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关键词： 变应性鼻炎   黄芪多糖   Th1/Th2平衡   Th17/Treg失衡   NF-κB信号通路   炎症小体   研究进展  

摘要： 变应性鼻炎（Allergic Rhinitis，AR），作为一种普遍的耳鼻喉科疾病，在全球范围以及我国患者数量庞大，对患者日常生活影响较大。尽管现代医学在AR的治疗上取得了一定的进展，但仍较难根治该疾病，且现有治疗方案伴随着较大的副作用和不尽理想的长期疗效。相比之下，中医药在AR的治疗中展现出显著的疗效和独特的治疗优势。在中医学中，AR被归类为“鼻鼽”的范畴，其病理机制通常被认为是本虚标实、虚实夹杂。黄芪作为一种重要的补气药材，在AR的治疗中得到了广泛应用。黄芪多糖（Astragalus polysaccharide， ASP）作为黄芪的主要活性成分，通过多靶点调控变应性鼻炎（Allergic Rhinitis， AR）的免疫失衡与炎症级联反应，展现出显著的临床潜力。本文系统综述ASP在AR中的分子机制，重点聚焦其通过下调胸腺基质淋巴生成素（TSLP）表达、调节T-bet/GATA-3与Foxp3/RORγt转录因子平衡、抑制NF-κB信号通路及NLRP3炎症小体活化等途径，纠正Th1/Th2及Th17/Treg细胞失衡，从而缓解鼻黏膜炎症。结合近年研究，本文进一步探讨ASP在纳米递送技术提升生物利用度、中西医联合治疗中的转化价值，为AR的精准干预提供理论依据。

关键词： 蛋白质组学   分析流程   品质评价   真伪鉴别   发展趋势  

摘要： 蛋白质组学作为生命科学进入后基因时代的标志性特征，已广泛应用在食品科学、生物医药等领域，因其可以快速、准确且全面地描述蛋白质或多肽标志物的含量组成、结构变化和代谢途径等，已成为品质评价和真伪鉴别的有力手段。本研究系统地介绍了蛋白质组学技术的提取、分离、定量、鉴定及生物信息学分析流程，详细阐述了其在评价指标产物、阐明品质变化作用机理、评估食品质量差异、开发新产品等品质评价和掺假鉴定、物种鉴别等真伪鉴别方面的应用，并对未来的发展趋势进行了展望，以期为蛋白质组学在食品加工中的深入应用提供参考。

关键词： 黄条（鱼师   orexin   ox2r   组织表达   摄食  

摘要： 为探究食欲素(orexin)及其受体ox2r在黄条（鱼师） (Seriola aureovittata)摄食调控中的作用及可能机制，获得了黄条（鱼师） orexin和ox2r基因的开放阅读框(ORF)序列，分析了orexin和ox2r基因的组织分布、早期发育表达特征及其对饥饿再投喂的应答特性。黄条（鱼师） orexin基因ORF序列长450 bp，编码149个氨基酸，包括46个氨基酸的信号肽、43个氨基酸的orexinA成熟肽和28个氨基酸的orexinB成熟肽。黄条（鱼师） ox2r基因ORF序列长1 269 bp，编码422个氨基酸。氨基酸同源性比对发现，黄条（鱼师） orexin和ox2r氨基酸序列在硬骨鱼类中高度保守；系统进化分析表明，黄条（鱼师） orexin和ox2r与高体（鱼师） 关系最近。orexin和ox2r mRNA在所检测的12种组织中均有表达，其中，在脑组织中表达量最高，在垂体和胃中表达量次之。在精子和卵子中可检测到orexin和ox2r mRNA的表达，表明其具有亲本遗传的特性。orexin和ox2r mRNA参与了黄条（鱼师） 胚胎及仔稚幼鱼发育过程，且在内源性营养向外源性营养转化阶段表达量变化差异显著。饥饿刺激了orexin和ox2r mRNA在脑和垂体中上调表达，再投喂7 d后恢复到对照组水平。上述结果表明，orexin及受体参与了黄条（鱼师） 早期生长发育和摄食过程调控，该结果为黄条（鱼师） 摄食调控机制研究提供了基础数据。

关键词： 核酸适配体   氧四环素   氯霉素   硫黄素T   同时检测  

摘要： 基于核酸适配体与抗生素的特异性识别和适配体提高小分子荧光这一现象，建立了一种简单、灵敏、高效的核酸适配体检测新方法，该方法可用于氧四环素和氯霉素的同时检测。在该方法中，氧四环素和氧四环素适配体可特异性结合，从而提高氧四环素的荧光，实现氧四环素检测。氯霉素适配体的多鸟嘌呤（多G）结构使其可以结合硫黄素T，从而提升硫黄素T的荧光，实现氯霉素检测；但当氯霉素存在时，氯霉素可以和氯霉素适配体特异性结合，使硫黄素T被替换下来，造成荧光下降。由于检测氧四环素体系的荧光发射峰（520 nm，激发波长为370 nm）和检测氯霉素体系的荧光发射峰（495 nm，激发波长为425 nm）不重合，检测不会互相干扰，因此可以实现2种抗生素的同时检测。该方法对氧四环素的检测限为0.064 μmol/L，检测线性范围为0～25 μmol/L，对氯霉素的检测限为0.012 μmol/L，检测线性范围为0～10 μmol/L。同时，该方法对氧四环素和氯霉素特异性良好，且2种抗生素不会对彼此的信号造成干扰。在实际样品检测中，氧四环素的回收率为95.1%～105.7%，氯霉素的回收率为95.1%～109.0%。

关键词： 帕金森病   运动障碍   多巴胺能神经元   干细胞治疗   动物模型   临床前实验  

摘要： 帕金森病（Parkinson’s disease, PD）是中老年人常见的神经退行性疾病之一，其临床特征主要表现为静止性震颤，运动迟缓，肢体僵硬以及姿势和步态不稳。除了运动障碍，大部分帕金森病患者还会伴有多种非运动症状，包括记忆力减退、抑郁、疼痛、嗅觉减退和睡眠障碍等。PD的发病原因尚未明确，其主要病理特征是以α-突触核蛋白（α-synuclein）为主要成分路易氏小体（Lewy bodies）的形成，路易小体不仅存在于黑质，还扩散至迷走神经背核、蓝斑核等其他脑区，引起多巴胺能神经元退行性改变。PD的诊断主要依赖临床症状和临床表现，颅脑CT和MRI检查无明显异常。目前PD的药物治疗包括左旋多巴、多巴胺受体激动剂等，其他治疗方法还有深部脑电刺激（Deep brain stimulation, DBS）和干细胞替代治疗等。由于PD的核心病理改变是中脑特异多巴胺能神经元数量减少，应用不同来源神经干细胞和多巴胺前体干细胞移植成为目前最有前景的细胞治疗方法。无论是药物，器械或细胞移植治疗，都需要用PD动物模型进行临床前实验，取得可靠治疗效果和安全性后，才能用于临床治疗。因此本指南首先简述PD的病因、发病机理、临床表现和诊断，然后重点介绍药物诱导的大鼠、小鼠和非人灵长类PD模型，转基因PD大鼠和小鼠模型，以及应用这些动物模型对药物和干细胞产品临床前评估等。本指南将为研发治疗PD的新药和新技术选择动物模型提供理论和实验指导，同时为研发PD治疗药物提供标准化模型选择框架。

关键词： 微波真空冷冻干燥   复合凝胶   3D打印   水分比   干燥速率   水分分布  

摘要： 本研究旨在探讨不同浓度（0.00、0.06、0.08、0.10、0.12、0.14、0.16 g/mL）的玉米淀粉（CS）对银耳多糖-蛋清蛋白（TFP-EWP）复合凝胶3D打印精确度的影响，以及不同微波真空冷冻干燥时间（0、20 min、40 min、60 min、80 min、100 min、120 min和140 min）对打印产品固型效果的影响。以TFP-EWP-CS凝胶为原料，对不同浓度CS打印产品的打印精确度进行了表征，采用微波真空冷冻干燥技术对其进行干燥处理，并对打印产品的水分含量、干燥速率、几何形状、质构、色差及水分分布等进行了系统性评估。研究结果表明，CS添加量为0.12 g/mL时，TFP-EWP-CS复合凝胶3D打印偏差最低，打印偏差值为0.75%，随着干燥时间的延长，自由水比例显著下降，同时部分弱结合水转化为自由水并随之蒸发，产品的水分含量和干燥速率均呈下降趋势。在20 min、40 min、60 min和80 min的处理时间内，打印产品的形状基本保持稳定，固型保真度均大于90%，但直径和高度显著减少（P < 0.05）。当干燥时间达到100 min时，产品表面出现裂缝。进一步分析发现，随着干燥时间的增加，产品的硬度、胶黏性和咀嚼性均显著增强，微波真空冷冻干燥处理使得产品的白度增加而黄度降低（P < 0.05）。综上所述，本研究为优化TFP-EWP-CS复合凝胶打印产品的干燥工艺提供了方案参考。

关键词： 金鳟   肝脏   多糖   提取工艺   结构表征   降糖活性   中药现代化技术  

摘要： 以金鳟肝脏为原材料，经超声辅助水提取金鳟肝脏粗多糖，在单因素实验基础上，采用Box-Behnken响应面法优化了提取条件。通过对金鳟肝脏粗多糖除蛋白、醇沉、透析、冻干及分离纯化得到均一多糖GTLP-2A，采用UV-Vis、FTIR、XRD、GC-MS对其组成和多糖结构进行了表征。采用体外实验，评价了GTLP-2A的降血糖活性。结果表明，在提取温度65 ℃、提取时间104 min、液料比（mL∶g）50∶1的最佳提取条件下，金鳟肝脏多糖提取率为26.35%±0.02%。GTLP-2A几乎不含蛋白质和核酸，是一种低结晶度的杂多糖，具有典型的三螺旋结构，主要是由葡萄糖（26.14%，质量分数，下同）、半乳糖（43.85%）、鼠李糖（27.36%）和岩藻糖（2.63%）组成。质量浓度6 g/L的GTLP-2A降血糖活性趋于稳定，对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制率分别达到50.79%和39.67%。

关键词： 葛仙米多糖   纳米硒   结构表征   抗氧化   抑制癌细胞  

摘要： 目的：探究葛仙米多糖（Polysachcaride of Nostoc Sphaeroides küting，PNSK）对纳米硒（Nano-Selenium Particles，SeNP）的稳定修饰作用机制及修饰前后生理活性的变化。方法：以PNSK为原料，采用亚硒酸钠(Na2SeO3)-抗坏血酸(Vc)氧化还原法制备葛仙米多糖纳米硒（Polysachcaride of Nostoc Sphaeroides küting Nano-Selenium Particles，PNSK-SeNP），通过紫外可见光谱、高效液相色谱、X射线衍射、红外光谱、X射线光电子能谱等对PNSK及PNSK-SeNP的结构进行了表征，并对比分析了PNSK及PNSK-SeNP的抗氧化、抑制癌细胞活性。结果：PNSK-SeNP的硒含量为52.03±0.20 mg/g，粒径为166.83±4.51nm，PNSK-SeNP制备前后的单糖摩尔比变化不显著。PNSK-SeNP的X射线光电子能谱图中具有Se 3d信号峰，硒元素以0价态存在，红外光谱和X射线光电子能谱图均表明PNSK-SeNP中葛仙米多糖的主要结构和官能团未发生变化，纳米硒与PNSK间未形成新的化学键。抗氧化测定发现PNSK和PNSK-SeNP对羟自由基（·OH）的的半抑制浓度(Half maximal inhibitory concentration， IC50)分别为4.45 mg/mL和0.55 mg/mL，对2，2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐自由基（ABTS）的IC50值分别为4.58 mg/mL和0.79 mg/mL，对A549肺癌细胞的IC50分别为0.87 mg/mL和0.06 mg/mL，同时PNSK-SeNP可以有效抑制A549肺癌细胞迁移，诱导其凋亡，斯皮尔曼相关分析发现PNSK-SeNP的硒含量与其抗氧化、抑癌作用具有显著相关性。结论：PNSK可有效稳定纳米硒，且PNSK-SeNP的体外抗氧化、抑制癌细胞活性较PNSK均显著增加。

关键词： 暴马桑黄   细胞色素P450酶   基因克隆   真核表达   三萜化合物  

摘要： 【目的】克隆暴马桑黄三萜类化合物合成下游途径中的关键CYP6620B1基因的全长c DNA，并对其进行生物信息学分析和真核表达分析，以期为阐明暴马桑黄三萜生物合成途径机制及提高三萜产量提供理论依据。【方法】通过qRT-PCR技术检测CYP6620B1基因在暴马桑黄菌丝体、原基、子实体等不同发育阶段的转录水平。采用PCR扩增技术获得目的基因的c DNA序列全长，通过生物信息学在线软件分析其蛋白的理化性质和空间结构。通过LiAC/PEG法获得重组酿酒酵母菌株INVSc/pYES2-CYP6620B1，并采用酶标仪法检测其中总三萜含量。【结果】CYP6620B1基因在暴马桑黄不同发育阶段转录水平呈现先上升再下降的趋势，与已报道的暴马桑黄中总三萜的变化趋势相吻合，提示其可能参与三萜合成调控，进而克隆获得了CYP6620B1基因c DNA全长，为1 629 bp，编码542个氨基酸，不具有信号肽和跨膜结构，亚细胞定位于细胞质和内质网；系统进化树结果表明暴马桑黄CYP6620B1蛋白和牛樟芝蛋白同源性最高，分子对接结果显示CYP6620B1蛋白与羊毛甾醇的结合能最低并具有良好的对接构象；CYP6620B1基因成功在酿酒酵母菌株INVSc中实现表达，且重组酿酒酵母菌株INVSc/pYES2-CYP6620B1中总三萜含量显著高于对照菌株。【结论】本研究成功克隆得到可能参与暴马桑黄三萜合成途径的CYP6620B1基因，并对其进行分析，为深入探究该基因在暴马桑黄三萜生物合成途径中的功能奠定了基础。

关键词： 长链非编码RNA00894   甲状腺未分化癌   miR-24-3p   凋亡   迁移   侵袭  

摘要： 目的 探究长链非编码RNA LINC00894对甲状腺未分化癌细胞体外凋亡、迁移和侵袭的影响及机制。方法 通过GEPIA2数据库检测LINC00894在甲状腺癌及癌旁组织中表达情况；通过KM-plotter数据库分析 LINC00894表达与甲状腺癌患者总生存期相关性；RT-qPCR检测LINC00894在甲状腺未分化癌细胞中的表达。建立稳定过表达LINC00894的甲状腺未分化癌CAL-62细胞，RT-qPCR验证转染效率，分别通过流式细胞术和Transwell实验检测过表达LINC00894对甲状腺未分化癌CAL-62细胞凋亡、迁移和侵袭的影响。生物信息学分析miR-24-3p与LINC00894的潜在结合位点，并通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-24-3p与LINC00894结合；RT-qPCR检测过表达LINC00894甲状腺未分化癌CAL-62细胞中miR-24-3p表达；ENCORI数据库分析miR-24-3p与LINC00894在甲状腺癌中表达相关性，进一步采用流式细胞术和Transwell实验检测过表达miR-24-3p对过表达LINC00894的甲状腺未分化癌CAL-62细胞凋亡、迁移和侵袭的影响。结果 LINC00894在甲状腺癌组织和甲状腺未分化癌细胞中表达下调，LINC00894低表达与甲状腺癌患者较低的总生存期相关。过表达LINC00894增加甲状腺未分化癌CAL-62细胞LINC00894表达，抑制细胞体外迁移和侵袭并促进凋亡。LINC00894与miR-24-3p结合，过表达LINC00894下调CAL-62细胞中miR-24-3p表达，miR-24-3p和LINC00894的表达在甲状腺癌中呈显著负相关。过表达miR-24-3p逆转了过表达LINC00894对CAL-62细胞体外迁移和侵袭的抑制作用及凋亡的促进。结论 LINC00894通过调控miR-24-3p抑制甲状腺未分化癌细胞的迁移和侵袭并促进凋亡。