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关键词： 蛇菰多糖   糖尿病肾病   肾损伤   肾纤维化   炎症   TLR4/MyD88/NF-κB信号通路  

摘要： 目的研究蛇菰多糖(balanophora polysaccharide,BPS)对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)小鼠的肾脏保护作用,并探讨其相关机制。方法采用高脂饮食联合链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)腹腔注射诱导DN小鼠模型,检测空腹血糖≥11.1 mmol·L^(-1),同时伴有多饮、多食、多尿和体质量减轻等糖尿病症状,判定造模成功,予以BPS干预。检测各组小鼠体质量及空腹血糖;全自动生化分析仪检测血肌酐(serum creatinine,SCr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、24 h尿蛋白(urinary protein at 24 h,24 h UP)、甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)含量;ELISA检测血清中促炎因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;HE、Masson染色观察肾组织病理形态;Western blot法检测肾组织Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)、核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)蛋白表达情况。结果与Model组相比,经BPS干预后,各药物组小鼠体质量及空腹血糖明显降低(P<0.01或P<0.05);肾功能SCr、BUN、24 h UP及肝功能TC、TG、ALT含量明显降低(P<0.01或P<0.05);促炎因子TNF-α、IL-6水平明显降低(P<0.01或P<0.05);肾组织损伤及纤维化减轻;TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达水平明显下降(P<0.01或P<0.05)。结论BPS对DN小鼠肾脏具有保护作用,能够降低DN小鼠血糖水平,改善肝肾功能,减轻肾组织损伤和肾纤维化程度,减少炎症反应,其机制可能与调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路有关。

关键词： 瓜蒌   产地差异   糖类   氨基酸  

摘要： 为探究不同产地瓜蒌的品质差异,选取河北石家庄“西-2”、安徽合肥“皖蒌7-8号”、湖南益阳“皖蒌7-8号”3个代表性样品,采用UPLC-MS/MS和HPLC方法,检测果糖、葡萄糖、总氨基酸、总核苷及木犀草苷5种成分含量。结果表明,河北石家庄产“西-2”瓜蒌中果糖(19.23%)、葡萄糖(16.87%)、总氨基酸(135.84 mg/g)及总核苷(1.18 mg/g)含量均显著高于其他产地(P<0.05),木犀草苷含量为7.78 mg/g;安徽合肥样品糖类含量较高,但氨基酸与核苷类成分较低;湖南益阳样品木犀草苷含量最高(0.5 mg/g)。研究结果可为瓜蒌临床用药及产地优选提供参考。

关键词： 间充质干细胞   工程化外泌体   外泌体修饰   口腔医学   牙髓再生   牙周再生   骨再生   口腔癌   组织再生  

摘要： 近年来,间充质干细胞来源的外泌体(mesenchymal stem cell-derived exosomes,MSC-EXO)在口腔医学领域受到了越来越多的关注,成为生物医学研究的前沿热点。本文就间充质干细胞来源外泌体的工程化及其在口腔医学领域的应用进行综述,以期对口腔医学的发展提供新的思路。外泌体是一种由细胞分泌的纳米级膜性囊泡,内含多种蛋白质、RNAs、脂质和其他生物分子。它们通过循环系统运输,能够与其他细胞相互作用,调控其生物学行为,参与多种生理和病理过程。在口腔疾病治疗方面,外泌体因其天然的生物活性和多功能性,展现出巨大的潜力。然而研究发现,单纯依赖天然外泌体的功能可能无法完全满足复杂的临床需求。为此,工程化外泌体的概念应运而生。工程化外泌体通过生物工程技术对外泌体进行改造,可以增强其靶向性,使其能够更加精准地到达病灶部位。同时,工程化外泌体还能够通过表面修饰或内部装载,携带特定的治疗性分子,如药物、基因编辑工具或信号分子,从而提高治疗效果。此外,这种工程化处理还可以赋予外泌体更强的稳定性,使其在体内循环时能够更好地抵抗免疫系统的清除,延长其半衰期,提高治疗的有效性。尽管工程化外泌体在口腔医学等领域引起了广泛关注,但当前其应用仍主要停留在基础研究阶段。为了推动工程化外泌体进入临床应用阶段,需要提供更充分的生物相容性证据,明确其治疗作用及机制。

关键词： 罗汉果   干燥方法   多糖   自由基   抗氧化  

摘要： 为探究干燥方法对罗汉果多糖(Siraitia grosvenorii polysaccharides,SGPs)结构和抗氧化活性的影响,该文采用水提醇沉法,分别从新鲜及热风干燥、真空干燥和微波干燥的罗汉果中提取分离到多糖F-SGP、H-SGP、V-SGP和M-SGP。通过高效液相色谱、紫外光谱、傅里叶红外光谱、核磁共振、电镜扫描、刚果红实验等对多糖的单糖组成、分子质量、微观结构等理化性质进行分析,并通过自由基清除实验考察各多糖的抗氧化活性。结果表明,4个罗汉果多糖均由甘露糖(Man)、鼠李糖(Rha)、葡萄糖醛酸(GluA)、半乳糖醛酸(GalA)、葡萄糖(Glu)、半乳糖(Gal)和阿拉伯糖(Ara)构成,为低酯化的同型半乳糖醛酸聚糖(homogalacturonan,HG)型果胶多糖,但单糖比例、分子质量分布及微观结构都有明显差异。其中,H-SGP提取率最高,糖醛酸含量最低,对DPPH自由基、ABTS阳离子自由基和羟自由基的清除能力也最强,EC 50分别为1.19、1.95、0.43 mg/mL。该研究结果表明,罗汉果的干燥方法会显著影响其多糖的结构和抗氧化活性,可为罗汉果干燥加工和功能产品开发提供参考。

关键词： 超声   双水相   茉莉红茶   多糖   优化   抗氧化活性  

摘要： 以茉莉红茶多糖提取率为评价指标,在单因素实验的基础上,采用响应面法优化了茉莉红茶多糖的超声辅助双水相提取工艺,利用红外光谱表征了提取多糖的化学结构,并通过DPPH自由基、羟基自由基清除实验评价了其抗氧化活性。结果表明,在超声温度为72℃、硫酸铵浓度为0.45g·mL^(-1)、超声时间为40min、液料比为29∶1(mL∶g)的最佳条件下,茉莉红茶多糖提取率为47.09mg·g^(-1),与预测值(47.26mg·g^(-1))的相对误差仅0.36%;红外光谱分析确证提取多糖具有多糖的特征吸收峰,进一步证实其多糖结构;茉莉红茶多糖具有较高的抗氧化活性,其对DPPH自由基、羟基自由基的清除率均随浓度增加逐渐升高。茉莉红茶多糖可作为天然抗氧化剂,在食品、保健品等领域具有潜在应用价值。

关键词： 多糖   芦荟   提取方法  

摘要： 芦荟多糖的提取方法会影响多糖得率、分子量和化学结构等,选择合适的提取方法对芦荟多糖的开发与应用发挥至关重要的作用。本文综述了芦荟多糖的提取方法,主要包括溶剂提取法、水提醇沉法、酸辅助提取法、微波辅助提取法、超声辅助提取法、酶解提取法、超声波辅助复合酶法以及超临界CO_(2)提取法等,并对进一步研究提出了展望。

关键词： 千金藤   O-甲基转移酶   苄基异喹啉生物碱   原核表达   功能表征  

摘要： 目的克隆千金藤中SjOMT31基因,并对其进行生物信息学分析及体外酶活表征来探讨其功能。方法通过PCR扩增获得SjOMT31的全长序列,并利用生物信息学分析蛋白结构。构建PET-30a-SjOMT31原核表达载体,并将其转入BL21(DE3)大肠杆菌中进行诱导表达。蛋白纯化后进行体外酶活反应,对其功能进行表征。结果从千金藤中扩增得到SjOMT31全长序列,生信分析发现SjOMT31为稳定亲水性蛋白,无跨膜结构域和信号肽,属于膜外蛋白。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)结果分析显示,利用原核表达系统成功诱导获得可溶性SjOMT31蛋白,体外酶促反应检测结果表明,SjOMT31能够催化(S)-去甲乌药碱C6、(S)-乌药碱C7和(S)-金黄紫堇碱及四氢非洲防己碱C2位羟基甲基化。结论成功克隆SjOMT31基因,属于膜外蛋白;同时在大肠杆菌中实现了SjOMT31的异源表达,体外酶功能表征发现SjOMT31能催化苄基异喹啉类生物碱C6、C7和原小檗碱C2位羟基发生甲基化,为其在生物碱代谢中的作用提供了重要依据。

关键词： miR-17-5p   间充质干细胞   成骨分化   颅缝处颅骨的间充质干细胞  

摘要： 目的:探究miR-17-5p对颅缝处颅骨的间充质干细胞(SuSCs)成骨分化的调节作用,并进一步揭示其可能的作用机制。方法:(1)提取并培养SD大鼠SuSCs,使用成骨诱导液诱导后,利用碱性磷酸酶(ALP)染色、茜素红染色、RT-qPCR来鉴定其成骨能力,再利用流式细胞术鉴定所提取SuSCs的纯度。(2)构建miR-17-5p的过表达和干扰载体并转染至SuSCs细胞,利用ALP染色、茜素红染色、RT-qPCR来检测过表达或干扰miR-17-5p对SuSCs成骨分化的影响。(3)过表达或干扰miR-17-5p载体并转染至SuSCs细胞,利用WB检测转染后细胞TGF-β、Smad7的表达。结果:成功提取SuSCs细胞;SuSCs过表达miR-17-5p后ALP染色、茜素红染色、RT-qPCR检测成骨相关标志物(ALP、OCN、Runx2、BMP2)的结果均展现出促进成骨分化的趋势;而SuSCs干扰miR-17-5p后,ALP染色、茜素红染色、RT-qPCR检测成骨相关标志物(ALP、OCN、Runx2、BMP2)的结果均展现出抑制成骨分化的趋势。WB结果显示,相较于空白对照组,过表达miR-17-5p显著提高了TGF-β蛋白的表达水平,同时显著降低了Smad7蛋白的表达水平;而干扰miR-17-5p则展现出相反结果。结论:miR-17-5p参与SuSCs的成骨分化,并通过调节TGF-β/Smad7信号通路发挥关键作用。

关键词： 榆黄菇   多糖   提取优化   抗氧化   抗衰老  

摘要： 为提高榆黄菇粗多糖得率,研究其抗氧化、抗衰老活性,该研究采用响应面法优化榆黄菇粗多糖提取工艺,并构建多指标评估体系。通过检测DPPH自由基清除率、羟自由基清除率及超氧阴离子自由基清除率,系统评价榆黄菇粗多糖的体外抗氧化活性;以秀丽隐杆线虫为模式生物,通过应激实验、生殖力实验、运动实验探究榆黄菇粗多糖的抗衰老活性。结果表明:榆黄菇粗多糖的最佳提取参数为提取温度53℃、提取时间2.4 h、液料比30∶1(mL/g),此条件下的粗多糖得率为(18.76±0.16)%;榆黄菇粗多糖对DPPH自由基和羟自由基清除率较高,对超氧阴离子自由基的最大清除率为11.92%;榆黄菇粗多糖可以增强线虫热抵抗力,缓解H2O2和胡桃醌引起的氧化应激损伤,促进线虫产卵,增强线虫运动能力,提高线虫的身体弯曲频率和头部摆动频率,具有良好的抗衰老活性。

关键词： 支持细胞   精原干细胞   自我更新   分化  

摘要： 精子发生是哺乳动物生殖过程中的关键环节,精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)在这一过程中起着至关重要的作用。睾丸支持细胞(Sertoli cells,SCs)作为精子发生的核心细胞,除了为精原干细胞提供物理支撑和稳定的微环境外,还通过分泌多种细胞因子、信号分子调控精原干细胞的增殖、分化、凋亡和免疫豁免等过程,显著影响精原干细胞的自我更新和分化过程。文章主要对支持细胞通过不同机制调控精原干细胞发育进行综述,旨在为精原干细胞的研究提供新的视角和思路,并推动其在生殖生物学和临床应用领域的发展。