课程文献中心 更多>>

关键词： 亚砷酸钠   烟酰胺腺嘌呤二核苷酸   突触   神经炎症   孤独症样行为  

摘要： 目的探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)在亚砷酸钠致子鼠孤独症样行为中的作用。方法60只10周龄清洁级ICR小鼠(雌鼠40只、雄鼠20只),按照雌鼠和雄鼠2∶1的比例合笼饲养,将妊娠雌鼠随机分为对照组(水)和亚砷酸钠染毒组(染毒剂量分别为0.5、5.0及50.0 mg/L),通过自由饮水染毒,建立围产期母体亚砷酸钠染毒模型;使用行为实验评估亚砷酸钠导致的子代小鼠孤独症样行为;生化检测试剂盒检测血清及皮质NAD+水平、炎症相关因子的水平以及皮质三磷酸腺苷(ATP)水平;免疫荧光检测突触后致密蛋白-95(PSD-95)和突触小泡蛋白(SYP)的荧光强度;苏木素伊红(HE)和尼氏染色观察神经元结构。结果与对照组的子代小鼠相比,亚砷酸钠染毒组的子代小鼠重复刻板行为、焦虑样行为和社交行为异常(P<0.05),血清及皮质中NAD+含量降低(P<0.05);与对照组的子代小鼠相比,亚砷酸钠染毒组的子代小鼠促炎因子的表达增加、抑炎因子的表达降低,皮质中ATP含量降低,皮质PSD-95和SYP的荧光强度降低(P<0.05)。结论母体亚砷酸钠染毒导致子鼠孤独症样行为,其机制可能与亚砷酸钠扰乱NAD+/ATP代谢,进而导致神经炎症及突触损伤有关。

关键词： 西红花瓣   多糖   抗衰老   脑代谢组  

摘要： 为探究西红花瓣多糖对D-半乳糖诱导衰老小鼠脑组织的保护作用及潜在机制,将KM小鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组,西红花瓣多糖低、中、高剂量组(100、200、400 mg/kg/d),每组10只,建模给药同时进行8周。实验结束后分析小鼠体重及器官指数,尼氏体染色检测海马组织变化,比较脑组织乙酰胆碱酯酶(AChE)和总一氧化氮合酶(T-NOS)指标的变化,Western blot检测P53蛋白(P53)、B-淋巴细胞-2相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达,并采用代谢组学分析脑组织代谢物变化。结果发现,西红花瓣多糖对小鼠体重及器官指数影响较小。与正常组比较,模型组尼氏体数量减少,AChE、T-NOS酶活性分别显著增加了58.22%、23.036%(P<0.01),P53、Bax、Caspase-3蛋白表达上调了48.41%、25.08%、37.91%(P<0.05);与模型组相比,多糖剂量组尼氏体数量增加,AchE活性及中高剂量组T-NOS活性显著降低(P<0.01),P53、Bax、Caspase-3蛋白表达减少,尤其是西红花瓣多糖高剂量组分别显著下调了37.88%、37.12%、30.02%(P<0.05)。代谢通路分析发现,西红花瓣多糖主要影响精氨酸合成、谷胱甘肽代谢等通路。综上所述,西红花瓣多糖能够有效缓解D-半乳糖诱导的小鼠脑组织损伤,其机制可能与调节P53、Bax、Caspase-3蛋白表达,影响精氨酸合成和谷胱甘肽代谢等通路有关,研究结果可为扩展西红花瓣资源在抗衰老领域中的应用提供理论依据。

关键词： 白及多糖   达托霉素   抗菌活性   协同作用   金黄色葡萄球菌  

摘要： 采用热水提取结合醇沉法制备白及多糖(BSP),并通过MCR702,GPC-MALS-RI,SEM等分析BSP分子特征.在此基础上,进一步考察BSP与达托霉素(DAP)的联合抗菌作用.结果表明,BSP得率53.3%,数均分子量58.635 kDa,重均分子量83.319 kDa,多分散性指数1.421,数均旋转半径18.3 nm,重均旋转半径22.5 nm;在盐溶液中,BSP分子呈现紧凑型准球状的构象;在水溶液中,BSP可自发形成多级聚集结构,平均粒径为410.7 nm;BSP(质量浓度1.0 g/L)可使DAP对金黄色葡萄球菌的抗菌活性提高2倍;与DAP单药相比,DAP联用BSP可增强细菌细胞膜通透性,引发核酸、蛋白质、K+等内容物外泄,致使细胞形态皱缩,加速膜电位下降.这提示BSP可通过协同作用促进DAP在细胞膜磷脂中的插入与离子通道的形成,进而发挥杀灭金黄色葡萄球菌的作用.

关键词： 糖尿病肾病   蛋白质摄入   炎症   预后  

摘要： 目的分析糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)患者蛋白质摄入水平与高敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的关系及对预后的影响。方法纳入2021年6月至2024年6月期间收治的325例DKD患者,将其分为低蛋白组、高蛋白组。比较2组患者随访前、随访1年后hs-CRP、IL-6、TNF-α。以线性混合模型分析相关性。比较2组患者随访期间终点事件发生率、疾病无进展生存期。结果随访前2组患者炎症指标比较差异均无统计学意义(P>0.05);随访1年后,2组患者hs-CRP、IL-6、TNF-α水平均高于随访前,且高蛋白组高于低蛋白组(P<0.05)。线性混合模型分析结果显示,蛋白质摄入水平、时间以及蛋白质摄入水平×时间交互项均与hs-CRP、IL-6、TNF-α水平变化存在相关性(P<0.05)。高蛋白组随访期间终点事件发生率为24.84%(40/161)显著高于低蛋白组的12.80%(21/164)(χ^(2)=7.724,P=0.005)。低蛋白组疾病无进展生存期长于高蛋白组(Log Rankχ^(2)=9.007,P=0.003)。结论糖尿病肾病患者蛋白质摄入水平与其炎症反应和预后密切相关。

关键词： 拟素化   神经前体细胞表达发育调控蛋白8   MLN4924   免疫细胞   炎症通路   去拟素化  

摘要： 蛋白质拟素化修饰是一种将神经前体细胞表达发育调控蛋白8(neural precursor cell expressed developmentally downregulated protein 8,NEDD8)共价修饰至靶蛋白的重要翻译后修饰过程,已被证实对细胞增殖、凋亡及信号转导等关键生物学事件具有调控作用。近年研究显示,蛋白质拟素化修饰与炎症性疾病的发生发展密切相关。本文首先系统综述了拟素化级联反应的生物化学过程及其调控机制,进而深入探讨其通过调控炎症信号通路关键蛋白发挥作用的过程,揭示该修饰对中性粒细胞、巨噬细胞、树突状细胞等天然免疫细胞及适应性免疫细胞特征与功能的核心调控作用。随后重点评述了蛋白质拟素化修饰在炎症性肠病、类风湿性关节炎、肝纤维化、胰腺炎、动脉粥样硬化及急性肺损伤等炎症性疾病中的具体作用机制,并探讨其作为治疗靶点的潜力。最后,针对当前小分子拟素化抑制剂(特别是MLN4924与TAS4464)在炎症治疗中的应用前景,阐述了其潜在临床价值,并提出未来研究需解决的关键问题与发展方向。

关键词： 长枝木霉   川牛膝多糖   抗氧化   抗炎   IPEC-J2细胞  

摘要： 为探究长枝木霉发酵酶液对川牛膝多糖提取及活性的影响,采用水提醇沉法和长枝木霉发酵液辅助法提取川牛膝多糖,经纯化后测定其含量、结构特征,并比较体外抗氧化活性及对脂多糖(LPS)诱导的IPEC-J2细胞的抗炎与抗氧化保护作用。结果表明:发酵液辅助法使多糖提取率提升25.7%;两种多糖结构与单糖组分基本一致,但水提醇沉法提取的川牛膝多糖中半乳糖醛酸含量更高。体外实验中,TLCP的DPPH自由基、羟基自由基清除能力及总抗氧化活性均优于WCP;细胞实验表明,TLCP能更显著下调炎症因子(IL-6、IL-1β、TNF-α)和TLR4受体表达,上调抗氧化相关基因(NQO1、HO-1等)的mRNA与蛋白水平。说明长枝木霉发酵液辅助提取法可高效获取川牛膝多糖,且显著增强其抗氧化与抗炎活性,为川牛膝多糖的开发利用提供了新路径。

关键词： 胚胎干细胞   间充质基质细胞   外泌体   辐射损伤   氧化应激  

摘要： 目的:探索胚胎干细胞诱导的间充质基质细胞来源外泌体对辐射导致淋巴细胞损伤的修复作用及相关机制。方法:建立胚胎干细胞(ESC)诱导分化间充质基质细胞(ESC-MSC)培养体系,并通过流式细胞术及形态学方法对诱导产生的细胞进行鉴定。分离纯化ESC-MSC外泌体(ESC-MSC-Exo),通过电镜观察、纳米示踪分析、蛋白免疫印迹检测对其进行鉴定,并将其与人骨髓MSC外泌体(BM MSC-Exo)进行对比,观察其异同。分离健康人外周血淋巴细胞,60Coγ射线对其进行4Gy照射,在培养体系中分别加入ESC-MSC-Exo、BMMSC-Exo共培养48h,对其凋亡、DNA断裂、活性氧(ROS)产生、线粒体膜电位变化情况进行检测,对比两种外泌体疗效差异并探索ESC-MSCExo对辐射导致淋巴细胞损伤的修复作用及其相关机制。结果:通过流式细胞术及形态学鉴定证明ESC-MSC含有间充质基质细胞(MSC)表面标志且形态呈梭形。电镜观察示ESC-MSC-Exo呈茶托状或一侧凹陷的半球状;蛋白免疫印迹证明其含有外泌体标志性蛋白TSG101、CD63与CD81;纳米示踪分析结果显示,其颗粒大小均匀,峰值大小为153.6nm。ESC-MSC-Exo能够改善辐射导致的淋巴细胞凋亡、DNA断裂,减少ROS产生,改善辐射诱导的线粒体膜电位下降。结论:ESC-MSC-Exo能够改善辐射导致的淋巴细胞氧化应激,减少细胞凋亡。

关键词： 马铃薯   花青素   StMYB3   生物信息学   表达分析  

摘要： 马铃薯转录因子对花青素的影响主要体现在对马铃薯花青素合成途径相关转录因子的调控作用上。通过RT-PCR从马铃薯品种夏坡蒂(薯肉为白色)、万紫千红(薯肉为浅紫色)和2013-89-61(薯肉为深紫色)中克隆出马铃薯StMYB3基因,对其进行生物信息学分析和差异表达分析。结果表明,马铃薯StMYB3基因目的片段长度为710 bp,编码的蛋白分子质量20.71 kDa,等电点9.14,属于亲水性蛋白。马铃薯StMYB3基因含有R2R3-MYB结构域和bHLH转录因子,不含跨膜结构域,系统进化分析表明马铃薯StMYB3基因与辣椒ScMYB序列相似度最高。经半定量PCR发现,马铃薯StMYB3基因在不同部位表达量为嫩叶>老叶>茎>块茎>根,2013-89-61品种在各部位均属于高表达。

关键词： 决策树模型   血液细胞分析   呼吸道病原体   阴性预测值  

摘要： 目的建立基于血液细胞分析参数的决策树筛查模型,以筛查常见呼吸道病原体非感染者,提高呼吸道病原体核酸检测精准性。方法采用回顾性研究,收集2023年12月-2024年3月就诊于昆明医科大学第一附属医院,并进行呼吸道病原体核酸检测的患者数据,包含阳性390例,阴性578例。分析患者血液细胞及其参数之间的炎症指标,并将数据分为训练集和验证集,建立多规则决策树模型。基于Gini测量分析各参数的模型贡献度,通过ROC曲线、灵敏度、特异度等指标,评价模型的筛查性能,并比较模型建立前后核酸检测阳性率变化。结果血液细胞分析参数按模型贡献度大小排序:MO-Z(ch)、NE-FSC(ch)、MONO%、BA-D#、NE-WX等;建立了14条筛查规则的决策树模型,结果显示模型的AUC 0.77、灵敏度99.31%、特异度54.44%、假阴性率0.27%、阴性预测值99.19%、约登指数0.54、放行率33.38%。通过计算,该模型可将核酸检测阳性率由40.3%提高至60.5%。结论通过血液细胞分析参数建立决策树筛查模型,对筛查常见呼吸道病原体感染阴性的患者及提高核酸检测的精准性具有较大的优势。

关键词： 蛋白核小球藻   常压室温等离子体   甲基磺酸乙酯   复合诱变   蛋白质  

摘要： 为了采用复合诱变技术提高蛋白核小球藻发酵蛋白产量并改善氨基酸品质,以本团队前期选育获得的高蛋白叶绿素合成缺陷型突变株CX41为出发藻株,采用甲基磺酸乙酯(Ethyl Mesylate,EMS)和常压室温等离子体(Atmospheric and Room Temperature Plasma,ARTP)诱变技术进行复合诱变处理,与微生物微液滴培养系统(Microbial Microdroplet Culture System,MMC)和48孔板培养高通量筛选相结合,经250 mL摇瓶培养复筛后,最终得到突变藻株Y11,在含30 g·L^(-1)葡萄糖、3.75 g·L^(-1)硝酸钠的Basal培养基中,于30℃、160 r·min-1条件下避光发酵96 h,其生物量、蛋白含量及产率分别达到9.05 g·L^(-1)、55.54 g/100 g干重和1.26 g·(L·d)^(-1),较出发藻株CX41分别显著提高了21.15%、25.60%、51.81%;氨基酸评分达94.41,支链氨基酸总含量达6.96 g/100 g干重,较出发藻株CX41分别提高了3.49分和27.35%;叶黄素含量、产量及产率分别达到1.12 mg·g-1、10.10 mg·L^(-1)和2.52 mg·(L·d)^(-1),相较于出发藻株CX41分别提高了4.67%、26.88%、26.63%。该研究为利用复合诱变手段-高通量筛选技术选育优质微藻藻株提供了理论基础和技术支撑。