课程文献中心 更多>>

关键词： 梓醇   脂多糖   IEC-6细胞   肠道功能障碍  

摘要： 目的探讨梓醇(CAT)对脂多糖(LPS)诱导的肠上皮细胞IE-6损伤的保护作用及其可能作用机制。方法将IEC-6细胞分为正常对照组(Control组)、CAT对照组(CAT组)、模型组(LPS组)、CAT治疗组(LPS-CAT组)。Control组使用完全培养基培养;CAT组以含10μmol/L CAT的培养基培养,LPS组以含10μg/mL LPS的培养基培养;LPS-CAT组以含10μg/mL LPS和10μmol/L CAT的培养基培养。各组细胞均培养24 h。采用细胞计数试剂盒-8检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞活性氧(ROS)水平,划痕试验检测细胞迁移能力,蛋白质印迹法检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)/Bcl-2相关X蛋白(BAX)]、肠屏障功能蛋白[闭锁小带蛋白1(ZO-1)、闭合蛋白(Occludin)]及核因子-κB(NF-κB)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路相关蛋白表达水平,酶联免疫吸附试验检测炎症因子白细胞介素(IL)-6、IL-1β水平,实时荧光定量PCR法检测IL-6、IL-1βmRNA表达水平。结果与Control组相比,LPS组细胞活力下降,细胞迁移能力减弱,细胞凋亡率和ROS水平升高,Bcl-2/BAX蛋白比值降低,NF-κB、MAPK通路相关蛋白磷酸化水平升高,ZO-1、Occludin蛋白表达水平下降,IL-6、IL-1β水平升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。CAT干预后上述变化均显著改善(均P<0.05)。结论CAT可通过抑制NF-κB/MAPK通路的激活,拮抗LPS诱导的肠上皮细胞炎症反应、凋亡及氧化损伤,增强肠上皮细胞迁移能力,促进肠道功能恢复。

关键词： 苦竹笋多糖   超声辅助提取   低共熔溶剂   抗氧化   降血脂   抑菌  

摘要： 本研究建立了一种超声辅助低共熔溶剂(deep eutectic solvent,DES)提取苦竹笋多糖的优化工艺,并对其结构特征和体外生物活性进行了系统评价。结果表明,以氯化胆碱-乳酸(摩尔比1:3)为DES体系,在液料比30:1 m L/g、超声时间40 min、超声功率75 W、温度40℃的水浴条件下,苦竹笋多糖得率为12.73%。结构表征结果显示,苦竹笋多糖的重均分子量为381.52 kDa,主要单糖组成有阿拉伯糖、半乳糖和葡萄糖等;其分子结构具有典型的多糖官能团,并呈现非晶态、蜂窝状多孔形貌。体外活性实验结果表明,苦竹笋多糖具有优异的抗氧化能力,其半抑制浓度(IC_(50))分别为0.51 mg/mL(DPPH自由基清除能力)、1.80 mg/m L(ABTS^(+)自由基清除能力)以及0.86 mg/m L(铁离子还原能力)。苦竹笋多糖在一定程度上具有降血脂和降血糖的潜力,2 mg/m L浓度时对α-淀粉酶的抑制率为36.6%;3 mg/m L苦竹笋多糖与牛磺胆酸钠和甘氨胆酸钠的结合率分别为52.10%和46.18%。此外,苦竹笋多糖对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有抑制作用,抑菌圈直径超过10 mm。本研究为苦竹笋多糖的提取工艺优化及功能活性开发提供了理论依据。

关键词： 白花泡桐   转录因子   HY5   启动子   bZIP基因家族  

摘要： 为了初步探究白花泡桐(Paulownia fortunei)转录因子HY5的功能和表达调控机制,基于白花泡桐基因组数据库,克隆得到了PfHY5基因及其启动子序列并对其进行了生物信息学及表达分析。结果表明,PfHY5基因长度为474 bp编码157个氨基酸。PfHY5是一个结构保守的酸性蛋白,定位于细胞核中,二级结构主要由α-螺旋组成。PfHY5基因在白花泡桐茎和根中高表达,可响应光照和泡桐丛枝病。同时,也验证了PfHY5基因上游1993 bp的启动子序列具有转录激活活性,预测到该区域包含响应光、胁迫和激素的顺式元件,表明PfHY5基因表达受到多种因素的调控。这些结果为明晰白花泡桐PfHY5基因的功能和光信号调控途径奠定了基础,也为其他木本植物光响应机制的研究提供了参考。

关键词： 尿酸   半抗原   人工抗原   多克隆抗体  

摘要： 针对小分子尿酸不具备免疫原性、难以用免疫法直接检测的问题,将尿酸用琥珀酸酐修饰,得到修饰后的尿酸半抗原,再将尿酸半抗原与牛血清蛋白和卵清蛋白偶联制得尿酸人工抗原及包被抗原,用尿酸人工抗原免疫小鼠,制备得到尿酸多克隆抗体.通过Fourier变换红外光谱法和质谱法对尿酸半抗原进行表征,通过紫外分光光度法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法对人工抗原及包被抗原进行表征,通过间接竞争酶联免疫吸附实验(ELISA)测定抗体的效价、灵敏度和特异性.结果表明:多抗血清的效价均在1∶25600以上,且1~4号小鼠抗体的灵敏度分别为10.337,8.426,16.457,21.177μg/mL;该抗体与尿酸的结构类似物的交叉反应率均小于1%.可见,该实验免疫制备的尿酸多克隆抗体获得了较高的效价、较高的灵敏度及较强的特异性,为尿酸的免疫检测提供了实验依据.

关键词： 寡糖   多糖   制备技术   结构解析   功能特性   食品糖组学  

摘要： 糖链结构的复杂多样性为食品科学提供了广阔的研究空间,同时也带来了巨大的解析挑战。食品中的寡糖和多糖作为关键的生物活性成分,其研究已从传统的提取、纯化迈入精准结构解析与功能化应用的新阶段。本综述系统梳理了国内外在该领域的突破性进展。在制备技术层面,物理法、化学法及酶解法等新兴技术通过对糖苷键的高效、可控断裂,实现了产物分子量的精准调控与得率的显著提升;绿色溶剂技术,特别是天然低共熔溶剂(NADES)的应用,为多糖的绿色高效提取提供了创新解决方案。在结构解析方面,质谱联用技术(如LC/QqQ-MS、MALDI-TOF MS)、离子淌度质谱、纳米孔测序及核磁共振(NMR)等高通量、高分辨率技术的融合与发展,极大地推动了糖链精细结构、序列乃至三维构象的深入解析。在功能特性上,糖类组分通过肠道菌群-宿主互作、免疫信号调节等途径,在益生元、免疫靶向递送、抗衰老等方面展现出多维生理效应,其构效关系日益明晰。寡糖与多糖的应用已远远超越传统的食品配料范畴,正向医药健康、材料科学、绿色制造等多领域拓展。最后,本文展望了食品糖组学与多组学整合、智能传感、人工智能等前沿技术推动下的未来趋势,旨在为糖类资源的高值化利用和食品产业创新提供理论参考。

关键词： 外周血造血干细胞   低温保藏   临床实践   质量控制   专家共识  

摘要： 外周血造血干细胞移植(PBSCT)是指通过血细胞单采技术从供者体内获取外周血造血干细胞(PBHSCs)并用于移植的治疗方法,广泛应用于白血病、淋巴瘤等多种血液系统肿瘤的治疗。PBHSCs的低温保藏是影响PBSCT疗效的关键环节之一。为规范PBHSCs低温保藏技术流程,提升保藏质量,保障移植安全与疗效,由中国医药生物技术协会组织生物样本库分会等协(学)会组织血液学、细胞生物学、临床检验及低温生物学等多学科专家,在全面参考国内外相关政策、法规及研究成果的基础上,结合我国临床实践,针对PBHSCs低温保藏关键技术节点,依据循证医学原则和专家讨论,共同制订本共识。本共识共对17个关键问题形成了23条推荐意见,旨在推动我国PBHSCs低温保藏技术的规范化与标准化,提升PBSCT的整体治疗水平。

关键词： 人脐带间充质干细胞   成软骨分化   肝细胞生长因子  

摘要： 目的探讨肝细胞生长因子(HGF)对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)定向成软骨诱导分化能力的影响以及其促诱导分化的最适浓度。方法体外分离,通过成球和平铺培养获得hUC-MSCs,并对其进行形态学观察,表型鉴定及成脂、成骨分化鉴定。取P3代细胞,分别加入含有3、5、7 ng/mL的HGF的诱导培养基进行成软骨诱导培养,通过阿利新蓝染色和实时荧光定量PCR检测诱导分化效果。结果在hUC-MSCs分离和成软骨诱导过程中二维平铺培养优于成球培养,低浓度的HGF可以促进hUC-MSCs向软骨分化,而高浓度的HGF反而会抑制其向软骨分化,并且通过浓度梯度验证后发现,5 ng/mL HGF在诱导成软骨分化方面有良好的促进作用,而且诱导分化7 d的效果优于14 d,提高了诱导分化效率。结论使用含适当浓度HGF的成软骨诱导分化培养基对平铺培养的hUC-MSCs进行诱导培养,可获得高质量的诱导分化软骨细胞。

关键词： 冠心宁注射液   冠心病不稳定心绞痛   心功能   血清核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3   白细胞介素-1β  

摘要： 目的探究冠心宁注射液联合常规治疗对冠心病不稳定心绞痛患者心功能及血清核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的影响。方法选取2022年2月—2025年2月黄河科技学院附属医院收治的冠心病不稳定心绞痛患者90例作为研究对象。根据治疗方案不同分为对照组(n=44)和联合组(n=46),分别予以常规方案治疗、冠心宁注射液联合常规方案治疗。比较2组患者的临床疗效、治疗前后的超声参数[左室收缩末径(left ventricular end-systolic diameter,LVESD)、左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、心脏指数(cardiac index,CI)]、心肌酶指标[肌酸激酶(creatine kinase,CK)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase-myocardial band,CK-MB)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)]、心绞痛发作情况、炎症因子[肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、IL-6、IL-18]及NLRP3/IL-1β的变化情况。结果治疗后,与对照组比较,联合组的治疗总有效率更高(P<0.05);治疗后,2组的LVESD、CK、CK-MB、LDH、心绞痛发作频次和发作时间、TNF-α、IL-6、IL-18、NLRP3 mRNA、IL-1βmRNA均降低,且联合组均低于对照组(P<0.05);治疗后,2组的LVEF、CI均升高,且联合组均高于对照组(P<0.05)。治疗期间,2组均未发生严重不良反应。结论采用冠心宁注射液治疗冠心病不稳定心绞痛,可有效缓解患者的症状,改善心功能,减轻炎症,机制可能与其对NLRP3/IL-1β通路的调控相关。

关键词： 猕猴桃   AcPHS-H基因   克隆   亚细胞定位   表达分析  

摘要： 以‘金艳’猕猴桃采后果实为材料,克隆α-葡聚糖磷酸化酶(α-glucan phosphorylase,PHS)基因,并进行生物信息学和不同温度条件下的表达特性分析.结果表明,AcPHS-H基因的序列长度为2550 bp,编码的蛋白分子质量为96.16 kD,等电点为8.62,无信号肽和跨膜结构域,具有66个磷酸化位点;AcPHS-H定位与内质网上,隶属于GTB糖基转移酶家族,具有葡聚糖磷酸化活性,主要的二级结构为α-螺旋和无规则卷曲;AcPHS-H与毛花猕猴桃的同源蛋白序列亲缘关系最近,进化过程中高度保守;AcPHS-H的表达水平受低温环境(1℃~10℃)显著诱导上调,当温度高于15℃时,AcPHS-H的表达量显著下调.本研究为揭示AcPHS-H的功能及其在不同温度条件下调控采后猕猴桃果实淀粉降解的作用机制提供了一定的理论依据.

关键词： 黑龙江林蛙   HSP90AB1基因   脂多糖   生物信息学   组织表达  

摘要： 【目的】探究黑龙江林蛙(Rana amurensis)热休克蛋白90α家族B类成员1(heat shock protein 90 alpha class B member 1,HSP90AB1)基因的序列特征,了解其组织表达特性和脂多糖(LPS)诱导下的表达变化。【方法】以黑龙江林蛙脾脏组织cDNA为模板,通过PCR扩增HSP90AB1基因完整编码区(CDS)序列,使用在线软件对其编码蛋白进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR和Western blotting检测生理状态下HSP90AB1基因在黑龙江林蛙皮肤、肌肉、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和胃等组织器官中的表达量,同时对LPS诱导下不同时间点HSP90AB1基因在不同组织器官的转录水平进行检测。【结果】黑龙江林蛙HSP90AB1基因CDS长2178 bp,共编码725个氨基酸。生物信息学分析显示,HSP90AB1蛋白不存在信号肽且无跨膜信号,属于非跨膜蛋白,存在62个潜在磷酸化位点(含33个丝氨酸、19个苏氨酸及10个酪氨酸位点),其二级结构以α-螺旋为主(占47.03%),其次为无规则卷曲(占39.59%)和延伸链(占13.38%)。系统进化树结果显示,黑龙江林蛙与欧洲林蛙亲缘关系最近。在生理状态下,HSP90AB1基因在黑龙江林蛙胃中表达量最高,且显著高于其他组织(P<0.05);在肌肉组织中表达量最低,且显著低于其他组织(P<0.05)。Western blotting结果显示,HSP90AB1蛋白在黑龙江林蛙胃中表达量最高;在心脏中表达量最低,且显著低于其他组织(P<0.05)。LPS诱导后,黑龙江林蛙各组织中HSP90AB1基因表达量随诱导时间延长而呈降低趋势,其中诱导72和96 h表达量均显著低于其他时间点(P<0.05);诱导12、72 h时脾脏中HSP90AB1基因表达量显著高于其他组织(P<0.05);24 h时肌肉和脾脏中HSP90AB1基因表达量显著高于其他组织(P<0.05)。【结论】本研究成功克隆了黑龙江林蛙HSP90AB1基因CDS区序列,并明确了其在不同组织中的表达规律,其中在胃中表达量最高,肌肉组织中表达量最低。LPS诱导可明显抑制HSP90AB1基因在黑龙江林蛙不同组织中的转录水平。本试验结果为深入探究HSP90AB1基因在林蛙生理及应激过程中的功能机制提供了理论依据。