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关键词： 蕨麻   等级评价   氨基酸含量   形态参数   质量常数法  

摘要： 目的 通过相对质量常数（RQC）建立门源蕨麻的等级评价体系，并利用紫外分光光度法测定门源蕨麻中总氨基酸含量。方法 通过采集门源地区不同产地的蕨麻样本，测定外观形态指标及蕨麻总氨基酸含量，计算RQC，进行等级划分并进行统计分析。结果 24种不同编号的蕨麻相对质量常数为1.966～6.165，特等品为相对质量常数A′≥1.312、百分质量常数A%≥90%，一等品为相对质量常数1.312>A′≥1.020，百分质量常数90%>A%≥70%，二等品为相对质量常数1.020>A′≥0.583、百分质量常数70%>A%≥40%，三等品为相对质量常数A′<0.583，百分质量常数A%<40%。24种不同编号蕨麻中特等品有7个，占总数的29.17%；一等品有5个，占总数的20.83%；二等品有8个，占总数的33.33%；三等品有4个，占总数的16.67%。相关性分析表明，门源蕨麻相对质量常数等级与总氨基酸含量呈正相关。结论 基于相对质量常数的方法可客观、合理地划分门源蕨麻等级，适用于蕨麻质量的综合评价。

关键词： 人源性内参   循环阈值   采样质量   质量监测   病原体核酸检测   口岸卫生检疫  

摘要： 人源性内参是病原体核酸检测试剂中靶向人类管家基因的内对照,其循环阈(cycle threshold,Ct)值所携带的定量质控信息系统化利用程度仍有待提高。本文简述了其检测原理与判读基础,并以质量监测中的应用进展为主线,依次评述单样本有效性的定性判读及其局限、Ct值作为采样质量代理指标的方法学前提与定量证据,以及群体与批次层面的质控监测。现有证据表明,人源性内参Ct值的变异在相当程度上可由采样等分析前因素解释,其绝对水平与分布携带可供统计建模的采样质量信息,并可经受试者工作特征曲线分析确定预测假阴性的Ct值。在应用层面,人源性内参Ct值正由单样本有效性的定性判读,向采样质量连续代理指标与群体批次质控统计量演进。但判读阈值标准化缺位、跨试剂跨平台Ct值可比性受限仍是主要方法学短板。本文结合口岸卫生检疫“实验室与采样现场分离”“多病同检”的工作特点,提出围绕低质量样本比例建立分级预警与数据反馈机制的设想,以期为采样质量的量化监控提供参考。

关键词： StSDD1   基因克隆   生物信息学分析   人工microRNA技术   马铃薯  

摘要： 【目的】SDD1(stomatal density and distribution)基因是气孔发育相关的重要元件之一，为了明确SDD1基因在调控马铃薯气孔密度和响应各种逆境胁迫过程中的作用。【方法】从马铃薯品种大西洋（Atlantic）中克隆得到StSDD1基因，并对其进行生物信息学分析。通过人工microRNA技术（artificial microRNA,amiRNA），设计特异性沉默StSDD1的人工miRNA序列（amiR-StSDD1），通过双酶切和同源重组法构建了StSDD1干扰表达载体pCAMBIA1300-amiR-StSDD1。【结果】StSDD1基因的编码区长度为2 313 bp，编码770个氨基酸的蛋白质，StSDD1基因不包含内含子，属于连续基因。通过双酶切验证以及测序比对验证，成功构建了StSDD1基因干扰表达表达载体pCAMBIA1300-amiR-StSDD1。【结论】克隆了马铃薯StSDD1基因，对StSDD1基因进行了生物信息学分析，并成功构建了StSDD1基因的人工miRNA干扰载体，为后续通过StSDD1基因进行马铃薯抗旱遗传改良提供理论基础。

关键词： 青花菜   BoFLC3   表达模式   遗传转化   开花  

摘要： 【目的】FLC是调控植物开花的关键基因之一，通过克隆青花菜BoFLC3，并对其功能进行研究，以期为阐明青花菜开花转变的分子调控机制提供理论依据。【方法】以青花菜为材料，同源克隆获得BoFLC3，通过生物信息学工具分析其序列特性、保守结构域及系统发育关系；采用RT-q PCR技术检测BoFLC3在不同组织及不同处理下的表达谱，明确其表达特异性；构建亚细胞定位载体进行烟草瞬时过表达，明确其蛋白的细胞定位情况；进一步在拟南芥中异源过表达BoFLC3，并通过对比转基因株系与野生型植株的抽薹和开花表型差异，分析该基因在开花过程中的作用。【结果】BoFLC3的cDNA全长为594 bp，编码197个氨基酸，其编码蛋白含有典型的MADS结构域和K-box结构域，蛋白定位于细胞核。系统进化分析表明，青花菜FLC3与结球甘蓝FLC的同源性较高。表达模式分析显示，BoFLC3在成熟叶和茎尖中表达水平较高，且在低温处理后的青花菜茎尖中表达量显著下降。在拟南芥中异源过表达BoFLC3可显著推迟植株的抽薹及开花时间，过表达株系中开花促进基因AtFT、At LFY、At AP1和AtSPL的表达水平下调，而开花抑制基因AtSVP的表达则上调。【结论】BoFLC3在植物开花过程中发挥关键作用，其异源过表达可显著延迟抽薹与开花，表明该基因在成花诱导途径中发挥负调控功能。

关键词： 甘草多糖   胃溃疡   抗炎   抗氧化  

摘要： 目的 探讨甘草多糖对大鼠胃溃疡模型的作用及机制。方法 选择雄性SD大鼠，先给予甘草多糖灌胃，采用80%无水乙醇及吲哚美辛分别制作胃溃疡模型，观察其胃溃疡面积并计算溃疡抑制率。测定乙醇所致溃疡大鼠血清中的白介素-6（IL-6）、白介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达水平及其胃组织中的丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）和过氧化氢酶（CAT）含量。应用qRT-PCR检测甘草多糖对吲哚美辛所致胃溃疡大鼠胃组织中环氧合酶-1（COX-1）和前列腺素E2（PGE2）mRNA含量的影响。结果 甘草多糖可以减轻乙醇和吲哚美辛所致胃溃疡症状，降低乙醇所致胃溃疡大鼠血清中TNF-α、IL-6含量，升高IL-10及大鼠胃组织中GSH、CAT含量，降低MDA含量。甘草多糖可增加吲哚美辛所致胃溃疡大鼠胃组织中COX-1及PGE2的表达。结论 甘草多糖对乙醇和吲哚美辛两种胃溃疡大鼠模型均有一定的抗溃疡作用，其作用机制与抗炎、抗氧化及增加COX-1的表达，从而增加PGE2的合成，保护胃黏膜有关。

关键词： POE教学策略   前概念   概念教学  

摘要： 本文以POE教学策略为核心，基于学生的前概念创设“基孔肯雅热”的教学情境。教师通过预测暴露学生认知偏差，借助观察呈现事实基础，依托解释促进学生构建学科核心概念体系，从而实现前概念向科学概念的转变。

关键词： 蛋白质组学生物标志物   周围面神经损伤   差异蛋白  

摘要： 目的 周围神经损伤是口腔颌面临床中最常见的慢性疾病之一。本研究旨在探讨大鼠面神经损伤后生物标志物蛋白的差异表达情况。方法 使用12只雄性SD大鼠，大鼠面神经随机均分为正常组（正常面神经）和压榨损伤组（钳夹损伤面神经30 s，建立面神经压榨损伤模型）。收集两组大鼠神经组织，采用蛋白质组学方法对神经组织样本进行分析，随后进行无标记质谱检测。结果 两组大鼠面神经共存在8种差异表达的蛋白，其中3种上调蛋白包括原肌球蛋白1、突触样蛋白1、硫氧还蛋白相关跨膜蛋白3;5种下调蛋白包括对氧磷酶、分泌酶复合物蛋白、神经钙蛋白、PRA1家族蛋白2、网状蛋白1。结论 本研究筛选出与周围面神经钳夹损伤相关的差异表达蛋白，为进一步验证及研究神经再生相关蛋白提供理论基础。

关键词： 黄芪多糖   糖尿病   心肌损伤   脂联素受体2/信号转导与转录激活因子3通路  

摘要： 目的 探究黄芪多糖通过调控脂联素受体2(adiponectin receptor 2,AdipoR2)/信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)通路对糖尿病（diabetes mellitus,DM）大鼠心肌损伤的可能作用机制。方法 将30只SD大鼠随机分为3组：对照组、DM组、黄芪多糖组，每组10只。培养H9C2大鼠心肌细胞，分为对照组、干扰AdipoR2组、黄芪多糖组。采用葡萄糖检测试剂盒检测大鼠的空腹血糖（fasting blood glucose,FBG）水平；采用酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）试剂盒检测血清总胆固醇（total cholesterol,TC）、三酰甘油（triglycerides,TG）含量；采用小麦胚芽凝集素（wheat germ agglutinin staining,WGA）染色检测心肌结构变化；采用马松（masson）染色检测心肌组织纤维化水平；采用蛋白免疫印迹法（western blotting）检测AdipoR2、STAT3蛋白表达水平；采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记（terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick-end labeling,TUNEL）试剂盒检测心肌细胞凋亡水平；采用反转录定量聚合酶链式反应（reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR）检测AdipoR2、STAT3 mRNA表达水平。结果 与对照组比较，DM组大鼠的FPG水平显著升高，血清TC、TG含量显著增加，心肌横截面积显著增大，心肌纤维排列紊乱、断裂，心肌间隙可见大量胶原沉积，心肌细胞凋亡水平升高，AdipoR2、STAT3蛋白表达水平显著降低（P<0.01,P<0.05）；与DM组比较，黄芪多糖组大鼠FPG水平降低，血清TC、TG含量减少，大鼠心肌横截面积减小，心肌纤维损伤改善，心肌间隙胶原沉积减少，心肌细胞凋亡水平降低，AdipoR2、STAT3蛋白表达水平升高（P<0.01,P<0.05）。与对照组比较，干扰AdipoR2组心肌细胞中AdipoR2、STAT3蛋白及mRNA表达水平降低（P<0.05）；与干扰AdipoR2组比较，黄芪多糖组心肌细胞中AdipoR2、STAT3蛋白mRNA表达水平升高（P<0.05）。结论 黄芪多糖可通过激活AdipoR2/STAT3通路改善DM大鼠心肌损伤。

关键词： miR-200b-3p   骨髓间充质干细胞   成骨增殖   成骨分化   VEGF/Notch信号通路  

摘要： 目的 探讨miR-200b-3p在绝经后骨质疏松中的作用及其与血管内皮生长因子（VEGF）/Notch通路的关联。方法 (1)利用生物信息学数据库筛选与VEGF/Notch信号轴显著关联的差异表达miRNAs，并以此为依据筛选本研究的目标miRNA，确定miR-200b-3p为研究对象；(2)双荧光素酶报告基因实验验证靶向关系；(3)qRT-PCR检测临床血清及去卵巢大鼠骨组织中miR-200b-3p表达；(4)大鼠骨髓间充质干细胞定向诱导成骨分化，过表达/抑制miR-200b-3p表达，检测Runt相关转录因子2(RUNX2)及VEGF、Notch1mRNA表达及细胞增殖、碱性磷酸酶（ALP）活性。结果 (1)生信分析提示miR-200b-3p在绝经后骨质疏松中可能存在差异表达；(2)双荧光素酶实验证实VEGFA与Notch1是miR-200b-3p的靶基因；(3)miR-200b-3p在绝经后骨质疏松女性血清及去卵巢骨质疏松大鼠股骨中表达下调（P<0.05,P<0.01）；(4)过表达miR-200b-3p促进骨髓间充质干细胞成骨分化，提高ALP活性，上调RUNX2、VEGF及Notch1 mRNA表达（P<0.05）；抑制其表达则结果相反。结论 miR-200b-3p在绝经后骨质疏松患者血清及骨质疏松大鼠骨组织中表达下调，促进骨髓间充质干细胞成骨分化，上调VEGF/Notch通路相关基因的转录，提示其促成骨作用可能与该通路的激活相关。

关键词： 间充质干细胞   细胞外囊泡   外泌体   肺纤维化   工程化修饰  

摘要： 肺纤维化是一种由环境暴露及感染等多因素诱发的慢性进行性间质性肺病，其核心病理特征表现为细胞外基质异常沉积及肌成纤维细胞过度活化。现有治疗药物因靶向性不足且无法逆转纤维化进程，故疗效有限。近年来，多能间充质干细胞及其分泌的细胞外囊泡(尤其是外泌体)凭借其独特的组织修复及免疫调节功能，在肺纤维化治疗领域展现出突破性潜力。该文系统阐述间充质干细胞及其细胞外囊泡(外泌体)的多维抗纤维化机制，同时深入探讨工程化修饰策略(如基因修饰、新型载体和递送系统以及联合干预)对疗效的提升作用，并分析从基础研究向临床转化面临的挑战，以期为新型抗纤维化药物的研究及间充质干细胞的临床应用提供理论依据。