课程文献中心 更多>>

关键词： 传染性法氏囊病毒   单克隆抗体   检测方法   双抗体夹心ELISA  

摘要： 旨在建立一种快速有效的检测鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的方法,本研究以IBDV全病毒作为免疫原制备单克隆抗体,以获得的单抗6G3作为捕获抗体,单抗4C12作为检测抗体,建立检测IBDV的双抗体夹心ELISA方法。结果表明,该ELISA方法具有良好的特异性,与REV、AEV、ALV和EDSV均无交叉反应;能检测病毒的最小量为1.585×10^(3) ELD50;批间和批内重复性试验显示,该方法具有良好的重复性;通过该方法对49份临床样品进行检测,与商品化的IBDV抗原检测卡进行比较,符合率达94.18%。综上,本研究建立的双抗体夹心ELISA方法,具有良好的特异性、敏感性和重复性,可用于IBDV的快速检测,为制备商品化的IBDV检测试剂盒奠定基础。

关键词： 人脐带充质干细胞   2型糖尿病   病例报告  

摘要： 目的评估静脉输注人脐带间充质干细胞治疗2型糖尿病的有效性和安全性。方法回顾性研究了1例确诊为2型糖尿病患者。在该研究对象的糖化血红蛋白仍旧不达标的基础上静脉输注人脐带间充质干细胞3次,并随访12周。在随访阶段通过血糖、胰岛功能情况及降糖方案的调整来评估治疗效果。记录随访期间的不良事件及肝肾功能及肿瘤等进行安全性评估。结果(1)在随访过程中,患者4、12周糖化血红蛋白均控制达标;(2)患者空腹血糖持续下降。餐后2小时血糖均小于基线水平,实现了减药;(3)一定程度上恢复了胰岛功能,改善了胰岛素抵抗;(4)患者随访12周内未见不良反应。结论本病例研究表明,hUC-MSCs可能为治疗T2DM提供新的途径。

关键词： 蛋白质   氧化铝   陶瓷   制备   多孔介质   烧结  

摘要： 选用容易获取的鸡蛋清、鸭蛋清、鹌鹑蛋清3种蛋白质作为发泡剂制备氧化铝多孔陶瓷。分别研究了蛋白质种类、用量、蛋白质复配等对多孔陶瓷形貌的影响。对多孔陶瓷的孔隙率、密度、抗压强度、孔径形貌等性能进行测试,利用红外光谱、X射线衍射对多孔陶瓷的结构进行分析。结果表明:鸡蛋清、鸭蛋清、鹌鹑蛋清3种蛋白质都可作为发泡剂制备多孔陶瓷,当3种蛋白质以体积比为1∶1∶1作为发泡剂时,泡沫体积分数为30%、浆料固相体积分数为40%时,多孔陶瓷的孔隙率为29.0%,密度为1.65 g·cm^(-3),抗压强度为23 MPa,最大压缩力为5.9 kN,可作为一种轻质高强的多孔建筑材料。

关键词： 神经表皮生长因子样蛋白1   人脱落乳牙牙髓干细胞   成骨分化  

摘要： 目的探究神经表皮生长因子样蛋白1(Nel-like type 1 molecule,NELL-1)对人脱落乳牙牙髓干细胞(stem cells from human exfoliated deciduous teeth,SHEDs)增殖及骨向分化的影响。方法对SHEDs进行分离、培养和细胞鉴定,将生长状态良好的第3代细胞用于后续实验。SHEDs分为4组,分别加入浓度为0(对照组)、50、100、200 ng/mL的NELL-1,利用CCK-8法和结晶紫染色法检测细胞活性;碱性磷酸酶活性检测细胞成骨能力改变;RT-qPCR检测成骨相关基因ALP、OCN、Runx-2表达水平;Western blot法检测成骨相关蛋白ALP、Runx-2、Col-Ⅰ表达情况。结果SHEDs具有干细胞特性,50 ng/mL的NELL-1可显著促进SHEDs增殖(P<0.01);碱性磷酸酶活性检测结果显示,加入NELL-1后,各组细胞成骨效果优于对照组,其中50 ng/mL NELL-1组成骨效果最佳(P<0.05);RT-qPCR和Western blot结果显示50 ng/mL NELL-1显著促进ALP、OCN、Runx-2成骨相关基因及ALP、Runx-2、Col-Ⅰ蛋白表达(P<0.05)。结论NELL-1对SHEDs增殖、成骨分化具有促进作用。

关键词： 多糖结合疫苗   合成生物学   蛋白多糖偶联技术   无细胞糖蛋白合成技术   膜抗原通用模块技术  

摘要： 多糖结合疫苗是预防细菌性传染病的重要手段,目前已上市的多糖结合疫苗均采用分步提取天然多糖抗原、纯化载体蛋白后,体外化学交联方法生产。近年来,合成生物学等新兴技术的快速发展,催生了一系列创新型多糖结合疫苗生产设计策略。本文重点对蛋白多糖偶联技术和无细胞糖蛋白合成技术研究进展进行综述,同时也简要介绍了膜抗原通用模块技术、半合成糖疫苗制备技术、非共价结合技术和基于非天然氨基酸的点击化学偶联技术在多糖结合疫苗研发中的应用。未来,随着人工智能技术的发展,有望在寡糖转移酶和载体蛋白的人工设计改造方面取得突破,进一步提升多糖结合疫苗的免疫效果和生产效率。

关键词： 结构与功能   蛋白质科学   生命形式   氨基酸  

摘要： 蛋白质是由基因编码,多种氨基酸聚合而成的生物大分子,为所有生命形式与生命活动的主要物质基础和功能执行者。蛋白质科学是生命科学的制高点,旨在研究蛋白质的结构与功能,以及在生物体中的时空分布、相互作用方式,进而揭示生命活动的本质和规律。在《国家中长期科技发展战略规划(2006-2020年)》中,蛋白质研究被列为基础研究四大科学研究计划之一。

关键词： 乙型肝炎e抗原阴性   慢性乙型肝炎   血清载脂蛋白C3   乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸病毒载量  

摘要： 目的 探讨乙型肝炎e抗原(hepatitis B e antigen,HBeAg)阴性慢性乙型肝炎患者血清载脂蛋白C3(apoli-poprotein C3,ApoC3)水平与乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(hepatitis B virus deoxyribonucleic acid,HBV-DNA)病毒载量是否存在相关性,以便于了解其在诊断HBeAg阴性慢性乙型肝炎中的作用。方法收集郑州市中心医院2022年2月至2024年2月收治的HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者153例为研究对象,根据肝功能Child-pugh分级分为:乙肝轻度50例、乙肝中度54例、乙肝重度49例,同期选择郑州市中心医院健康体检人群88例为对照组;测定上述各组血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT),天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST),γ-谷氨酰转移酶(gamma-glutamate transferase,GGT)、血清总胆红素水平(total bilirubin,TBil)、HBV-DNA病毒载量、ApoC3,分析各指标与HBV-DNA的相关性。结果与对照组比较,乙肝轻度、乙肝中度、乙肝重度组血清ApoC3水平降低[(249.63±18.96)μg/mL vs(126.52±21.59)μg/mL,(88.54±19.52)μg/mL,(61.87±12.58)μg/mL],差异有统计学意义(t=14.471、23.547、18.965,P<0.05),且随着乙肝严重程度的增加,ApoC3水平逐渐降低,差异有统计学意义(F=1432.90,P<0.001)。与对照组比较,乙肝轻度、乙肝中度、乙肝重度组血清AST、ALT、GGT、TBil、HBV-DNA水平升高,且乙肝损伤的严重程度越高,血清AST、ALT、GGT、TBil、HBV-DNA越高,差异均有统计学意义(F=2401.33、1614.92、922.47、1727.46、2948.35,P<0.001)。ApoC3水平与肝功能分级、AST、ALT、GGT、TBil、HBV-DNA负相关,差异均有统计学意义(r=-0.642、-0.719、-0.721、-0.659、-0.674、-0.703,P<0.05)。HBV-DNA,ApoC3诊断HBeAg阴性慢性乙型肝炎的灵敏度、特异度相近,差异均无统计学意义(χ^(2)=1.654、1.340,P>0.05)。结论HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者血清中ApoC3水平降低,且其浓度与患者肝功能以及HBV-DNA病毒载量负相关;ApoC3诊断HBeAg阴性慢性乙型肝炎具有一定程度的灵敏度、特异度。

关键词： MALAT1   miR-15b-5p   软骨细胞   Wnt/β-catenin信号通路   骨关节炎   炎症反应   成骨分化   细胞外基质  

摘要： 目的探讨骨关节炎中长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录物1(MALAT1)/微小RNA-15b-5p(miR-15b-5p)调控Wnt/β-catenin通路在脂多糖(LPS)诱导软骨损伤中的分子机制。方法以5 mg/L LPS处理ATDC5细胞形成骨关节炎细胞损伤模型,RT-qPCR检测细胞中MALAT1和miR-15b-5p的表达。MTT、流式细胞术、茜素红染色和ELISA检测MALAT1和miR-15b-5p对LPS诱导的软骨细胞损伤的影响。双荧光素酶报告基因实验检验MALAT1和miR-15b-5p的调控关系。Western blot检测相关蛋白的表达情况。结果在LPS诱导的ATDC5细胞中,MALAT1表达降低(P<0.05)。与Control组比较,LPS组细胞活性降低,凋亡率升高,肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6、白细胞介素-1β水平升高,钙化结节增多,MMP13、ADAMTS5蛋白表达水平升高,CollagenⅡ、Aggrecan蛋白表达水平降低,Wnt1和β-catenin蛋白表达水平升高(P<0.05)。MALAT1过表达可消减LPS对软骨细胞活性、凋亡、炎症反应、成骨分化、细胞外基质降解和Wnt/β-catenin通路的影响(P<0.05);而miR-15b-5p过表达增强了LPS对软骨细胞的作用(P<0.05)。结论MALAT1在LPS诱导的软骨细胞中低表达,其通过靶向miR-15b-5p抑制Wnt/β-catenin通路减轻LPS诱导的软骨细胞损伤。

关键词： 野马追倍半萜内酯   急性肺损伤   肺部屏障   代谢组学  

摘要： 目的:旨在通过代谢组学探讨野马追倍半萜内酯(sesquiterpene lactones of Eupatorium lindleyanum DC.,SLEL)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导急性肺损伤(acute lung injury,ALI)模型大鼠的保护作用。方法:将48只SD雄性大鼠随机分为空白对照组(control group,CG)、模型对照组(model group,MG)、SLEL低、中、高剂量组(50、100、200 mg/kg)和阳性对照组(醋酸地塞米松片,5 mg/kg),其中CG组和MG组给予磷酸盐缓冲液(phosphate-buffered saline,PBS),各组灌胃给药体积均为10mL/kg,每天给药1次,连续7 d。末次给药后1 h,除CG组外,其余各组大鼠均气管滴注5 mg/kg LPS建立ALI大鼠模型。造模24 h后,腹主动脉取血并收集左肺肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)。采用瑞氏-吉姆萨染色法计数BALF的总炎性细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞数;酶联免疫吸附测定法检测血清和BALF中白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)和干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)的含量;苏木精-伊红染色观察肺组织病理改变;蛋白免疫印迹技术(Western blot)检测肺组织紧密连接蛋白-1(zonula occludens-1,ZO-1)和闭合蛋白(Occludin)的蛋白表达;实时定量逆转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测肺脏IL-18、IFN-γ、ZO-1和Occludin的mRNA表达;超高效液相色谱-电喷雾电离-串联质谱(UPLC-ESI-MS/MS)对大鼠的血清和肺组织进行非靶向代谢组学分析。结果:与MG组相比,SLEL各剂量组均明显降低肺组织的湿干重比、肺系数和BALF的总炎性细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞的数量;均明显降低血清和BALF中IL-18和IFN-γ的含量以及肺组织中IL-18和IFN-γ的mRNA表达;也能够明显促进ZO-1和Occludin的蛋白和mRNA表达;光镜下可见肺组织水肿程度、肺泡腔内出血和炎症细胞浸润明显减轻,显示对ALI大鼠具有一定的保护作用;非靶向代谢组学研究结果显示SLEL血清和肺组织分别有91和33种代谢产物差异明显,其中血清中主要差异代谢物为鞘氨醇、L-乳酸、烟酸D-核苷酸及甲羟戊酸-5P,肺组织中主要差异代谢物为牛磺胆酸,提示SLEL可能主要影响血清的鞘脂、丙酮酸、烟酸和烟酰胺、色氨酸等代谢通路以及肺组织的牛磺酸和亚牛磺酸等代谢通路而改善ALI。结论:SLEL对LPS诱导ALI大鼠具有明显保护作用,其作用机制可能与抑制炎症因子、改善肺部屏障功能以及调控相关代谢通路相关。

关键词： 藜麦品种   蛋白质   脂肪   膳食纤维   淀粉  

摘要： 选取迪庆州黑、红、白3种藜麦进行深入分析,旨在探究该地区藜麦品质特性,为未来科学研究及产业升级提供支持。以100 g藜麦计,研究显示,3种藜麦蛋白质含量差异很小,分别为12.6 g、12.3 g和12.2 g;黑藜麦脂肪、膳食纤维、粗纤维含量最高,分别为4.81 g、8.32 g和6.12 g,与其他品种有明显差异;红藜麦钠含量最高为6.24 mg,明显高于其他品种;白藜麦淀粉含量最高为34.1 g,明显高于其他品种。