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摘要： 当合成生物学遇上基因编辑，当计算机代码变成细胞的遗传载体，人类在实验室里的每一次尝试，都是在努力“创造生命”。从原料到蓝图，从模仿到构建，我们离真正的“造物者”究竟还有多远？电影《黑客帝国》里，人躺在一排排透明的培养舱里，营养液包裹其全身，管线插满躯体。出生、成长、死亡都由庞大的系统控制，生命在工厂被流水线式地创造出来，再统一接入一个虚拟世界。这样类似的场景在科幻作品中很常见，所以当“我们已经造出了生命”的媒体报道出现时，大家脑海里常常会立刻浮现相近的画面。那么，科学是怎样定义“创造生命”的？

关键词： 鹿茸菇   多糖   响应面法   热水浸提-醇沉法   抑菌效果  

摘要： 探究鹿茸菇多糖（Lyophyllum decastes polysaccharide， LDP）的提取条件及对病原真菌的抑制效果，为天然抑制剂的开发提供理论依据。采用热水浸提-醇沉法提取鹿茸菇多糖，通过Box-Behnken响应面法优化提取工艺，并评估其对不同病原真菌的抑菌活性。LDP的最佳提取条件为料液比1：30.01 g·mL-1、提取时间2.166 h和温度77.03 ℃，LDP的得率为8.9%，与模型预测趋势相符。此外，试验还测定了LDP对7种不同病原真菌的抑制效果，包括金黄菌寄生（Hypomyces aurantius）、拟轮枝镰孢菌（Fusarium verticillioides）、嗜菌枝葡霉（Cladobotryum mycophilum）、产扁虫菌素单端孢（Trichothecium crotocinigenum）、层出镰孢菌（Fusarium proliferatum）、多年异担子菌（Heterobasidion annosum）及假禾谷镰孢菌（Fusarium pseudograminearum）。通过测定病原真菌在多糖培养基上的生长速率，评估其抑菌能力。抑菌试验表明，LDP对多数供试菌株表现出抑制效果，其中对产扁虫菌素单端孢的抑制作用最强，其抑菌活性为47.3%，且对其他供试菌株也存在不同程度的抑制作用。本研究不仅优化了鹿茸菇多糖的提取工艺，也为该多糖作为天然抑菌剂应用于农业生物防治及绿色功能产品开发提供了前期基础。

关键词： 张家川红花牛   FTL基因   基因克隆   生物信息学分析   组织表达  

摘要： 本研究旨在探究张家川红花牛铁蛋白轻链（Ferritin light chain，FTL）基因的结构与功能，克隆其CDS区并对其进行生物信息学分析及组织表达分析。试验以张家川红花牛为对象，以其肌肉组织cDNA为模板，通过RT-PCR技术克隆FTL基因CDS区序列，运用多种软件和在线工具进行生物信息学分析，并利用RT-qPCR技术检测该基因在张家川红花牛7种组织中的转录表达水平。结果显示，张家川红花牛FTL基因的CDS区全长528 bp，存在6个开放阅读框，编码175个氨基酸；FTL蛋白分子式为C883H1 399N255O265S5，分子质量为19 987.67 Da，理论等电点为5.88，原子总数为2 807个，不稳定系数为29.13，平均亲水系数为-0.501，该蛋白为稳定型亲水性蛋白。生物信息学预测可知，FTL蛋白既不存在信号肽区域也无跨膜结构域，但识别出9个潜在磷酸化位点和1个N-糖基化位点。亚细胞定位结果显示，张家川红花牛FTL蛋白主要分布于细胞质（56.5%），在细胞核、线粒体及细胞膜中也有少量分布；该蛋白的二级结构主要以α-螺旋为主（70.86%），无β-转角，其三级结构与同源模板相似度达86.78%。同源性比对发现，张家川红花牛FTL基因与黄牛同源性最高（98.6%），与小鼠同源性最低（77.2%）；系统进化树显示其与反刍动物（牦牛、绵羊、山羊）亲缘关系最近。RT-qPCR结果显示，FTL基因的转录水平在肝脏组织中最高，与其余组织相比存在显著差异（P<0.05），在心脏组织中表达量最低。蛋白互作网络预测显示，FTL蛋白与FTH1、TFRC、TFR2、SLC40A1等铁代谢相关蛋白相互作用。综上，张家川红花牛FTL基因在肝脏组织中的高表达及其编码蛋白与多种铁代谢相关蛋白的相互作用表明，FTL基因在维持机体铁稳态并抑制氧化应激等方面发挥着重要作用。

关键词： 磷酸二氢钾   废弃动物蛋白   木质素磺酸钠   分散剂   分散稳定性  

摘要： 针对悬浮肥料贮存稳定性差及废弃动物蛋白资源化利用的双重挑战，以废弃动物蛋白、精制磷酸和氢氧化钾溶液为原料；木质素磺酸钠（SLF）为分散剂，通过水热酸解、中和反应及砂磨剪切乳化工艺，制备出一种富含氨基酸的磷酸二氢钾悬浮肥，并系统探究木质素磺酸钠对其分散稳定性的影响。采用激光粒度分析仪、Zeta电位仪及多重光散射仪对悬浮肥的分散稳定性进行定量表征，结合热重分析与红外光谱解析其稳定机制。结果表明，木质素磺酸钠添加量对体系稳定性具有显著影响：当添加量为0.5%（质量分数）时，悬浮肥综合性能最优，粒径(D50)达到最小值6.19 μm，Zeta电位绝对值达18.28 mV，不稳定性指数（TSI）低至7.81，12 h析水层厚度仅为1.66 mm。研究表明，木质素磺酸钠通过阴离子磺酸根基团与羟基的协同作用牢固吸附于颗粒表面，一方面构建双电层提供静电排斥力，另一方面形成吸附层产生空间位阻，同时其亲水基团优化颗粒-水界面水合状态，显著提升体系对自由水的保持能力。这种静电排斥与空间位阻的双重协同机制，是其有效延缓颗粒沉降与水分析出的核心所在。本研究为开发功能差异化、高稳定性的磷酸二氢钾悬浮肥产品提供理论依据与技术参考，对推动废弃蛋白资源化利用及绿色农业发展具有积极意义。

关键词： 氧化三甲胺   脂多糖   进展性脑梗死   肠脑轴   预测生物标志物  

摘要： 目的 探讨血清氧化三甲胺(TMAO)与脂多糖(LPS)水平对进展性脑梗死发生及预后的预测价值。方法 纳入2021年3月—2024年8月收治的125例急性脑梗死患者，根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分变化分为进展组(n=60)与非进展组(n=65)。采用酶联免疫吸附法检测入院时及发病4周后血清TMAO、LPS水平，分析其与神经功能缺损评分、脑梗死体积及预后的相关性，并通过ROC曲线评估预测效能。结果 进展组入院时血清TMAO与LPS水平显著高于非进展组(P<0.001);TMAO、LPS水平与加重后NIHSS评分及梗死体积均呈正相关(P<0.001);联合检测TMAO与LPS预测进展性脑梗死的曲线下面积(AUC)优于单一指标TMAO和LPS;治疗前后对比结果显示，血清TMAO与LPS水平升高与患者生活依赖程度加重显著相关(P<0.001)。结论 急性脑梗死患者入院时血清TMAO与LPS水平升高与后续病情进展风险增加显著相关，联合检测显示出较好的预测潜力，其动态监测有助于进展性脑梗死患者的预后评估。

关键词： 鸡肉   培养肉   营养品质   加工品质   品质差异  

摘要： 【目的】明确培养肉（cultured meat,CM）与鸡胸肉（chicken breast,CB）、鸡腿肉（chicken thigh,CT）营养品质和加工品质的差异，利用蛋白组学技术解析造成培养肉与鸡胸肉、鸡腿肉品质差异的原因，为培养肉的食品化加工提供理论依据。【方法】评估培养肉与鸡胸肉、鸡腿肉在蛋白质、水分、脂肪、维生素、矿物质、脂肪酸、氨基酸方面的组成差异，并对培养肉的以上营养品质进行评价；测定培养肉与鸡胸肉、鸡腿肉的pH、色差、保水性，并对培养肉的以上加工品质进行评价；最后利用蛋白组学对培养肉与鸡胸肉、鸡腿肉差异表达的蛋白质进行探究，通过Gene Ontology（GO）和Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes（KEGG）方法注释差异蛋白的代谢通路，从而解释造成培养肉与鸡胸肉、鸡腿肉蛋白质组成差异的原因。【结果】培养肉水分含量较高，蛋白质含量偏低，培养肉的脂肪酸、维生素、氨基酸等营养成分与鸡胸肉、鸡腿肉存在差异。培养肉的主要脂肪酸为油酸（C18:1），其饱和脂肪酸（SFA）含量低于鸡胸肉、鸡腿肉；主要氨基酸为谷氨酸（99.55 mg/100 g），半胱氨酸、酪氨酸含量均高于鸡胸肉、鸡腿肉，但必需氨基酸的比例（34.99%）较低。培养肉中维生素B1含量（0.09 mg/100 g）介于鸡胸肉和鸡腿肉之间，维生素E含量（0.01 mg/100 g）低于鸡胸肉和鸡腿肉；钾含量低于鸡胸肉和鸡腿肉；铝、铁、硒含量高于鸡胸肉和鸡腿肉。加工品质中，培养肉的硬度、咀嚼性等低于鸡胸肉、鸡腿肉；离心损失率（53.53%）高于鸡胸肉（14.57%）和鸡腿肉（12.56%），蒸煮损失率与鸡胸肉基本持平，显著低于鸡腿肉（P<0.05）。从蛋白质组学的角度分析，根据VIP>1在CB、CT、CM之间筛选鉴定到的76种最具差异性的蛋白质主要包含与糖酵解、糖异生相关的果糖二磷酸醛缩酶（ALDOC）、肌球蛋白轻链（MYL1）等；培养肉中肌原纤维蛋白等结构性蛋白、与肌肉系统过程及骨骼肌组织发育相关的蛋白质下调表达；KANK1、TPM2、COL5A1等部分与纤维组织相关的蛋白质上调表达。【结论】培养肉与饲养肉的营养品质存在一定差距，其蛋白质和必需氨基酸比例较低，钠含量高于饲养肉，饱和脂肪酸（SFA）含量较低且含有不饱和脂肪酸；铁、硒等微量元素含量更高，具备营养强化潜力。培养肉质地较软，保水性与饲养肉也有一定差距，更适宜加工乳化香肠等肉糜类制品。质构差异的主要原因是培养肉中肌原纤维蛋白等结构性蛋白表达下调，导致其热凝胶形成能力与持水力较弱。

关键词： 舌拭子   结核分枝杆菌   核酸检测   诊断效能   痰菌载量  

摘要： 目的 评估舌拭子PCR检测在疑似肺结核患者中的诊断效能,分析痰菌载量及采样时间对检测性能的影响。方法 前瞻性纳入2025年9月至2026年2月于南宁市第四人民医院结核科住院的185例疑似肺结核患者,以痰Xpert为参考标准,计算舌拭子检测的敏感性、特异性、预测值及准确率,采用Clopper-Pearson法计算95%CI,采用Kappa一致性检验评估两种方法的一致性。根据痰Xpert半定量结果(高、中、低、极低)进行亚组分析,分析不同痰菌载量对诊断效能的影响;同时按取样时间(晨起vs.日间)分层,评估采样时间对检测性能的影响。结果 舌拭子检测总体敏感度为69.23%(45/65,95%CI:57.28%～79.14%),特异性为94.17%(113/120,95%CI:88.42%～97.16%),Kappa=0.66(95%CI:0.55～0.78)。敏感性随菌载量降低而显著下降,高、中、低、极低菌量组敏感度分别为93.33%(14/15)、83.33%(15/18)、61.90%(13/21)、11.11%(1/9)。晨起取样亚组(24例)敏感度达100.00%(9/9),Kappa=0.91,但95%CI较宽(70.09%～100.00%)。结论 舌拭子PCR检测在疑似肺结核患者中特异性高、敏感性中等,检测效能受痰菌载量影响显著,可用于高菌载量患者及痰液获取困难者的辅助筛查;低菌载量时阴性结果不能完全排除肺结核,需结合其他方法确认。晨起取样可能提升效能,但需大样本验证。

关键词： 青稞   HvMYB15   转录因子   低温胁迫   异源表达  

摘要： 青稞是青藏高原地区的主要粮食作物，因主要种植在海拔2700米以上的高寒区，其生长发育受低温胁迫的多维度限制。MYB转录因子在多种作物中参与非生物胁迫响应，但在青稞中未见相关研究报道。本研究通过生物信息学分析、基因表达分析、拟南芥异源过表达功能验证，探究了青稞HvMYB15基因响应低温胁迫的功能。结果表明，HvMYB15基因编码区全长为867 bp，编码289个氨基酸，其启动子区域含有多个和逆境胁迫响应相关的顺式作用元件。qRT-PCR结果显示，HvMYB15在根中的表达量最高，叶次之。胁迫诱导表达分析表明，低温胁迫可显著诱导HvMYB15基因的上调表达。亚细胞定位和转录自激活活性实验表明，HvMYB15定位于细胞核中，具有转录自激活活性。低温胁迫功能验证发现，HvMYB15拟南芥过表达株系苗期存活率显著高于野生型，离子渗漏率、过氧化氢和丙二醛含量显著低于野生型，而超氧化物歧化酶活性和脯氨酸含量显著高于野生型。此外，低温胁迫处理后HvMYB15拟南芥过表达株系中低温胁迫响应相关基因的表达量相比野生型显著上调。综上，本研究表明青稞HvMYB15基因对低温胁迫具有正调控作用，研究结果为深入解析青稞耐低温应答分子机制和遗传育种改良奠定了理论基础。

关键词： 乌鳢水泡病毒G蛋白   原核表达   多克隆抗体制备  

摘要： 为获得具有中和活性的乌鳢水泡病毒(Snakehead vesiculovirus, SHVV)多克隆抗体，根据GenBank数据库公布的SHVV G蛋白基因序列设计特异性引物，通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)扩增获得大小为1 524 bp的G蛋白胞外区基因片段，构建pET-28a-ΔG重组质粒并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactoside, IPTG)诱导表达和Ni-NTA亲和层析纯化后获得高纯度重组G蛋白，用该蛋白免疫雌性BALB/c小鼠，4次免疫后经眼眶采血获得多克隆抗体。间接酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)结果表明，制备的多克隆抗体效价为1∶102 400。免疫印迹(western blot)和间接免疫荧光实验(indirect immunofluorescence assay, IFA)结果表明，该抗体能特异性识别SHVV G蛋白。血清中和实验结果表明，该抗体可显著抑制SHVV的增殖，证明其具有中和SHVV的活性。研究成功制备了能特异性识别SHVV G蛋白并具有中和活性的多克隆抗体，为后续SHVV免疫学快速检测方法的建立和疫苗研制提供了参考。

关键词： 芳樟醇合成基因   NuTPS2814   体外合成   青枯病菌   抑菌效果  

摘要： 为挖掘荫生烟草中参与芳樟醇生物合成的关键基因，并解析其在青枯病抗性中的功能，采用同源克隆法克隆了芳樟醇合成相关基因NuTPS2814，通过生物信息学分析、基因表达模式分析、酶学性质分析系统解析了该基因的功能，并利用体外抑菌试验和烟苗处理抗性试验，探究了NuTPS2814代谢产物对烟草青枯病菌的抑制效果。结果表明，NuTPS2814编码蛋白与芳樟醇合成酶蛋白序列具有较高的相似性，并含有萜类合酶催化活性中心DDxxD和NDIxSxxxE结构域。NuTPS2814与拟南芥香叶基芳樟醇合酶AtTPS04在系统进化树中聚为同一簇。在不同类型烟草种质资源的表达分析发现，NuTPS2814基因可能在荫生烟草中特异性表达。异源合成的NuTPS2814可以催化香叶基焦磷酸（GPP）合成芳樟醇，表明其具有单萜合酶的活性。NuTPS2814代谢产物对烟草青枯病菌GD具有显著的抑制效果，其最小抑菌浓度为100 mg/L，最小致死浓度为400 mg/L，且其抑制强度随NuTPS2814代谢产物浓度的升高而增强。利用NuTPS2814代谢产物预处理烟草幼苗可以显著增强烟苗的青枯病抗性。综上，NuTPS2814基因是在荫生烟草中特异表达的一个芳樟醇合成基因，其代谢产物在烟草青枯病菌抗性中发挥重要作用。