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关键词： 北京鸭   CSRP3   克隆   生物信息学分析   原核表达  

摘要： 为研究CSRP3基因在北京鸭肌肉生长发育过程中的作用,研究使用TA克隆方法扩增了北京鸭CSRP3基因的CDS区序列,测序正确后对其进行生物信息学分析和原核诱导表达,使用SDS-PAGE技术检测其表达情况。结果表明北京鸭CSRP3基因具有大小为591 bp的开放阅读框,共编码196个氨基酸,CSRP3蛋白的总平均亲水系数为-0.537,不稳定指数为34.99,是一种亲水性的稳定蛋白。此外,该蛋白不具备跨膜结构,只有0.003 4的可能具有SP型信号肽,存在2个N-糖基化位点和30个潜在磷酸化位点。原核表达结果显示,CSRP3可在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出约为21 ku的重组蛋白。本研究成功克隆了716 bp长度的CSRP3基因CDS区序列并通过原核表达系统诱导表达出了大小约21 ku的CSRP3重组蛋白,研究结果为后续进一步研究CSRP3基因的功能提供了一定的理论基础。

关键词： 人脐带间充质干细胞   外泌体   保存时间  

摘要： 目的探讨保存时间对人脐带间充质干细胞来源外泌体物理稳定性的影响。方法培养人脐带间充质干细胞并鉴定表面标志物,观察第3代人脐带间充质干细胞的成骨、成脂和成软骨诱导分化能力。分离并制备人脐带间充质干细胞来源外泌体,观察外泌体的形态,检测外泌体的颗粒数、粒径、蛋白含量以及表面标志物的蛋白表达,并评估保存时间对外泌体物理稳定性的影响。结果人脐带间充质干细胞高表达CD90、CD44、CD73和CD105,低表达CD45和人类白细胞抗原-DR。人脐带间充质干细胞在成骨、成脂、成软骨诱导分化后,分别观察到红色的钙结节、红色的圆形脂滴、蓝色和立体的圆球状结构。外泌体的粒径峰值为(121.56±1.27)nm,颗粒数为(2.13±0.12)×10^(11)/mL,蛋白含量为(0.71±0.03)mg/mL。外泌体形态为杯状或茶托形,且具有双层膜结构。外泌体表达肿瘤易感基因101(TSG101)、CD9、CD81和CD63蛋白,不表达钙连蛋白。随着保存时间的延长,外泌体的形态无明显变化,外泌体的粒径和蛋白含量亦无明显变化(P>0.05)。与保存0个月比较,保存5、6个月时外泌体颗粒数、TSG101和CD81蛋白表达减少(P<0.05)。结论保存时间对外泌体形态、粒径、蛋白含量无明显影响,而对颗粒数、CD81和TSG101的表达有明显影响。在进行外泌体研究时,应选择保存时间在5个月以内的外泌体样本。

关键词： 珊瑚   脂质   脂肪酸   生物标志物   虫黄藻  

摘要： 脂类生物标志物来源于前体生物,因其独特的化学稳定性而具有广泛的古生物和古环境应用前景。近年来,随着珊瑚脂类物质的提取与检测技术的发展,脂类化合物在珊瑚研究领域发挥着越来越重要的作用。为了探究珊瑚脂类化合物的多样性以及对环境的指示作用,文章重点介绍了珊瑚脂质含量和组成在属种和时空上的差异性,论述了珊瑚脂类化合物的种类和分布特征,认为珊瑚脂质含量及组成主要受珊瑚生长发育阶段、水深、光照和营养模式等生境要素的影响。此外,脂肪酸对珊瑚生态系统物质来源和交换过程、营养模式以及珊瑚白化等具有重要的指示意义。文章还分析了当前珊瑚研究中存在的主要问题,以及脂类化合物在珊瑚共生微生物和珊瑚骨骼有机质研究中的前景,未来不仅要丰富脂类化合物分析测试类目,还亟需开发并完善珊瑚组织分离技术,进而提升脂类生物标志物在珊瑚科学研究中的应用。

关键词： 羊肚菌菌渣   肉鸡   生长性能   氨基酸   蛋白质代谢  

摘要： 文章旨在探究发酵羊肚菌菌渣对肉仔鸡生长性能、肌肉氨基酸组成和蛋白质代谢的影响。试验将960只1日龄AA肉鸡随机分为4组,每组8个重复,每个重复30羽,分别饲喂发酵羊肚菌菌渣(Fermented morel mushroom substrate,FMS)添加量为0%、1.5%、3%和6%的试验日粮,试验为期42 d。结果表明,3%的FMS组末重比0%的FMS组显著增加4.03%(P<0.05),日增重比0%的FMS组显著增加4.14%(P<0.05),料重比显著减少3.64%(P<0.05)。1.5%和3%的FMS组肌肉蛋氨酸、亮氨酸、甘氨酸、丙氨酸含量,3%的FMS组肌肉苏氨酸含量,6%的FMS组肌肉亮氨酸、谷氨酸含量较0%的FMS组显著提高(P<0.05)。3%的FMS组血清生长激素(GH)、胰岛素(INS),腿肌碱性磷酸酶(AKP)、生长激素(GH),肝脏胰岛素(INS)含量,1.5%的FMS组血清INS,腿肌AKP,肝脏INS含量,6%的FMS组肝脏INS比0%的FMS组显著提高(P<0.05)。综上所述,在本试验条件下,3%发酵羊肚菌菌渣饲料能改善肉鸡蛋白质代谢和肌肉氨基酸组成,并提高其生长性能。

关键词： 粕类植物蛋白   固态发酵   氨基酸/肽   生物活性   护肤   修复  

摘要： 以链霉菌SCUT-3-3940为菌株进行固态发酵,得到豆粕、棉籽粕和菜籽粕三种粕类植物蛋白发酵后的氨基酸/肽(SAP、CAP、RAP),通过体外法与在体法系统地比较研究其生物活性和护肤功效。结果显示:三批试样稳定性好,不具有刺激性,小鼠皮肤对SAP中的氨基酸和多肽有很好的吸收效果。三种氨基酸/肽(SAP、CAP、RAP,添加量均为480µg/mL)在全血清添加培养基中的HSF细胞生长有显著促进作用,细胞生长率分别提高了53.4%,30.1%,30.9%;同剂量添加,HSF细胞的划痕修复面积在24 h比对照组分别提高了98.4%,99.0%,54.7%;三种原料能有效减少紫外损伤造成的ROS产生,对光老化细胞有保护作用。人体试验表明,在640µg/mL添加量下,受试者使用样品组2 h后的皮肤角质层含水量(MMV)显著高于基质空白组(P<0.05),其中SAP组的MMV值增加了21.58%;通过低敏胶带进行皮肤受损造模,受试者使用同添加量的精华乳3 h后的皮肤颜色a值和皮肤经皮水分流失量(TEWL)均明显低于基质空白组,其中SAP组受试者的a值降低了21.46%,TEWL值减少40.84%。研究表明,SAP、CAP、RAP具有多种生物活性和良好的保湿、抗光老化和皮肤屏障修复等护肤功效,为粕类副产物实现高值化利用提供新的方向和理论参考。

关键词： 悬浮流变改性剂   细菌纤维素微凝胶   羟丙基甲基纤维素   流变行为   稳定悬浮  

摘要： 在现代日化工业中,为实现“一洗多效”,越来越多以微胶囊为代表的功能性固体颗粒被添加进洗涤剂中,但是由于颗粒与基质之间的密度差,颗粒在洗涤剂中难以均匀悬浮分散,大大阻碍了固体颗粒功能性的发挥。因此,本研究以羟丙基甲基纤维素(HPMC)与TEMPO氧化细菌纤维素微凝胶(T-BC-microgel)构建了复合二元流变改性体系,来稳定悬浮香精油微胶囊。本研究系统研究了在不同的基质中不同浓度的悬浮剂对香精油微胶囊和气泡悬浮稳定性的影响。结果显示,HPMC/T-BC-microgel复合体系显著提高了香精油微胶囊和气泡在市售洗衣液和水中的悬浮稳定性,当悬浮剂质量分数为0.048%时,能够在不改变洗衣液原有流变特性的情况下,实现香精油微胶囊长达240天的稳定悬浮。另外,研究发现悬浮剂与表面活性剂也存在一定的相互作用增强了悬浮效果。基于此,本研究为开发高效、稳定、绿色悬浮体系提供了新的路径,具有一定的工业应用价值。

关键词： 鸢尾素   单磷酸腺苷活化蛋白激酶/Runt相关转录因子2信号通路   骨髓间充质干细胞   成骨分化  

摘要： 目的探讨鸢尾素(irisin)调控小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的作用及可能机制。方法使用不同质量浓度(0、50、100 ng·mL^(-1)和500 ng·mL^(-1))的irisin干预小鼠BMSCs,通过细胞计数试剂盒-8(cell-counting-kit-8,CCK-8)实验和聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)实验确定irisin最佳干预浓度。将BMSCs分为对照、irisin、单磷酸腺苷活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK)抑制剂和irisin+AMPK抑制剂组,成骨分化结束后,各组细胞进行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色、ALP酶活性检测、茜素红S染色以及Western blot检测AMPK、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(aphosphorylated AMP-activated protein kinase,p-AMPK)、Runt相关转录因子2(runt related transcription factor 2,Runx2和锌指转录因子osterix(Osx)蛋白表达。结果irisin最佳干预浓度为100 ng·mL^(-1)。成骨分化后,与对照组相比,irisin组ALP染色、ALP酶活性和钙沉积显著增强,p-AMPK/AMPK蛋白比值、Runx2和Osx的蛋白表达显著升高(均P<0.05);AMPK抑制剂组ALP染色、ALP酶活性和钙沉积显著降低,p-AMPK/AMPK蛋白比值、Runx2和Osx的蛋白表达显著降低(均P<0.05)。与irisin组相比,irisin+AMPK抑制剂组ALP染色、ALP酶活性和钙沉积显著降低,p-AMPK/AMPK蛋白比值、Runx2和Osx的蛋白表达显著降低(均P<0.05)。与AMPK抑制剂组相比,irisin+AMPK抑制剂组ALP染色、ALP酶活性和钙沉积显著增强,p-AMPK/AMPK蛋白比值、Runx2和Osx蛋白表达显著升高(均P<0.05)。结论irisin可能通过AMPK/Runx2通路促进了BMSCs成骨分化。

关键词： 细胞游离DNA   脓毒症   预后预测   生物标志物   临床应用  

摘要： 脓毒症是一种由感染引发的全身性炎症反应综合征,其早期识别与精准预后评估对改善患者预后至关重要。细胞游离脱氧核糖核酸(cell-free DNA,cfDNA)作为新兴生物标志物,近年来在脓毒症领域参与疾病的发生、发展过程,并在预后评估中具有潜在价值。本研究系统阐述cfDNA的生成机制(包括细胞凋亡、坏死及免疫反应介导的释放途径)、临床应用前景(如早期识别、严重程度评估、病死率预测)及其与传统评分系统和生物标志物的互补性。通过分析cfDNA水平与脓毒症患者器官衰竭程度、治疗反应及长期预后的关联,以期能够为临床实践提供参考。

关键词： 不饱和脂肪酸   蛋白质   寒露   大豆   三鲜豆浆锅  

摘要： 寒露是大豆丰收的时节。寒露时节推荐美食为三鲜豆浆锅。大豆及其制品种类多样、营养丰富,可提供优质蛋白质、不饱和脂肪酸、钙、钾、维生素E等,适合所有人群食用。建议成年人平均每天摄入15 g~25 g大豆或相当量的大豆制品,目前我国2/3以上的居民未达到推荐摄入量,应适当增加。

关键词： 电针   转录组学   抑郁症   脂多糖   炎症   小鼠  

摘要： 目的观察电针对脂多糖诱导抑郁样小鼠行为学的影响,采用转录组学技术探讨电针抗抑郁效应的潜在分子机制。方法将36只雄性SPF级C57BL/6J小鼠采用随机数字表法分为正常组、模型组和电针组,每组各12只。电针“百会”“印堂”,每日1次,每次持续20 min。电针7 d后,模型组和电针组腹腔注射1.5 mg/kg脂多糖,正常组注射等体积生理盐水。通过旷场实验和悬尾实验评价小鼠抑郁样行为;苏木素-伊红染色观察小鼠海马组织病理形态;转录组学技术筛选海马差异基因并进行生物信息学分析;实时荧光定量PCR检测海马造血细胞激酶(Hck)、黏附G蛋白偶联受体E1(Adgre1)、Toll样受体2(Tlr2)、Gm49037 mRNA表达。结果与正常组相比,模型组小鼠旷场实验总运动距离、中心区域运动距离和中心区域停留时间减少(P<0.01),悬尾不动时间增加(P<0.05);海马神经细胞排列松散,部分神经细胞边界模糊。与模型组相比,电针组小鼠旷场实验总运动距离、中心区域运动距离和中心区域停留时间增加(P<0.05),悬尾不动时间减少(P<0.01);海马神经细胞排列较为紧密,形态结构较清晰。转录组学分析显示,与正常组相比,模型组共筛选出779个差异基因;与模型组相比,电针组筛选得到172个差异基因。其中,19个基因在模型组表达上调而在电针组下调,10个基因在模型组表达下调而在电针组上调。GO功能分析显示差异基因主要功能集中在免疫反应、Toll受体功能、细胞表面受体信号通路、白细胞介素-10的产生等方面;KEGG通路分析显示差异基因主要富集在与炎性反应相关的通路,如Toll样受体信号通路和肿瘤坏死因子信号通路等。与正常组相比,模型组Hck、Adgre1和Tlr2 mRNA表达升高(P<0.01),Gm49037 mRNA表达有降低趋势但差异无统计学意义(P>0.05);与模型组相比,电针组Hck、Adgre1和Tlr2 mRNA表达降低(P<0.05),Gm49037 mRNA表达有上升趋势但差异无统计学意义(P>0.05)。结论电针可改善脂多糖诱导小鼠的抑郁样行为、减轻海马病理损伤,其作用机制可能与调控海马炎性通路有关,Hck、Adgre1和Tlr2基因可能是其作用的潜在靶点。