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关键词： 硫培非格司亭   异基因造血干细胞移植   造血干细胞动员  

摘要： 目的:探讨硫培非格司亭与重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)在健康供者外周血造血干细胞(PBSC)动员中的疗效、安全性及药物经济学差异。方法:纳入2022年1月至2025年6月在本院行PBSC动员的100例健康供者,将其分为硫培非格司亭组与rhG-CSF组。设定成功动员标准为CD34^(+)细胞≥2×10^(6)/kg,CD34^(+)细胞≥5×10^(6)/kg为优良动员标准。比较两组供者的动员效果、不良反应与医疗费用,并评估相应受者的细胞输注量、造血重建时间及急性移植物抗宿主病(aGVHD)的发生率。结果:两组的动员成功率均为100%。硫培非格司亭组在优良动员率(98.0%vs.80.0%,P=0.004)及动员的CD34^(+)细胞数量中位数[7.84(4.86-20.86)vs.5.85(2.99-15.20)×10^(6)/kg,P<0.001]方面均显著高于rhG-CSF组,而单个核细胞数低于rhG-CSF组[10.13(5.38-24.80)vs.12.16(4.99-28.38)×10^(8)/kg,P=0.049]。两组受者的植入率(88%vs.90%)及aGVHD发生率(52.3%vs.48.9%)无显著差异(P>0.05);但硫培非格司亭组受者的中性粒细胞(14vs.16d)与血小板(13vs.22d)植入时间较rhG-CSF组均显著缩短(均P<0.001)。两组的不良反应发生率(32.0%vs.30.0%)及症状谱相似(P>0.05)。此外,硫培非格司亭组供者的住院时长[2(2-3)vs.6(6-7)d]及动员总费用均显著低于rhGCSF组(P<0.001)。结论:在健康供者PBSC动员中,硫培非格司亭的疗效不劣于rhG-CSF,且在促进受者造血重建方面更具优势,同时能缩短住院时间并降低医疗成本,安全性相当,是一种具有更高成本效益的动员方案。

关键词： 枸杞多糖   骨质疏松症   骨关节炎  

摘要： 枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharides,LBP)自枸杞果实中提取,是枸杞的主要生物活性物质之一。最新的研究表明,枸杞多糖具有强大的抗炎及抗氧化能力,对骨骼健康具有积极影响,能够抑制破骨细胞介导的骨吸收、促进成骨细胞及骨髓间充质干细胞(BMSCs)介导的骨形成并保护软骨细胞,具有预防和治疗骨质疏松症(osteoporosis,OP)及骨关节炎(osteoarthritis,OA)的潜在价值。本文概述LBP的理化特性、LBP对OP与OA影响的相关动物实验,并着重讨论了LBP对OP与OA影响的机制,旨在为OP与OA的研究提供新的思路。

关键词： 中亚白及   多糖   甲基化   二维核磁   抗炎活性  

摘要： 本研究以药食同源植物中亚白及为对象,旨在系统研究中亚白及中性多糖(USP-N)的结构特征与抗炎活性。通过部分酸水解、Smith降解、甲基化及二维核磁共振(2D-NMR)技术系统解析其精细结构,并基于斑马鱼炎症模型评价了其抗炎活性。结构分析表明,USP-N主链由β-1,4连接的葡萄糖(38.5%)和甘露糖(33.8%)交替构成,形成葡甘聚糖骨架,侧链含少量鼠李糖、阿拉伯糖及半乳糖,部分甘露糖残基存在2-O-乙酰化基团。生物活性实验显示,USP-N处理抑制了脂多糖(LPS)诱导的相关一氧化氮(NO)的释放(P<0.0001)及斑马鱼体内中性粒细胞向尾部的迁移(P<0.0001)。同时,也减少了机械损伤后中性粒细胞和巨噬细胞向尾部的募集,且呈现剂量依赖性。综上,该研究为中亚白及多糖在功能性食品和药品开发中的应用提供了理论依据。

关键词： 春尺蠖   小分子热激蛋白   滞育   逆境胁迫   表达谱  

摘要： 本研究旨在克隆春尺蠖(Apocheima cinerarius)中2个小热激蛋白编码基因(sHSP),分析其在不同发育阶段、不同组织、不同温度胁迫下的表达模式,以期明确小热激蛋白在春尺蠖应答温度胁迫过程中的作用。基于春尺蠖蛹的转录组数据,筛选并克隆春尺蠖的2个sHSP基因,对其进行系统发育分析、结构域分析等生物信息学分析。用实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测sHSP基因在春尺蠖不同发育阶段(卵、幼虫、蛹及成虫)及不同组织(头部、胸部、腹部、足部及翅膀)中的时空表达特征,并进一步分析其4龄幼虫在不同温度(-5℃、0℃、5℃、25℃和30℃)胁迫下的表达模式。克隆获取2个s HSP基因后,分别将其命名为AcinHSP20.4、AcinsHSP(GenBank登录号分别为PV053122和PV053123),编码序列(CDS)全长分别为543 bp、758 bp,分别编码180个、252个氨基酸,相对分子量分别为20470、27758,理论等电点分别为6.98、4.60。基因表达结果显示,AcinHSP20.4基因在春尺蠖卵至5龄幼虫阶段的相对表达量较低,在滞育解除蛹期的相对表达量最高;AcinsHSP基因的相对表达量在春尺蠖卵至5龄幼虫阶段处于较低水平,在雌虫中的相对表达量达到最大值。AcinHSP20.4基因的相对表达量在雌虫胸部最高,AcinsHSP基因的相对表达量则在雄虫头部最高。随着温度的升高,AcinHSP20.4基因的相对表达量整体表现为先升高后降低的趋势,在25℃达到最大值,在30℃时下降并且与25℃的相对表达量间表现出显著差异(P<0.05);AcinsHSP基因的相对表达量总体呈上升趋势,在0~30℃范围内无显著差异,在-5℃与30℃之间差异显著(P<0.05)。由研究结果可以看出,sHSP基因在春尺蠖生长发育、滞育及响应温度胁迫的过程中具有重要作用,研究结果为进一步探究春尺蠖生长发育机制、滞育机制及对温度胁迫的适应性机制奠定了一定的理论基础。

关键词： 鸡传染性法氏囊病病毒   VP2蛋白   单克隆抗体   阻断ELISA  

摘要： 本研究旨在制备鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2蛋白的特异性单克隆抗体(mAb),建立高灵敏度阻断ELISA方法,为IBDV疫苗研发及抗体检测提供技术支撑。本试验以IBDVVP2蛋白免疫BALB/c小鼠,通过脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合并筛选杂交瘤细胞株;采用Western-blot、间接免疫荧光(IFA)和中和试验鉴定单克隆抗体特性;以VP2为包被原、以2F11为检测抗体,优化阻断ELISA反应体系,通过ROC曲线确定临界值,并与商品化试剂盒比较符合率。获得两株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株1D6(IgG2a)和2F11(IgG1),其中2F11具中和活性。Western-blot与IFA证实二者均特异性结合VP2蛋白及鸡胚成纤维细胞(CEF)感染的IBDV。建立的阻断ELISA最佳条件为:VP2包被浓度0.015μg/mL、2F11浓度0.034μg/mL、2%BSA溶液封闭。该方法灵敏度95.24%、特异性97.61%(AUC=0.978),临床样本检测总符合率达97.5%。本文成功制备IBDVVP2特异性单克隆抗体,基于2F11建立的阻断ELISA具有高灵敏度和可靠性,为IBDV抗体监测及新型疫苗评价提供了高效工具。

关键词： 桑桑牦牛   PFN3基因   克隆   生物信息学分析   组织表达  

摘要： 旨在探究桑桑牦牛PFN3基因(Profilin 3)的结构与理化指标,并利用qPCR检测RPL8基因在各组织中的表达情况,为挖掘牦牛PFN3基因的生物学功能提奠定理论基础。以心脏组织cDNA为模板,克隆牦牛PFN3基因的CDS区序列并检测该基因在不同组织中的表达。并使用多种软件和在线工具进行生物信息学分析。结果表明:桑桑牦牛PFN3基因编码区全长为414 bp,共有3个开放阅读框,编码137个氨基酸;通过分析牦牛PFN3蛋白显示,脂肪族系数为101.75,理论等电点9.04,不稳定指数37.22,该蛋白属于稳定的疏水蛋白;该蛋白存在4处潜在磷酸化位点,没有信号肽和跨膜区;氨基酸组成中甘氨酸(Gly)占比最高,为14.6%;亚细胞定位发现,PFN3蛋白在细胞质、细胞核和线粒体内的占比分别为43.5%,30.4%和26.1%;同源性比对发现,桑桑牦牛与野牦牛同源性最近,与非洲疣猪和欧亚野猪的亲缘关系最远;对互作蛋白进行KEGG通路富集分析,发现这些蛋白主要富集在肌动蛋白细胞骨架调控、Rap1信号通路、聚焦黏附、沙门菌感染和肌萎缩侧索硬化等通路中。qPCR结果显示,桑桑牦牛PFN3基因在直肠组织中表达最高,显著高于其他组织,在心脏中表达最低。

关键词： 梯棱羊肚菌   谷氨酸脱氢酶   基因克隆   原核表达  

摘要： 采用RT-PCR克隆梯棱羊肚菌(Morchella importuna)谷氨酸脱氢酶(MiGDH)基因,并进行生物信息学分析,采用DNA重组技术构建原核表达载体pEB-MiGDH,并在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中进行诱导表达。结果表明:MiGDH的cDNA序列长度为1377 bp,编码458个氨基酸;MiGDH基因组DNA全长为1529 bp,包含3个外显子和2个内含子;MiGDH相对分子质量为50167.51,理论等电点为5.91,为稳定的亲水性蛋白质,不含信号肽,无跨膜结构域,定位于细胞质;MiGDH N端含有ELFV脱氢酶结构域,为NADP(H)-GDH;MiGDH的二级结构主要包括α螺旋和无规则卷曲,三级结构为同源六聚体;成功在原核表达系统中表达了MiGDH。本研究结果可为探讨MiGDH的生物学功能提供参考。

关键词： 大豆   精准施肥   产量调控   蛋白质   油分  

摘要： 为探究精准施肥技术对大豆产量和营养成分的调控效应,以‘中黄13’为试验材料,采用随机区组设计,设置精准施肥、常规施肥、农户施肥和对照4个处理。结果表明,精准施肥显著提高了大豆产量,增产效果明显;籽粒蛋白质和油分质量分数均显著高于其他处理,营养品质得到有效改善;氮磷钾利用效率显著提升,实现了减量增效目标。精准施肥技术通过优化养分配比和施用时期,实现了大豆高产优质高效生产目标,为现代大豆生产提供了重要技术支撑。

关键词： 牡丹籽粕   多糖   结构特征   抗炎活性  

摘要： 为研究牡丹籽粕(peony seed meal,PSM)中多糖的结构特征及抗炎活性作用。本研究采用水提醇沉法获得牡丹籽粕多糖(peony seed meal polysaccharides,PSMP),利用纤维素DEAE-52层析柱分离得到牡丹籽粕中性多糖PSMP1,酸性多糖PSMP2和PSMP3。采用高效凝胶渗透色谱法、离子色谱法以及傅里叶变换红外光谱方法分析PSMP的组成和结构特征,结合小鼠单核巨噬细胞白血病细胞RAW 264.7炎症模型测定一氧化氮(NO)的释放量,以及白介素-6(interleukin-6,IL-6)和IL-1βmRNA的表达情况评价其抗炎活性。结果表明,PSMP1和PSMP2是由2种不同分子量的多糖构成的混合多糖,PSMP3为均一组分多糖;PSMP1由半乳糖、葡萄糖和木糖组成,摩尔比为29.06∶25.37∶53.43,PSMP2和PSMP3由半乳糖、葡萄糖、木糖和阿拉伯糖组成,摩尔比分别为2.95∶4.25∶42.91∶29.89和5.95∶25.88∶40.84∶27.33;红外光谱结果表明,3种多糖组分均有典型的植物多糖特征峰。3种牡丹籽粕多糖均具有一定的抗炎作用,且存在量效关系,其中中性多糖PSMP1的抗炎活性最佳。本研究可为牡丹籽粕资源的充分利用和功能开发提供理论依据。

关键词： 间充质干细胞   再生   组织工程   颅骨   面骨  

摘要： 颅颌面组织再生修复是口腔与再生医学领域的关键挑战。间充质基质/干细胞(mesenchymal stromal/stem cells,MSCs)作为核心效应细胞,其功能受代谢、表观遗传与免疫网络的多维精密调控。本文系统综述了MSCs在颅颌面组织再生中的功能调控机制,重点探讨了力学刺激、代谢重编程、H2S气体信号以及表观遗传修饰对MSCs干性维持、定向分化及免疫调节功能的影响。同时,阐述了MSCs通过外泌体等载体与免疫细胞相互作用,共同调控骨稳态与再生进程的双向机制。文末展望了基于MSCs及其工程化外泌体的靶向治疗策略所面临的挑战与临床转化前景,旨在为颅颌面缺损的再生修复提供新的见解。