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关键词： 西藏   全株小黑麦   发酵TMR   发酵品质   饲料配方优化  

摘要： 为开发适合西藏地区的育肥牦牛饲料,试验以西藏全株小黑麦为主要原料,标准级[T1组:代谢能(ME)9.3 MJ/kg、粗蛋白(CP)11.8%]、优级(T2组:ME 10.6 MJ/kg、CP 14.2%的优加级)和优加级(T3组:ME 11.1 MJ/kg、CP 16.3%的优加级)3种不同能量与蛋白水平的发酵全混合日粮(TMR)配方将西藏全株小黑麦与玉米、菜粕、小麦秸秆及脂肪酸钙等饲料原料按配方充分混合,加入植物乳杆菌Lactobacillus plantarum,调整水分含量至约46%,装入青贮袋(300 g/袋),在室温下厌氧发酵,并分别于发酵15、30、45 d后开封测定微生物组成、发酵品质及化学成分。结果显示:①发酵时间对好氧细菌、乳酸菌、肠细菌有显著影响(P<0.05)。②随着发酵时间增加,各组的pH显著降低(P<0.05);T2、T3的乳酸(LA)、乙酸(AA)含量逐渐显著增加(P<0.05)。相同发酵时间下,各组间pH、LA、AA、丙酸(PA)均有显著差异(P<0.05),pH从高到低依次为T3组、T2组、T1组,LA从高到低依次为T3组、T2组、T1组,AA从高到低依次为T2组、T3组、T1组。③相同发酵时间下,各组间CP、中性洗涤纤维(NDF)含量差异显著(P<0.05),其中CP含量由高到低依次为T3组、T2组、T1组,NDF含量由高到低依次为T1组、T2组、T3组。组别相同时,不同发酵时间对WSC含量差异显著(P<0.05),含量由高到低依次为15、30、45 d。综合来看,发酵45 d后,各组TMR均发酵良好。表现为LA含量较高(8.2%DM)、pH较低(4.2)及氨态氮(NH3-N)含量较低(<0.5%TN)。发酵过程中,各组TMR的干物质损失均控制在1%以内,营养成分保持稳定,均能满足反刍动物的基本营养需求综合分析,发酵品质综合排序为T2组>T3组>T1组。

关键词： 分枝杆菌属   舒达吡啶   抗药性   多态性,单核苷酸  

摘要： 目的:诱导脓肿分枝杆菌标准株ATCC19977对舒达吡啶(sudapyridine,WX-081)的耐药菌株,对其耐药单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)基因功能注释及相关通路进行初步研究。方法:选取单克隆脓肿分枝杆菌标准株ATCC19977,采用2倍WX-081药物递增液体培养方法筛选耐药菌株。将获得耐WX-081菌株提取DNA并进行全基因组测序,检测SNP。随后,使用Blast软件将所有基因(包含新基因和原有注释基因)与非监督直系群(evolutionary genealogy of genes:non-supervised orthologous,eggNOG)、基因本体(gene ontology,GO)、京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)、非冗余数据库(non-redundant,Nr)、蛋白质家族(protein families,Pfam)和注释的蛋白质序列(swiss-prot protein sequence,swiss-prot)等数据库进行序列比对,获得基因的注释信息,建立相应的GO、eggNOG和KEGG数据库。结果:ATCC19977标准株与WX-081耐药ATCC19977菌株相比,编码区共检测到187个SNP,其中62个满足质量标准,43个为纯合SNP,包括12个同义突变和31个错义突变。编码区SNP占9.14%(187/2047),其中获得性终止密码子比例最低,仅为0.05%(1/2047)。非编码区SNP占90.86%(1860/2047),其中基因下游区域、基因上游区域产生SNP占比分别达51.83%(1061/2047)、39.03%(799/2047)。GO注释结果显示,生物学过程(BP)8条,细胞组分(CC)5条,分子功能(MF)4条。eggNOG功能预测显示,7个差异基因功能未知,3个参与氨基酸转运及代谢,1个与核苷酸代谢及转运相关,2个参与脂转运和代谢,1个与转录相关,2个参与细胞壁/细胞膜/包膜生物合成,1个参与翻译后修饰、蛋白质降解、分子伴侣,2个参与无机离子运输与代谢,2个参与次级代谢物生物合成、运输与降解,1个与信号传导功能相关。KEGG通路注释显示,细胞膜转运、氨基酸代谢、碳水化合物代谢、全局和总览图谱、脂代谢相关通路分别有1条、1条、1条、3条、4条。结论:耐WX-081脓肿分枝杆菌的基因组变异以非编码区SNP为主,编码区31个错义突变可能直接参与耐药。代谢通路分析显示,脂代谢、细胞壁合成及氨基酸转运相关基因显著富集,提示膜/壁结构重塑和代谢重编程是耐药关键机制。耐WX-081脓肿分枝杆菌基因组分析显示,其代谢调控与膜结构相关通路中SNP显著富集。

关键词： 多糖   挥发油   生物碱   总黄酮   滇黄精  

摘要： 本研究以百合科植物滇黄精(Polygonatum kingianum *** Hemsl.)、黄精(*** Red.)或多花黄精(*** Hua.)的干燥茎为原料。其中,黄精(*** Red.)主要分布在东北地区、华北地区、西北地区等,集中种植主要在河北省、河南省。现代分析和药理学研究表明,黄精中含有多糖、黄酮、生物碱、挥发油等活性成分,具有降血糖、抗癌、肾脏保护、心脏保护等诸多药理作用。其中,黄精总黄酮作为其核心活性成分之一,具有显著的抗氧化、抗炎、抗肿瘤及调节免疫等作用。

关键词： 干细胞   骨质疏松   成骨细胞   破骨细胞   间充质干细胞  

摘要： 间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一种多能干细胞,存在于骨髓、脂肪组织、肝脏、肌肉和脐带血中。文献报道近10年全球干细胞治疗临床研究约560项,我国干细胞治疗临床研究超过130项,在干细胞治疗骨质疏松研究领域取得了大量新成果。本文收录了国内外报道干细胞治疗骨质疏松的研究文献,梳理了干细胞治疗骨质疏松机制,并对干细胞治疗骨质疏松,促进成骨细胞增殖、修复骨微结构、降低破骨细胞活性、促进血管生成、提高骨受损区供血以及免疫调节、抑制炎性反应等进行了述评。

关键词： 羊口疮病毒   ORFV ORF011蛋白   B细胞表位   多克隆抗体  

摘要： 本试验旨在制备抗羊口疮病毒(ORFV)ORF011蛋白的多克隆抗体,为研究ORFV的致病机制及疫苗防控策略提供生物学材料。利用SVMTriP和IEDB网站在线生物信息学分析软件预测ORFV ORF011蛋白序列的B细胞抗原表位,发现ORFV ORF011蛋白存在多个B细胞抗原表位。PCR扩增ORFV ORF011全长基因,连接至经Bam HⅠ和Eco RⅠ双酶切后的载体pET-28a上构建原核表达重组质粒,将构建成功的重组质粒(pET28a-ORFV-ORF011)转化感受态细胞Rosetta,经IPTG诱导成功表达ORF011蛋白,该蛋白主要以包涵体形式存在。ORF011蛋白的最佳诱导表达条件:诱导温度为37℃,IPTG最佳浓度为0.5 mmol/L,最佳诱导时间为12 h。目的蛋白经变性、复性纯化后免疫小鼠获得的多克隆抗体具有良好的特异性,效价可达1∶256000,中和抗体效价可达1∶400。本试验证实ORFV ORF011蛋白是良好的抗原和免疫原,能够诱导BALB/c小鼠产生具有中和活性的多克隆抗体,在羊口疮诊断试剂和疫苗研制中具有重要应用价值。

关键词： 高尿酸血症   基因多态性   LRP2  

摘要： 目的探讨低密度脂蛋白受体相关蛋白2(low-density lipoprotein receptor-related protein 2,LRP2)基因rs2544390单核苷酸多态性与高尿酸血症的相关性。方法选取2024年6—12月北京市顺义区医院受试者198例,采用iPLEX基因分型技术,对高尿酸血症患者134例和健康对照者64例的rs2544390基因位点进行分型,分析不同基因型与高尿酸血症易感性的关系。结果高尿酸血症组的每周进食豆类食物的次数和运动的次数少于正常对照组(P<0.01);高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL)水平低于正常对照组(P<0.001),而血肌酐(serum creatinine,SCr)和天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)水平高于正常对照组(P<0.001);高尿酸血症组TT占比(82.1%)显著高于对照组(65.6%);3种基因型(TT、TC、CC)在高尿酸血症组与正常对照组的分布存在显著差异(χ^(2)=6.593,P=0.037);采用显性遗传模型(TT ***+CC)分析时,2组突变等位基因携带者占比的差异更为显著(χ^(2)=6.583,P=0.010);Logistic回归分析发生高尿酸血症的相关因素,单因素分析结果显示:体重指数(body mass index,BMI)、吸烟、进食内脏、SCr以及rs2544390基因型多态性与高尿酸血症的风险显著相关(P<0.05);而运动次数、HDL与高尿酸血症的发病风险呈显著负相关(P<0.05);多因素分析结果显示:BMI升高、进食内脏、高甘油三酯、SCr升高、rs2544390风险基因型与高尿酸血症的风险显著相关(P<0.05);运动次数增加、高密度脂蛋白升高是高尿酸血症的独立保护因素(P<0.05)。结论rs2544390基因多态性与高尿酸血症的发生密切相关,为高尿酸血症的独立危险因素,基因与环境因素的协同效应是疾病发生发展的关键环节。

关键词： 冻干百香果   多糖提取   GC-MS分析   抗氧化活性   自由基清除  

摘要： 研究采用水提醇沉法并结合超声辅助技术从冻干百香果果肉中提取多糖,优化后得到的粗多糖得率为71.4%,脱蛋白效率为58.9%。经GC-MS分析发现,水解衍生后的多糖包含9种单糖组分,其中D-氰基葡萄糖占比最高,达66.39%。体外抗氧化实验显示:当多糖质量浓度为25 mg/mL时,其铁氰化钾还原能力基本饱和;多糖质量浓度提升至100 mg/mL时,其对O_(2)-·的清除率超过95%,与同浓度VC的效果相当,EC_(50)值为60 mg/mL。本研究为百香果资源在功能食品及医药领域的开发提供了理论依据。

关键词： 黄精多糖   慢性间歇缺氧   Nrf2/HO-1信号通路   氧化应激   认知功能   HIF-1α  

摘要： 目的探讨黄精多糖改善慢性间歇缺氧(CIH)大鼠认知功能损伤的作用机制。方法30只SD大鼠随机分为正常组、模型组和黄精多糖低、中、高剂量组(100、200、400 mg/kg),每组6只。使用间歇低氧箱循环低氧/复氧方法建立CIH大鼠模型,各组灌胃给药4周后,测定大鼠体质量;Morris水迷宫实验评估大鼠行为学变化;试剂盒检测大鼠血清及海马组织中炎症因子(IL-1β、TNF-α)和氧化应激指标(SOD、MDA)水平;HE染色观察海马CA1区神经元形态学变化;免疫组化(IHC)染色观察海马CA1区神经元cleaved-Caspase3表达;DCFH-DA荧光探针检测海马组织ROS表达;RT-qPCR和Western blot法检测海马组织Nrf2、HO-1、HIF-1α、NF-κB、NLRP3 mRNA和蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠体质量降低(P<0.05),逃避潜伏期延长(P<0.05),穿越平台次数和目标象限停留时间减少(P<0.05);海马CA1区神经细胞排列紊乱,间隙增大;cleaved-Caspase3蛋白阳性率升高(P<0.01);血清和海马组织中MDA、IL-1β、TNF-α和HIF-1α水平升高(P<0.05,P<0.01),SOD活性降低(P<0.05,P<0.01);海马组织中ROS水平升高(P<0.05),Nrf2、HO-1 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05),NF-κB、NLRP3、HIF-1αmRNA和蛋白表达升高(P<0.05)。与模型组比较,黄精多糖中、高剂量组大鼠体质量升高(P<0.05),逃避潜伏期缩短(P<0.05),穿越平台次数和目标象限停留时间增加(P<0.05);海马CA1区组织损伤减轻,神经细胞排列较为整齐;cleaved-Caspase3蛋白阳性率降低(P<0.01);血清和海马组织中MDA、IL-1β、TNF-α和HIF-1α水平降低(P<0.05,P<0.01),SOD活性升高(P<0.05,P<0.01);海马组织中Nrf2、HO-1 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05),NF-κB、NLRP3、HIF-1αmRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。结论黄精多糖可改善CIH大鼠学习及记忆认知功能,减轻海马区神经元损伤,其机制可能与激活Nrf2/HO-1信号通路,拮抗HIF-1α发挥抗氧化应激及抗炎作用有关。

关键词： 肠道菌群   Carbohydrate Polymers   抗肥胖效应   鹿茸菇多糖  

摘要： 2021年11月1日,中国科学院微生物研究所真菌学团队在国际期刊Carbohydrate Polymers(IF=12.5,中科院1区,Q1)在线发表题为“Polysaccharides from Lyophyllum decastes reduce obesity by altering gut microbiota and increasing energy expenditure”的研究论文,揭示鹿茸菇(Lyophyllum decastes)多糖通过调节肠道菌群和增加能耗发挥抗肥胖作用。

关键词： 杏鲍菇   复合花粉   液体发酵   工艺优化   多糖   酚酸   抗氧化  

摘要： 该研究采用蜂蜜培养基,使用杏鲍菇对复合花粉(松花粉25%、向日葵花粉25%、枸杞粉15%、玫瑰花瓣粉15%、丹凤牡丹花瓣粉15%和关山樱花花瓣粉5%)进行液态发酵,通过单因素及正交试验对发酵工艺进行优化,并通过高效液相色谱(HPLC)和超高液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分析发酵液中多糖的单糖组成及酚酸成分。结果表明,最优发酵工艺为复合花粉添加量4%、初始pH值为7、发酵时间4 d。在此优化条件下,发酵液的总多糖、总黄酮含量分别为(792.39±96.54)mg/100 mL、(46.85±1.79)mg/100 mL,铁离子还原/抗氧化能力(FRAP)为(3.884±0.313)μmol/mL。HPLC分析结果表明,发酵液中多糖由甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、岩藻糖10种单糖组成,其中葡萄糖占比最高(85.99%)。UPLC-MS/MS分析共检出羟基苯甲酸、芦丁、水杨酸、槲皮素、木樨草素、山奈酚酸、芹菜酸共7种酚酸化合物,其中含量最高的为对羟基苯甲酸[(2803.74±343.56)μg/L]。综上,杏鲍菇发酵复合花粉发酵液中富含多糖和黄酮类化合物,具有较好的抗氧化活性。