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关键词： 酶工程   混合式教学   OBE理念   项目驱动教学   问题导向教学  

摘要： 基于OBE(Outcome-based Education)理念,对“蛋白质与酶工程”课程进行了混合式教学模式的探索与实践。针对传统教学模式的不足,我校构建了包括课前线上自主学习、课中线下深度探究和课后线上巩固与拓展的分阶段混合式教学模式。通过引入企业真实案例和科研项目,我校采用项目驱动与问题导向教学方法,激发学生的学习兴趣与创新能力。同时,构建了丰富的线上教学资源,并采用“教师点评+小组互评+学生自评”的多元化过程性评价体系。结果显示,该模式显著提升了学生的学业成绩和学习满意度,有效培养了学生的实践能力与创新能力,为生物工程专业人才的培养奠定了坚实基础。

关键词： 植物蛋白质   氨基酸   生物大分子  

摘要： (上接中国食物与营养2025年第6期封三)2植物蛋白质植物蛋白质是指来源于植物体,由氨基酸通过肽键连接形成的生物大分子,是植物细胞代谢、生长和繁殖的核心物质[3]2.1基本特性植物蛋白具有来源的专属性:仅存在于植物及其衍生物(如种子、叶片、根茎)中,与动物蛋白形成。天然区分。

关键词： 脑缺血再灌注损伤   铁死亡   谷胱甘肽氧化酶4   嗅觉黏膜间充质干细胞   神经元  

摘要： 目的探究嗅觉黏膜间充质干细胞(olfactory mucosa mesenchymal stem cells,OM-MSCs)通过谷胱甘肽氧化酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)改善氧糖剥夺/复氧(oxygen and glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)诱导的神经元细胞铁死亡。方法收集鼻息肉患者的中鼻道正常嗅觉黏膜组织,并提取OM-MSCs,采用流式细胞仪检测人嗅觉黏膜分离培养的原代细胞表面标志物CD34、CD45、CD73、CD90、CD105、CD146,显微镜下观察细胞形态学。将小鼠海马神经元细胞HT22细胞按随机数字表法分为:对照组、OGD/R组、OGD/R+OM-MSCs组、OGD/R+sh-NC组、OGD/R+sh-GPX4组、OGD/R+sh-GPX4+OM-MSCs组。对HT22细胞进行OGD/R处理,并给予OM-MSCs共培养和/或GPX4敲低处理。采用流式细胞仪检测HT22细胞凋亡,CCK-8法检测HT22细胞活力,试剂盒检测HT22细胞中铁死亡相关指标MDA、ROS、GSH、Fe^(2+),qPCR及Western blot检测GPX4表达。结果人嗅觉黏膜分离培养的原代细胞表面CD34及CD45呈阴性,CD73、CD90、CD105、CD146呈阳性,细胞贴壁生长并呈梭状,细胞表面标志物及形态学符合OM-MSCs特征。在HT22细胞方面,对照组、OGD/R组、OGD/R+OM-MSCs组在细胞活力、MDA、ROS、GSH、Fe^(2+)、GPX4方面具有统计学差异(P<0.05);OGD/R组与对照组相比,细胞活力和GSH降低(P<0.05),MDA、ROS、Fe^(2+)升高(P<0.05),GPX4下调(P<0.05);OGD/R+OM-MSCs组与OGD/R组相比(P<0.05),细胞活力和GSH升高(P<0.05),MDA、ROS、Fe^(2+)降低(P<0.05),GPX4上调。OGD/R+sh-GPX4组与OGD/R-sh-NC组相比,细胞活力和GSH降低(P<0.05),MDA、ROS、Fe^(2+)升高(P<0.05),并伴随有GPX4下调(P<0.05),OM-MSCs可逆转以上变化。结论OM-MSCs通过上调GPX4在HT22细胞中的表达抑制OGD/R诱导的HT22细胞铁死亡。

关键词： 肺炎链球菌结合疫苗   多糖类   游离多糖   脱氧胆酸钠酸沉淀   含量测定  

摘要： 目的 建立测定3型肺炎球菌结合物原液中游离多糖含量的方法。方法 3型肺炎球菌结合物原液经脱氧胆酸钠酸沉淀处理后按照蒽酮硫酸法进行游离多糖含量测定。2019年4月至2020年12月使用不同盐酸浓度按照脱氧胆酸钠酸沉淀法处理样品,通过蛋白质去除率和多糖回收率,确定处理游离多糖时使用盐酸的最佳浓度。对建立的方法进行检测限、定量限、准确度、精密度测定。结果 3型肺炎球菌结合物原液游离多糖处理的最佳盐酸浓度为0.20 mol/L。该方法仅沉淀蛋白质,而对游离多糖无影响。3型肺炎球菌结合物原液中游离多糖检测限为0.606 mg/L,定量限为1.837 mg/L。3型肺炎球菌结合物原液准确度回收率为94.0%~102.4%。重复性相对标准偏差(RSD)为3.6%。中间精密度RSD为2.1%。6批3型肺炎球菌结合物原液游离多糖含量测定结果均不高于6.164 mg/L。结论 采用脱氧胆酸钠酸沉淀法处理样品后按照蒽酮硫酸法进行游离多糖含量测定,具有良好的准确度、精密度,且方法稳定、易操作、结果可靠,可用于3型肺炎球菌结合物原液中游离多糖含量测定。

关键词： 明胶   溶胶-凝胶转变   水系电池   凝胶电解质   柔性电池  

摘要： 明胶是动物结缔组织中的胶原蛋白经过适度水解得到的高分子材料,其具有溶胶-凝胶可逆性。本实验借助明胶的溶胶-凝胶可逆性以及果汁中富含的金属离子,制备了明胶果冻电解质材料和系列电解反应的科普简易装置。通过趣味性教学展示和适宜于大众直接参与动手的简易实验,使大众深入了解水果电池的根本原理以及金属离子在明胶内部被固化溶液环境中的运动转移特性,进而认识普通电池工作的内在机制。本科普实验不但将凝胶电解质材料在能量储存和转化方面的巨大优势充分展现在大众面前,促进公众对天然大分子和电解质科学的了解、提高科技创新认知以及激发他们的科学兴趣,具有极高的社会价值。本科普实验所用材料价廉易得且绿色环保,实验过程没有安全隐患,达到用大众熟悉的材料创新性地实现普及科学知识之目的。

关键词： 微小RNA   颞下颌关节   骨关节炎   软骨,关节   miR-429  

摘要： 目的通过提取人滑膜组织中滑膜间充质干细胞来源外泌体(SMSC-Exos),结合转录组测序筛选差异表达微RNA(miRNA),并验证目的miRNA在颞下颌关节骨关节炎(TMJ OA)软骨修复中的关键功能作用。方法人滑膜组织均取自2023年6-12月解放军总医院第一医学中心收治的6例膝关节手术患者,其中骨关节炎组(OA组)3例、对照组3例,均为男性;提取滑膜组织中的SMSC-Exos进行miRNA测序并作差异分析,进一步对差异表达的miRNA靶基因进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,以筛选关键的功能性miRNA,并构建miRNA-靶基因调控网络及靶基因蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络。体外构建白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的兔髁突软骨细胞炎症微环境模型,对照组采用DMEM/F12基础培养基、炎症诱导组采用含10 ng/ml IL-1β的DMEM/F12基础培养基培养。采用RT-qPCR检测在炎症模型中过表达的目标miRNA对软骨表型因子Ⅱ型胶原α1链(Col2a1)、蛋白多糖(Acan),以及炎性因子人金属肽酶含血小板反应蛋白基元5(Adamts5)、环氧合酶-2(Cox-2)mRNA表达的影响。结果(1)成功分离、培养、鉴定后获得SMSCExos;(2)对OA组与对照组患者SMSC-Exos进行miRNA测序,筛选出16个差异表达miRNAs(|log2FC|>2,P<0.05),与对照组比较,OA组7个miRNAs上调,9个miRNAs下调。GO及KEGG分析显示,miR-429的靶基因主要参与发育过程、解剖结构发育、系统发育、细胞发育及分化等生物学过程,并富集于丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)及磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)等炎症相关通路;(3)在兔髁突软骨细胞炎症微环境模型中对miR-429进行功能验证,RTqPCR检测结果显示,过表达miR-429后,炎症诱导组细胞中Col2a1、Acan mRNA表达水平升高(P<0.05),Adamts5、Cox-2 mRNA表达水平降低(P<0.05)。结论对基于人滑膜组织分离并鉴定的SMSC-Exos进行miRNA测序,发现OA患者存在特异性miRNA表达谱,其中miR-429显著下调;功能验证表明过表达miR-429对炎症微环境下的髁突软骨细胞具有修复和抑制炎症的作用。

关键词： 组合酶   羊栖菜多糖   结构表征   降血脂活性   斑马鱼  

摘要： 为了研究果胶酶与中性蛋白酶组合对羊栖菜多糖提取得率的影响及多糖产物的降血脂活性,本研究采用响应面法优化组合酶制备羊栖菜多糖的工艺,使用多糖纯化仪分离纯化多糖产物,通过扫描电子显微镜、傅里叶红外变换光谱及高效液相色谱法分析其理化性质,利用胆酸盐结合能力和抑制胰脂肪酶活性实验评估其体外降血脂能力,并在斑马鱼高脂血症模型中评价其体内降血脂活性。结果表明,组合酶法制备羊栖菜多糖的最佳工艺条件为:果胶酶和中性蛋白酶的比例4:1, pH5.5,温度50℃,加酶量2%,液料比25:1;分离纯化共得到4种羊栖菜多糖组分(SFP),其中SFP-4能有效结合胆酸盐(EC_(50)=0.3524 mg/mL)并抑制胰脂肪酶活性(IC_(50)=0.3568 mg/mL),具有最好降脂活性;进一步研究该组分的理化性质,发现SFP-4由岩藻糖、半乳糖、葡萄糖醛酸等七种单糖组成,具有孔隙结构和硫酸酯多糖的结构特征;在浓度为500μg/mL时能显著(P<0.01)降低斑马鱼体内脂质积累并下调脂肪酸合成相关基因mttp、pparg、fasn的表达,上调脂肪分解相关基因pparab和acaca的表达,与辛伐他汀具有相似降脂作用。因此,组合酶法提高了羊栖菜多糖得率,其多糖产物表现出了较好的降血脂活性,本研究为筛选制备降脂功能羊栖菜多糖的开发利用提供了理论依据。

关键词： 免疫球蛋白G   寡克隆区带   脑脊液   重症脑炎  

摘要： 目的探讨重症脑炎患者脑脊液寡克隆区带(OCB)阳性率及免疫球蛋白G(IgG)表达水平在疾病预后判断的价值。方法收集2016年1月~2020年10月在空军军医大学第一附属医院、西京九八六医院神经内科收治的699例脑炎患者作为研究对象,根据病情严重程度分为轻度(n=360)和重症(n=339)两组。采集入院时患者的脑脊液及血清样本,比较脑脊液细胞数、糖含量、IgG、脑脊液及血清寡克隆区带等指标差异。根据重症脑炎患者出院时的格拉斯哥预后(GOS)评分将患者分为预后良好组(n=259)和预后不良组(n=80),采用多因素Logistic回归分析影响患者预后的因素,分析脑脊液寡克隆区带和脑脊液IgG与重症脑炎患者预后间的相关性。绘制ROC曲线分析脑脊液IgG对预后的预测价值。结果与轻度脑炎患者比较,重症脑炎患者出现发热、肺部感染、癫痫持续状态、机械通气的比例更高,更易并发脑卒中和脑积水,差异具有统计学意义(χ^(2)=5.319~245.179,均P<0.05)。两组相比,脑脊液有核细胞计数、脑脊液氯含量、脑脊液IgG含量与OCB阳性率的差异具有统计学意义(Z=-3.623,-4.875,-3.518,χ^(2)=6.581,均P<0.05)。脑脊液寡克隆区带与脑脊液IgG是重症脑炎患者不良预后的独立危险因素(Waldχ^(2)=7.295,11.179,均P<0.05)。绘制限制性立方样条图后发现,脑脊液IgG与不良预后之间存在线性关系。脑脊液IgG对不良预后预测ROC曲线下面积[AUC(95%)CI]为0.754(0.632~0.876)。结论预后不良的重症脑炎患者脑脊液IgG含量及脑脊液寡克隆区带阳性率均高于预后良好患者,检测这两项指标对重症脑炎患者预后预测有一定参考价值。

关键词： 必需氨基酸   蛋白质   蛋白粉  

摘要： 组成人体蛋白质的氨基酸有20多种,其中9种是人体不能合成的,必须从食物中获取,被称为“必需氨基酸”。

关键词： 山药多糖   纳米硒   结构特征   抗氧化  

摘要： 【目的】探讨山药多糖-纳米硒(YP-SeNPs)复合物的结构特征和体外抗氧化活性。【方法】利用热水浸提法提取,经除杂、二乙氨基乙基纤维素52(DEAE-52)柱层析和透析得到山药多糖(YP),以YP为模版,在抗坏血酸(VC)和亚硒酸钠(Na2SeO3)氧化还原体系中按不同Se/YP质量比(1∶3、1∶1、4∶3)制备YP-SeNPs复合物。通过溶液颜色观察、紫外-可见吸收光谱(UV-vis)扫描、粒径测定,采用透射电子显微镜(TEM)、扫描电子显微镜(SEM)、原子力显微镜(AFM)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)、能量色散X射线(EDX)和X射线衍射(XRD)等多种技术,对复合物结构特性进行表征;通过测定YP-SeNPs复合物对1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)、2,2’-联氮基双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐(ABTS)自由基的清除能力,评价其体外抗氧化活性。【结果】成功构建球形YP-SeNPs复合物,其中包含C、O、Se元素,最佳Se/YP质量比为1∶3,此时粒径最小为(61.67±0.69)nm,两者结合稳定。YP可阻止SeNPs聚沉和团聚,从而提高体系分散性。YP-SeNPs复合物对DPPH、ABTS自由基具有良好的清除能力,最高清除率分别为(96.66±0.79)%、(96.66±1.19)%。【结论】YP-SeNPs复合物具有良好的抗氧化活性,可作为功能性抗氧化剂加以开发利用。