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关键词： 支链氨基酸   代谢   循环系统   脂肪   寿命   生殖   发育  

摘要： 支链氨基酸是人体必需的氨基酸,参与了生物的多种生理功能,是近年来的研究热点。国内外对支链氨基酸的研究也取得了一定的成果,但目前关于支链氨基酸在生理功能中作用的研究结果比较分散。因此文章梳理了支链氨基酸对循环系统、脂肪代谢、寿命、生殖发育等基本生理功能的影响以及相关机制,总结了支链氨基酸与这些生理功能紊乱相关疾病的关联,并提出了未来研究方向。

关键词： 五味子   多糖   药理作用  

摘要： 五味子为我国传统中药,其干燥成熟果实的药用历史已逾两千年,富含多糖、木脂素、挥发油等多种活性成分。其中,五味子多糖(Schisandra Chinensis Polysaccharide,SCP)作为五味子的核心活性成分,因具有温和的生物活性及多元生理调节功能,近年已成为中药活性成分研究领域的重点方向之一。本文系统梳理并综述近年来SCP的主要药理作用及潜在机制研究成果,旨在为SCP的后续药用开发、作用机制深化探索及临床转化应用提供坚实的理论支撑。

关键词： 光皮木瓜   低共熔溶剂   多糖   结构表征   免疫活性  

摘要： 为促进光皮木瓜的高值化利用,本研究采用低共熔溶剂法(Deep eutectic solvents,DES)结合单因素与响应面试验系统优化了光皮木瓜多糖(Chaenomeles sinensis (Thouin) Koehne polysaccharides,CSKP)的提取工艺,并对所得多糖进行初步结构表征及体外免疫活性评价。结果表明,氯化胆碱-柠檬酸体系在摩尔比1:2、含水量30%、提取温度92 °C、提取时间70 min、料液比1:30(g/mL)的最优工艺条件下,CSKP的提取得率为300.37 mg/g,与模型预测值接近。CSKP中性糖和糖醛酸含量分别为38.60%和30.80%,蛋白质含量为2.30%,主要是由半乳糖醛酸(32.64%)、鼠李糖(19.25%)、阿拉伯糖(19.06%)组成的酸性多糖,平均粒径为478.77 nm,Zeta电位为-21.77 mV。CSKP可在一定浓度范围内显著提高RAW264.7细胞增殖和吞噬能力,并促进一氧化氮(Nitric oxide,NO)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)及肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)的分泌。综上,氯化胆碱-柠檬酸DES可实现光皮木瓜多糖的高效绿色提取,所得CSKP具有酸性多糖结构特征,并表现出良好的体外免疫调节活性。本研究可为光皮木瓜多糖的高附加值开发利用提供理论依据和技术支撑。

关键词： 间充质干细胞(MSC)   血管周围脂肪组织(PVAT)   形态学观察   表面标志物   三系分化潜能  

摘要： 目的 建立大鼠主动脉血管周围脂肪间充质干细胞(PV-ADSC)的提取扩增方法,为血管重塑及相关心血管病研究提供可靠的细胞模型。方法 无菌分离1月龄Sprague Dawley(SD)大鼠主动脉血管周围脂肪组织(PVAT),经漂洗、剪碎、消化、过筛后接种培养;待细胞汇合率达80%~90%时进行传代扩增,培养期间持续观察细胞形态及其增殖情况;取P5代细胞,采用流式细胞术分析表面标志物CD分子表达水平,定向诱导分化实验及相应染色检测成脂/成骨/成软骨三系分化潜能。结果 原代培养第4天,可见梭形、星形或多角形细胞自接种组织边缘迁出;5~6 d出现岛屿样细胞克隆团;7~8 d细胞集落融合,呈漩涡或平行排列,单层贴壁生长。传代后细胞形态渐趋一致,为典型成纤维样梭形,增殖旺盛,至P8代仍未见明显细胞衰老或异常分化现象。P5代细胞高表达间充质干细胞(MSC)表面标志物CD90(93.60 ± 0.62)%、CD73(86.80 ± 2.40)%、CD44(97.77 ± 0.58)%、CD29(98.60 ± 0.30)%,平均阳性率达(94.19 ± 5.00)%;低表达造血干细胞(HSC)表面标志物CD45(5.42 ± 0.78)%、CD34(7.15 ± 0.49)%、CD11b/c(3.74 ± 0.08)%,平均阳性率仅(5.44 ± 1.55)%,显著低于前者。诱导分化实验显示,细胞可成功分化为脂肪细胞(油红O染色阳性)、成骨细胞(茜素红染色阳性)及软骨细胞(阿利新蓝染色阳性)。结论 本研究方法能够成功提取扩增出符合MSC形态学特征及表面标志物表达特点、具备良好自我更新能力和成脂/成骨/成软骨三系分化潜能的大鼠主动脉PV-ADSC,可为血管重塑及相关心血管病研究提供可靠的细胞模型。

关键词： Vγ9Vδ2 T细胞   BTN2A1   单克隆抗体   T细胞   抗体   免疫  

摘要： 目的 探究靶向BTN2A1的单克隆抗体制备方法及其检测工具开发,为免疫治疗策略优化提供实验依据。方法 采用杂交瘤技术筛选高亲和力BTN2A1单克隆抗体;通过流式细胞术验证抗体对天然构象抗原的特异性识别;运用竞争ELISA进行表位解析;基于抗体配对实验评估双抗夹心检测体系可行性。结果 成功获得15株高亲和力BTN2A1单克隆抗体(最小半数有效浓度可达0.002 862 g·L-1),流式检测显示所有抗体均能在过表达BTN2A1的CHO细胞及Daudi肿瘤细胞系中高特异性识别细胞表面天然BTN2A1,并且抗体结合阳性率>95%。表位分析表明所有抗体均靶向同一表位。结论 本研究成功制备了一组高亲和力BTN2A1单克隆抗体,成功制备了高亲和力BTN2A1单抗,为功能研究提供了工具。但这些抗体均识别同一表位,无法建立双抗夹心检测系统,因此需进一步开发针对不同表位的抗体组合,为优化BTN2A1免疫检测方法及治疗性抗体开发奠定了基础。

关键词： 靶向给药   肿瘤干细胞   智能给药系统   纳米载体  

摘要： 为解决传统化疗非特异及肿瘤干细胞清除难题,构建了顺铂(Cis)-蒙脱土(MMT)-透明质酸(HA)-壳聚糖(CS)-海藻酸钠(SA)纳米给药系统(CMHCS)。MMT负载顺铂,HA赋予CD44靶向,CS-SA水凝胶包封。XRD/TEM显示MMT剥离均匀。体外释放具有pH敏感性,64 h累积释放在pH 6.5时为pH 7.4的3倍。CMHCS显著抑制干细胞增殖(IC50=44.02 μg/mL),成球抑制提高2.53倍,凋亡率提高1.08倍,侵袭抑制提高2.86倍。CMHCS可实现肿瘤选择性释放及干细胞清除,为克服耐药复发提供新策略。

关键词： 马铃薯   弱光耐性   StPIF3转录因子   bHLH   过表达  

摘要： 根据9个马铃薯品种弱光处理下生长指标及荧光参数指标的测定比较,经主成分分析(principle component analysis, PCA)筛选出马铃薯品种“大西洋”为耐弱光品种。为研究马铃薯耐弱光品种“大西洋”在弱光逆境下响应的相关基因,对10 μmol m-2 s-1光强下处理48 h的“大西洋”进行转录组学分析,通过GO富集、KEGG通路分析及转录因子预测,筛选出马铃薯光响应相关转录因子编码基因StPIF3,并进行全长克隆。使用农杆菌介导法对烟草进行遗传转化,自交获得T1代转基因烟草株系。采用生物信息学、RT-qPCR、荧光参数测定对其功能及性质进行分析验证。生物信息学分析表明,StPIF3蛋白由716个氨基酸组成,分子质量、等电点分别为76.77 kD、7.26,为亲水性不稳定蛋白。StPIF3蛋白具有典型HLH结构域,属于bHLH家族成员,进化树显示StPIF3与烟草的亲缘关系最近。在50 μmol m-2 s-1光强下,转基因烟草的Fv/Fm、qP、ETR、ETRmax、SPAD均显著高于野生型烟草,F0低于野生型烟草。综上所述,StPIF3过量表达会显著提高电子传递效率和光能利用效率,进而提高植物光合性能与弱光耐性。

关键词： 4DPAIPN   光氧化还原   脱羧   单氟烯烃  

摘要： 此研究致力于4DPAIPN-R衍生物作为N-保护氨基酸的光氧化催化剂,实现其脱羧并和偕二氟烯烃偶联. 经过系统研究发现, 对于N-苯基甘氨酸和偕二氟烯烃,氟取代的4DPAIPN(4DPAIPN-F)具有优异的偶联性能(25个例子). 对于N-乙酰基/叔丁基氧酰基氨基酸和偕二氟烯烃偶联,三氟甲基取代的4DPAIPN(4DPAIPN-CF3)具有更好的催化性能(5个例子). 研究表明该分子平台可广泛应用于不同的偕二氟苯乙烯和不同的N-保护氨基酸的偶联,超过30个例子,最高产率到95%. 产物后期修饰可实现产物转化成氟代烯胺或者氟代肉桂醛.

关键词： 语音克隆   语义特征   语音合成   人工智能数字音频  

摘要： 随着深度学习与语音合成技术的进步,人工智能(AI)在人声克隆领域取得了显著发展。与传统文本转语音相比,人声克隆不仅能合成自然语音,还可复刻特定说话者的音色和语调,展现出在音频制作、教育及娱乐等领域的广阔应用前景。当前主流商用系统多为闭源,限制了技术透明度与学术探索。相较之下,开源项目依托GitHub等平台快速迭代,推动了研究与大众实践的普及。本文以开源AI人声克隆为研究对象,结合技术综述与项目实践,揭示不同技术路线的优势与不足,并讨论其在典型应用场景中的价值与挑战,旨在为后续研究提供系统参考,并为开源AI人声克隆的应用拓展与规范发展提供思路。

关键词： 乳腺上皮细胞   脐带间充质干细胞   条件培养基   炎性因子  

摘要： 本试验旨在研究牦牛脐带间充质干细胞(UC-MSCs)条件培养基对脂多糖(LPS)诱导乳腺上皮细胞(MECs)炎症反应的影响。体外培养原代UC-MSCs和MECs,免疫荧光(IF)检测UC-MSCs和MECs标志蛋白的表达,采用成脂、成骨、成软骨诱导分化结合特殊染色(油红O、茜素红、阿利新蓝染色)评估UC-MSCs的分化能力,以10 μg/mL LPS处理MECs 24 h构建炎症模型,通过CCK-8检测MECs的活性;设置试验组(加入UC-MSCs)和炎症模型组,运用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、蛋白免疫印迹(WB)检测MECs中炎性相关因子(IL-6、IL-1β、TNF-α)基因和蛋白的表达。结果显示:UC-MSCs中表面标志蛋白CD44、CD73、CD90和CD105均阳性表达,而CD34、CD45不表达;MECs中细胞角蛋白18(CK18)阳性表达,波形蛋白(VIM)阴性表达。UC-MSCs经成脂诱导后,油红O染色可见胞内脂滴形成;成骨诱导后,茜素红染色显示钙结节沉积;成软骨诱导后,阿利新蓝染色证实软骨基质生成。添加10 μg/mL LPS处理MECs共培养24 h,细胞活力显著降低,炎性相关因子(IL-6、IL-1β、TNF-α)基因和蛋白的表达量显著上调,造模成功;试验组MECs中炎性因子(IL-6、IL-1β、TNF-α)基因和蛋白表达量显著低于炎症模型组。结果表明,脐带间充质干细胞条件培养基(UC-MSC-CM)可以降低LPS诱导的MECs炎症反应,为开发新型抗生素替代治疗乳腺炎提供了基础资料。