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关键词： 云南省文山州   药饲兼用植物   茎叶营养价值   糖、蛋白质和粗脂肪含量   隶属函数评价  

摘要： 本试验以近年云南省文山州畜禽等养殖户大量使用的饲药兼用植物芭蕉芋、绿叶山蚂蝗、波叶山蚂蝗、假地豆、苋和红果参的11个茎叶混合样品为研究材料,用分光光度法测定样品的可溶性糖、总淀粉和可溶性蛋白质含量,用凯氏定氮法和索氏提取法分别测定粗蛋白质和粗脂肪含量,用隶属函数评价样品营养价值的综合等级。结果表明:红果参的可溶性糖、总淀粉和粗脂肪含量均最高,分别约为(305.205±2.375) mg/g DW、(33.412±0.638)mg/g DW和(3.708±0.092)%,而绿苋的可溶性蛋白质和粗蛋白质含量均最高,分别约为(12.105±0.009) mg/g DW和(17.558±0.175)%;对于芭蕉芋居群,WS13的可溶性糖和可溶性蛋白质含量最高,分别约为(187.076±1.631) mg/g DW和(6.265±0.078) mg/g DW,WS9的总淀粉含量、WS2-1的粗蛋白质含量和WS8的粗脂肪含量均最高,分别约为(16.434±0.113) mg/g DW、(3.938±0.202)%和(2.673±0.036)%;可溶性糖、总淀粉、可溶性蛋白质、粗蛋白质和粗脂肪含量在不同样品间的差异均达到极显著水平;样品基于糖、蛋白质和粗脂肪含量的营养价值综合等级为:红果参>绿苋>紫红苋>芭蕉芋WS13>芭蕉芋WS2-1>芭蕉芋WS9>芭蕉芋WS8>绿叶山蚂蝗>芭蕉芋WS1>波叶山蚂蝗>假地豆。本研究可为文山州饲药兼用植物茎叶的饲料化开发和合理使用提供依据。

关键词： 大花红景天   转录因子   基因克隆   盐胁迫  

摘要： 本研究克隆大花红景天(Rhodiola crenulata)转录因子NAC家族成员之一RcNAC22基因,并对其进行生物信息学分析和功能验证。结果表明:RcNAC22基因全长为1 049 bp,含2个内含子、3个外显子,编码293个氨基酸。其蛋白质相对分子质量为33 625.02,属亲水蛋白,性质较稳定,不具有跨膜结构域和信号肽且亚细胞定位于细胞核,含有32个可磷酸化位点。RcNAC22基因包含1个NAM结构域(no apical meristem),第4结构域为转录抑制结构域NARD区,与狭叶红景天(R. kirilowii)亲缘关系最近。RcNAC22基因在6个器官(根、成熟茎、幼茎、叶、顶芽和花)中均有表达但主要存在于绿色器官(茎、叶、顶芽)中,同时受多种非生物胁迫和植物激素脱落酸(ABA)、水杨酸(SA)的诱导表达。RcNAC22蛋白对酵母细胞没有毒性,其全长基因和截短C端均具有自激活活性。此外,以丹参(Salvia miltiorrhiza)为转基因受体研究RcNAC22基因过表达对植物生长的影响,结果显示:提高RcNAC22基因表达量不会影响丹参的生长发育过程,但降低其对盐胁迫的耐受性。本研究揭示了RcNAC22基因的生物学功能,为进一步开展大花红景天分子生物学研究提供理论基础。

关键词： 花椒叶   抗菌肽   超声波   最小抑菌浓度   氨基酸组成  

摘要： 为提高花椒叶的综合利用价值和开发天然植物源抗菌肽,本研究在前期优化确定的酶解参数基础之上,以多肽提取率、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌效果为评价指标,采用单因素试验和响应面试验对超声波辅助酶法制备花椒叶抗菌肽的工艺进行了优化,并进一步分析了抗菌肽的氨基酸组成和评估了该抗菌肽的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明,在恒定超声波频率20 kHz下,超声波辅助酶法制备花椒叶抗菌肽的最佳超声工艺参数为脉冲超声工作间歇比5:3 s/s、超声波功率290 W、处理温度51 ℃、处理时间20 min,在此条件下的多肽酶法制备提取率为(58.6±0.7)%,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌圈分别为21.8 ±0.4 mm和17.0±0.4 mm,与未经超声波处理的对照组(提取率为43.05%±0.7%,抑菌圈直径分别为16.8±0.3mm和13.1±0.1mm)相比,分别提高了36.1%、 29.8%和29.7%。氨基酸组成分析表明,经超声辅助提取的花椒叶抗菌肽中含有较高水平的疏水性氨基酸(42.27%)和碱性氨基酸(12.94%),且超声并没有显著改变抗菌肽的氨基酸组成和含量。抑菌效果表明,经超声辅助提取的花椒叶抗菌肽对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的MIC分别为 0.5 mg/mL和1.0 mg/mL,MBC分别为1.0 mg/mL和4.0 mg/mL, 较未经超声波处理的对照组(分别为0.7 mg/mL和1.5 mg/mL 、1.5 mg/mL和6.0 mg/mL)显著降低。研究为超声波辅助酶法制备植物源活性多肽的提供了理论依据,同时为新型天然抗菌剂的开发奠定了基础。

关键词： 核桃   青皮汁   真空浓缩   多酚   多糖   抗氧化活性  

摘要： [目的]探究浓缩过程中核桃青皮汁的品质变化趋势。[方法]通过单因素结合响应面试验优化浓缩工艺,探究温度、时间和转速对多酚、多糖质量分数的影响,对核桃青皮浓缩汁进行抗氧化活性检测,并采用高效液相色谱法(HPLC)对核桃青皮汁中多酚类物质进行鉴定与定量分析。[结果]核桃青皮汁最佳浓缩工艺为时间32 min、温度60℃、转速41 r/min,在此条件下,多酚、多糖质量分数分别为59.78,39.64 mg/g。体外抗氧化试验表明,核桃青皮浓缩液比核桃青皮原液抗氧化活性更强,DPPH自由基、ABTS自由基、羟自由基清除能力的IC_(50)值分别为0.012,0.13,0.17 mg/g。此外,核桃青皮汁原液与浓缩液中共检测出6种酚类物质,其中氯原酸、羟基苯甲酸的质量分数较高,在核桃青皮原液中分别为35.38,21.04 mg/L,在浓缩液中分别为63.13,36.57 mg/L,这两种酚类物质经核桃青皮汁浓缩后其质量分数皆明显升高。[结论]通过优化后的浓缩工艺得到的核桃青皮浓缩汁不仅在多酚、多糖质量分数上有显著提升,而且抗氧化活性更强,同时其中主要酚类物质的质量分数也明显升高。

关键词： A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗   多糖含量   批签发   趋势分析  

摘要： 经审查符合标准要求。每年度每个企业送检批次超过100批,合计每年度签发的MPV-AC单次人用疫苗剂量数量均超过3千万。趋势分析结果显示,两个企业在不同年度生产的MPV-AC产品A群和C群多糖含量检测结果趋势整体平稳,几乎全在警戒限(平均值±2SD)以内波动。不同年度的环比统计分析发现,2018—2021年期间在两个企业不同年度之间A群和C群多糖含量结果,以及不同年度随机抽取检测MPV-AC中A群和C群多糖含量检测结果与其企业自检结果之间均无显著性差异(P>0.05)。结论两个送检企业的MPV-AC产品中多糖含量稳定,产品质量一致性良好,这些产品的顺利签发不仅为国家免疫规划成功实施奠定了物质基础,也为未来相关疫苗质控的研究提供数据支持。

关键词： 自身免疫性卵巢早衰   安神固元汤   骨髓间充质干细胞   细胞免疫   归巢   炎症  

摘要： 目的 探讨安神固元汤联合骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stromal cells,BMSCs)对自身免疫性卵巢早衰小鼠模型的治疗效果及其治疗调节机制。方法 50只雌性KM小鼠,随机选取10只小鼠颈椎脱位安乐死,从骨髓中分离并培养BMSCs。剩余40只小鼠随机分为四组:对照组、模型组、BMSCs组和安神固元汤组,每组10只。对照组只注射生理盐水,模型组、BMSCs组和安神固元汤组则使用透明带糖蛋白3诱导自身免疫性卵巢早衰。造模成功后,BMSCs组直接注射BMSCs,安神固元汤组注射BMSCs后再灌胃安神固元汤15天,对照组及模型组小鼠灌胃等量生理盐水15天。实验末次给药后取材,收集小鼠眼球血、下丘脑以及卵巢组织。采用酶联吸附法检测抗卵巢抗体(anti ovary antibody,AOAB)、β-内啡肽(β-endorphin,β-EP)和细胞免疫相关细胞因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)。采用Transwell试验评估BMSCs的迁移能力,RT-qPCR和蛋白质印迹法检测C-X-C趋化因子受体4型(C-X-C motif chemokine receptor 4,CXCR4)的mRNA和蛋白表达。结果 与对照组相比,模型组的AOAB、TNF-α和IFN-γ均明显升高(P<0.01)。与模型组相比,BMSCs组和安神固元汤组的AOAB(P<0.05,P<0.01)、TNF-α(P>0.05,P<0.05)和IFN-γ(P<0.01,P<0.01)均下降。与对照组相比,模型组的β-EP明显降低(P<0.05)。与模型组相比,BMSCs组和安神固元汤组的β-EP升高(P<0.05)。与BMSCs组相比,安神固元汤组的BMSCs迁移、CXCR4 mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.01,P<0.01,P<0.05)。结论 安神固元汤联合BMSCs结合可能通过激活CXCR4通路,调节AOAB、β-EP 、TNF-α、IFN-γ来促进骨髓间充质干细胞归巢,干预小鼠模型的自身免疫性卵巢早衰。

关键词： 牙龈卟啉单胞菌   脂多糖   动脉粥样硬化   炎症通路   Toll样受体  

摘要： 动脉粥样硬化(AS)以脂质沉积及动脉内膜斑块形成为特征,可引发急性冠脉综合征、心肌梗死或中风等严重心血管事件,是我国居民主要死因之一。近年研究发现,牙龈卟啉单胞菌脂多糖通过结合Toll样受体刺激炎症介质的表达从而激活炎症通路,诱导巨噬细胞与内皮细胞功能紊乱,促进泡沫细胞的形成,从而加速AS的发生与发展。本文主要总结牙龈卟啉单胞菌脂多糖在AS中作用及机制的最新研究进展,并探讨其作为临床治疗靶点的潜在价值,以期为AS的防治提供新思路。

关键词： 法医多组学   死亡鉴识   微生物   蛋白质   挥发性有机物  

摘要： 临床将死亡定义为生命体征的终结,而法医视角中,这是另一种“生命叙事”的开端。死后微生物演替、蛋白质降解及挥发性有机物释放等分子变化,构成忠实记录死后进程的“分子时钟”,为法庭科学还原死亡真相提供了高分辨率的科学依据。公元1247年,宋代提刑官宋慈在《洗冤集录》中通过以醋熏蒸红伞验尸,开启了人类用理性之光照亮死亡迷雾的先河。数百年来,法医学的基石一直建立在对尸体宏观物理变化的敏锐观察之上:从尸温的流失、尸僵的蔓延,到尸斑的沉积,这些经典的“尸体现象”构成了法医与亡者对话的通用语言。

关键词： 抗猪抑制素血清   C57BL/6J雌性小鼠   超数排卵   卵母细胞数   2-细胞期胚胎数  

摘要： 目的制备兔抗猪抑制素多肽偶联钥孔血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)多克隆抗体,探究其对C57BL/6J小鼠超数排卵的影响。方法将人工合成的猪抑制素多肽偶联KLH蛋白免疫新西兰白兔,制备抗抑制素血清(anti-inhibin serum,AIS,即抑制素多克隆抗体)。将纯化后的AIS联合孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotropin,PMSG)经腹腔注射雌性C57BL/6J小鼠,48 h后再注射人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)诱导超数排卵,15 h后收集并计数超数排卵获得的卵母细胞数;在体外受精24 h后检测2-细胞期胚胎数。结果将KLH免疫新西兰白兔后制备AIS,采用间接ELISA法测定AIS效价,结果显示其效价可达1∶512000;AIS经硫酸铵沉淀法纯化后进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,结果显示在分子量为50 kDa及25 kDa处均出现了清晰可见的条带,符合免疫球蛋白G抗体亚型重链和轻链的理论分子量大小,表明成功制备出猪抑制素多克隆抗体。与常规超数排卵方法相比,AIS 10倍稀释联合PMSG处理可以显著增加小鼠超数排卵产生的卵母细胞数量(P<0.05),约为常规PMSG处理的1.5倍。结论本研究制备的猪抑制素多克隆抗体作为改良超数排卵试剂,可以提高C57BL/6J小鼠的超数排卵效果,在后续的市场应用中有较大前景。

关键词： 狭叶柴胡   茎叶   根   黄酮   多糖   皂苷   挥发油   GC-MS分析  

摘要： 目的测定狭叶柴胡茎叶与根中挥发油、总皂苷、总黄酮和总多糖的含量,并分析挥发油的化学成分组成。方法采用比色法测定狭叶柴胡茎叶和根中总皂苷、总黄酮和总多糖的含量;采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,计算得率,并结合GC-MS技术对其化学成分进行定性分析。结果总皂苷、总黄酮和总多糖在各自质量浓度范围内均呈现出良好的线性关系(r>0.9962),RSD均小于3%。狭叶柴胡茎叶和根中各成分含量分别为:总黄酮6.316%和0.462%,总多糖0.575%和1.871%,总皂苷0.140%和0.513%,挥发油0.401%和0.571%。茎叶挥发油中共鉴定出38种化学成分,以萜类化合物为主,其中大根香叶烯D的相对百分含量最高,为28.203%;根挥发油中共鉴定出32种化学成分,主要为脂肪族,其中十二醛的相对百分含量最高,为25.799%。结论本研究建立的分析方法准确、可靠,适用于狭叶柴胡不同部位活性成分的质量评价。茎叶与根的化学成分差异显著,该结果为狭叶柴胡药用部位的差异化开发与合理利用提供了科学依据。