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关键词： 南瓜   多糖   淀粉   非淀粉类多糖   性状改良   遗传规律   配合力   定向育种  

摘要： 【目的】探明南瓜亲本及其杂交组合淀粉与非淀粉类多糖含量的遗传特性,为南瓜定向育种的亲本选择提供依据。【方法】以3份红皮南瓜种质(R1、R2、R3)和3份绿皮南瓜种质(G1、G2、G3)为骨干亲本,用Griffing双列杂交法I配制杂交组合,用南瓜淀粉组分高效检测体系和热水浸提-苯酚硫酸法分别测定淀粉和非淀粉类多糖含量,对比分析红皮南瓜种质和绿皮南瓜种质营养性状的配合力和遗传模型,并估算遗传参数。【结果】6份南瓜亲本中,红皮南瓜R3淀粉含量最高(172.17 mg/g),绿皮南瓜G1非淀粉类多糖含量最高(108.87 mg/g)。不同南瓜亲本淀粉和非淀粉类多糖含量的配合力不同,R3和G3分别在红皮南瓜和绿皮南瓜中表现为淀粉含量的一般配合力效应值最大、非淀粉类多糖含量的一般配合力效应值负值最小,是选育高淀粉、低非淀粉类多糖后代的良好亲本;G1、R1和R2淀粉含量的一般配合力效应值较小、非淀粉类多糖含量的一般配合力效应值较大,是选育高非淀粉类多糖、低淀粉的良好亲本。G2淀粉含量和非淀粉类多糖含量的一般配合力效应值均为负数,具备使后代淀粉和非淀粉类多糖含量均降低的潜力。从杂交组合看,R3×R1、G3×G1淀粉含量和非淀粉类多糖含量的特殊配合力效应值均为正数,既可有效提高淀粉含量,也可提高非淀粉类多糖含量,适用于培育营养型高淀粉南瓜品种。R1×R2、G2×G1非淀粉类多糖含量特殊配合力效应值为正数、淀粉含量特殊配合力效应值为负数,2个组合均能有效提高非淀粉类多糖含量,降低淀粉含量,适用于培育功能型高非淀粉类多糖南瓜品种。南瓜淀粉和非淀粉类多糖含量受基因加性效应和非加性效应共同作用,符合加性-显性-上位性遗传模型。2个性状的广义遗传力>狭义遗传力,环境方差<遗传方差,宜在高代进行选择。【结论】不同类型南瓜亲本淀粉和非淀粉类多糖含量的配合力不同,R3和G3是选育高淀粉的最佳亲本,G1、R1和R2是选育高非淀粉类多糖的最佳亲本,应根据育种实际需求选配亲本。

关键词： 肺炎链球菌   荚膜多糖   多糖结合疫苗   多糖氰酸酯化   亚胺碳酸酯基   氨基甲酸酯基  

摘要： 目的探究已报道可定量测定氰酸酯、亚胺碳酸酯、氨基甲酸酯3种基团的方法对肺炎链球菌荚膜多糖氰酸酯化中各生成基团的适用性。方法对于活化多糖氰酸酯基含量,使用高氯酸滴定法和二甲基巴比妥酸吡啶法进行测定;对于亚胺碳酸酯基含量的测定,使用盐酸水解法将亚胺碳酸酯水解为铵离子,通过分光光度法测得亚胺碳酸酯基含量;对于氨基甲酸酯基含量,使用酶联免疫法进行测定。结果由于肺炎链球菌荚膜多糖在乙酸中溶解性较差,高氯酸滴定法对于该类多糖活化物中氰酸酯基含量测定有待进行反应溶剂的优化。通过二甲基巴比妥酸吡啶法测定23F型肺炎链球菌荚膜多糖活化后的氰酸酯基生成率为(0.038±0.004)%。盐酸水解法测定23F型肺炎链球菌荚膜多糖活化后的亚胺碳酸酯基生成率为(2.20±0.03)%。酶联免疫法测定的活化多糖氨基甲酸酯基含量结果显示超过检测范围,该方法不适用于活化多糖的反应体系。结论二甲基巴比妥酸吡啶法可测定活化程度达到(0.038±0.004)%的氰酸酯化多糖中氰酸酯基含量。盐酸水解法可以准确测定氰酸酯化多糖的亚胺碳酸酯基含量。酶联免疫法并不适用于氰酸酯化多糖的氨基甲酸酯基含量测定。

关键词： 紫荆   种子休眠   蛋白质组   代谢通路  

摘要： 【目的】探究紫荆(Cercis chinensis)种子休眠解除前后蛋白质组的变化,进一步了解紫荆种子休眠与萌发的内在机制。【方法】以成熟紫荆种子为材料,基于非标记(label-free)定量技术和液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术,分别对休眠种子和经过45 d低温层积后解除休眠的种子进行蛋白质组定量和定性分析,利用生物信息学分析紫荆种子休眠解除前后差异蛋白质的功能。【结果】筛选获得1031个差异表达蛋白,其中显著上调的779个,显著下调的252个。差异表达蛋白被GO功能注释到生物进程、细胞组分和分子功能3大类49个亚类,注释的差异蛋白与代谢过程、酶催化活性、细胞组分合成、应激反应等密切相关。KEGG代谢通路注释结果表明,共有1012个差异蛋白被注释,涉及264条通路,差异蛋白主要集中在碳代谢、多糖分解、蛋白质过程等,显著富集在7条通路,主要参与激素合成、次生代谢产物合成、脂质代谢等。差异倍数较高的蛋白质中,可能与紫荆种子休眠解除相关的有β-葡萄糖苷酶活性相关蛋白、泛醌和其他萜醌生物等次生代谢相关蛋白、乙醛酸循环相关蛋白等。【结论】紫荆种子休眠解除是较为复杂的生物学过程,涉及细胞形态变化、酶的催化、多糖分解及激素信号转导等,多条代谢途径相互作用构成了较为复杂的休眠解除调控机制。

关键词： 乌头汤   Ahr/LOC101928120/SHC1信号通路   炎症   氧化应激   人尿源性干细胞  

摘要： 目的探讨乌头汤(Wutou decoction,WTD)调节芳烃受体(aryl hydrocarbon receptor,Ahr)/长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)LOC101928120/SHC衔接蛋白1(SHC articulin 1,SHC1)信号通路抑制炎症和氧化应激对人尿源性干细胞(urogenic stem cells,UdSC)损伤的机制。方法将UdSC细胞分为Control组、IL-1β组、IL-1β+WTD组、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+WTD组。CellTiterGlo法、流式细胞术检测各组细胞中的增殖、凋亡;qRT-PCR检测各组细胞中Ahr、LOC101928120、SHC1 mRNA水平;蛋白质印迹检测各组细胞中Ahr、HDAC1、SHC1、COL2、SOX-9的表达;ELISA检测炎症诱导的UdSC细胞中IL-6、TNF-α及MMP-13的表达;DCFH-DA荧光探针检测氧化应激诱导UdSC细胞中的ROS水平。结果IL-1β组A_(560 nm)值,Ahr mRNA和蛋白水平,LOC101928120 mRNA水平,COL2、SOX-9蛋白水平低于Control组,IL-1β+WTD组以上各指标高于IL-1β组(P<0.05);IL-1β组凋亡率,IL-6、TNF-α、MMP-13水平,SHC1 mRNA和蛋白水平,HDAC1蛋白水平高于Control组,IL-1β+WTD组以上各指标低于IL-1β组(P<0.05)。H_(2)O_(2)组A_(560 nm)值,Ahr mRNA和蛋白水平,LOC101928120 mRNA水平,COL2、SOX-9蛋白水平低于Control组,H_(2)O_(2)+WTD组以上各指标高于H_(2)O_(2)组(P<0.05);H_(2)O_(2)组凋亡率、ROS阳性细胞比例、SHC1 mRNA和蛋白水平、HDAC1蛋白水平高于Control组,H2O2+WTD组以上各指标低于H_(2)O_(2)组(P<0.05)。结论WTD可抑制炎症和氧化应激诱导的人UdSC损伤,其机制可能是通过调节Ahr/LOC101928120/SHC1信号通路实现的。

关键词： 干扰素基因刺激因子   肝细胞   线粒体凋亡   脂多糖   纤维化  

摘要： 目的:探讨干扰素基因刺激因子(STING)抑制剂调节脂多糖(LPS)诱导的人肝细胞线粒体凋亡的作用机制。方法:分别采用未处理、LPS处理和LPS联合STING抑制剂处理将人肝细胞(L02)分为对照组、LPS组和LPS+STING抑制剂组。采用蛋白质印迹法分别检测STING通路信号相关蛋白STING、TANK结合激酶1(TBK1)、干扰素调节因子3(IRF3)的表达;线粒体凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达;纤维化相关蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和I型胶原蛋白(Collagen I)的表达。采用流式细胞术检测细胞凋亡率,酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素(IL)-1β和IL-18水平。结果:与对照组比较,LPS处理后L02细胞凋亡率上升,细胞上清液中IL-1β和IL-18水平升高;给予STING抑制剂处理后,细胞凋亡率下降,IL-1β和IL-18水平降低。此外,LPS处理后STING、TBK1、IRF3、Bax和Caspase-3蛋白表达均上调,Bcl-2蛋白表达下调;给予STING抑制剂处理后,STING、TBK1、IRF3、Bax和Caspase-3蛋白表达下调,Bcl-2蛋白表达上调。结论:抑制STING信号通路能减轻LPS诱导的炎症反应和线粒体凋亡,进而缓解LPS诱导的肝损伤。

关键词： 植物多糖   凝胶   制备与应用   研究进展  

摘要： 文章综述了植物多糖类凝胶的研究进展,包括其来源、结构、制备方法以及在食品、医药、生物工程等多个领域的应用。详细讨论了不同植物多糖的特性对凝胶性能的影响,以及凝胶形成的机制和影响因素。同时,对植物多糖类凝胶的未来研究方向进行了展望,旨在为相关领域的研究和应用提供参考。

关键词： 黄精多糖   硒化修饰   结构表征   抗氧化活性  

摘要： 以黄精多糖(Polygonatum sibiricum polysaccharides,PSP)为研究对象,在含有冰乙酸和亚硒酸钠的氧化还原体系中,制备得到硒化黄精多糖(selenized Polygonatum sibiricum polysaccharides,PSP-Se),采用电感耦合原子发射光谱、气相色谱-质谱联用、傅里叶变换红外光谱仪、扫描电子显微镜、纳米粒度仪等对其结构及性质进行表征分析,同时以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)阳离子自由基及羟自由基清除率为指标,研究对比其体外抗氧化活性。结果表明,通过响应面试验确定PSP-Se的最佳制备工艺条件为:亚硒酸钠添加量1.5 g/g、冰乙酸添加量3.0 mL/g、反应温度80℃、反应时间12 h,此时PSP-Se硒含量为(6.00±0.20)mg/g。所制备的PSP-Se为球状物,热稳定性提高,粒径为1654 nm,电位绝对值较PSP提高了95.12%。硒化修饰后的PSP基本骨架得到保留,单糖组成上增加了N-乙酰-氨基葡萄糖和N-乙酰-氨基半乳糖,其他单糖组分的含量也有所改变。傅里叶变换红外光谱表明PSP-Se在1131 cm-1和900 cm-1处出现两个新的吸收峰,证明形成亚硒酸酯键,硒化成功。在体外抗氧化性实验中,PSP-Se对DPPH自由基、ABTS阳离子自由基和羟自由基清除率显著高于PSP(P<0.05),并呈现明显的剂量效应。

关键词： 五味子多糖   运动性疲劳   线粒体自噬   骨骼肌   Nrf2/ARE通路  

摘要： 目的基于Nrf2/ARE通路探究五味子多糖(SCP)对运动性疲劳小鼠骨骼肌线粒体自噬的影响。方法通过游泳训练建立运动性疲劳小鼠模型,随机分为疲劳组、SCP(20 mg/kg)组、红景天(8 mL/kg)组、抑制剂(30 mg/kg ML385)组、SCP+抑制剂组,并以正常小鼠为对照组,分离血清,检测乳酸(LA)、乳酸脱氢酶(LDH)、血尿素氮(BUN)、肌酸激酶(CK)水平;分离肝,检测丙二醛(MDA)、肝糖原(HG)及超氧化物歧化酶(SOD)水平;分离骨骼肌,检测肌糖原(MG)及骨骼肌组织运动疲劳损伤变化、线粒体形态变化;分析线粒体转录因子A(TFAM)、核呼吸因子-1(NRF-1)mRNA及Nrf2、醌氧化还原酶1(NQO1)、血红素氧合酶-1(HO-1)、LC3蛋白表达。结果疲劳组HG、MG水平、SOD水平、TFAM mRNA、NRF-1 mRNA表达、Nrf2、NQO1、HO-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达低于对照组,LA、BUN、LDH、CK水平、MDA高于对照组(P<0.05);SCP组、红景天组HG、MG水平、SOD水平、TFAM mRNA、NRF-1 mRNA表达、Nrf2、NQO1、HO-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达高于疲劳组,LA、BUN、LDH、CK水平、MDA低于疲劳组(P<0.05),抑制剂组上述指标均相反(P<0.05)。结论SCP通过激活Nrf2/ARE通路促进运动性疲劳小鼠骨骼肌线粒体自噬,有效发挥抗疲劳作用。

关键词： 软骨修复   软骨组织缺损   生物材料   免疫组织化学   实时定量聚合酶链反应   免疫印迹法   兔  

摘要： 目的探讨掺钆羟基磷灰石(Gd-HA)支架材料复合脂肪间充质干细胞(ADSCs)对膝关节软骨缺损的修复作用。方法分离、培养和鉴定兔ADSCs,建立兔膝关节全层软骨缺损模型,18只兔随机分成空白对照组、Gd-HA支架组和ADSCs+Gd-HA支架组。术后12、24周取材行大体观察及评分(ICRS),HE、甲苯胺蓝、改良番红O亮绿和Ⅱ型胶原(ColⅡ)免疫组织化学染色分析及组织学染色评分(O’Driscoll),Real-time PCR检测修复组织ColⅡ与糖胺聚糖(GAG)mRNA表达量,Western blotting检测修复组织ColⅡ蛋白表达,二甲基亚甲蓝比色法(DMMB)检测GAG含量,压痕实验检测生物力学强度,PKH26标记的ADSCs示踪,评价Gd-HA复合ADSCs的组织工程支架对兔膝关节软骨缺损的修复效果。结果体外分离培养的ADSCs形态学观察生长良好,表型稳定,定向分化良好。大体观察及组织学染色可见,植入Gd-HA支架组的膝关节全层软骨缺损模型修复程度及修复效果均优于空白对照组,而ADSCs+Gd-HA支架组的软骨修复情况优于Gd-HA支架(P<0.05);ICRS和改良O’Driscoll评分均高于其他两组(P<0.05)。与Gd-HA组相比,ADSCs+Gd-HA组关节软骨修复过程中可产生更多的ColⅡ、GAG,其修复组织的力学强度表现更强(P<0.05);ADSCs+Gd-HA组修复组织内发现PKH26标记的ADSCs,且参与新生组织的组成。结论Gd-HA支架材料复合ADSCs对膝关节全层软骨缺损具有良好的修复效果,可能成为生物学修复关节软骨缺损的新型材料。

关键词： 脐带间充质干细胞   女性生殖系统疾病   不孕症   组织修复与再生   再生医学   干细胞技术  

摘要： 女性生殖系统疾病,如早发性卵巢功能不全(POI)、卵巢早衰(POF)、多囊卵巢综合征(PCOS)、宫腔黏连(IUA)、子宫瘢痕憩室、输卵管炎和输卵管阻塞等可诱发不孕,严重影响患者的身心健康和生活质量。目前脐带间充质干细胞(UCMSCs)在妇产科领域的应用已成为一个新兴研究热点,在女性生殖系统疾病治疗中也展现出良好的效果。UCMSCs可分泌多种细胞因子,激活相关信号通路和关键分子,通过减少炎症介质的产生和释放,降低氧化应激的能力,阻止或延缓细胞凋亡作用,防止细胞过度损伤,从而达到治疗目的。近年来,已有大量关于UCMSCs对女性生殖系统疾病治疗效果的研究。现就UCMSCs在女性生殖系统疾病治疗的体内外研究现状及最新研究进展进行综述,旨在为未来研究和临床治疗提供新的策略及方向。