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关键词： 涡虫   再生   干细胞   增殖   Notch通路基因  

摘要： Notch信号通路是一种保守的细胞间通讯机制,在组织发育与稳态维持中发挥重要作用。为探究其在组织再生及干细胞调控中的作用,本研究选择涡虫为实验材料。鉴定了日本三角涡虫中的Notch信号通路基因aph-1、csl、numb的同源基因,并探讨了它们在涡虫再生过程中的生物学功能。研究结果显示,Djaph-1、Djcsl与Djnumb mRNA在整体涡虫中广泛表达,并在再生涡虫的芽基中富集表达。Djaph-1、Djcsl与Djnumb干扰均导致再生涡虫出现身体中线黑斑和眼点不对称的异常表型以及中枢神经系统再生缺陷,引起了不同再生时间点细胞增殖水平的变化以及眼点、表皮相关基因的表达变化。进一步研究表明,Djaph-1和Djcsl均可正调控Notch信号,而Djnumb则发挥负向调控作用。综上,Djaph-1、Djcsl与Djnumb参与调控干细胞增殖与分化,在涡虫再生过程中发挥关键作用。

关键词： 阿尔茨海默病   β-淀粉样蛋白   单克隆抗体   指南解释   治疗  

摘要： 《抗Aβ单克隆抗体临床应用建议(2025版)》(以下简称2025版建议)系统整合了阿杜卡单抗、仑卡奈单抗、多奈单抗的Ⅲ期临床试验数据,参考相关药物说明书、国内真实世界证据及临床实践经验,重点围绕仑卡奈单抗和多奈单抗对2024版建议进行了全面更新。2025版建议从用药前患者筛选、治疗方案评估、用药流程规范、不良反应监测、停药指征及特殊人群管理等多个方面提出了细化建议,特别在个体化停药标准方面取得重要进展,明确仑卡奈单抗推荐采用18个月固定疗程;而多奈单抗则以β-淀粉样蛋白(amyloid β-protein, Aβ)-正电子发射断层显像(positron emission tomography,PET)检测的Centiloid值达到预设阈值作为治疗完成标准,即单次Centiloid值≤11,或连续2次Centiloid值均处于11~25区间。在安全性管理方面,2025版建议进一步完善了淀粉样蛋白相关影像学异常(amyloid-related imaging abnormalities,ARIA)的分层监测与处理流程,并对接受抗凝治疗、载脂蛋白E(apolipoprotein E,APOE)ε4/ε4纯合子等特殊人群制定了精准风险管理策略。当前抗Aβ单抗的临床应用仍面临若干关键挑战,多维度生物标志物的整合应用体系尚未系统建立,制约了个体化治疗路径的构建;中国人群长期用药的真实世界证据仍显不足,影响治疗方案的本地化优化与风险精细管理。未来需围绕上述方向加强研究,以推动抗Aβ单抗治疗从标准化模式,向基于生物标志物与临床表型的个体化精准医疗持续发展。

关键词： 新生大鼠   肝脏间充质干细胞   组织块联合酶解法   细胞形态   细胞免疫标志物   三系分化潜能  

摘要： 目的采用“组织块联合酶解法”提取新生大鼠肝脏间充质干细胞(L-MSCs),为开展脂肪肝、肝硬化等慢性肝病治疗及肝脏再生医学研究提供理想的种子细胞。方法无菌分离1周龄SD新生大鼠肝脏,经漂洗、剪碎、0.1%II型胶原酶/0.05%Ⅳ型胶原酶消化15~20 min、100目筛网过滤后,进行L-MSCs原代培养。通过细胞形态学观察、细胞表面标志物CD分子及成脂、成骨诱导分化潜能检测,多维度鉴定所培养的目的细胞。结果原代接种培养6~8 d后,短梭形贴壁生长的细胞呈漩涡状铺满皿底。流式细胞仪检测分析第4代细胞表面标志物,高表达CD90(99.33%±0.06%)、CD73(99.60%±0.10%)、CD44(99.50%±0.10%)、CD29(97.60%±0.17%),平均阳性率为(99.01%±0.86%);低表达CD45(0.87%±0.12%)、CD34(0.95%±0.22%)、CD11b/c(1.71%±0.28%),平均阳性率为(1.18%±0.44%),显著低于前者(P<0.01),符合MSCs的免疫表型特征。诱导成脂、成骨分化实验均为阳性。结论“组织块联合酶解法”能够成功提取新生大鼠L-MSCs。

关键词： RT-qPCR   基因克隆   查尔酮合成酶   油茶  

摘要： 查尔酮合成酶(chalcone synthetase,CHS)对于植物的抗菌机制、抗胁迫以及外源基因的表达等有着关键作用。为了探究查尔酮合成酶与油茶抗炭疽病能力之间的关系,本研究以‘华硕’‘华金’‘华鑫’‘湘林210’4种油茶叶片为供试材料测定其叶片抗炭疽菌能力,发现‘华金’抗性最强,‘湘林210’抗性最弱;参考油茶全基因组数据设计特异性引物,从‘华金’油茶叶片克隆得到查尔酮合成酶相关基因,命名为CoCHS,该基因CDS序列全长1170 bp,共编码389个氨基酸;蛋白理化性质预测CoCHS为无跨膜结构的稳定亲水蛋白,且不存在信号肽;CoCHS启动子区域包含了对光线、激素、生长发育、逆境胁迫以及伤口的应答有关作用元件;二级、三级结构预测表明该蛋白的结构主要为α-螺旋。系统进化分析表明,CoCHS在同属植物中高度保守,其中与狭叶油茶和毛柄连蕊茶的同源性较高,亲缘关系较近;此外RT-qPCR结果显示,油茶叶片抗炭疽菌能力越强其CoCHS基因表达量越高。本研究结果为未来油茶抗病品种的选育提供了理论基础。

关键词： 烟用香料   杨梅   美拉德反应   分子对接   香气活度值  

摘要： 分别添加不同种类氨基酸(脯氨酸、谷氨酸、甘氨酸)于杨梅浸膏中,进行美拉德反应制备新型卷烟用香料,并利用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)对挥发性成分定性、定量分析,随后进行多元统计分析,识别、分析关键差异香气成分,并运用分子对接技术判断差异香气成分与嗅觉受体结合程度,最后进行卷烟加香、嗅香验证.GC-MS结果表明,不同氨基酸制备的3种香料中共鉴定出74种挥发性成分,其中56种为3种香料共有,脯氨酸与杨梅浸膏反应所制备香料的挥发性成分含量最高(2283.82μg/mL).依据关键差异香气成分的聚类分析,脯氨酸与杨梅浸膏反应所得的美拉德香料被区分为独立类别.多元统计分析得出其中17个关键差异挥发性成分,脯氨酸与杨梅浸膏反应所得美拉德香料中香气活度值较高的有肉桂酸乙酯(OAV=583.43)、5-甲基呋喃-2-(5H)-酮(OAV=516.25)、乙基麦芽酚(OAV=501.62)、肉桂酸甲酯(OAV=259.00)、叶醇(OAV=165.50)等为香料赋予果、烘焙、甜香.分子对接结果表明,12个关键差异香味成分与11种嗅觉受体蛋白的平均结合能在-17.57~-26.31 kJ·mol^(-1)间,特征香气可以被有效感知.卷烟加香结果表明,脯氨酸与杨梅浸膏美拉德反应所得香料加香效果最好,在香气、烟气浓度、杂气、丰富性上提升明显,嗅香结果总体香韵以果香、甜香、花香为主,焦香、烘焙香为辅.相较于谷氨酸、甘氨酸,脯氨酸更适于制备杨梅美拉德烟用香料.

关键词： 腱骨愈合   肩袖损伤   干细胞  

摘要： 腱骨损伤是常见的肌肉骨骼系统疾病,前交叉韧带和肩袖是常见的腱骨损伤结构。目前治疗以修复手术和重建手术为主,而决定手术疗效的主要因素是术后有效的腱骨愈合,这就需要移植肌腱与骨隧道的稳定结合,以保证关节的稳定性。纤维软骨和骨形成是骨髓腔内愈合的主要生理过程。因此,有利于这些过程的治疗措施若能够尽快应用于临床,可促进腱骨愈合。近年来,干细胞、细胞因子、富血小板血浆和外泌体等技术被广泛应用于促进腱骨愈合的研究中。该文就目前新的干细胞技术在促进腱骨愈合的潜在作用和相关机制进行综述。

关键词： 糖尿病   膀胱,神经原性   间充质干细胞   骨髓   移植   尿动力学  

摘要： 目的探讨骨髓间充质干细胞移植治疗糖尿病神经源性膀胱的临床效果。方法选取40只糖尿病神经源性膀胱大鼠为研究对象,随机分为单纯胰岛素治疗组(A组)、骨髓间充质干细胞静脉注射移植联合胰岛素治疗组(B组)、骨髓间充质干细胞腹腔直接注射移植联合胰岛素治疗组(C组)及无治疗对照组(D组),每组各10只。记录分析四组大鼠治疗6周后的一般情况、血糖、血清胰岛素、胰岛素抵抗指数、糖耐量及尿流动力学等指标,比较分析各组大鼠的治疗效果。结果B组和C组的血糖、残余尿量、最大尿流率、最大膀胱内压及膀胱顺应性优于其他两组(P<0.05)。在膀胱内压力曲线及尿动力学实验中,B组的压力曲线平滑,小幅度波动最少,治疗尿频效果更显著。结论骨髓间充质干细胞注射联合胰岛素治疗糖尿病神经源性膀胱大鼠的效果显著,且静脉注射方式优于直接注射方式。

关键词： 卒中后认知障碍   氨基酸代谢   代谢紊乱   神经炎症   氧化应激   生物标志物  

摘要： 卒中后认知障碍(post-stroke cognitive impairment,PSCI)作为卒中后常见且致残性极高的并发症,不仅会严重降低患者的生活质量,还会显著增加卒中复发风险和死亡概率。在探索其发病机制的过程中,氨基酸代谢紊乱逐渐被认为是关键的病理生理因素之一。基于这一背景,文章系统梳理了近年来PSCI核心发病机制中主要氨基酸代谢紊乱的研究进展,包括其潜在机制、生物标志物价值及干预策略相关研究,揭示了其在神经炎症、氧化应激、神经递质失衡等方面的关键作用。这些研究有助于深化对PSCI病理机制的理解,也为疾病的早期诊断、精准治疗及预后评估提供了新的思路和工具,具有重要的临床意义和潜在应用价值。

关键词： 蒙古族   急性肺血栓栓塞症   临床特征分析   蛋白质组学  

摘要： 目的分析蒙古族急性肺血栓栓塞症(APTE)患者临床特征,并探究其与血清蛋白质组学的关系。方法选择2022年1月~2025年1月在内蒙古自治区人民医院就诊的413例蒙古族APTE患者作为研究对象,并根据APTE严重程度分为:低危组(n=66)、中危组(n=319)和高危组(n=28)。分析三组患者基线资料、血清生化指标方面存在的差异。选择180例同期体检的健康者纳入对照组,分析APTE患者与同期体检健康者在血清生化指标方面的差异。蛋白质标记定量技术结合液相色谱-串联质谱联用(LC-MS/MS)技术鉴定和筛选APTE的差异蛋白,并分析差异蛋白的生物学功能及富集的信号通路。结果APTE不同危险度患者在高血压、静脉血栓栓塞、慢性阻塞性肺疾病(COPD)方面的差异具有统计学意义(χ^(2)=6.654、7.267、35.251,均P<0.05)。随着APTE危险度增加,纤维蛋白原(FIB)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)、C-反应蛋白(CRP)、D-二聚体(D-D)、肌钙蛋白I(cTnI)和N-末端脑利钠肽前体(NT-proBNP)明显上升(F/H=3.669~786.487),白蛋白(ALB)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)明显下降(F=19.143、36.954),差异具有统计学意义(均P<0.05)。各危险度APTE患者白细胞(WBC)、红细胞体积分布宽度(RDW)、FIB、TC、TG、LDL-C、CRP、D-D、cTnI和NT-proBNP明显高于对照组(F/H=16.859~1740.668),血小板(PLT)、血红蛋白(Hb)、ALB和HDL-C明显低于对照组(F=37.228~123.817),差异具有统计学意义(均P<0.05)。APTE患者与对照组血清蛋白质组学共筛查鉴定出352个差异蛋白。与对照组比较,研究组患者4个蛋白显著上调,10个蛋白显著下调。差异蛋白主要参与生物学过程调控、代谢过程和跨膜运输等生物学过程,构成细胞质、细胞器等细胞成分,发挥蛋白质结合、酶催化活性、酶水解活性与能量运输活性等分子功能;主要富集于信号分子和相互作用、碳水化合物代谢和脂质代谢等信号通路。3个上调蛋白均与WBC、ALB、FIB、CRP、D-D、cTnI、NT-proBNP显著相关(r=-0.73~0.92,均P<0.05),且上调蛋白载脂蛋白C-Ⅲ还与ALB、FIB、TC、TG、HDL-C、LDL-C、CRP、D-D、cTnI、NT-proBNP显著相关(r=-0.74~0.78,均P<0.05);9个下调蛋白均与FIB、CRP、D-D、NT-proBNP显著相关(r=-0.95~-0.72,均P<0.05),且抗凝血酶Ⅲ、凝血因子Ⅻ和前胶原C端肽醇增强子还与PLT呈显著正相关(r=0.56~0.68,均P<0.05)。结论蒙古族APTE患者临床特征多样,与危险度存在一定关联。血清生化指标随危险度增加而变化。APTE相关差异蛋白主要参与信号分子和相互作用、碳水化合物代谢和脂质代谢等调控过程,且同临床指标密切相关,为蒙古族APTE的发病机制和诊断提供了潜在生物标志物。

关键词： 犬IL-31   原核表达   单克隆抗体  

摘要： IL-31通过与其受体结合,在多种皮肤炎症过程中发挥关键生物学作用。本研究通过构建犬IL-31蛋白原核表达载体,利用大肠杆菌表达系统成功表达后纯化出高纯度的重组犬IL-31蛋白。以该重组蛋白免疫BALB/c小鼠,通过3次免疫、细胞融合与有限稀释法筛选,成功获得1株可稳定分泌抗犬IL-31单克隆抗体的杂交瘤细胞株1F2,其抗体亚型为IgG1/λ,纯化后的抗体效价可达1:13107200。为进一步验证抗体的特异性,构建真核表达质粒并在HEK-293T细胞中表达犬IL-31。Western-blot结果表明,1F2单克隆抗体能够特异性识别真核系统中表达的犬IL-31蛋白,表明有良好的反应特异性。本研究成功制备的抗犬IL-31单克隆抗体1F2,为后续开发针对犬IL-31的治疗性抗体及相关检测方法的建立奠定了基础。