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关键词： 微流控   多重核酸检测   生殖道病原体   不良妊娠结局   分子诊断  

摘要： 目的分析可能对妊娠结局产生不良影响的生殖道病原体,研发基于微流控技术的多靶标核酸检测试剂,建立快速多重分子检测新技术,并对该方法的有效性进行验证。方法对在北京大学第三医院就诊的妊娠期女性生殖道标本中可能对妊娠结局产生不良影响的病原微生物进行回顾性研究。采用微流控芯片核酸检测技术对上述样本进行检测,将检测结果与传统培养法或实时荧光定量聚合酶链反应(q PCR)法结果进行比较,对方法的符合率、检出限、交叉反应和抗干扰能力等方面进行验证。结果生殖道样本中B族链球菌、大肠埃希菌和白念珠菌阳性的妊娠期女性出现胎膜早破、子痫前期和妊娠期糖尿病等不良妊娠结局率显著高于阴性组(P<0.05)。微流控多重核酸检测技术与培养法相比,阳性符合率为92.59%,阴性符合率为84.72%,与q PCR法相比,阳性符合率为98.75%,阴性符合率为100.00%。结论微流控多重核酸检测技术具备高效、准确的特点,有望在临床实践中提供更快速、精准的病原体检测,及时诊断妊娠期女性生殖道感染并预防不良妊娠结局的发生。

关键词： 微针技术   昆虫   核酸分子递送   害虫防治   生物材料  

摘要： 微针(microneedles,MNs)技术作为先进的微创药物递送平台,在生物医学领域广泛应用于药物、疫苗及生物大分子的透皮输送。近年来,以成簇规律间隔短回文重复序列/CRISPR相关蛋白9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated protein 9,CRISPR/Cas9)基因编辑和RNA干扰(RNA interference,RNAi)为代表的现代分子技术,为农业害虫的绿色防控研究提供了革命性的工具,传统显微注射法操作繁琐、通量低且易对虫卵造成损伤;而饲喂法则受限于昆虫消化道的多重生理与酶解屏障,导致外源dsRNA难以被有效摄取并进入血液循环,递送效率低且不稳定。因此,将已在医学领域应用成熟的微针技术(其核心为微米级针尖阵列)引入昆虫分子学研究,为解决这一递送难题提供了创新思路。首次系统探讨了微针技术在昆虫分子递送中的应用潜力,重点阐述了适用于昆虫体系的微针类型、关键生物相容性材料及其性能,并深入分析了该跨界应用所面临的主要机遇与挑战,旨在为开发下一代高效、精准的害虫分子防控策略提供新的技术视角和理论参考。

关键词： 白果   多糖   抗氧化   超声辅助提取   自由基  

摘要： 以新鲜白果为原料,考查不同提取条件对白果粗多糖提取率的影响,通过单因素试验和正交试验探索白果粗多糖最佳提取工艺,通过自由基清除试验检测其抗氧化能力。结果表明,在料液比1∶30(g∶m L),超声时间45 min,超声温度50℃时,白果粗多糖提取率达到最大值10.10%。自由基清除试验结果表明,白果粗多糖对DPPH自由基、ABTS+自由基均具有清除作用,且清除能力与多糖质量浓度呈正比。

关键词： 肠道菌群   支链氨基酸   中医药   糖尿病肾病   研究进展  

摘要： 糖尿病肾病以肾小球滤过进行性受损和高血糖水平,进而导致终末期肾功能衰竭为特征,是全球终末期肾病的主要原因。肠道菌群在糖尿病肾病中起着重要作用,支链氨基酸是肠道菌群的代谢产物,也是能量支持、营养感应、神经递质合成和细胞信号传导的关键调节因子,是糖尿病肾病发生的关键生物标志物。中医药可通过改善肠道菌群功能,维持其平衡稳态,减轻支链氨基酸代谢紊乱而达到防治糖尿病肾病的目的。本文主要探讨肠道菌群和支链氨基酸在糖尿病肾病中的作用以及中医药通过调节肠道菌群和支链氨基酸代谢防治糖尿病肾病的研究进展,以期为糖尿病肾病的防治提供具有中医特色的新思路。

关键词： 坡垒   无融合生殖   微卫星标记   单核苷酸多态性标记   保护  

摘要： 利用微卫星和单核苷酸多态性标记检测坡垒(Hopea hainanensis)母树与子代的基因型,由此推断坡垒的繁殖方式。微卫星标记显示10个坡垒家系的母本与子代在12个微卫星位点上具有完全相同的基因型组成。随机选择4个家系通过简化基因组测序分析单核苷酸多态性(SNP)的变异模式,发现母树和子代在绝大多数SNP变异位点上保持一致,有性生殖产生这一变异模式的可能性几乎为零。微卫星和SNP标记分析均支持坡垒的繁殖方式为无融合生殖。作为同源四倍体,坡垒不能通过减数分裂产生能育配子,无融合生殖生产种子是其维持和更新种群的必然途径。体细胞突变是无融合生殖产生变异的主要途径,因此,要恢复坡垒种群的遗传变异,必须严格保护现存的坡垒种群,避免多样性的进一步丧失;同时利用高通量测序筛选变异种苗,在自然生境中重建坡垒种群,逐步恢复遗传多样性,实现其长期稳定续存。

关键词： 再生障碍性贫血   间充质干细胞   移植物抗宿主病   外泌体  

摘要： 再生障碍性贫血(AA)的一线治疗方案目前存在造血干细胞移植(HSCT)后移植物宿主排斥反应高和免疫不耐受的风险。间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)由于在移植物抗宿主病(GVHD)和自身免疫性疾病的治疗中具备免疫调节活性而引起广泛关注。为更好地了解MSCs作用于AA的发病机制以及其临床应用的可行性和有效性,首先介绍了AA患者在临床治疗中的困境和MSCs生物学特性,其次综述了MSCs在治疗AA中的可行性,最后对MSCs在AA中的应用做了展望。

关键词： 长链非编码RNA H19   人脐带间充质干细胞   成骨性能   Runt相关转录因子2(RUNX2)   整合素结合唾液酸蛋白(IBSP)   成纤维细胞生长因子(FGF5)  

摘要： 目的:观察长链非编码RNA H19(long non-coding RNAs lncRNA H19,lncRNA H19,以下简称H19)转染人脐带间充质干细胞后对多个成骨成血管因子表达的影响及其成骨性能,为合成血供良好的骨缺损填充物提供前期研究基础。方法:生物信息学确定H19可以调控与骨形成相关的微小RNA(microRNA,miRNA)及miRNAs可调控的成骨成血管因子,将目标锁定为miR-137-3p、miR-383-5p和它们可以调控的整合素结合唾液酸蛋白(integrin-binding sialoprotein,IBSP)、Runt结构域基因家族的Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)和成纤维细胞生长因子5(fibroblast growth factors 5,FGF5)。体外培养人脐带间充质干细胞。将lncRNA H19转染至人脐带间充质干细胞,用反转录-聚合酶链式扩增技术(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)观察转染后细胞中miR-137-3p、miR-383-5p表达丰度,采用Western blot观察IBSP、RUNX2、和FGF5表达情况,碱性磷酸酶和茜素红染色观察转染H19后细胞的成骨性能。验证H19转染人脐带间充质干细胞是否可以通过降低miR-137-3p、miR-383-5p的表达,从而提高成骨成血管因子IBSP、RUNX2、和FGF5的表达,并确认转染H19可以促进人脐带间充质干细胞的成骨作用。结果:转染H19的人脐带间充质干细胞内miR-137-3p、miR-383-5p表达下调,而RUNX2、IBSP和FGF5的表达均明显升高,分别由转染前(0.533±0.058)、(0.633±0.058)、(0.500±0.100)升高至转染后的(1.300±1.100)、(1.233±0.058)、(0.967±0.115),差异均有统计学意义(P=0.000,P=0.000,P=0.006)。脐带间充质干细胞转染H19后成骨性能更好。结论:转染lncRNA H19的人脐带间充质干细胞可以促进某些成骨成血管因子的表达且成骨性能提高,为今后研制一种包含有lncRNA H19的组织工程骨,促进该组织工程骨的成骨及成血管性能提供可能。

关键词： 白芍   多糖   白芍总苷   提取方法   生物活性   医药中间体   研究进展  

摘要： 白芍作为我国应用广泛的传统中药材,富含多糖类、萜类、黄酮类等多种化学成分,具有平肝止痛、养血调经、敛阴止汗的功效。白芍多糖和白芍总苷是白芍的主要活性成分,研究表明,这些成分具有丰富的生物活性,展现出较高的研究价值和开发潜力。概述了白芍药材的资源分布,综述了其活性成分的提取方法和生物活性研究进展,并梳理归纳其在精细化工产品、医药中间体及制剂等领域的应用开发现状,为白芍今后的研究工作提出展望,以期为白芍的深入研究和高附加值产品开发提供参考。

关键词： 黄秋葵   AeF3H   黄烷酮3-羟化酶   基因克隆   功能验证   总黄酮   组织表达模式  

摘要： 【目的】从黄秋葵(Abelmoschus esculentus L.)中克隆黄烷酮3-羟化酶基因(AeF3H),通过拟南芥遗传转化鉴定其生物学功能,为阐明黄秋葵类黄酮累积的调控机理提供理论基础。【方法】根据黄秋葵转录组数据设计引物,以秋葵籽cDNA为模板,通过PCR扩增获得AeF3H基因;通过生物信息学分析AeF3H的基本特征;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析其组织表达特性;构建35::AeF3H::YFP过表达载体,通过花序浸染法转化拟南芥,采用硝酸铝比色法测定T3代拟南芥转基因株系中总黄酮含量变化;利用拟南芥原生质体瞬时表达技术分析AeF3H亚细胞定位。【结果】AeF3H的ORF长1101 bp,编码366个氨基酸;基因组序列长1304 bp,含3个外显子和2个内含子。推测其蛋白的相对分子量为41.08 kD,理论等电点为5.32。系统进化树分析发现,AeF3H与木槿(Hibiscus trionum)的F3H亲缘关系最近。RT-qPCR结果表明,AeF3H具有一定的组织表达特异性,在嫩籽和花蕾中的表达量最高,在茎和果荚中的表达量最低。亚细胞定位显示其蛋白同时定位于细胞核和细胞质中。过表达AeF3H的拟南芥植株,其总黄酮含量为野生型的4.75倍。【结论】AeF3H具有一定的组织表达特异性,其蛋白定位于细胞核和细胞质中。AeF3H在黄秋葵类黄酮生物合成代谢途径中发挥着重要作用,过量表达AeF3H能够显著增加转基因拟南芥的总黄酮含量。

关键词： 红枣多糖   提取方法   构效关系   生物活性   开发利用  

摘要： 红枣多糖作为重要的生物活性成分,因其具有抗炎、免疫调节、抗氧化、抗肿瘤、调节肠道微生物群等多种药理作用而受到广泛关注。然而目前红枣加工主要依赖传统方法,导致效率低下,提高红枣多糖的提取率以提升其在食品、医药等领域的应用具有巨大潜力。本文系统综述了红枣多糖的提取技术、生物活性及其在生产与应用领域的最新研究进展。在溶剂萃取、超声和微波辅助以及酶法助提等传统提取技术的基础上,概述了多技术联合提取、脉冲电场提取、亚临界水萃取和超高压萃取4种新兴提取方法。从单糖组成、糖苷键和侧链基团、分子量及高级结构特性等方面探讨了红枣多糖结构与生物活性之间的构效关系;介绍了红枣多糖在食品、医药、化妆品及采后保鲜等方面的应用潜力,旨在为红枣多糖研究、拓展红枣产业链提供参考。