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关键词： 黄芪   均一多糖   硒多糖   分子结构   体外降血糖活性  

摘要： 取黄芪干粉,采用水提醇沉法提取粗多糖,经Sevage法脱蛋白、透析除杂质后先后采用常规DEAE-52纤维素层析法、常规Sephacryl S-400凝胶色谱和高效液相Sephacryl S-300凝胶色谱分离纯化,得到一种高纯度的均一黄芪多糖(PAPS-1),其分子量为15 388 D,单糖组成为葡萄糖、甘露糖、半乳糖和阿拉伯糖。采用Na2SeO3硒化PAPS-1得到均一黄芪硒多糖(PAPS-1-Se),原子荧光光谱法测得其硒含量为40μg/g,原子能谱分析进一步证实硒元素均匀修饰到PAPS-1。通过对PAPS-1-Se体外降血糖活性的研究,证实PAPS-1-Se具有显著的降血糖活性,表明其具有良好的药用价值。

关键词： 核桃仁   氨基酸   脂肪酸   矿物质元素   α-葡萄糖苷酶  

摘要： 为评价不同产地核桃仁营养成分,开发功能性核桃产品,研究以来自不同产地共9个核桃品种为研究对象。分别测定其营养成分,并对核桃酶解产物进行降血糖活性评价。结果表明:9种核桃在脂肪、蛋白质等方面均具有显著差异(P<0.05);新疆核桃的单不饱和脂肪酸平均含量为23.09%,云南核桃平均含量为21.85%;云南核桃锰元素(110.53 mg·kg-1)的含量高于新疆核桃(13.80 mg·kg-1),9号(山西晋龙)核桃样品钙含量高达1 464.63 mg·kg-1;9种核桃必需氨基酸的平均含量为40.92 mg·g-1,疏水性氨基酸平均含量为42.34 mg·g-1,必需氨基酸与非必需氨基酸的含量比值的变幅为39.33%~42.25%。以α-葡萄糖苷酶抑制率为指标,对9种核桃乳及核桃蛋白酶解液进行降糖活性评价发现:核桃蛋白酶解液的降血糖效果显著高于核桃乳酶解液,核桃蛋白酶解产物对α-葡萄糖苷酶具有较好的抑制效果是5号(新疆新丰),其抑制率为73.88%。综合分析,核桃酶解后具有降血糖活性,且其蛋白酶解产生的特异性肽段是功能核心,可为功能性核桃产品开发及品种选择提供参考。

关键词： 蜜环菌   多糖   工艺优化   抗氧化活性   酶抑制动力学   荧光淬灭   中药现代化技术  

摘要： 以蜜环菌为原料,采用超声波辅助酶(纤维素酶和木瓜蛋白酶质量比2∶1)法提取蜜环菌多糖。通过单因素和响应面实验,考察料液比(g∶mL,下同)、超声时间、酶解温度、酶解时间对蜜环菌粗多糖得率的影响,并优化工艺条件。通过紫外荧光和红外荧光光谱对蜜环菌多糖进行表征,并对其进行体外抗氧化、降糖能力,以及酶抑制动力学进行研究。结果表明,以水为提取溶剂,超声波辅助酶法提取蜜环菌多糖的最佳工艺条件为:料液比1∶26,酶解温度50 ℃,超声时间19 min,酶解时间131 min,在该条件下,蜜环菌粗多糖得率为49.17%±0.06%。;蜜环菌多糖对DPPH自由基、羟基自由基和ABTS+自由基的清除作用都呈现出剂量依赖性;蜜环菌多糖对α-淀粉酶的半数抑制质量浓度(IC50)为0.0944 mg/mL,对α-葡萄糖苷酶的IC50=0.278 mg/mL。蜜环菌多糖对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶均呈竞争性抑制,其相互作用方式为范德华力和氢键,且反应是自发进行的。

关键词： 微小隐孢子虫   核酸   定性标准样品   均匀性   稳定性  

摘要： 目的 按照GB/T 15000《标准样品工作导则》所规定的标准样品制备流程和工艺制备微小隐孢子虫核酸检测用标准样品。方法 通过犊牛传代获取大量微小隐孢子虫虫株C1HN(亚型为ⅡdA19G1)卵囊,纯化后提取DNA并溯源,溯源性检验正确后分装保存,通过微小隐孢子虫巢式PCR和荧光定量PCR(qPCR)对制备的标准样品进行均匀性检验、冻融稳定性检验、短期和长期稳定性检验,通过多家单位合作的方式联合定值。采用SPSS 27.0软件进行统计学分析,数据采用单因素方差分析和配对样本t检验。结果 PCR结果显示,扩增片段大小约为830 bp,与国标检测方法结果一致。测序结果显示,该片段与C1HN虫株上的2号、7号、8号染色体上的SSU rRNA片段序列一致性为99.65%,与感染虫株完全一致,亚型为ⅡdA19G1。均匀性检验结果显示,样品Ct值为15.00±0.36,组间均方为0.17,组内均方为0.11,差异无统计学意义(F=1.49,P > 0.05);冻融稳定性结果显示,样品反复冻融第0、3、7、14天的Ct值别为15.67±0.25、15.68±0.22、15.69±0.27、15.71±0.27,差异无统计学意义(t=0、0.31、0.50、0.71,均P > 0.05);短期稳定性结果显示,4℃下样品储存第0、1、2、3、4、5、10天的Ct值分别为16.48±0.28、16.48±0.25、16.49±0.28、16.50±0.25、16.53±0.26、16.56±0.25、16.57±0.24,差异无统计学意义(t=0、0.04、0.34、0.46、1.56、1.60、1.84,均P > 0.05);25℃下样品储存第0、1、2、3、4、5、10天的Ct值分别为16.20±0.18、16.21±0.14、16.21±0.13、16.22±0.14、16.23±0.14、16.24±0.14、16.25±0.15,差异无统计学意义(t=0、0.17、0.28、0.47、0.61、1.09、1.40,均P > 0.05);37℃下样品储存第0、 1、 2、 3、 4、 5、 10天的Ct值分别为16.21±0.17、 16.22±0.16、 16.23±0.16、 16.24±0.17、 16.26±0.18、16.247±0.18、16.259±0.19,差异无统计学意义(t=0、0.33、0.56、1.10、1.20、1.34、1.89,均P > 0.05);长期稳定性结果显示,-20℃下样品储存第0、30、90、180、270、360天的Ct值分别为15.67±0.11、15.67±0.21、15.67±0.21、15.67±0.25、16.67±0.24、15.67±0.23,差异无统计学意义(t=0、0.01、0.11、0.23、0.37、0.39,均P > 0.05),第180、360天巢式PCR结果显示,特异性条带大小均约为830 bp,测序结果与先前一致;所有单位出具的标准样品复核报告均证明制备的标准样品可作为微小隐孢子虫核酸检测定阳性样品。结论 制备的标准样品达到了GB/T 15000《标准样品工作导则》的要求,溯源性可靠、均匀性良好、稳定性符合要求、定值结果正确。

关键词： 大球盖菇   生长特性   遗传多样性   氨基酸组成   营养价值评价  

摘要： 以河南省不同地区收集的13个大球盖菇菌株为试材,采用菌丝生长速度测定法、ITS序列分子系统进化分析及子实体氨基酸组成与营养价值评价的方法,研究了不同菌株在生长特性、遗传多样性及营养品质方面的差异,以期筛选出生长快、营养品质优良的备选菌株。结果表明:13个菌株菌丝均洁白浓密,但生长速度差异显著,其中Sr-4(0.219 cm·d-1)和Sr-6生长最快,Sr-3、Sr-5等生长较慢;基于ITS序列的分子系统进化分析将13个菌株聚为3类,Sr-4与Sr-6聚为独立类群;13个菌株均检测出16种水解氨基酸,种类一致但含量不同,Sr-4总氨基酸含量最高(23.95 g·kg-1),Sr-9最低(15.64 g·kg-1),且氨基酸组成模式均为鲜味氨基酸>甜味氨基酸>苦味氨基酸>芳香族氨基酸;营养评价表明,所有菌株必需氨基酸/总氨基酸为36.54%~37.97%、必需氨基酸/非必需氨基酸为57.59%~61.22%,接近FAO/WHO 推荐模式,甲硫氨酸为第一限制氨基酸;聚类热图按照氨基酸的含量将13个大球盖菇菌株划分为3类。综合来看,Sr-4在菌丝生长速度、总氨基酸及鲜味、甜味氨基酸含量上表现突出,是兼具高产潜力与优良品质的备选菌株。

关键词： 代谢能   粗蛋白质   吉山黑鸡商品代蛋鸡   生长性能  

摘要： 【目的】本试验以生长性能、屠宰性能、器官指数、血清生化指标和抗氧化指标为评价指标,旨在研究13~18周龄吉山黑鸡商品代蛋鸡适宜饲粮代谢能和粗蛋白质水平。【方法】选取1 152只健康状况良好、体重相近的12周龄吉山黑鸡商品代蛋鸡,随机分为9组,每组8个重复,每个重复16只。采用3×3双因子(代谢能水平为:10.67、11.09和11.51 MJ/kg;粗蛋白质水平为:15.00%、16.00%和17.00%)试验设计,共配制9种试验饲粮。试验正试期6周。试验期间统计平均日采食量、平均日增重和料重比,试验结束时,每个重复取1只鸡,测定屠宰性能、器官指数、血清生化指标和抗氧化指标。【结果】①饲粮代谢能水平为10.67 MJ/kg时,蛋鸡末重和平均日增重显著低于11.09和11.51 MJ/kg组(P<0.05)。料重比随代谢能水平的升高而显著降低(P<0.05)。饲粮代谢能和粗蛋白质水平对料重比有显著互作效应(P<0.05)。②饲粮代谢能和粗蛋白质水平对屠宰性能无显著影响(P>0.05)。③饲粮代谢能和粗蛋白质水平对肌胃指数和脾脏指数有显著互作效应(P<0.05)。④饲粮代谢能水平为11.09 MJ/kg时,蛋鸡血清总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、总蛋白、白蛋白和尿素氮含量显著低于10.67和11.51 MJ/kg组(P<0.05)。⑤饲粮代谢能水平为11.51 MJ/kg时,蛋鸡血清总抗氧化能力显著低于10.67 MJ/kg组,谷胱甘肽过氧化物酶活性显著低于11.09 MJ/kg组(P<0.05)。饲粮粗蛋白质水平为15.00%时,蛋鸡血清总抗氧化能力和超氧化物歧化酶活性显著低于16.00%和17.00%组(P<0.05)。【结论】综合考虑各项指标,推荐13~18周龄吉山黑鸡商品代蛋鸡适宜的饲粮代谢能和粗蛋白质水平分别为11.09 MJ/kg和16.00%。

关键词： 驼肉   超声波   木瓜蛋白酶   嫩化   蛋白质组学   体外消化  

摘要： 本研究以驼肉为原料,系统解析了超声波协同木瓜蛋白酶嫩化处理对驼肉品质特性及体外消化行为的影响,并采用蛋白质组学方法深入探究其品质变化的分子机制。结果显示,与对照组相比,驼肉经协同处理后剪切力、蒸煮损失、硬度、咀嚼度及内聚性显著降低,弹性显著增加(P<0.05)。基于蛋白质组学技术共鉴定到5,048个蛋白质和23,609条肽段,协同处理通过激活钙信号与细胞凋亡通路、下调结构蛋白并富集消化系统通路,破坏肌原纤维并抑制应激修复,从而实现多通路协同嫩化与消化性提升;该过程进一步得到差异蛋白质与质构特性相关性分析的验证。通过体外模拟消化后,协同处理组的蛋白消化效率显著提高,其胃蛋白酶水解率(81.94%±1.27%)和总蛋白水解率(90.34%±1.72%)较对照组分别提升17.57%和18.06%。消化产物中总羰基含量显著上升,总巯基含量相应下降,表明适度氧化进一步支持消化性改善。此外,驼肉经协同处理其蛋白质构象发生显著改变,表现为内源荧光强度显著增强(P<0.05);电泳结果显示,协同处理组在35~100 kDa区间的蛋白条带密度较对照组减弱,显著提升驼肉嫩度。本研究从分子机制层面阐释了协同处理提升驼肉嫩化与消化品质的内在关联,旨在为驼肉品质的精准调控提供理论与技术支撑。

关键词： 子宫内膜异位症   当归多糖   氧化应激   自噬   Keap1/Nrf2/HO-1通路   SD大鼠  

摘要： 目的:基于Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)通路探讨当归多糖是否通过抑制氧化应激恢复细胞自噬,从而改善子宫内膜异位症(EMT)。方法:大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、小剂量当归多糖组、大剂量当归多糖组、孕三烯酮组、大剂量当归多糖+重组Keap1蛋白(rKeap1)组,每组12只。除正常对照组外,其他组均构建EMT模型,建模成功后给药1次/d,持续4周。测量大鼠异位子宫内膜组织的质量和体积,苏木精-伊红染色观察子宫内膜组织病理学特征,通过试剂盒检测活性氧、丙二醛、超氧化物歧化酶(SOD)水平;透射电镜观察子宫内膜组织中自噬小体数;免疫荧光染色检测子宫内膜组织中微管相关蛋白轻链3(LC3)相对荧光强度;蛋白质印迹法检测子宫内膜组织中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62、Keap1、细胞核Nrf2、HO-1蛋白水平。结果:与正常对照组子宫内膜组织比较,模型对照组异位子宫内膜组织腺体增多,细胞空泡化明显,炎性细胞浸润明显,活性氧、丙二醛水平及p62、Keap1表达增加,而SOD水平降低,自噬小体数减少,LC3相对荧光强度降低,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、细胞核Nrf2、HO-1表达减少(均P<0.05)。与模型对照组比较,小、大剂量当归多糖组及孕三烯酮组异位子宫内膜组织病理损伤减轻,异位子宫内膜组织质量和体积、活性氧、丙二醛水平及p62、Keap1表达减少,SOD水平升高,自噬小体数、LC3相对荧光强度增加,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、细胞核Nrf2、HO-1表达增加(均P<0.05)。rKeap1逆转了大剂量当归多糖对EMT大鼠氧化应激的抑制作用以及对自噬稳态的恢复作用。结论:当归多糖可能通过阻断Keap1激活Nrf2/HO-1通路,抑制大鼠氧化应激,恢复自噬稳态,从而改善EMT。

关键词： 13-17周龄   京粉6号蛋鸡   日粮   粗蛋白质   预测模型   验证  

摘要： 本实验旨在研究日粮不同蛋白质水平对13-17周龄京粉6号蛋鸡体重、胫骨质量、脏器发育和健康状况的影响,以验证前期所建立的京粉6号蛋鸡育成后期蛋白质生长需要预测模型的有效性。将160只12周龄京粉6号蛋鸡随机分为4组,每组10个重复,每重复4只鸡。对照组按照“京粉6号”蛋鸡手册的营养需要量配制日粮,模型组按照相应阶段生长需要预测模型值配制日粮。90%组与110%组在模型组基础上将蛋白质水平及氨基酸分别减少或增加10%。结果显示:1)在14和17周龄末,模型组胫重、胫骨指数、胫长和胫围相比于对照组无显著差异;在14周龄末,模型组体重相比于对照组显著降低(P<0.05),而在17周龄末,模型组体重相比于对照组无显著差异。2)在14和17周龄末,模型组脏器指数相比于对照组无显著差异。3)在14周龄末,模型组葡萄糖、甘油三酯和肌酐相比于对照组均显著升高(P<0.05);模型组白蛋白和谷草转氨酶均显著降低(P<0.05);在17周龄末,模型组肌酐和白蛋白相比于对照组均显著降低(P<0.05),但均在动物正常生理范围。结论:前期建立的京粉6号蛋鸡育成后期生长需要预测模型是有效的,可用于京粉6号蛋鸡育成后期的精准饲养及低蛋白日粮配制。

关键词： 金荞麦片   质量评价   指纹图谱   四级杆飞行时间质谱   模式识别   层次聚类分析   主成分分析   正交偏最小二乘法-判别分析   鞣质   酚   黄酮   苯丙素苷   氨基酸   有机酸   生物碱   萜   没食子酸   原儿茶酸   原儿茶醛   原花青素   儿茶素   表儿茶素   表儿茶素没食子酸酯   芦丁  

摘要： 目的对不同企业生产的金荞麦片进行质量评价。方法分别收集18批次A企业和20批次B企业生产的金荞麦片,HPLC法测定所有38批次金荞麦片指纹图谱,标定共有峰,采用四级杆飞行时间质谱(quadrupole time-of-flight mass spectrometry,Q-TOF-MS/MS)对共有峰进行成分鉴定,以量化共有峰面积为变量,对指纹图谱进行层次聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares- discriminant analysis,OPLS-DA)等模式识别分析,对样品中采用对照品比对确认且分离度较好的9个成分进行定量测定。结果 38批次金荞麦片指纹图谱标定共有峰33个;Q-TOF-MS/MS共鉴定成分53个,包括21个鞣质类成分、12个酚类成分、7个黄酮类成分、7个苯丙素苷类成分、2个氨基酸类成分、2个有机酸类成分、1个生物碱类成分及1个萜类成分,其中3个酚类成分(没食子酸、原儿茶酸和原儿茶醛)、5个鞣质类成分(原花青素B1、B2、B3、C1、C2)、4个黄酮类成分(儿茶素、表儿茶素、表儿茶素没食子酸酯和芦丁)采用对照品比对确认,除原花青素C2、B2和芦丁外的9个成分分离度较好,B企业生产的金荞麦片中这9个成分的平均含量均明显高于A企业(P<0.01)。HCA、PCA和OPLS-DA结果一致,均明显将A企业和B企业生产的金荞麦片区分为2类。共有峰30、29、16、17、2、21、10、11、18、20、27对应的成分(如原花青素C2、B2、C1、B1、B3、没食子酸、表儿茶素等)是引起2家企业生产的金荞麦片质量差异的标志性成分。结论 2家企业生产的金荞麦片存在明显质量差异。