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关键词： 黄芪多糖   流感病毒   肺损伤   炎症因子   巨噬细胞极化  

摘要： 目的研究黄芪多糖对H1N1流感小鼠肺损伤的保护机制。方法体内实验:将60只小鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组、黄芪多糖低剂量组、黄芪多糖中剂量组、黄芪多糖高剂量组和磷酸奥司他韦治疗组,每组各10只小鼠。除对照组外,各组小鼠均采用甲型H1N1流感病毒鼠适应株A/FM1/1/47(H1N1)构建小鼠流感模型。建模成功后,对照组和模型组均给予生理盐水灌胃,黄芪多糖低剂量组、黄芪多糖中剂量组及黄芪多糖高剂量组分别给予100 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg剂量的黄芪多糖灌胃,磷酸奥司他韦治疗组给予30.44 mg/kg剂量的奥司他韦灌胃。采用HE染色检测各组小鼠肺组织的病理变化,采用RT-qPCR法检测肺组织及肺泡灌洗液中FM1和炎性相关因子白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)和γ-干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)的表达水平。体外实验:采用小鼠单核巨噬细胞白血病细胞Raw 264.7检测黄芪多糖对巨噬细胞活力的影响;采用免疫荧光法和流式细胞术检测黄芪多糖对Raw 264.7巨噬细胞极化的影响。结果与模型组比较,黄芪多糖干预后的各组小鼠肺充血水肿情况得到缓解、肺组织病理接近正常;黄芪多糖组小鼠M1型巨噬细胞促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α和IFN-γ表达下调,差异有统计学意义(P<0.05),且肺损伤与病理变化显著改善。与对照组比较,模型组小鼠肺泡灌洗液中FM1、IL-1β、IL-6、TNF-α和IFN-γmRNA表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,黄芪多糖低剂量组小鼠肺泡灌洗液中IL-1β、IL-6、TNF-α和IFN-γmRNA表达下调,差异有统计学意义(P<0.01),黄芪多糖中剂量组小鼠肺泡灌洗液中IL-6 mRNA表达下调,差异有统计学意义(P<0.01),黄芪多糖高剂量组小鼠肺泡灌洗液中FM1 mRNA表达下调,差异有统计学意义(P<0.05)。在Raw 264.7细胞实验中,与模型组比较,黄芪多糖治疗组可下调M1型巨噬细胞标志物CD86和iNOS水平,差异有统计学意义(P<0.05),且能抑制细胞死亡,抑制巨噬细胞M1型极化,减轻炎症水平。结论黄芪多糖能缓解流感病毒诱导的肺炎性病理损伤,通过M1型巨噬细胞极化,降低肺组织的炎性反应,发挥抗流感病毒感染的作用。

关键词： 人牙髓干细胞   黄芩苷   FOXO1信号通路   增殖迁移能力   成骨分化  

摘要： 目的探究黄芩苷(Baicalin)通过FOXO1信号通路对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)增殖、迁移及成骨分化的影响及作用机制。方法采用酶消法提取人牙髓干细胞,设置Control组、L/Baicalin组、H/Baicalin组、si-FOXO1组、Baicalin+si-FOXO1组,其中L/Baicalin组、H/Baicalin组分别给予10μmol/L和20μmol/L Baicalin溶液处理,si-FOXO1组经慢病毒si-FOXO1沉默处理,并给予20μmol/L Baicalin进行挽救试验。细胞继续培养24 h后采用MTT法、Transwell法检测其增殖、迁移能力;人牙髓干细胞经成骨诱导后采用ALP活性检测、茜素红染色分析细胞ALP染色、矿化结节形成能力;Western-blot检测各组细胞成牙/成骨分化关键因子RUNX2、OSX、OPN、OCN蛋白及FOXO1信号通路关键蛋白FOXO1、FOXO3a浓度表达。结果随着细胞培养时间的延长,各组hDPSCs细胞均体现出增殖趋势(P<0.05);与Control组相比,Baicalin干预可以上调hDPSCs增殖能力、迁移能力、ALP活性、矿化结节面积及数量(P<0.05);其中,H/Baicalin组hDPSCs细胞增殖能力、迁移能力、ALP活性、矿化结节面积及数量上调更为明显,体现出剂量依赖性(P<0.05);FOXO1沉默质粒转染可以下调hDPSCs增殖能力、迁移能力、ALP活性、矿化结节面积及数量(P<0.05);而20μmol/L Baicalin处理则会逆转并上调si-FOXO1组细胞增殖能力、迁移能力、ALP活性、矿化结节面积及数量(P<0.05);Baicalin干预可上调hDPSCs细胞内成骨相关因子RUNX2、OSX、OPN、OCN及FOXO1信号通路相关因子FOXO1、FOXO3a的蛋白表达,其中高H/Baicalin组上调更高,体现出剂量依赖性(P<0.05);si-FOXO1沉默下调hDPSCs细胞内RUNX2、OSX、OPN、OCN、FOXO1、FOXO3a蛋白表达(P<0.05);而加入Baicalin(20μmol/L)则会逆转并上调si-FOXO1组细胞内RUNX2、OSX、OPN、OCN、FOXO1、FOXO3a蛋白表达(P<0.05)。结论黄芩苷可以增强人牙髓干细胞增殖、迁移能力,提高其成骨/成牙分化能力。这可能与激活FOXO1信号通路有关,值得深入研究。

关键词： 巨噬细胞   组织再生   干细胞来源心肌细胞   分化   成熟   免疫微环境  

摘要： 干细胞来源心肌细胞(SC-CM)在心脏再生医学、疾病建模和药物筛选中潜力巨大,但存在移植存活率低、功能不成熟及与宿主整合差等问题,严重限制了其临床应用。免疫微环境,特别是巨噬细胞通过极化为促炎的M1型或修复的M2型,在心脏修复中起关键作用。主要综述了巨噬细胞对SC-CM的典型"双刃剑"效应,总结了M1/M2型巨噬细胞与SC-CM相互作用的分子机制和治疗策略,并延伸探讨了巨噬细胞极化在胰腺等组织中调控间质细胞功能的跨器官机制,以期为心脏免疫调控提供更广泛的参考视角。最后,对其临床应用的前景和未来面临的挑战进行了展望。

关键词： 麦冬多糖   干燥综合征   TNF-α/NF-κB信号通路   NOD样受体热蛋白结构域3  

摘要： 目的探究麦冬多糖(Ophiopogon japonicus polysaccharides,OJP)对干燥综合征(Sjögren’s syndrome,SS)小鼠颌下腺炎症的抗炎作用及其对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)/核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)/NOD样受体热蛋白结构域3(NOD like receptor family pyrin domain containing 3,NLRP3)通路的影响。方法①8只C57BL/6J小鼠设为空白组(Control组),32只C57BL/6J小鼠采用免疫诱导法建立SS模型,采用随机数字法分为(n=8):模型组(SS组)、低剂量麦冬多糖组[OJP(10 mg/kg)组]、高剂量麦冬多糖组[OJP(20 mg/kg)组]、羟氯喹组(Hyd组)。Control组、SS组灌服生理盐水,OJP(10 mg/kg)和OJP(20 mg/kg)组分别灌胃0.2 mL的10、20 mg/kg OJP溶液,Hyd组灌胃给予0.2 mL的100 mg/kg羟氯喹溶液,每日1次,共4周。测量小鼠饮水量及唾液流率,采用ELISA法检测小鼠血清中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、TNF-α炎症因子指标,HE染色观察各组小鼠颌下腺组织病理的改变,Western blot检测TNF-α/NF-κB/NLRP3通路相关蛋白的表达,免疫荧光法检测TNF-α、NLRP3蛋白表达。②将RAW264.7巨噬细胞分为空白对照组(Control组)、模型组(SS组)、麦冬多糖低剂量组(OJP1组)、麦冬多糖中剂量组(OJP2组)、麦冬多糖高剂量组(OJP4组),培养24 h后,去除培养基,Control组加入2 mL的DMEM完全培养基,SS组加入2 mL的含16μg脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)的DMEM完全培养基,OJP不同剂量组分别加入2 mL的含16μg LPS及浓度为1、2或4 mg/mL OJP的DMEM完全培养基。采用ELISA法检测炎症因子指标,Western blot检测TNF-α/NF-κB/NLRP3通路相关蛋白的表达,免疫荧光法检测TNF-α蛋白表达。结果①与空白组比较,SS组小鼠饮水量增加,唾液流率减少(P<0.05),血清中炎症因子IL-1β、IL-6及TNF-α增多(P<0.01),颌下腺组织HE染色显示病理损伤加重,NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)、半胱天冬酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase-1)、IL-1β、TNF-α、肿瘤坏死因子受体1(TNF receptor type 1,TNFR1)/甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)及磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)/NF-κB p65升高(P<0.01),免疫荧光结果显示TNF-α、NLRP3蛋白的表达升高。与SS组相比,Hyd组、OJP各剂量组小鼠饮水量减少,唾液流率增加(P<0.01)、血清中炎症因子IL-1β、IL-6及TNF-α不同程度减少、颌下腺病理损伤均有减轻、Western blot结果显示NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、TNF-α、TNFR1/GAPDH及p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达降低(P<0.01)、免疫荧光结果显示TNF-α、NLRP3蛋白的表达均有降低。②与单纯用LPS处理的巨噬细胞相比,经OJP干预后的细胞中的炎症因子、NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、TNF-α、TNFR1/GAPDH及p-NF-κB p65/NF-κB p65均有所降低(P<0.01)。结论OJP可能通过抑制TNF-α/NF-κB/NLRP3信号通路激活达到抗炎作用,以此减轻SS小鼠炎症反应。

关键词： 素食   宠物食品   营养成分   适口性   蛋白质   维生素  

摘要： 近年来,宠物素食食品在海外受到越来越多的关注,随着市场不断增长,其营养价值和应用研究也逐渐增多。但目前国内宠物食品市场依旧追求动物性蛋白,对宠物素食食品的研究基本为空白。文章综述了国内外宠物素食食品营养的相关研究,包括宠物素食食品的起源发展、营养成分与适口性评估,展望了国内宠物素食食品的发展趋势。并基于前人研究成果,讨论分析了宠物素食食品的可行性和亟待解决的问题,旨在为国内宠物素食食品的应用提供参考,也为研究素食食品对犬、猫的影响提供新思路。综合来看,宠物素食食品具有广阔的发展前景,但仍需进一步研究和应用,以满足不同情况下宠物的营养需求和健康需求。

关键词： 人工智能   卷积神经网络   TTS   广播电视  

摘要： 在人工智能技术迅猛发展的时代浪潮中,广播电视行业正经历深刻的智能化转型。本文聚焦于音视频生产流程中的核心痛点——配音效率瓶颈,提出并深入探讨了基于深度学习的声音克隆技术作为创新解决方案。该技术通过对目标人声的高质量数据采集与精细化预处理,运用卷积神经网络(CNN)等先进算法进行深层声纹特征提取与建模,最终实现高度逼真、富有表现力的合成语音。其在广播电视节目制作、多语言内容生产、个性化服务等场景的应用,不仅能显著提升内容产出效率、降低人力与时间成本,更能为观众带来新颖的互动体验。

关键词： 急性肾损伤   虫草素   间充质干细胞   趋化因子配体2   凋亡  

摘要： 目的探讨虫草素预处理的间充质干细胞是否能保护缺氧/复氧(hypoxia/reoxygen⁃ation,H/R)的肾小管上皮细胞(human renal tubular epithelial cell,HK-2)免受细胞凋亡。方法从基因表达综合(gene expression omnibus,GEO)公共数据库中获得干细胞疗法治疗急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)的靶点。从中药分子机制生物信息学注释数据库(bioinformatics analysis tool for molecular mechanism of traditional chinese medicine,BATMAN-TCM)获得虫草素相关靶点。对干细胞疗法治疗AKI的靶点与虫草素相关靶点取交集,筛选出共同靶基因。细胞实验分为对照组、H/R组、H/R+间充质干细胞共培养组、H/R+虫草素预处理间充质干细胞共培养组进行细胞实验。结果细胞增殖检测试剂盒8检测结果表明,不同浓度的虫草素处理干细胞后细胞存活率显著升高,呈剂量依赖性,尤其40μmol/L虫草素处理干细胞活力增高尤为显著(P<0.001)。划痕实验结果表明,虫草素处理间充质干细胞可以显著提升其迁移效率。蛋白质免疫印迹法结果表明,虫草素处理间充质干细胞可以维持其干性,表现为与对照组相比,虫草素处理组八聚体结合转录因子4(octamerbinding transcription factor 4,OCT4)、Nanog同源框蛋白(nanog homeobox protein,Nanog)表达水平显著上调(P<0.05)。免疫荧光检测间充质干细胞中OCT4的表达量,结果进一步证实了虫草素处理间充质干细胞可维持其干性。此外,与H/R组相比,H/R+间充质干细胞共培养组可明显上调HK-2细胞B细胞淋巴瘤/白血病2(B cell lymphoma/lewkmia-2,BCL2)表达水平(P<0.05),同时下调Bcl-2相关X蛋白(bcl-2 associated x protein,Bax)、剪切型半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(cysteineaspartic acid protease 3,Cleaverd-caspase3)的表达水平(P<0.01),表现为抗凋亡作用;与H/R+间充质干细胞共培养组比较,H/R+虫草素预处理间充质干细胞共培养组的BCL2的蛋白水平明显上升(P<0.05),而Bax、Cleaverd-caspase3蛋白水平均显著降低(P<0.01),进一步抑制了凋亡。为了进一步探索其中的机制,结合网络药理学与生信分析结果发现间充质干细胞治疗AKI与虫草素的共同靶基因有6个,而其中趋化因子配体2[Chemokine(C-C Motif)Ligand 2,CCL2]具有代表性。酶联免疫吸附测定结果表明,H/R+间充质干细胞共培养组相比H/R组,CCL2的表达水平显著下降(P<0.0001),而H/R+虫草素预处理间充质干细胞共培养组较H/R+间充质干细胞共培养CCL2的释放进一步减少了(P<0.0001)。结论虫草素预处理的间充质干细胞可能通过减少CCL2释放保护H/R诱导的肾小管细胞免受细胞凋亡,为干细胞治疗AKI提供理论研究基础。

关键词： 股骨头坏死   骨髓间充质干细胞   髓芯减压   细胞分化  

摘要： 目的探讨干细胞治疗股骨头坏死(ONFH)的疗效与细胞活力的相关性。方法选择2019年1月—2021年6月在西安交通大学附属红会医院就诊的53例ONFH患者为研究对象,所有患者均采用髓芯减压联合自体骨髓间充质干细胞(BM-MSC)治疗,于术前和术后12个月时评估患者的髋关节疼痛、髋关节功能和骨坏死修复率,采用视觉模拟量表(VAS)评估髋关节疼痛程度,采用Harris评分评定髋关节功能,采用三维计算机断层扫描获得骨坏死面积。以术后12个月时骨坏死修复率中位值为阈值,将患者分为修复不良组和修复良好组。观察两组BM-MSC的电解结构、成骨或成软骨诱导后碱性磷酸酶(ALP)水平、染色百分比(茜素红S和甲苯胺蓝)。Pearson相关分析评估骨坏死修复率与Harris评分改善值(ΔHarris)的相关性。结果术后12个月时患者骨坏死百分比、VAS评分均较术前显著降低(均P<0.05),Harris评分较术前显著升高(P<0.05)。术后12个月时骨坏死修复率为23.54%~78.36%,平均修复率为(58.76±14.06)%,中位修复率为57.34%。Pearson相关分析显示,骨坏死修复率与ΔHarris呈正相关(r=0.847,P<0.05)。修复良好组的BM-MSC表现出完整的超微结构(电子密度均匀,线粒体功能正常)。修复不良组BM-MSC细胞质中电子密度降低,有大量空泡和大小不等的自噬体,自噬体含有未消化完全的残余细胞器、细胞质成分和破裂的线粒体。诱导14 d后,修复良好组BM-MSC茜素红S和甲苯胺蓝阳性染色面积均高于修复不良组,ALP水平也高于修复不良组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论髓芯减压联合自体BM-MSC移植治疗早期ONFH的效果与干细胞活力相关,治疗前可采用快速活力检测方法(如台盼蓝染色联合流式细胞术)在24 h内完成干细胞质量评估,有助于预测手术预后和及时调整手术方案。

关键词： 帽状息肉病   英夫利西单克隆抗体   黏液脓血便  

摘要： 帽状息肉病是一种罕见的良性消化道疾病, 具有独特的内镜和病理学特征。该病主要影响直肠和乙状结肠, 临床表现多样, 常导致误诊和治疗延误。本文报道了1例经英夫利西单克隆抗体治疗痊愈的帽状息肉病病例, 通过文献复习, 以期提高临床医师对该病的认识及诊治能力。

关键词： 奶牛   LPS   乳腺上皮细胞   miR-193a-5p   乳腺炎   炎性反应  

摘要： 【目的】本研究通过构建脂多糖(LPS)诱导的奶牛乳腺上皮细胞系(MAC-T)炎性反应模型,旨在探究miR-193a-5p对奶牛乳腺炎的作用。【方法】检测LPS诱导的MAC-T细胞炎性反应模型中miR-193a-5p的表达水平。通过在MAC-T细胞中过表达miR-193a-5p,使用qPCR、CCK-8和EdU等技术,检测炎症因子、增殖和凋亡相关基因的表达变化,以及细胞活力和增殖情况。利用生物信息学方法预测miR-193a-5p的候选靶基因,并通过GO和KEGG分析揭示其潜在的作用机制。【结果】在LPS诱导MAC-T细胞3、6和12 h时,miR-193a-5p表达水平显著下调(P<0.01)。过表达miR-193a-5p后能够促进炎症细胞因子(IL-1β和IL-8)和凋亡基因(CASP9)的表达,抑制增殖基因(BCL2和PCNA)的表达,同时抑制细胞活力和增殖。共预测到44个miR-193a-5p的候选靶基因,这些基因富集在真核生物核糖体发生、黏附连接、NF-κB信号通路、Wnt信号通路和阿尔兹海默症等信号通路,主要参与细胞分化的调控和细胞因子生成的调控等生物学过程。【结论】miR-193a-5p在LPS诱导的MAC-T细胞中表达下调,过表达miR-193a-5p可能通过NF-κB和Wnt信号通路促进炎症反应、抑制增殖并促进凋亡,表明其在奶牛乳腺炎发生中的潜在调控作用。