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关键词： 蛋白质摄入   肌肉合成   运动恢复   营养干预   蛋白质代谢  

摘要： 运动后肌肉的合成重建依赖于合理的蛋白质摄入水平。研究显示,摄入蛋白质种类与剂量不同,会对肌肉合成效率、代谢调节及恢复时间产生显著影响。研究表明,某些富含必需氨基酸并具备抗氧化活性的植物蛋白(如文冠果蛋白),在促进肌肉修复、减缓运动疲劳方面展现出潜在优势,为运动营养干预提供了多元化选择。以文冠果蛋白为基础的摄入方案,结合动物实验证据,呈现出在调节肌肉代谢与提升恢复质量方面的积极潜力,值得在运动营养干预中深入推广与验证。

关键词： 原花青素   树莓   还原酶   基因克隆  

摘要： 以树莓(Rubus idaeus L.)为材料,基于转录组研究数据设计引物,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRTPCR)和快速扩增cDNA末端(RACE)技术,克隆获得树莓花青素还原酶基因(RiANR)。该基因开放阅读框长1020 bp,编码339个氨基酸,编码蛋白预测分子量为36.41 kDa,等电点为5.81,与原核表达结果一致。系统进化分析表明,RiANR蛋白与草莓、玫瑰ANR蛋白具有较高的同源性,分别为92%和91.7%。qRT-PCR显示,RiANR在果实中表达量显著高于根、茎、叶(p<0.05),且在绿果期达峰值,后随果实成熟急速下降。本研究结果可为解析原花青素合成调控机制及果实品质改良提供基因资源参考。

关键词： 滇黄精   多糖   工艺考察   线虫   抗衰老  

摘要： 本研究旨在优化滇黄精多糖(Polygonatum kingianum polysaccharide,PKP)的提取工艺,纯化获得组分PKP-1,分析其化学组成,并基于秀丽隐杆线虫模型评估其抗衰老活性。通过单因素和正交试验确定了最佳提取条件为:提取时间2 h,液料比10∶1(mL·g^(-1)),提取3次。随后,采用醇沉、脱色、除蛋白、透析和DEAE-52离子交换柱层析对PKP进行纯化,得到主要组分PKP-1。利用苯酚-硫酸法、BCA试剂盒、硫酸-咔唑法、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)和气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析表明,PKP-1总糖含量为86.36%±3.16%,不含蛋白质和糖醛酸,其单糖主要由果糖、葡萄糖和阿拉伯糖组成。在线虫模型中的抗衰老活性实验显示,PKP-1能显著增强线虫的抗逆性、降低活性氧(reactive oxygen species,ROS)和脂褐素的积累,并有效延长其寿命。结果表明,所优化的提取工艺高效可行,纯化获得的PKP-1纯度较高,主要由果糖、葡萄糖和阿拉伯糖构成,并具有显著的抗衰老生物活性。

关键词： 异基因造血干细胞移植   炎症   MK2   NLRP3  

摘要： 目的:探究MK2抑制剂MMI-0100对异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后炎症反应的作用及分子机制。方法:建立allo-HSCT小鼠模型。随机将受鼠分为BMT+NaCl组和BMT+MMI-0100组,并于移植后每天分别注射NaCl和MMI-0100。两组分别于d 7、14取材,HE染色股骨石蜡切片并于光学显微镜下观察骨髓腔病理变化,qPCR和Western blot检测促炎性细胞因子IL-1β和IL-18的基因和蛋白表达水平,流式细胞仪检测巨噬细胞分型情况,Western blot检测NLRP3和Caspase-1的表达水平。结果:BMT+MMI-0100组骨髓腔炎性细胞浸润明显减少。Western blot结果显示BMT+MMI-0100组IL-1β和IL-18的蛋白表达水平在d 7、14均低于BMT+NaCl组,且比较差异有统计学意义(均P<0.01)。qPCR结果显示与BMT+NaCl组相比,BMT+MMI-0100组在d 7和14的IL-18基因表达水平显著降低(均P<0.01);BMT+MMI-0100组IL-1β基因表达水平在d 7较BMT+NaCl组降低(P<0.05),但在d 14有所增高且明显高于BMT+NaCl组(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,相较于BMT+NaCl组,BMT+MMI-0100组M1型巨噬细胞表达下降,M1/M2比值亦下降(均P<0.05)。Western blot检测结果表明,BMT+MMI-0100组NLRP3和Caspase-1蛋白表达水平均低于BMT+NaCl组(均P<0.05)。结论:MMI-0100具有改善allo-HSCT后骨髓炎症损伤的作用,且可能通过减少NLRP3表达促进M2极化来发挥作用。

关键词： 广西拟水龟   营养成分   品质评价   氨基酸   脂肪酸  

摘要： 试验旨在探究广西不同地区广西拟水龟肌肉营养品质差异,为保护和开发利用广西拟水龟种质资源提供数据依据。选取广西凭祥(PX组)、桂平(GP组)、钦州(QZ组)3个地区广西拟水龟各30只,测定肌肉常规营养成分、矿物质元素、氨基酸和脂肪酸含量。结果显示:3组广西拟水龟肌肉粗蛋白含量为15.28%~18.69%,粗脂肪含量为0.16%~0.98%。其中,GP组的粗脂肪、粗蛋白和总糖含量均显著高于PX和QZ组(P<0.05)。广西拟水龟中常量元素P的含量最丰富,GP组的Ca、P和Mg的含量均显著高于PX和QZ组(P<0.05),5种微量元素中Zn的含量最高,其次为Fe,其中QZ组的Fe、Zn、Mn的含量均显著高于PX组(P<0.05)。3组广西拟水龟肌肉检测出16种氨基酸,其中谷氨酸(Glu)含量最高,蛋氨酸(Met)含量最低,氨基酸总量(ΣEAA)为13.30%~14.07%,必需氨基酸总量/氨基酸总量(ΣEAA/ΣTAA)、必需氨基酸总量/非必需氨基酸总量(ΣEAA/ΣNEAA)的比值分别为35.17%~37.37%和64.46%~71.26%,必需氨基酸指数(EAAI)为60.78~66.98。PX组的氨基酸评分(AAS)、化学评分(CS)和EAAI均为最高。3组广西拟水龟共检测出23种脂肪酸,其中多不饱和脂肪酸含量(PUFA)为35.44%~63.40%,二十碳五烯酸+二十二碳六烯酸(EPA+DHA)含量为3.41%~20.65%,Σn-3/Σn-6 PUFA为24.74%~146.94%。研究表明,广西拟水龟肌肉的蛋白含量较高,脂肪含量较低,且氨基酸和PUFA组成丰富,其中桂平地区广西拟水龟的肌肉营养品质更优。

关键词： CYP2C19   基因多态性   药物基因组学   临床应用   个体化用药  

摘要： CYP2C19代谢酶参与了多种临床药物的代谢,CYP2C19基因的遗传变异会影响CYP2C19的酶活性,导致人群中出现多种不同的表型。针对其基因多态性进行的药物基因组学研究能够帮助指导相关临床治疗的个体化用药方案设计,帮助实现精准药疗。其中临床药物基因组学实施联盟针对证据级别最高的氯吡格雷、伏立康唑、质子泵抑制剂类抗消化性溃疡药、三环类抗抑郁症药及选择性5-羟色胺再摄取抑制剂类抗抑郁症药已发布了临床应用指南。该文针对上述4种类型药物系统对比了相关国内外临床应用指南的差异,总结了CYP2C19基因多态性在临床个体化用药中的具体应用,以期为中国人群的个体化用药策略提供参考,促进精准医学的临床实施与发展。

关键词： 纹带棒杆菌   生物膜   纹带棒杆菌毒力   菌毛组装蛋白D   多克隆抗体  

摘要： 目的:制备纹带棒杆菌(***)生物膜形成相关蛋白菌毛组装蛋白D(SpaD)多克隆抗体,分析其抑制***强产膜株生物膜形成的作用和潜在应用价值。方法:选取2011-2021年内蒙古医科大学附属医院住院患者临床标本中分离的117株***为研究对象。采用结晶紫染色法检测各菌株生物膜形成能力,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测SpaD编码基因spaD在***强产膜株中的分布。将***强产膜株分为对照组和蛋白酶K组,采用结晶染色法检测蛋白酶对***强产膜株生物膜形成能力的抑制作用。蛋白重组技术构建*** SpaD重组蛋白,实验分为对照组和5及10 mg·L^(-1) SpaD重组蛋白组,采用结晶染色法检测SpaD重组蛋白对***强产膜株生物膜形成能力的抑制作用。并通过动物免疫获得兔抗SpaD多克隆抗体实验分为对照组和1∶400、1∶200及1∶100 SpaD多克隆抗体组,采用结晶紫染色法检测SpaD多克隆抗体对***强产膜临床株生物膜形成能力的抑制作用。结果:结晶紫染色法检测,强产膜株、中等产膜株和弱产膜株占比分别为47.9%(56/117)、29.0%(34/117)及23.1%(27/117)。RT-qPCR法,所有强产膜株均携带spaD基因。与对照组比较,5和10 mg·L^(-1) SpaD重组蛋白组13株强产膜菌生物膜形成能力均明显降低(P<0.05)。与对照组比较,1∶100和1∶200倍数稀释SpaD兔多克隆抗体组中分别有61.5%(8/13)及7.7%(1/13)的强产膜菌株生物膜形成能力明显降低(P<0.05)。结论:spaD基因在***强产膜株中呈高表达状态。SpaD多克隆抗体可明显抑制***强产膜株生物膜形成,其抑制效应呈浓度依赖性。SpaD可作为防治***产膜株感染的新靶点。

关键词： 单点突变   无义突变   DNA序列   自注意力机制  

摘要： 基因序列上的单核苷酸无义突变会对下游序列造成严重影响,为此,提出一种基于自注意力机制的深度学习模型PON-NS来预测DNA单核苷酸无义突变的致病性。从ClinVar与VariSNP数据库中筛选无义突变数据,构建全新的无义突变数据集;通过Transformer中的自注意力机制学习突变前后突变位点上下文序列中的隐藏特征,并结合序列衍生特征进行预测。与现有方法相比,PON-NS在盲测中取得了更优的性能,ACC、AUC和MCC分别达到了0.920、0.950与0.842。特别地,在ExAC验证集上,PON-NS比同样基于DNA层面预测的DDIG-in方法降低了39.7%的误报率。

关键词： 多囊卵巢综合征   干细胞移植   细胞外囊泡   人脐带间充质干细胞   无细胞治疗   机制  

摘要： 多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)作为一种复杂的内分泌代谢紊乱性疾病,在育龄期女性中发病率较高,严重影响患者的生殖健康和生活质量。传统的治疗方案仅限于改善症状,并不能逆转PCOS病理进程,因此难以根治及有效预防远期并发症。人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cell,hUC-MSC)及其来源的细胞外囊泡具有独特的免疫调节、抗炎和组织修复能力,有望成为PCOS的治疗新方法。研究表明,hUC-MSC移植及其衍生的无细胞疗法通过调节炎症反应和炎症信号转导、抑制卵巢颗粒细胞程序性细胞死亡、维持线粒体稳态等多种作用机制,对调控免疫微环境、改善卵母细胞质量、缓解PCOS相关病理变化具有积极作用,并且在改善PCOS患者生殖结局、预防远期并发症等方面也展现出潜在临床价值,为后续深入研究hUC-MSC作用机制及临床转化提供了理论依据。

关键词： 氨基酸类   聚合物   聚氨基酸   骨修复   骨缺损  

摘要： 聚氨基酸是一类由α-氨基酸作为结构单元通过肽键连接的聚合物,其结构与天然蛋白质相似,能够在体内降解为多肽、氨基酸及其他小分子,在骨修复领域展现出独特的应用优势。现已开发出多种功能化的氨基酸单体及其聚合方式,聚合方式主要包括开环聚合法、缩聚法、酶催化法和固相合成法,可以将谷氨酸、赖氨酸、天冬氨酸等聚合为聚氨基酸,满足骨缺损修复需求。随着氨基酸数量的增加和多肽链的延伸,分子链会通过氢键、范德华力等非共价相互作用形成α-螺旋、β-折叠等二级结构,这些结构对聚氨基酸的生物活性和功能起着决定性作用。聚氨基酸的功能高度依赖其单体组成、序列、二级结构以及所携带的电荷特性,通过精准设计可以有效调控生物学效应。但聚氨基酸应用于骨缺损修复最大的困难仍未克服,即规模化制备、长期安全性问题。随着多学科交叉融合,兼具优异性能、生物活性与智能响应特性的新一代聚氨基酸材料有望推动骨修复策略迈向精准化、个性化与高效化的新阶段。