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关键词： 猪苓多糖   椎间盘退行性变   炎症   活性氧  

摘要： 目的探讨猪苓多糖(PUP)通过活性氧(ROS)调控NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎性小体通路对椎间盘退行性变(IDD)髓核细胞炎性模型的保护作用。方法培养大鼠椎间盘髓核细胞,按照不同处理方式分为对照组、模型组[(白细胞介素-1β(IL-1β)处理]、低质量浓度PUP组(1.25 ng/mL的PUP和IL-1β处理)、中质量浓度PUP组(2.50 ng/mL的PUP和IL-1β处理)、高质量浓度PUP组(5.00 ng/mL的PUP和IL-1β处理)、高质量浓度PUP+三甲胺N-氧化物(TMAO)组(5.00 ng/mL的PUP、IL-1β和TMAO处理)、TMAO模型组(IL-1β和TMAO处理)。比较各组细胞增殖活力、炎性因子水平、细胞焦亡程度、氧化应激反应、线粒体功能以及ROS/NLRP3/含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)通路情况。结果模型组的细胞增殖活力、超氧化物歧化酶(SOD)水平、线粒体功能(线粒体膜电位、ATP水平)均低于对照组,炎性因子[IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平、丙二醛(MDA)水平、细胞焦亡程度、ROS水平及NLRP3和Caspase-1表达水平均高于对照组;与模型组比较,不同质量浓度PUP组的细胞增殖活力、SOD水平、线粒体功能呈质量浓度依赖性升高,炎性因子水平、MDA水平、细胞焦亡程度、ROS水平及NLRP3和Caspase-1表达水平呈质量浓度依赖性降低;高质量浓度PUP+TMAO组的细胞增殖活力、SOD水平、线粒体功能均低于高质量浓度PUP组、高于TMAO模型组,炎性因子水平、MDA水平、细胞焦亡程度、ROS水平及NLRP3和Caspase-1表达水平均高于高质量浓度PUP组、低于TMAO模型组;以上差异均有统计学意义(P<0.05)。结论PUP对IDD髓核细胞炎性模型具有保护作用,通过ROS抑制NLRP3/Caspase-1通路介导的细胞焦亡、氧化应激、线粒体功能障碍是与这一保护作用相关的分子机制。

关键词： 水平骨增量   引导性骨再生   骨移植   数字化技术   干细胞   组织工程  

摘要： 随着口腔种植学的长足发展,牙槽嵴骨量不足已成为影响种植成功率和长期稳定性的主要挑战之一。牙槽骨缺损根据其发生方向可分为水平向骨缺损、垂直向骨缺损以及复合性骨缺损。其中,水平向骨缺损尤为常见,常因拔牙后生理性吸收、长期缺牙、创伤或感染等病理性因素导致,严重影响种植体的初期稳定性和远期预后[1]。

关键词： 中速型麻黄鸡   粗蛋白质   生长性能   蛋白质代谢   蛋白质沉积  

摘要： 为分析小麦-高粱型饲粮粗蛋白质水平对31~60日龄中速型麻黄鸡生长性能、蛋白质沉积、血浆生化指标和肝脏蛋白质代谢的影响,以确定其饲粮粗蛋白质需要量,本研究根据体重一致原则选用31日龄中速型麻黄鸡母鸡900只,随机分为5个粗蛋白质水平组(依次为16%、17%、18%、19%和20%),每组6个重复(30只鸡/重复),试验期为30 d。统计并比较分析不同蛋白质组肉鸡生长性能;每重复选取1只接近平均体重的肉鸡测定机体蛋白质沉积率;每重复选取2只接近平均体重的肉鸡进行屠宰采样,测定血浆生化指标和肝脏蛋白质代谢相关指标;应用荧光定量PCR法检测肝脏蛋白质代谢关键基因mRNA表达水平的变化。结果表明:1)肉鸡平均日增重、末重和体蛋白质含量随着饲粮粗蛋白质水平的提高均呈线性和二次曲线升高(P<0.05),料重比、日沉积蛋白质量和蛋白质沉积率呈二次曲线降低(P<0.05)。与16%粗蛋白质组相比,18%粗蛋白质组体蛋白质含量、日沉积蛋白质量、蛋白质沉积率均显著提高(P<0.05)。与18%粗蛋白质组相比,19%和20%粗蛋白质组平均日增重和末重显著降低(P<0.05),料重比显著升高(P<0.05);20%粗蛋白质组日沉积蛋白质量和蛋白质沉积率显著降低(P<0.05)。2)肉鸡血浆总蛋白含量和胰岛素样生长因子1(IGF-1)随着饲粮粗蛋白质水平的提高均呈线性和二次曲线升高(P<0.05)。与16%粗蛋白质组相比,18%粗蛋白质组血浆中总蛋白含量显著提高(P<0.05)。与18%粗蛋白质组相比,20%粗蛋白质组血浆IGF-1含量显著降低(P<0.05)。3)18%粗蛋白质水平组试鸡肝脏IGF-1、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白、核糖体蛋白激酶1和真核生物起始因子4E结合蛋白1 mRNA表达水平显著高于16%和20%粗蛋白质水平组(P<0.05)。综上,小麦-高粱型饲粮18%粗蛋白质水平可通过改善肉鸡血浆和肝脏蛋白质代谢提高31~60日龄中速型麻黄鸡生长性能和体蛋白质沉积。本研究通过推广精准营养技术和优化饲料资源利用,不仅显著提升了中速型麻黄鸡养殖效益,还有助于实现粮食资源节约。

关键词： 蛋白质-蛋白质相互作用位点预测   蛋白质语言模型   图注意力网络  

摘要： 识别蛋白质-蛋白质相互作用位点对解析生命过程和药物设计至关重要.近年来,基于深度学习的方法在蛋白质相互作用位点预测中取得了显著进展.本文提出了一种新型深度学习模型GL-GAT,该模型整合了卷积神经网络(CNN)、双向长短时记忆网络(Bi-LSTM)以及图注意力网络(GAT)以充分挖掘蛋白质序列与三维结构信息.具体而言,首先利用CNN提取蛋白质语言模型ESM-2生成的序列特征,并采用Bi-LSTM提取位置特异性得分矩阵、二级结构和位置信息;然后,将上述特征拼接生成节点特征,并基于蛋白质三维结构构建蛋白质图;最后,通过GAT聚合邻域信息,并通过全连接神经网络输出残基位点预测概率.实验结果表明,相较于现有主流方法,GL-GAT在多个关键性能指标上均表现出更高的预测精度.

关键词： 解毒化瘀颗粒   铁死亡   急性肝衰竭   5-LOX   氧化应激  

摘要： 目的研究解毒化瘀颗粒(JDHY)对D-GlaN+LPS诱导的小鼠ALF细胞和动物模型的抑制作用及其机制。方法采用10mg/mL D-GalN+1μg/mL LPS构建小鼠ALF细胞模型,并采用15%JDHY含药血清进行干预。采用蛋白质组学探讨JDHY治疗ALF的有效机制,并根据组学结果在细胞和动物层面进行验证。结果蛋白质组学结果表明JDHY干预ALF的机制与铁死亡相关,这与课题组前期研究结果一致。另外,JDHY抑制ALF铁死亡可能与5-LOX亚型相关。实验中,随着ALF细胞模型共培养时间的延长(0~48 h),5-LOX蛋白表达显著升高,这表明5-LOX的表达与ALF的发生存在密切关系;后续实验发现5-LOX的亚细胞定位会影响其表达活性,它在细胞质中的保留会加重ALF氧化应激并引发铁死亡,而该过程可被JDHY所显著抑制。从机制上讲,JDHY可能通过调节5-LOX的亚细胞定位来减少5-LOX的表达活性,即保留细胞核中的5-LOX,拮抗其向细胞质的易位,进而减轻铁死亡。结论JDHY可通过负反馈的方式抑制5-LOX的表达活性,减少后续催化的脂质过氧化,减轻了ALF铁死亡。

关键词： 甘薯   IbOPR2   酵母单杂   转录因子   启动子  

摘要： 茉莉酸类物质(JA)作为植物内源激素,广泛参与植物耐盐胁迫过程,12-氧-植物二烯酸还原酶(OPR)作为JA合成关键酶,其表达调控机制尚不明确。为筛选与鉴定调控IbOPR2基因表达的转录因子,本研究以甘薯耐盐品系‘海大7791’为材料,克隆IbOPR2基因启动子序列。采用生物信息学方法分析其顺式作用元件,并通过转录激活试验检测其启动子活性。利用酵母单杂交试验筛选其互作转录因子,并通过酵母单杂交点对点验证试验确认结合特异性。结果表明,克隆的IbOPR2基因上游1964 bp启动子序列含有MYBHv1、MYB和WRKY识别位点元件、MYB和MYC等胁迫响应元件、MeJA激素应答元件,并且启动子具有显著转录激活能力。以MeJA应答元件和MYC元件作为诱饵的酵母单杂交试验,共筛选到5个候选转录因子,分别为IbPHL7、IbZFP16、IbSKIP11、IbTGA2和IbERF2。随后酵母单杂交点对点试验发现,IbPHL7、IbZFP16和IbSKIP11均能与IbOPR2启动子元件特异性结合。双荧光素酶报告基因系统试验结果表明,IbPHL7、IbZFP16和IbSKIP11可以激活IbOPR2启动子的转录活性。qRT-PCR分析结果表明,IbPHL7、IbZFP16和IbSKIP11均响应甘薯的盐胁迫。以上结果表明,它们可能作为IbOPR2上游调控因子,调控IbOPR2基因表达。本研究首次筛选了甘薯IbOPR2上游调控因子,为深入解析IbOPR2响应盐胁迫的表达调控机制奠定了基础。

关键词： 慢重症   炎症反应   蛋白质   分解代谢   肌肉   营养支持  

摘要： 慢性危重症(chronic critical illness,CCI)是重症技术发展的产物,是一种影响功能结局和长期生存的衰弱性疾病。其特征是持续性炎症、免疫抑制和分解代谢综合征,它的研究在近几十年不断发展完善。本文描述了慢重症的定义、临床特征,介绍了其炎症及免疫抑制的驱动因素、炎症导致的肌肉萎缩,肌肉蛋白的分解以及目前临床上的抗炎治疗、营养支持配合运动和免疫治疗,除此之外,还简单描述了近年来新兴的代谢组学工具以及人工智能在CCI中的应用,以达到对慢重症患者更好的评估治疗。

关键词： 玛卡多糖   大孔吸附树脂   响应面法   脱色工艺   抗氧化活性  

摘要： 为优化黑玛卡多糖的脱色工艺并评价其抗氧化活性,本研究以D101型大孔吸附树脂为脱色剂,采用响应面法优化脱色工艺。首先通过单因素试验探究树脂用量、脱色时间和脱色温度对多糖脱色率及保留率的影响,并在此基础上采用Box-Behnken设计建立回归模型;采用DPPH和ABTS自由基清除实验,以VC为阳性对照,测定脱色前后玛卡多糖的吸光度并计算自由基清除率,对比分析其抗氧化效果。结果表明,回归模型显著(P<0.0001),拟合度高(R2=0.9866),可有效预测工艺参数。优化后的最佳工艺条件:粗多糖质量浓度5.0 mg/mL、树脂用量2.0 g、脱色时间1.5 h、脱色温度50℃。验证试验显示,在此条件下多糖脱色率达55.4%,保留率为53.56%,综合评分54.48%,与模型预测值基本一致。抗氧化活性测试表明,玛卡多糖对DPPH和ABTS自由基均具有良好的清除能力,且呈明显量效关系;脱色后多糖仍保持较好的抗氧化活性,尤其在ABTS自由基清除方面表现突出。综合表明,本研究确立的脱色工艺稳定可行,为黑玛卡多糖的纯化提供参考。

关键词： 药物纳米递送系统   天然多糖   纳米载体  

摘要： 药物纳米递送系统(drug nano-delivery systems,DNDs)凭借其独特结构能与各种药物及天然生物活性化合物结合,在疾病治疗方面发挥重要作用。研究表明,部分药物及其所含的天然生物活性成分,在临床应用中常因生物利用度低及口服后药代动力学表现不佳而受到限制。为此,近年来将天然多糖作为包覆材料,显著提高其安全性、生物相容性以及生物利用度等。本文系统梳理了DNDs中常见的天然多糖材料及多糖基纳米载体种类,并对纳米载体递送药物在疾病中的应用及未来发展前景进行综述。

关键词： 草鱼   常规营养成分   氨基酸   脂肪酸   药物残留  

摘要： 为了解池塘微流水环境生态草鱼的肌肉品质和药物残留情况,比较分析了微流水池塘养殖草鱼和传统精养池塘草鱼肌肉常规营养成分、氨基酸、脂肪酸及药物残留等指标,并同步检测了养殖水源水质。结果显示,草鱼池塘养殖水源无异色、异臭、异味,符合《无公害农产品淡水养殖产地环境条件》(NY/T5361—2016)标准要求;微流水池塘养殖草鱼肌肉中粗蛋白质质量分数为(20.21±0.33)%,显著高于传统精养池塘草鱼(P<0.05);微流水池塘养殖草鱼肌肉中氨基酸总量(TAA)、必需氨基酸总量(TEAA)及呈味氨基酸总量(TDAA)分别为(17.56±0.60)%、(7.22±0.33)%、(8.02±0.24)%,均显著高于传统精养池塘草鱼(P<0.05);微流水池塘养殖草鱼肌肉中多不饱和脂肪酸(PUFA)占脂肪酸总量的质量分数为(32.44±1.33)%,显著低于传统精养池塘草鱼(P<0.05),饱和脂肪酸(SFA)和单不饱和脂肪酸(MUFA)含量分别为(23.35±0.10)%、(44.21±1.24)%,与传统精养池塘草鱼无显著差异(P>0.05);2种环境中的草鱼均未检测出药物残留。研究表明,微流水池塘环境的草鱼其肌肉氨基酸组成平衡、营养合理、食用安全。