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关键词： 间充质干细胞   转铁蛋白   青光眼   视网膜神经节细胞  

摘要： 目的探讨间充质干细胞(MSCs)负载转铁蛋白(Tf)对实验性青光眼大鼠的保护作用及其分子机制。方法2023年3月至2024年6月间40只SD大鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组、MSCs组和MSCs-Tf组,每组10只,模型组、MSCs组和MSCs-Tf组大鼠采用激光光凝大鼠房角诱导高眼压,持续1周建立青光眼大鼠模型,对照组大鼠不处理。建模成功后,MSCs组和MSCs-Tf组大鼠经玻璃体腔注射对照组和模型大鼠MSCs或MSCs-Tf(1×106个/眼)。模型组和对照组大鼠注射等体积生理盐水。连续干预7 d,4周后进行观察。采用免疫检测MSCs在视网膜的定植;采用眼压仪测定4组大鼠眼压变化;采用荧光金标记法检测4组大鼠视网膜神经节细胞数量;苏木精-伊红(HE)染色分析4组大鼠视网膜内丛状层、内核层、外核层厚度;采用试剂盒检测4组大鼠测视网膜超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒测定炎性因子水平;采用蛋白质免疫印迹检测转铁蛋白受体(TfR)和铁蛋白(Ferritin)表达。组间计量数据比较采用单因素方差分析。结果MSCs组和MSCs-Tf组大鼠视网膜组织中MSCs定植率[(47.91±12.43)%、(52.18±8.73)%]明显高于模型组[(0.00±0.00)%],差异有统计学意义(t=12.150、15.361,P<0.05)。MSCs-Tf组大鼠视网膜内丛状层和内核层厚度[(46.57±5.82)、(27.38±4.14)μm]明显高于MSCs组[(32.77±4.02)、(22.47±2.29)μm],差异有统计学意义(t=6.173、3.275,P<0.05)。MSCs-Tf组视网膜神经节细胞比例[(51.78±7.11)%]明显高于MSCs组[(37.28±4.01)%],差异有统计学意义(t=5.617,P<0.05)。MSCs-Tf组大鼠视网膜组织SOD和GSH-Px活性[(71.74±6.08)、(615.44±74.61)U/L]明显高于MSCs组[(56.27±5.37)、(459.45±63.78)U/L],差异有统计学意义(t=6.029、5.026,P<0.05)。MSCs-Tf组大鼠视网膜肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-1β水平[(63.26±7.83)、(117.76±25.88)pmol/L]明显低于MSCs组[(102.48±9.23)、(253.60±34.41)pmol/L],差异有统计学意义(t=10.250、9.977,P<0.05)。MSCs-Tf组大鼠视网膜组织转铁蛋白受体和转铁蛋白表达水平(0.86±0.06、1.71±0.17)明显高于MSCs组大鼠(0.62±0.08、0.79±0.07),差异有统计学意义(t=8.161、16.110,P<0.04)。结论MSCs负载转铁蛋白提高视网膜神经节细胞存活率,减少视神经萎缩,主要通过调节铁代谢和抗氧化途径发挥协同保护作用。

关键词： 桑白皮-地骨皮药对   急性肺炎   炎症   氧化应激   机制  

摘要： 目的 探讨桑白皮-地骨皮药对(MCLC)对脂多糖(LPS)诱导急性肺炎小鼠炎症和氧化应激的影响及作用机制。方法 选取BALB/c小鼠48只随机分为对照组,模型组,阳性药组,MCLC高、中、低剂量组,每组8只。除对照组外其余各组采用吸入LPS法构建急性肺炎小鼠模型。用药5 d后用HE染色法评估肺组织病理形态学变化;称重法测定肺指数;ELISA法检测BALF中TNF-ɑ、IL-6、IL-1β水平;试剂盒法测定血清中MDA、SOD水平;Western blot法测定肺组织中TLR4、MyD88、NF-κB p65、Keap1、Nrf2、HO-1表达。结果 与对照组比较,模型组肺组织病理切片结果明显改变,病理评分升高(P<0.01),经MCLC干预后上述病理改变明显改善,MCLC高、中剂量组肺损伤积分明显降低(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,模型组肺指数升高(P<0.01),经MCLC干预后,MCLC高剂量组肺指数明显下降(P<0.01)。与对照组比较,模型组TNF-ɑ、IL-6、IL-1β、MDA升高,SOD下降(P<0.01),经MCLC干预后,MCLC高、中剂量组显著降低TNF-ɑ、IL-6、IL-1β和MDA,升高SOD(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,模型组TLR4、MyD88、NF-κB p65、Keap1表达升高,Nrf2、HO-1表达下降(P<0.01),经MCLC干预后,MCLC高剂量组TLR4、MyD88、NF-κB p65和Keap1明显下降,Nrf2、HO-1明显上升(P<0.01),MCLC中剂量组TLR4、Keap1明显下降,HO-1明显上升(P<0.05或P<0.01)。结论 MCLC对LPS诱导的急性肺炎小鼠炎症和氧化应激有改善作用,此作用机制可能与其抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路减轻炎症反应和激活Keap1/Nrf2/HO-1通路抑制氧化应激有关。

关键词： 腹泻型肠易激综合征   安肠汤   干细胞因子   酪氨酸激酶受体   肿瘤坏死因子α   大鼠   匹维溴铵   影响  

摘要： 目的:观察安肠汤对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠干细胞因子/酪氨酸激酶受体(SCF/C-kit)通路的影响。方法:将40只雄性无特定病原体(SPF)级斯泼累格·多雷(SD)大鼠随机平均分为正常组、模型组、安肠汤组、西药组;除正常组外,余组别均采用辣素灌胃联合束缚-夹尾应激方式建立IBS-D模型,造模成功后西药组给予匹维溴铵片灌胃,安肠汤组给予安肠汤灌胃;应用苏木精-伊红(HE)染色法检测病理学表现,并采用蛋白质印迹法检测各组大鼠结肠组织中干细胞因子(SCF)、酪氨酸激酶受体(C-kit)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白的表达水平,逆转录PCR法(RT-PCR)检测各组大鼠结肠组织中SCF、C-kit、TNF-αmRNA的表达水平,应用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测各组大鼠血清TNF-α水平。结果:各组大鼠结肠组织HE染色在镜下观察,正常组大鼠结肠黏膜未见异常病理改变;模型组结肠黏膜局部可见少量炎症细胞浸润;西药组、安肠汤组大鼠结肠黏膜偶见炎症细胞浸润。与正常组比较,模型组大鼠结肠组织中SCF、C-kit蛋白及mRNA的表达水平显著下调(P<0.01),结肠组织中TNF-α蛋白、mRNA及血清TNF-α含量的表达水平显著上调(P<0.01);西药组及安肠汤组、大鼠结肠组织中SCF、C-kit蛋白及mRNA表达水平上调(P<0.01或P<0.05),结肠组织中TNF-α蛋白、mRNA及血清TNF-α含量的表达水平显著下调(P<0.01)。结论:安肠汤能够改善IBS-D模型大鼠内脏高敏感性,其机制可能与通过调节SCF/C-kit信号通路,抑制TNF-α表达有关。

关键词： 氨基酸   果酒   超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱   柑橘酒   主成分分析  

摘要： 利用超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱(ultra-performance liquid chromatography-tandem Q/Orbitrapelectrostatic field track trap high resolution mass spectrometry,UPLC-Q/Orbitrap HRMS)建立了发酵型果酒中22种氨基酸的快速定量分析方法,并对六款市售果酒中的氨基酸含量进行分析。样品经稀释,过膜后上机检测,采用Acclaim^(TM)HILIC-10 HPLC色谱柱(150 mm×2.1 mm,3.0μm)分离,以90%乙腈水溶液(含0.1%(v/v)甲酸和10 mM乙酸铵)-水(含0.1%甲酸和10 mM乙酸铵)作为流动相梯度洗脱;质谱使用可加热电喷雾电离,在全扫描/数据依赖的二级扫描(full scan data-dependent MS/MS acquisition mode,Full MS/dd-MS~2)模式下使用正离子扫描,以母离子提取色谱峰面积进行定量,以保留时间和二级碎片离子质谱图进行定性确证。结果表明,22种氨基酸的线性关系良好(R~2>0.99),在置信水平0.99下计算出方法检出限为0.009~0.274μmol/L,加标回收率为81.4%~118%,相对标准偏差(RSD,n=6)为0.420%~2.00%;对市售六款果酒中22种氨基酸含量进行测定,方差分析结果显示,六款果酒中氨基酸总量具有显著差异(P<0.05),主成分分析(principal component analysis,PCA)表明,六款果酒中柑橘类发酵型果酒与21种氨基酸呈正相关性,且不同品牌柑橘酒中氨基酸含量存在差异。该方法前处理简单、精密度高、准确性好,适用于果酒中氨基酸的快速定量,能为果酒功能性研究提供数据支撑。

关键词： 外泌体   骨性关节炎   间充质干细胞   干细胞   软骨修复   软骨再生   软骨细胞   RNA   工程化外泌体  

摘要： 背景:外泌体可在骨性关节炎患者滑液和血浆中检测出来,其水平随着骨性关节炎的进展而不断变化,并且可以对骨性关节炎的局部炎症、软骨钙化和关节退化起缓解作用。目的:旨在全面了解不同干细胞来源外泌体在骨性关节炎诊疗中的作用和机制,并提出了外泌体治疗骨性关节炎的前景和挑战。方法:检索PubMed及中国知网数据库,英文检索词为“exosomes,osteoarthritis,mesenchymal stem cells,stem cells”,中文检索词为“外泌体,骨性关节炎,间充质干细胞,干细胞”,对2003年10月至2023年10月发表的文献进行检索,最终纳入99篇文献进行综述。结果与结论:外泌体的出现给骨性关节炎的诊断和治疗带来了希望。外泌体内含RNA、蛋白质及脂类的差异能够作为骨性关节炎的生物标志物用于诊断。同时,来自不同干细胞的外泌体均能够有效保护软骨细胞、缓解炎症、维持软骨基质代谢以及调节血管生成和软骨下骨重塑,表现出治疗骨性关节炎的优秀潜力。工程化外泌体则突破传统局限,通过调节特定非编码RNA表达增强治疗特异性与效率,为骨性关节炎的治疗提供新策略。

关键词： 生物学功能   蛋白质   空间结构   生命活动  

摘要： 蛋白质,作为生命体的主要构成成分,是几乎所有生命活动的执行者.它们宛如微观世界的建筑师与工程师,构建着生命的宏伟大厦,驱动着每一个生物过程.每个蛋白质分子都拥有特定的空间结构,这一结构由其一级序列决定,并与其生物学功能紧密相关.蛋白质结构与功能之间的关系,一直是科学家们不懈探索的分子生物学核心问题之一.如今,随着人工智能技术的划时代变革,AlphaFold等工具已经能够从蛋白质分子的一级序列高精度预测其空间结构,为生命科学研究带来了革命性的变化.然而,这些人工智能(artificial intelligence,AI)预测的背后,是不同分子生物学领域之间的协作与相互借鉴,是不断更新的科学技术,更是全球几代结构生物学家近一个世纪心血与智慧的结晶.

关键词： 抗生素检测   核酸传感器   生物传感器  

摘要： 随着抗生素滥用问题的日益严重,发展快速、准确、灵敏的抗生素检测方法至关重要。核酸传感器作为一种新兴的生物传感器,因其高选择性、高灵敏度及实时监测能力,在抗生素检测领域展现出强大的应用潜力。该文综述了基于核酸传感器的抗生素检测研究进展,包括比色、光学、电化学等核酸传感器,以期为未来基于核酸传感器的新型抗生素检测技术的研究开发提供参考。

关键词： 维生素   氨基酸   乡村振兴   蛋白质   高分子多糖  

摘要： 食用菌被称作健康食品,食用菌中含有大量的蛋白质、氨基酸、维生素及钙、锌、铁等矿质元素及一些微量元素,具有很高的食用价值,同时食用菌中的高分子多糖、β-葡萄糖等还具有促进人体健康的作用。且食用菌在生产过程中具有不与农争时、不与粮争地,投资少,见效快的特点。还能将农作物废弃的秸秆、棉籽壳等作为食用菌栽培的基质材料,实现农作物副产品的再利用价值。食用菌产业作为现代农业发展的重要产业,在促进农村经济发展中起着重要的作用,对乡村战略的实施有着重要的意义。

关键词： 教材比较   实验教学   实验设计  

摘要： 本文从编排位置、材料用具、实验内容与设计以及对学生生物学学科核心素养培养等方面,对2019年人教版与2020年沪科版教材中的“检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质”实验进行较为全面的比较与分析,探讨两个版本教材在实验方面的编排特色,旨在为高中生物学实验的教学实施提供建议和参考。

关键词： 低蛋白质   氨基酸   蛋鸡   生产性能   蛋品质   养分利用  

摘要： 本试验旨在通过研究饲粮低蛋白质水平下不同氨基酸平衡模式对蛋鸡生产性能、蛋品质和养分消化利用的影响,探究低蛋白质平衡氨基酸饲粮在蛋鸡养殖中的应用效果。选取384只33周龄的健康海兰灰蛋鸡,随机分为4个组,每组8个重复,每个重复12只。其中,对照组(CON组)饲粮粗蛋白质(CP)含量为15.91%并平衡4种氨基酸[赖氨酸(Lys)+蛋氨酸(Met)+苏氨酸(Thr)+色氨酸(Trp)],氨基酸平衡模式为可消化赖氨酸(DLys)∶可消化蛋氨酸(DMet)∶可消化苏氨酸(DThr)∶可消化色氨酸(DTrp)=100∶45∶73∶21(DLys含量为0.75%);低蛋白质1组(LPF组)饲粮CP含量为14.53%并平衡4种氨基酸(Lys+Met+Thr+Trp),氨基酸平衡模式为DLys∶DMet∶DThr∶DTrp=100∶45∶73∶21(DLys含量为0.75%);低蛋白质2组(LPS组)饲粮CP含量为14.58%并平衡8种氨基酸,氨基酸平衡模式为DLys∶DMet∶DThr∶DTrp∶可消化精氨酸(DArg)∶可消化亮氨酸(DLeu)∶可消化异亮氨酸(DIle)∶可消化缬氨酸(DVal)=100∶45∶73∶21∶126∶177∶97∶90(DLys含量为0.75%);低蛋白质3组(LPH组)饲粮CP含量为13.05%并平衡8种氨基酸,氨基酸平衡模式为DLys∶DMet∶DThr∶DTrp∶DArg∶DLeu∶DIle∶DVal=100∶45∶73∶21∶126∶177∶97∶90(DLys含量为0.75%)。预试期为2周,正试期为20周。结果显示:1)与LPF组相比,LPS组的平均蛋重显著提高(P<0.05);与LPS组相比,LPH组的产蛋率和产蛋量显著降低(P<0.05),料蛋比显著增加(P<0.05)。2)与LPF组相比,LPS组Ile的表观回肠消化率显著增加(P<0.05);与LPS组相比,LPH组Thr、Val、Met、Ile、Leu的表观回肠消化率显著降低(P<0.05)。3)与LPS组相比,LPH组血清游离Val、Ile、Leu、苯丙氨酸(Phe)、Lys、必需氨基酸(EAA)含量显著增加(P<0.05)。4)与CON组相比,LPF组空肠黏膜胰蛋白酶活性显著降低(P<0.05);与LPF组相比,LPS组空肠黏膜胰蛋白酶活性显著增加(P<0.05);与LPS组相比,LPH组空肠黏膜糜蛋白酶和胰蛋白酶活性显著降低(P<0.05)。综上所述,饲粮CP含量由15.91%降为14.58%时,平衡4种氨基酸即可维持蛋鸡的生产性能,平衡8种氨基酸则可改善蛋鸡的肠道消化吸收功能,从而提高生产性能;饲粮CP含量降到13.05%时,即使平衡8种氨基酸,仍会降低蛋鸡对养分的消化利用,从而降低生产性能。