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关键词： 基因组组装   比较基因组学   洞穴适应   拉氏狼牙虾虎鱼  

摘要： 研究利用多平台测序数据,对近盲虾虎鱼亚科物种拉氏狼牙虾虎鱼(Odontamblyopus lacepedii)开展了染色体水平基因组组装与注释,并结合比较基因组学分析,探讨了近盲虾虎鱼亚科的系统发育关系及其适应潮间带穴居生活的分子机制。结果表明:拉氏狼牙虾虎鱼基因组大小为963.28 Mb,序列被成功锚定至23条染色体上,共注释到23558个蛋白质编码基因。系统发育分析表明,近盲虾虎鱼亚科鱼类并未形成独立单系类群,而是嵌套于背眼虾虎鱼亚科(Oxudercinae)内部,从而与其共同构成并系关系,支持了近盲虾虎鱼亚科与背眼虾虎鱼亚科合并为一个科的分类学观点。与四个背眼虾虎鱼亚科物种及其他7个外群物种相比,在近盲虾虎鱼亚科谱系中共鉴定出了24个扩张基因家族、243个收缩基因家族及163个正选择基因。这些扩张和正选择基因主要富集在嗅觉感知、血管生成及脂质/碳水化合物代谢等相关信号通路,可能与其适应黑暗、缺氧及营养匮乏的泥滩洞穴生活相关。此外,还鉴定到了552个放松选择基因,其中相当部分与视觉、色素沉着及昼夜节律相关,提示可能与近盲虾虎鱼类视觉退化、体色弱化及昼夜节律丧失等退化性状形成密切相关。本研究为深入理解近盲虾虎鱼及其他潮间带穴居鱼类环境适应及关键性状演化机制提供了新见解。

关键词： 多囊卵巢综合征   氨基酸   代谢   支链氨基酸  

摘要： 多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是一种以内分泌与代谢异常为特征的常见女性疾病。近年来研究发现,氨基酸代谢紊乱在PCOS的发生发展中发挥重要作用。多种氨基酸,尤其是支链氨基酸、芳香族氨基酸,其血浆浓度在PCOS患者中明显升高,可能与胰岛素抵抗、慢性炎症及排卵功能障碍密切相关。同时,不同PCOS表型在氨基酸代谢谱上表现出特异性差异。氨基酸代谢改变可能成为疾病早期筛查、生育评估及代谢干预的新靶点。本文综述近年来相关研究进展,旨在为PCOS的精准诊疗提供新思路。

关键词： 卷丹多糖   海藻酸钠   水凝胶   性能表征  

摘要： 以卷丹多糖LP-1为原料,结合海藻酸钠天然高分子材料,制备了一种具有一定物理特性的卷丹多糖基水凝胶(LP-1H)。采用重量分析法、干凝胶溶胀吸附法等技术对水凝胶的性能进行了表征,并研究了其溶胀性能、降解行为、保湿性能、孔隙率、冻融稳定性下的析水率。结果表明:LP-1H在2种不同的pH缓冲溶液中的溶胀率具有不同的变化趋势并且变化趋势差别较大,说明pH对水凝胶的成胶状态有一定影响;不同浓度的LP-1可以提高或者降低水凝胶的降解速率;LP-1H随LP-1浓度的变化使得保湿率和孔隙率发生规律性变化;在冻融稳定性下的析水率会随LP-1浓度变化呈现规律性变化。本研究为天然多糖基水凝胶的开发和优化提供了重要的理论基础和实验支持。

关键词： 外泌体   骨质疏松   种植体   骨结合  

摘要： 目的:研究骨髓间充质干细胞外泌体(bone marrow mesenchymal stem cell-derived exosomes,BMSC-Exos)在骨质疏松大鼠种植体骨结合中的作用。方法:采用透射电镜、纳米颗粒追踪分析和Western blot 3种方法鉴定BMSC-Exos。通过CCK-8实验和细胞划痕实验检测BMSCs的增殖和迁移能力。分别采用逆转录定量聚合酶链反应(reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和Western blot在基因和蛋白水平检测Ⅰ型胶原蛋白α1链(collagen typeⅠalpha 1 chain,Col1a1)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,Alp)和Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)的表达。在动物实验中,首先通过卵巢切除术建立骨质疏松大鼠模型并验证其建模成功。另取一批大鼠建立骨质疏松模型,随机分为对照组(注射磷酸盐缓冲液)和实验组(注射BMSC-Exos),对所有大鼠进行胫骨种植体植入手术,术后8周进行影像学和组织学评估。结果:本研究成功分离并鉴定了BMSC-Exos。BMSC-Exos显著促进BMSCs增殖和迁移,并上调成骨标志物(Col1a1、Alp和Runx2)的mRNA和蛋白表达。在骨质疏松大鼠模型中,BMSC-Exos治疗显著提高了种植体周围骨密度和种植体-骨结合率。结论:本研究结果表明,BMSC-Exos能够促进BMSCs增殖、迁移和成骨标志物表达,显著增强骨质疏松大鼠种植体骨结合。

关键词： 干旱区   碱土新根瘤菌   胞外多糖   盐碱土修复   固态菌剂  

摘要： 为筛选干旱区盐碱土修复高效固氮菌并阐明胞外多糖(EPS)功能机制,从新疆乌鲁木齐盐湖盐碱土中分离纯化固氮菌,结合16S rRNA基因测序明确其分类地位,研究培养时间对EPS产量与纯度的影响,优化菌剂干燥及储藏条件,并解析菌株耐盐碱及降碱特性。结果表明:分离获得1株碱土新根瘤菌(Neorhizobium alkalisoli)NaXJIPC-GNJ0001,与菌株TRM85146的16S rRNA基因序列同源性达99.20%,保藏号为CGMCC No.30470。该菌株呈时间依赖的“产量-纯度协同提升”效应,培养120 h时EPS提取量达2302.0±2.85 mg·L^(-1),糖含量86.57%±1.02%;紫外与红外光谱证实EPS富含羟基、羧基等官能团,为环境适应提供结构基础。喷雾干燥(45 min·L^(-1))的固态菌剂活菌数达4.60×10^(15)CFU·mL^(-1),-40~-20℃储藏24个月后活性仍保持2.50×10^(12)~2.70×10^(12)CFU·mL^(-1),优于其他方式。功能分析表明,该菌株可在15%NaCl及pH 12环境生长,对初始pH 11环境降碱率达29.18%,逆境适应性强。研究证实,该菌株高产EPS特性、优化的菌剂工艺及优异耐盐碱功能,为干旱区盐碱土生物修复提供重要菌种资源与技术支撑。

关键词： 靶向给药   肿瘤干细胞   智能给药系统   纳米载体  

摘要： 为解决传统化疗非特异及肿瘤干细胞清除难题,构建了顺铂(Cis)-蒙脱土(MMT)-透明质酸(HA)-壳聚糖(CS)-海藻酸钠(SA)纳米给药系统(CMHCS)。MMT负载顺铂,HA赋予CD44靶向,CS-SA水凝胶包封。XRD/TEM显示MMT剥离均匀。体外释放具有pH敏感性,64 h累积释放在pH 6.5时为pH 7.4的3倍。CMHCS显著抑制干细胞增殖(IC_(50)为44.02μg/mL),成球抑制提高2.53倍,凋亡率提高1.08倍,侵袭抑制提高2.86倍。CMHCS可实现肿瘤选择性释放及干细胞清除,为克服耐药复发提供新策略。

关键词： 菠萝蜜   蔗糖磷酸合酶   基因表达   糖代谢  

摘要： 为探究菠萝蜜蔗糖磷酸合酶(SPS)基因特性及其在果实成熟过程中的作用,本研究以‘海大2号’菠萝蜜果实为材料,采用0.5 mg/L 1-MCP和1000 mg/L ETH处理,研究室温(22℃)条件下菠萝蜜果实成熟过程中果糖、葡萄糖和蔗糖的动态变化,克隆获得1个菠萝蜜的SPS基因(AheSPS1),并对其进行了生物信息学和表达分析。结果表明:随着菠萝蜜果实的成熟,果糖、葡萄糖和蔗糖含量逐渐升高,ETH处理促进了3种糖的合成,1-MCP处理延缓了其贮藏前期的合成,但提高了果实贮藏后期糖分的含量。AheSPS1基因的开放阅读框(ORF)长度3174 bp,编码1057个氨基酸,其蛋白的二级结构主要由α-螺旋和无规卷曲组成,有Sucrose-synth、Glycos-transf-1和S6PP结构域,所编码蛋白属于SPS基因家族成员,分布在A亚族。AheSPS1基因与桃PpSPS2(EF568781)、沙梨PySPS1(AB334114)序列相似性最高,分别为81.25%和79.96%。RT-qPCR结果显示:AheSPS1基因在果实成熟前期表达量低,在果实成熟后期高表达。ETH处理提前了AheSPS1基因的表达峰,而1-MCP处理延缓了贮藏前期AheSPS1的表达,但对贮藏后期的表达无显著差异。相关性分析表明,AheSPS1基因表达与果糖和葡萄糖含量呈显著的正相关,与蔗糖含量呈正相关。表明AheSPS1参与菠萝蜜成熟过程中糖代谢活动的调控。

关键词： 近红外光谱   棉籽粕   氨基酸   快速检测   模型构建  

摘要： 本研究旨在构建棉籽粕氨基酸在Foss和微型近红外仪光谱量化数据与实测值的关联模型,并对两种近红外仪预测模型进行比较,探讨利用近红外技术快速测定棉籽粕氨基酸的可行性。采集棉籽粕样品76个,利用湿化学法测定其17种氨基酸含量。将样品随机分成定标集(N=56)和验证集(N=20),分别利用FOSS XDS近红外光谱仪和Nir Smart Eye 1700微型近红外仪进行近红外光谱采集,构建各氨基酸定标模型,并进行外部验证。结果表明:1)FOSS XDS建模结果为:Asp、Thr、Glu、Gly、Lys、His、Arg和Trp的验证决定系数(RSQv)为0.840~0.887,所建定标模型适用于日常检测。Ser、Pro、Ala、Val、Ile、Leu、Tyr、Phe和Met的RSQv<0.840,验证效果不佳,模型不可用;2)Nir Smart Eye 1700建模结果为:Asp、Thr、Ser、Glu、Gly、Leu、Phe、Lys、His、Arg、Trp的RSQv为0.845~0.899,所建定标模型适用于日常检测。Pro、Ala、Val、Ile、Tyr和Met的RSQv<0.840,验证效果不佳,模型不可用。Nir Smart Eye 1700近红外仪对Ser、Leu、Phe的预测效果优于FOSS XDS近红外仪,但是两种仪器都仅对棉籽粕部分氨基酸含量快速测定是可行的。

关键词： 改进型免疫克隆布谷鸟算法   宽带混沌激光网络   虚假注入攻击   检测方法   对比学习算法  

摘要： 虚假注入攻击检测方法主要依赖于预设的攻击特征和模式匹配算法,由于受限于样本集的全面性,难以涵盖所有潜在的攻击场景,导致检测精度不佳。对此,提出改进型免疫克隆布谷鸟算法的宽带混沌激光网络虚假注入攻击检测方法。利用混沌系统的特性,通过计算最大李雅普诺夫指数,从激光网络数据中提取出与虚假注入攻击密切相关的特征。结合对比学习算法,通过对比正常与异常网络行为,捕捉攻击特征,并据此模拟生成新的攻击实例,从而提高样本集的全面性。采用改进型免疫克隆布谷鸟算法对SVM分类器模型的参数进行寻优,从而实现宽带混沌激光网络中的虚假注入攻击检测。在实验中,对提出的方法进行了检测精度的检验。最终测试结果表明,采用提出的方法进行虚假注入攻击检测时,算法的虚假警示率均值为0.62%,具备较为理想的检测精度。

关键词： 络塞维   脂多糖   神经炎症   皮层星形胶质细胞   MAPK/NF-kB信号通路   氧化应激  

摘要： 目的探讨络塞维对p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPK)/p65 NF-κB信号通路抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的皮层原代星形胶质细胞损伤的影响及机制。方法实验分为对照组(Control)、络塞维干预组(Rosvain)、LPS干预组(LPS)、络塞维+LPS组(Rosvain+LPS)和Rosvain+LPS+p38 MAPK抑制剂组(Rosvain+LPS+SB203580)。络塞维干预24 h后,RT-qPCR实验检测不同mRNA表达水平,细胞免疫荧光检测p65 NF-κB核转移和p38 MAPK荧光强度,蛋白印迹实验检测对p38MAPK/p65 NF-κB信号通路蛋白表达水平。结果100μg·L^(-1)LPS刺激原代星形胶质细胞12 h使得TNF-α、IL-6和ROS释放水平达到顶峰,但是其细胞形态与正常细胞相比无明显变化。与Control组比较,1μmol·L^(-1)和10μmol·L^(-1)络塞维作用对原代星形胶质细胞24 h细胞活性无影响,其抑制LPS干预组TNF-α、IL-6、ROS和线粒体能量代谢释放水平。与LPS干预组相比,Rosvain+LPS组IL^(-1)0 mRNA表达水平明显升高,TNF-α、IL-6、S100b、cyba、cybb、ncf1、NF-κB mRNA表达水平均明显降低,能抑制细胞内p65 NF-κB核转移程度,细胞内p38 MAPK荧光强度变弱,p65 NF-κB和p38 MAPK蛋白的表达水平均降低。与Rosvain+LPS组相比,Rosvain+LPS+SB202190组,p65 NF-κB和p38 MAPK蛋白的表达水平降低。结论络塞维对LPS建立的皮层原代星形胶质细胞炎症和氧化应激模型具有抑制作用,其机制可能与抑制星形胶质细胞p38 MAPK/p65 NF-κB信号通路有关,从而抑制神经炎症和氧化应激损伤有关。