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关键词： 小尾寒羊   骨髓间充质干细胞   培养鉴定   诱导分化  

摘要： 为探究小尾寒羊骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)生物学特性及体外分化潜能,从4月龄小尾寒羊胚胎中无菌分离出胎羊股骨,利用全骨髓贴壁法体外培养BMSCs,对小尾寒羊BMSCs培养鉴定,绘制第3、13、23代BMSCs生长曲线,计算群体倍增时间及克隆形成率;利用BMSCs划痕试验检测细胞迁移能力,利用免疫荧光和RT-PCR检测干细胞表面标志物,利用染色体核型分析法检测基因稳定性;并向成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞定向诱导分化,评估其多向分化潜能。结果表明,BMSCs细胞贴壁后呈长梭形,生长曲线呈典型的“S”形。随着代次的升高,细胞增殖能力、迁移能力、克隆形成率均呈下降趋势,群体倍增时间不断延长。免疫荧光鉴定显示,表面标志物CD29、CD44、CD73、CD90和CD105阳性表达,而与造血干细胞相关的CD34不表达。RT-PCR检测显示,小尾寒羊BMSCs的CD29、CD73、CD90和CD105,CD34基因呈阴性表达。染色体核型分析显示,小尾寒羊BMSCs呈正常二倍体核型(2n=54,XY),染色体基因组未发生改变。小尾寒羊BMSCs经特异性诱导成功分化出骨、软骨和脂肪细胞。全骨髓贴壁法体外培养成功分离出小尾寒羊BMSCs,且具有较强的体外增殖能力和分化潜能。以上研究结果为再生医学和生物工程学研究提供参考。

关键词： 寒地桑叶   多糖结构   降糖   降脂   抗氧化  

摘要： 为探究‘龙桑一号’(Morus abla *** 1)桑叶多糖(mulberry leaf polysaccharide,MLP)的结构特性及功能活性,采用DEAE-52纤维素柱和Sephadex G-100凝胶色谱柱分离纯化MLP即得到3种多糖组分,分别命名为MLP-1、MLP-2和MLP-3,并对纯化后多糖的结构性质以及体外抗氧化、降糖和降脂活性进行分析。结果表明,纯化后MLP-1、MLP-2和MLP-3的得率分别为12.75%、5.52%和2.63%。组成成分分析表明,3种多糖的总糖含量逐渐减少,糖醛酸、蛋白质和多酚含量逐渐增加。凝胶渗透色谱测得MLP-1和MLP-3分别是分子质量为625.69 kDa和7.25 kDa均一多糖,MLP-2是分子质量为769.05 kDa多糖和41.35 kDa多糖的混合物。单糖组成分析结果显示3种多糖组分由果糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖等组成,但物质的量比存在差异。傅里叶变换红外光谱、碘-碘化钾实验和原子力显微镜结果表明,3种多糖组分均为吡喃糖,具有侧链长、分支多且相互交织的特点。刚果红实验结果表明MLP-1和MLP-2具有三螺旋结构;MLP-3无三螺旋结构。理化性质分析结果表明,MLP-1在持水力和保湿性方面优于其他多糖组分,而MLP-2在水溶性和吸湿性方面性能最佳,MLP-3则是在膨胀度和持油力方面表现最佳。流变特性分析结果表明,MLP-1和MLP-2的表观黏度和固体弹性特性更好,且MLP-1更易在低温状态下发生相变。活性功能实验测得3种多糖组分,对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶和胰脂肪酶抑制能力的大小均表现为MLP-1>MLP-2>MLP-3,对胆酸盐的结合能力为MLP-1>MLP-3>MLP-2,胆固醇吸附能力则表现为MLP-3性能最佳,MLP-2次之,MLP-1最低。本研究结果可为寒地桑叶的应用和功能评价提供实验数据。

关键词： 皮肤损伤修复   干细胞裂解液   反复冻融法   超声波破碎法   成纤维细胞  

摘要： 目的:比较反复冻融法与超声波破碎法制备的干细胞裂解液修复皮肤损伤的效果,筛选干细胞裂解液的最优制备方法。方法:将人皮肤成纤维细胞以1×10^(5)/mL、1×10^(6)/mL、5×10^(6)/mL、1×10^(7)/mL 4种密度重悬于生理盐水,分别采用反复冻融和超声波破碎法处理,通过BCA法检测细胞破碎率和蛋白质含量,筛选两种方法最佳制备条件;采用细胞划痕愈合实验、CCK-8法、Transwell实验分别检测人皮肤成纤维细胞划痕愈合能力、细胞活力、细胞迁移数,ELISA检测裂解液中表皮生长因子(EGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、干细胞因子(SCF)蛋白浓度。结果:超声波破碎法最佳条件为细胞浓度5×10^(6)/mL、超声处理5 min;反复冻融法最佳条件为细胞浓度5×10^(6)/mL、冻融3次(45 min)。两种方法细胞破碎率无显著差异(P>0.05),超声波破碎法制备的裂解液总蛋白含量更高;两种方法制备的裂解液对人皮肤成纤维细胞活力的影响无显著差异(P>0.05),反复冻融法制备的裂解液能显著促进人皮肤成纤维细胞迁移、提升细胞划痕修复效率(P<0.05)。ELISA结果显示,反复冻融法制备的裂解液中VEGF、SCF蛋白浓度显著高于超声波破碎法(P<0.05或P<0.01),EGF浓度无显著差异(P>0.05)。结论:反复冻融法制备的干细胞裂解液修复皮肤损伤的效果优于超声波破碎法。

关键词： 蜱   热休克蛋白90   RACE扩增   基因全长   生物信息学   表达  

摘要： 为获得波斯锐缘蜱HSPC1(ApHSPC1)和HSPC4(ApHSPC4)基因的全长序列,分析其生物信息学特征和差异表达水平,本研究采用RACE技术扩增其3'端和5'端缺失序列;测序拼接获得全长cDNA;生物信息学软件分析两基因及编码蛋白特征,并构建系统进化树;qPCR检测两基因在波斯锐缘蜱(Argas persicus)不同发育阶段、不同组织中的相对表达量。结果显示,ApHSPC1和ApHSPC4基因全长分别为2430bp、2637bp,开放阅读框(ORF)为2178bp和2370bp,编码蛋白均无信号肽,分别具有胞质定位基序MEEVD和内质网定位基序HDEL。相似性与进化树结果显示,两基因均与图卡钝缘蜱(Ornithodoros turicata)热休克蛋白90(HSP90)基因相似性较高、亲缘关系较近。qPCR结果显示,ApHSPC1在不同发育阶段波斯锐缘蜱中的表达量均高于ApHSPC4基因(P<0.001)。饥饿状态下,ApHSPC1在卵巢、中肠、唾液腺内的表达量均显著高于ApHSPC4(P<0.001);饱血后,ApHSPC1在卵巢和中肠内的表达量显著高于ApHSPC4(P<0.001),而在唾液腺中两者表达量无显著性差异(P>0.05)。ApHSPC1在卵巢中的表达量显著高于精巢(P<0.001),ApHSPC4则相反(P<0.001)。结果表明,ApHSPC1和ApHSPC4基因编码蛋白的定位基序不同,且在不同发育阶段、不同组织中的表达水平存在差异,提示ApHSPC1和ApHSPC4可能在波斯锐缘蜱发育、血餐消化、繁殖等生理过程中发挥不同作用。

关键词： 香附   产地溯源   傅里叶变换红外光谱   多元统计分析   多糖   质量评价  

摘要： 目的通过分析不同产地香附样品的傅里叶变换红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,FT-IR),寻找不同产地样品间差异的主要贡献波段,以便对不同产地香附药材进行溯源。方法采用FT-IR技术,结合多种化学计量学方法,对3个产区共30批香附药材样本进行分析,按其主要有效成分筛选特征波段峰,分析出样品的主要差异波段。结果筛选出991、1018、526、1081、2930、932、1514、708、579、1159、763、1461 cm^(-1)波段为差异主要贡献波段,层次聚类分析(Hierarchical cluster analysis,HCA)、主成分分析(Principal component analysis,PCA)与正交偏最小二乘判别分析(Orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)结果均可聚为3类。结论根据选定的特征波段可以有效区分不同产地香附,实验结果还表明不同产地香附应重点关注糖类、酸类成分的差异。

关键词： 氨基酸营养液   无土栽培   番茄   产量   品质  

摘要： 通过测定番茄植株生长指标、叶绿素含量、果实产量及品质指标,分析不同浓度氨基酸营养液的应用效果。结果表明,添加氨基酸营养液较对照可显著增加番茄植株株高、茎粗及叶绿素含量,其中T1处理(Gly161.3 mg/L、L-Glu58.8 mg/L、L-Asp26.6 mg/L)条件下,与对照相比株高增高2.71%,鲜果产量增产14.11%,达154893.9 kg/hm^(2),且可溶性糖、Vc含量分别提高33.09%和25.77%。可溶性糖、Vc、有机酸及可溶性固形物等果实品质较T2、T3处理组均有不同程度提升。本研究表明,添加氨基酸营养液可优化番茄无土栽培的养分供应,显著提高产量与品质,可为规模化生产提供理论依据。

关键词： 亮斑扁角水虻   油脂   蛋白质   甲壳素   提取  

摘要： 亮斑扁角水虻(BSF,Hermetia illucens)作为双翅目昆虫,因其优异的环境适应性和厨余垃圾、畜禽粪便等多种有机废弃物高效的降解能力,在有机固体废物资源化利用领域展现出广阔的应用前景而受到了广泛关注。亮斑扁角水虻具有食物转化效率高、生命周期短、繁殖能力强等生物学优势,能将摄入的大量有机废物高效转化为油脂、蛋白质、甲壳素等高附加值组分,为农业、养殖业及生物医药等领域提供可再生的动物源性资源,具有良好的规模化开发和工业化应用潜力。本文系统综述了近年来国内外关于亮斑扁角水虻体内主要营养物质提取及其资源化利用的研究进展,重点涵盖油脂提取、蛋白质分离与饲料开发、以及甲壳素获取与功能材料制备。旨在为该昆虫的高值化开发与绿色产业转化提供理论依据与技术支撑,推动其在生物资源循环利用中的集成应用与可持续发展。

关键词： 桉叶素   肉鸡   急性肺损伤   呼吸道健康   呼吸道黏膜屏障  

摘要： [目的]本文旨在探讨饲粮添加桉叶素(CIN)对脂多糖(LPS)诱导的肉鸡急性肺损伤的保护作用。[方法]选取128只健康的1日龄雄性AA肉鸡随机分为2组,每组8重复,每重复8只。对照组(Control组)饲喂基础饲粮,桉叶素组(Cineole组)饲喂添加1000 mg·kg^(-1)桉叶素饲粮。饲喂42 d后测定生长性能,并从2组中分别随机选取36只肉鸡,分成4组,采用2×2因子试验设计,分别为CON组、LPS组、CIN组和CIN+LPS组,每组6个重复,每重复3只。CON组和LPS组饲喂基础饲粮,CIN组和CIN+LPS组饲喂基础饲粮+1000 mg·kg^(-1)桉叶素,在43 d对LPS组和CIN+LPS组进行气管滴注LPS(1 mg·kg^(-1)),CON组和CIN组气管滴注同体积0.75%NaCl溶液,24 h后屠宰采样。[结果]与Control组相比,Cineole组肉鸡体重和平均日增重极显著提高(P<0.001),料重比显著降低(P<0.05)。与CON组比,LPS组肺脏指数显著升高(P<0.05),法氏囊指数显著降低(P<0.05);肺组织出现明显病理变化;支气管肺泡灌洗液(BALF)总蛋白浓度极显著升高(P<0.01);血清丙二醛(MDA)含量极显著升高(P<0.01),总抗氧化能力(T-AOC)及总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著降低(P<0.05);肺组织IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8、MUC5AC、MUC5B mRNA水平显著升高(P<0.05);Occludin、ZO-1 mRNA水平极显著降低(P<0.01)。与LPS组相比,CIN+LPS组法氏囊指数显著升高(P<0.05);肺组织病理状况有所缓解;BALF总蛋白浓度极显著降低(P<0.01);血清MDA含量显著降低(P<0.05),T-AOC水平、T-SOD活性极显著升高(P<0.01);肺组织IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8、MUC5AC、MUC5B mRNA水平显著降低(P<0.05),Occludin、ZO-1 mRNA水平显著升高(P<0.05)。[结论]饲粮添加1000 mg·kg^(-1)桉叶素可以提高肉鸡生长性能,减轻LPS诱导肉鸡急性肺损伤的炎症反应和氧化应激反应,维持肉鸡肺部气血屏障完整性,对肉鸡呼吸道健康具有保护作用。

关键词： 即食海参   姜黄素   冷藏   蛋白质   品质  

摘要： 为了探究姜黄素作为多酚是否可以延缓即食海参在冷藏过程中的品质劣化,以及添加姜黄素后对即食海参的影响,本文以海参为原料,通过测定海参在热加工过程中的重量损失率、体积损失率,并对即食海参在冷藏过程中水分含量、质构特性、微观结构、游离羟脯氨酸含量、游离氨氮含量和可溶性蛋白含量、聚丙烯酰胺凝胶电泳进行测定,通过红外光谱分析即食海参蛋白二级结构,同时对其挥发性物质及感官风味进行分析,探究添加姜黄素对即食海参品质和风味的影响。结果表明:热加工过程中添加姜黄素对即食海参重量损失率与体积损失率并没有明显影响。在经姜黄素处理后,即食海参硬度提高了53.92%,咀嚼性提高了64.03%,水分含量降低了5.14%,蛋白质相对分子质量中35 kDa条带消失,增加至100、48 kDa条带,蛋白质二级结构酰胺Ⅰ带和酰胺Ⅱ带的振动带由1654.1 cm^(-1)和1549.5 cm^(-1)发生偏移至1657.6 cm^(-1)和1549 cm^(-1),β-折叠增加,无规则卷曲减少,α-螺旋减少,β-转角增加。在冷藏期间,即食海参游离羟脯氨酸含量、游离氨氮含量、可溶性蛋白含量等蛋白质降解指标都呈显著上升趋势,但经姜黄素处理后,即食海参的蛋白质降解速率明显减缓。冷藏40 d时,经姜黄素处理后的即食海参中,具有焦糖味、果味、烟熏味等令人愉快的挥发性物质相对含量增加,且具有抗菌、抗氧化特性的挥发性物质相对含量增加。综上,姜黄素可以与海参体壁蛋白相互作用从而延缓其在冷藏期间体壁降解,且能改善其风味。

关键词： 维持性血液透析   蛋白质能量消耗   预测模型   系统评价  

摘要： 系统检索并评价维持性血液透析患者蛋白质能量消耗的风险预测模型,为实施针对性的干预提供借鉴。利用计算机检索中国知网、维普、万方、中国生物医学文献数据库、PubMed、Cochrane Library、Embase、Web of Science等数据库中关于维持性血液透析患者蛋白质能量消耗的文献,检索时限为建库至2025年9月。由两名研究者独立进行文献筛选和提取,根据PROBAST偏倚风险评价工具进行模型偏倚风险和适用性评价。共纳入15篇文献,3项研究进行内外部验证,1项研究仅进行了外部验证,11篇研究进行了内部验证,蛋白质能量消耗的发生率为23.99%~53.17%,纳入模型的AUC范围为0.76~0.98,区分度良好。纳入的风险预测模型有普遍适用性,但偏倚风险普遍较高,未来应构建标准化的高风险人群筛查工具,优选高质量的建模方法与变量筛选方案,加强模型的内部校准与外部验证,以全面提升其预测的稳定性与广泛性。