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关键词： PAK1   克隆   多浪羊   初情期   组织表达  

摘要： 本研究旨在克隆多浪羊PAK1基因,并进行生物信息学分析,探究PAK1基因在多浪羊初次发情过程中不同组织的表达水平,深入理解PAK1基因在绵羊繁殖中的作用。选取初情期前、初情期和初情期后的健康雌性多浪羊,采集其性腺轴(Hypothalamic-pituitary-gonadal Axis,HPG)中的各种组织样本。根据NCBI中已公布的绵羊PAK1基因序列,设计特异性引物并以初情期各组织cDNA为模板进行PCR扩增,并进行基因克隆及测序。通过生物信息学软件对PAK1基因序列进行分析,并应用qPCR技术,对多浪羊PAK1基因不同时期不同组织的相对表达进行分析。结果显示,多浪羊PAK1基因扩增片段长度为1 813 bp,其中CDS区长度为1 635 bp,共编码544个氨基酸,该基因与GenBank中绵羊预测mRNA序列的相似性达99.94%。系统进化树的分析结果表明,多浪羊PAK1基因在进化上与牛的亲缘性较高,而与鸡的进化距离最远。qPCR试验结果表明,多浪羊HPG轴中的PAK1基因在不同组织和时期均显著表达。特别是在初情期,PAK1在下丘脑的表达高于其他组织(P<0.05)。本研究成功克隆了多浪羊PAK1基因,并获得其CDS区序列,PAK1基因在多浪羊下丘脑组织中高表达,在初情期发挥重要的调节作用。本研究结果为进一步对多浪羊PAK1基因在初情期调控机制方面的研究提供了理论基础。

关键词： 缺铁性贫血   妊娠   多糖铁复合物胶囊   维生素C   多维元素片  

摘要： 目的探讨多糖铁复合物胶囊联合多维元素片对妊娠缺铁性贫血的治疗效果。方法选取2022年5月至2023年12月深圳市福田区妇幼保健院收治的786例妊娠缺铁性贫血的患者作为研究对象,按照随机数字表法分为A、B与C组(各262例),A组采用每日口服多糖铁复合物胶囊1粒的方法;B组采用在口服多糖铁复合物胶囊时加服维生素C 1片的方法;C组采用服多糖铁复合物胶囊时加服多维元素片1片的方法。比较三组孕28、30、37周时血液检查指标(红细胞计数、血红蛋白浓度、红细胞压积、血清铁蛋白)数值的变化,并观察患者用药期间的不良反应。结果治疗后,C组的红细胞计数、血红蛋白浓度、红细胞压积、血清铁蛋白数值高于B组及A组,差异有统计学意义(P<0.05)。C组治疗缺铁性贫血的总有效率高于B组和A组,差异有统计学意义(P<0.05)。三组患者不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论多糖铁复合物胶囊联合多维生素片口服治疗妊娠缺铁性贫血的方法有效实用,可以在临床推广应用。

关键词： 载体蛋白   免疫原性   多糖结合疫苗   疫苗研发  

摘要： 研发多糖结合疫苗,通过将多糖抗原与蛋白质共价结合,使多糖抗原成为T细胞依赖性抗原,是提高多糖疫苗在婴幼儿中诱导免疫保护的重要策略。目前全球已上市的多糖结合疫苗中应用的载体蛋白包括破伤风类毒素、白喉类毒素、白喉毒素无毒突变蛋白197等。近年来,全球在新型载体蛋白、载体蛋白的偶联策略以及多种多糖结合疫苗同时接种的免疫效果和干扰情况方面进行了大量研究和分析,推动多糖结合疫苗向广谱覆盖、长效保护、简化接种的方向发展。本文旨在综述全球多糖结合疫苗中的载体蛋白研发最新进展及关于多糖结合疫苗制备、特性、安全性和有效性以及疫苗流行病学相关报道,探讨载体蛋白选择的原则和标准、应用现状和面临的主要问题,以期为我国未来多糖结合疫苗研发和免疫策略制定提供借鉴与启示。

关键词： 赤松茸   酸性糖   结构表征   抗氧化  

摘要： 为探究赤松茸多糖的结构特征和体外抗氧化活性,该研究通过热水提取和分离纯化,得到一种均一的赤松茸酸性多糖组分(Stropharia rugosoannulata acidic polysaccharides,SRAP),采用高效液相色谱、气质联用、红外等方法对SRAP的分子质量、官能团、糖苷键、构象及分支等结构特性进行表征,并测定DPPH自由基、ABTS阳离子自由基和羟自由基清除能力来评价其体外抗氧化活性。结果表明,SRAP是由甘露糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖和半乳糖组成的杂多糖,分子质量为2.57×10^(4)Da,总糖含量为(88.47±0.74)%,不具有三螺旋结构,可能含有较多的侧链和分支。高碘酸氧化和Smith降解的结果表明SRAP的连接方式主要为1→2、1→3、1→4和1→6型糖苷键。体外抗氧化结果表明,SRAP具有较强的DPPH自由基、ABTS阳离子自由基和羟自由基清除能力,SRAP对DPPH自由基、ABTS阳离子自由基和羟自由基的IC50值分别为0.34、0.79、1.18 mg/mL。赤松茸酸性多糖具有较高的体外抗氧化活性的原因可能是其分子质量较低和含有较高比例的半乳糖。该研究可为博爱赤松茸的进一步开发利用提供理论依据。

关键词： 荧光分光光度计   同步荧光法   氨基酸   实验教学  

摘要： 阐述荧光分光光度计的基本原理、实验操作要点和教学策略,为相关实验教学提供参考。通过利用同步荧光法同时测定色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸的实验教学,帮助学生掌握同步荧光技术的特征和应用。该实验项目对相关专业的本科生开放,通过丰富实践课程内容,提高学生的科研兴趣与自主性,增强他们的实践操作能力与科研素养。

关键词： 亮菌多糖   CCl_(4)   HepG2   细胞凋亡   氧化损伤  

摘要： 目的:本研究旨在探讨亮菌多糖(ATPo)不同水解产物对CCl_(4)诱导HepG2细胞氧化损伤的干预作用与机制。方法:采用醇沉法提取亮菌多糖,经除杂、干燥后得到ATPo。ATPo溶液分别用三氟乙酸(TFA)、纤维素酶、果胶酶、体外模拟消化方式水解并收集产物,设置溶液浓度梯度,进行水解产物对CCl_(4)诱导HepG2损伤细胞干预效果评价。检测反应液中总糖、还原糖、总酚和总黄酮含量。利用MTT法检测细胞存活率,收集细胞检测抗氧化性与代谢相关酶活性。蛋白免疫印迹方法检测目的蛋白含量,qPCR方法检测目的基因表达量。结果:CCl_(4)诱导HepG2的LC_(50)浓度为15 mmol/L,4种水解产物可改善细胞胞外自由基清除力和抗氧化水平,抑制转氨酶活性,降低细胞凋亡关键蛋白与基因表达量,抑制被激活的氧化应激信号通路因子p38 MAPK的表达水平,其中以TFA水解ATPo的产物对CCl_(4)诱导HepG2细胞的干预作用在各个方面表现最优。结论:亮菌多糖可以改善CCl_(4)诱导HepG2细胞氧化损伤程度,而TFA水解后产物的干预作用在多个方面均优于未水解多糖,干预过程的作用机制可能与氧化应激p38 MAPK信号通路相关。

关键词： 生物学年龄   蛋白质组学   肿瘤   人群队列  

摘要： 目的探索基于蛋白质组学的生物学年龄与肿瘤的发病、死亡和预后的关联。方法本研究共纳入52680例英国生物样本库(UK Biobank)蛋白质组学队列参与者,分析了18种新发病例数超过100例的肿瘤。生物学年龄采用基于蛋白质组学和机器学习的ProtAge-204模型进行计算。时序年龄与生物学年龄的关联采用线性相关分析进行评估,生物学年龄与全肿瘤/各肿瘤的发病、死亡和预后关联均采用Cox比例风险模型进行分析。结果ProtAge-204生物学年龄在验证集中与时序年龄的关联较高(R^(2)=0.84),可作为生物学年龄的标志物。生物学年龄与全肿瘤发病风险(HR_(per year)=1.03,95%CI:1.02~1.04)、全肿瘤死亡风险(HR_(per year)=1.09,95%CI:1.07~1.11)和预后(HR_(per year)=1.05,95%CI:1.02~1.17)均显著关联,且在死亡风险(HR_(时序)=1.02)和预后结局(HR时序=0.99)预测中表现优于传统的时序年龄。各癌种分析发现生物学年龄与8种肿瘤发病风险显著关联,与7种肿瘤导致死亡显著关联,分别优于时序年龄的6种和2种。在肿瘤预后方面2种年龄均未呈现出广泛的关联趋势。结论蛋白质组学构建的生物学年龄与肿瘤发病、因肿瘤死亡和预后结局关联显著,优于传统的时序年龄,推荐作为肿瘤衰老生物标志物使用。

关键词： 枸杞多糖   分离纯化   抗疲劳   相对分子质量   单糖  

摘要： [目的]明确枸杞多糖发挥抗疲劳功效的主要组成成分。[方法]采用水提、超滤膜分级透析等方法制备不同相对分子质量的枸杞多糖组分,通过小鼠负重游泳试验获得抗疲劳活性较好的组分,进一步利用离子交换柱和凝胶层析柱对其进行洗脱纯化,测定其相对分子质量、单糖组分,并进行红外光谱分析。[结果]不同相对分子质量的枸杞多糖中多糖含量为63.62%~75.63%、蛋白质含量为1.77%~2.63%、糖醛酸含量为17.77%~24.77%,其中LBP2组分的得率较高,4种组分的相对分子质量分别为115.3×10^(3),47.4×10^(3),8.14×10^(3),4.82×10^(3);LBP2组分在延长游泳时间,降低尿素氮、血乳酸含量,提高肌糖原、肝糖原含量,增强超氧化物歧化酶、过氧化物酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力(P<0.05)方面优于其他组分;LBP2经纯化获得了酸性多糖LBPE1、LBPE2和LBPE3,LBPE1和LBPE2的相对分子质量分别为3.54×10^(4),1.10×10^(4),主要由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成,其摩尔比分别为0.73∶1.61∶0.53∶3.22∶6.33∶8.26和1.94∶1.81∶1.36∶6.77∶8.46∶6.57,具有多处明显的多糖特征吸收峰,且均为β-吡喃糖苷类多糖。[结论]枸杞多糖片段LBPE1和LBPE2是其发挥抗疲劳作用的主要组成物质。

关键词： 多发性骨髓瘤   氨基酸   代谢异常  

摘要： 多发性骨髓瘤(MM)是第二大常见血液恶性肿瘤,但目前尚未明确其病因及发病机制。近年来,代谢异常逐渐成为癌症发病机制中的研究热点,氨基酸代谢异常在该领域的研究备受关注。研究表明,肿瘤细胞表现出独特的氨基酸代谢特征,以满足其快速增殖的需求。而在MM中,也已有相关研究,如谷氨酰胺和色氨酸代谢途径的显著改变,展现出潜在的治疗前景。进一步阐明氨基酸代谢异常在MM中的分子机制,将为开发新的诊断标志物和靶向治疗提供重要依据。本文将对氨基酸代谢异常在MM中的研究进展进行综述。

关键词： 异基因造血干细胞移植   马立巴韦  

摘要： 异基因造血干细胞移植后人类疱疹病毒-6B型(HHV-6B)感染是移植后非复发死亡的重要原因之一。回顾性分析3例异基因造血干细胞移植后HHV-6B再激活患者,以膦甲酸钠为一线抗病毒方案无效/不耐受,马立巴韦治疗后病毒转阴。1例HHV-6B脑炎患者无神经系统后遗症,3例患者均未观察到药物不良反应,初步证实马立巴韦可用于治疗移植后常规治疗无效/不耐受的HHV-6B感染。