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关键词： 干细胞产品   致瘤性   安全性评估   3D培养   高通量筛选技术   体外检测技术  

摘要： 近年来,干细胞产品作为生物医药领域的热点,其在疾病治疗、组织修复等方面的应用潜力备受瞩目。为了确保干细胞产品的安全性,其潜在致瘤性评估是临床前评价中的关键环节。致瘤性评价旨在识别干细胞产品中可能存在的肿瘤形成风险,这对于保障患者安全至关重要。随着生物科技的进步,针对干细胞治疗产品的临床前致瘤性评价技术也在不断发展。本文综述了干细胞治疗产品的非临床致瘤性评价技术研究进展,通过对体内和体外评价方法的详细阐述,分析当前干细胞产品致瘤性评价技术的优缺点,并介绍了近年来新兴的3D培养、高通量筛选技术在干细胞治疗产品致瘤性评价中的应用,探讨新型检测技术在评估干细胞致瘤性方面的潜力,以期为干细胞产品致瘤性评价方法优化与完善提供有益参考。

关键词： 玉米   ZmFdx5   基因克隆   表达模式   逆境胁迫  

摘要： 为研究热带玉米(Zea mays L.)中铁氧还蛋白编码基因ZmFdx5的结构及其在玉米响应逆境胁迫过程中所起的作用,从热带玉米自交系CML288中克隆出ZmFdx5基因,对ZmFdx5蛋白进行生物信息学和系统进化树分析,并对ZmFdx5基因在干旱和盐逆境胁迫下的表达进行分析。结果表明:ZmFdx5基因含有1个585 bp的开放阅读框,共编码194个氨基酸。ZmFdx5蛋白包含典型的fer2超家族结构域,属于亲水性不稳定蛋白,不含信号肽并且是非跨膜蛋白,主要由无规则卷曲和α-螺旋组成。ZmFdx5蛋白可能与NAR1蛋白、铁硫氧还蛋白还原酶(FTRC)等蛋白具有互作关系,且该蛋白聚集在光合型Fd组,推测其属于玉米中的光合型Fd。玉米ZmFdx5蛋白在单子叶植物组中与高粱、柳枝稷等C4植物具有更近的亲缘关系。玉米ZmFdx5基因主要在叶片中表达,响应干旱和盐逆境胁迫。

关键词： 葡萄   VabHLH123   基因克隆   低温胁迫   瞬时表达  

摘要： 本研究克隆了山葡萄碱性螺旋-环-螺旋基因VabHLH123,研究其在低温胁迫响应中的作用,为葡萄抗寒基因功能研究提供一定的理论基础。通过生物信息学分析、亚细胞定位、低温及外源激素处理、瞬时表达等方法对VabHLH123的表达和功能进行了初步研究。VabHLH123基因的编码序列为279 bp,编码92个氨基酸,含有一个HLH结构域。组织特异性表达分析结果表明,VabHLH123在山葡萄各个组织均有表达,其中在茎的相对表达量最高。在低温胁迫处理后,VabHLH123的表达水平呈上调趋势。GA3处理后,VabHLH123基因快速响应,且表达量在1 h后达到最高,整体均高于对照;ABA处理后,VabHLH123基因表达量在6 h后达到最高;MeJA、ETH和SA处理后,VabHLH123基因受诱导响应程度小。亚细胞定位结果显示,VabHLH123定位在细胞核上。葡萄愈伤组织瞬时转化结果表明,在低温胁迫下,抗寒相关基因(VvCBF1、VvCBF3、VvRD29B和VvNCED1)在VabHLH123过表达愈伤中具有更高的表达量。瞬时过表达VabHLH123显著提高了抗寒相关基因表达水平,增强了葡萄愈伤的耐寒能力。

关键词： 生物相容性材料   水凝胶类   甲基丙烯酸酐化明胶   孔隙率   杨氏模量   骨髓间充质干细胞   干性   成骨分化  

摘要： 目的探究甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)水凝胶的孔隙率与杨氏模量对小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)生物学行为的影响,为开发用于皮肤创面修复的组织工程支架提供理论基础。方法该研究为实验研究。将由50 g/L的GelMA溶液光交联30、60 s及150 g/L的GelMA溶液光交联30、60 s制成的GelMA水凝胶分别设为低浓度短时组、低浓度长时组及高浓度短时组、高浓度长时组,使用Image J 1.54软件测量并计算4组水凝胶冷冻干燥48 h后的孔隙率,采用杨氏模量测定仪检测4组水凝胶的杨氏模量,评估前述孔隙率与杨氏模量的相关性并建立二者之间的预测模型,计算4组水凝胶在磷酸盐缓冲液中浸泡7 d后的剩余质量百分比。从10只雌雄不明1 d龄C57BL/6小鼠股骨分离BMSC,将由BMSC与50 g/L的GelMA溶液混合后光交联30、60 s及BMSC与150 g/L的GelMA溶液混合后光交联30、60 s制成的载细胞GelMA水凝胶分别设为低浓度短时载细胞组、低浓度长时载细胞组、高浓度短时载细胞组、高浓度长时载细胞组,采用细胞活/死试剂盒检测4个载细胞组水凝胶培养7 d后细胞存活情况并计算细胞存活率;将4个载细胞组水凝胶成骨诱导培养10 d后,采用实时荧光定量反转录PCR法检测细胞中成骨相关因子Runt相关转录因子2(Runx2)、碱性磷酸酶(ALP)及干性相关因子SRY盒转录因子2(Sox2)、Nanog的mRNA表达,采用免疫荧光法检测细胞中Runx2与Nanog的蛋白表达。除蛋白表达(定性观察)外,其余指标每组样本数均为3。结果低浓度短时组、低浓度长时组、高浓度短时组、高浓度长时组水凝胶冷冻干燥48 h后的孔隙率依次降低,分别为(92.7±0.9)%、(85.0±1.8)%、(68.6±1.2)%、(56.3±5.8)%;杨氏模量依次升高,分别为(5.933±0.020)、(7.803±0.089)、(20.772±0.106)、(22.498±0.060)kPa。除高浓度长时组与高浓度短时组间水凝胶杨氏模量(P>0.05)外,其余组间水凝胶的孔隙率或杨氏模量两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05);水凝胶的孔隙率与杨氏模量呈显著负相关(R^(2)=0.91,P<0.05),并据此建立了二者之间的线性方程预测模型。浸泡7 d后,低浓度长时组、高浓度短时组、高浓度长时组水凝胶剩余质量百分比均显著高于低浓度短时组(P<0.05),高浓度长时组水凝胶剩余质量百分比显著高于低浓度长时组(P<0.05)。培养7 d后,4个载细胞组水凝胶中均可见大量活细胞,组间细胞存活率总体比较,差异无统计学意义(P>0.05)。成骨诱导培养10 d后,高浓度长时载细胞组水凝胶的细胞中Runx2与ALP的mRNA表达均显著高于其余3个载细胞组(P<0.05),低浓度短时载细胞组水凝胶的细胞中Sox2与Nanog的mRNA表达均显著高于其余3个载细胞组(P<0.05);高浓度长时载细胞组水凝胶的细胞中Runx2的蛋白表达最高,低浓度短时载细胞组水凝胶的细胞中Nanog的蛋白表达最高。结论GelMA水凝胶的孔隙率与杨氏模量通过协同作用调控小鼠BMSC的生物学行为,其中高孔隙率-低杨氏模量利于干性维持,而低孔隙率-高杨氏模量驱动成骨分化。

关键词： 分层次教学   PBL   麻醉药物基因组学   自我效能感   评判性思维能力  

摘要： 目的探讨分层次教学联合以问题为导向教学法(PBL)在麻醉药物基因组学教学中的应用效果方法。方法选择2022年7月—2023年6月郑州大学第一附属医院实习的麻醉学学生85例,采用随机数字表法分成传统教学组42例(传统教学)和联合教学组43例(分层次教学联合PBL)。评估学生理论考试成绩和实践操作成绩、教学效果、自我效能感和核心能力、评判性思维能力量表-中文版(CTDI-CV)评分、教学满意度。结果联合教学组理论考试成绩、实践操作成绩、自我效能感、核心能力、CTDI-CV评分、教学满意度优于传统教学组;与传统教学组相比,联合教学组提升自学能力、激发学习兴趣、提高学习效率人数占比更高(P<0.05)。结论分层次教学联合PBL教学法可提升麻醉药物基因组学教学效果,增强学生综合能力及满意度。

关键词： 蛋白质翻译后修饰(PTMs)   水产生物病原菌   毒力   调控功能  

摘要： 【意义】细菌感染不仅严重威胁人类健康,也对水产养殖业造成重大损失。解析水产病原菌的分子致病机制是制定精准防控策略的核心环节。随着蛋白质组学和质谱技术的发展,蛋白质翻译后修饰(PTMs)逐渐被发现是调控病原菌致病过程的重要分子机制。因此,系统总结PTMs在水产病原菌致病机制中的研究进展,有助于深化对细菌感染机制的理解并为防治提供新思路。【进展】研究表明,磷酸化、乙酰化、琥珀酰化及糖基化等PTMs广泛存在于水产病原菌中,通过调控蛋白质构象、活性及相互作用,影响其致病过程。在毒力调控方面,类核相关蛋白(NAPs)的乙酰化、琥珀酰化修饰可改变其DNA结合能力,进而调控毒力基因的沉默或激活;双组分系统(TCS)和群体感应(QS)信号通路的关键组分则通过磷酸化、乙酰化等修饰介导信号转导;转录因子的PTMs影响其稳定性及与DNA的结合能力,以调控毒力因子的转录;而毒力因子本身的PTMs则直接调控其活性和感染能力。在病原宿主互作层面,PTMs不仅参与病原菌的代谢重编程与环境适应性调节,其表面结构蛋白及鞭毛的糖基化修饰也会影响宿主免疫识别与细菌免疫逃逸;此外,宿主细胞可主动介导病原菌效应蛋白的PTMs,改变其亚细胞定位和功能,从而促进感染进程。不同类型PTMs之间常存在复杂的串扰关系,它们可在同一蛋白或同一位点上协同或拮抗作用,形成动态的修饰调控网络,这为病原菌适应宿主微环境并增强其感染力提供了重要的分子基础。【展望】PTMs在水产病原菌致病机制中发挥关键作用,但当前研究仍局限于少数修饰类型和少数菌种。未来应拓展研究范围,结合多组学和感染模型揭示动态调控网络,并深入探索修饰间串扰机制。系统研究PTMs不仅有助于阐明病原菌致病机制,也可为水产病害防控提供特异性新靶点与理论依据。

关键词： 天然多糖   抑郁症   分子机制   脑肠轴  

摘要： 抑郁症是一种复杂而普遍的精神疾病,对全球健康构成重大挑战。近年来,天然多糖因其独特的生物活性和较少的不良反应,逐渐成为抑郁症治疗研究中的热点。本综述重点介绍在了解天然多糖发挥抗抑郁作用的分子机制方面取得的最新进展,包括调节肠道微生物平衡、抑制神经炎症、调控下丘脑-垂体-肾上腺轴功能、增强神经可塑性和抗氧化能力、上调脑源性神经营养因子的表达、促进神经元的存活和突触可塑性,并展望了未来在抑郁症治疗中开发天然多糖药物的潜力和挑战。

关键词： 红芪多糖   前列腺癌   侵袭   迁移  

摘要： 目的探讨红芪多糖对人前列腺癌PC-3细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法采用细胞计数试剂盒(CCK8)检测红芪多糖对PC-3细胞增殖的影响;流式细胞术检测PC-3细胞凋亡情况;细胞黏附实验检测PC-3细胞黏附力;Transwell小室体外侵袭实验和划痕修复实验分别检测PC-3细胞侵袭和迁移能力;Western blot分析PC-3细胞MMP-2和MMP-9表达的变化。结果红芪多糖明显抑制PC-3细胞增殖,且呈时间-浓度依赖性,作用24、48和72 h的IC50分别为120.69、64.37和38.81 mg/L。红芪多糖显著升高PC-3细胞凋亡率,显著降低PC-3细胞黏附率、迁移率和侵袭率,显著降低PC-3细胞MMP-2和MMP-9的蛋白表达(P<0.05)。结论红芪多糖可抑制PC-3细胞增殖、侵袭和迁移能力,并诱导细胞凋亡,作用与MMP-2和MMP-9的表达降低相关。

关键词： 黏多糖贮积症   酶替代治疗   护理  

摘要： 总结1例Ⅱ型黏多糖贮积症患儿应用酶替代治疗的护理经验,护理要点包括:用药前完善护理评估,做好药品运输与保存,专人严密监护用药,积极识别和处理药物不良反应,确保安全,做好患儿及家属的心理护理,经过43次酶替代治疗,患儿各项指标均有所改善,对患儿长期随访,无不良反应。

关键词： 脂肪移植   脂肪源性干细胞   包膜挛缩   植入物乳房再造   乳房切除术后放疗  

摘要： 包膜挛缩是最为常见的植入物乳房再造并发症,会导致疼痛、不良的美容效果和再次手术。随着对脂肪组织中脂肪源性干细胞(Adipose-derived stem cells,ADSC)的认识和研究的不断深入,其多向分化潜能和旁分泌效应在乳房再造领域也受到关注。现对ADSC的特性及其在乳房再造术后包膜挛缩方面的基础和临床研究进展进行综述。