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关键词： 水解羽毛粉   樱桃谷公鸭   养分消化   氨基酸真可利用率  

摘要： 该试验旨在研究樱桃谷成年公鸭对福建、山东、广东三种产地水解羽毛粉的养分消化情况及氨基酸利用率。选择48只健康成年樱桃谷公鸭,随机分为4组,每组12只,分别饲喂100%玉米淀粉(对照组)和85%玉米淀粉+15%水解羽毛粉(产地为福建、山东、广东)。通过强饲-全收粪法代谢试验,收集排泄物,测定饲料和排泄物的重量和水分、干物质、粗蛋白质、氨基酸、钙、磷含量。不同产地水解羽毛粉在干物质、粗蛋白和氨基酸含量方面存在差异。福建水解羽毛粉干物质含量最高(93.7%),粗蛋白质为83.4%。山东和广东水解羽毛粉粗蛋白稍高,但差异不显著(P>0.05)。氨基酸利用率方面,福建水解羽毛粉的天冬氨酸、苏氨酸和谷氨酸等氨基酸真可利用率显著高于山东和广东(P<0.01)。强饲不同产地水解羽毛粉后,试鸭粪便的重量和干物质、粗蛋白质、钙、磷含量无显著差异(P>0.05)。不同产地水解羽毛粉饲喂的樱桃谷肉鸭粪中,干物质、蛋白质和氮的消化率在福建、山东和广东之间未表现出显著差异(P>0.05)。不同产地水解羽毛粉除氨基酸以外的其他营养成分差异较小,福建水解羽毛粉的氨基酸含量较高,尤其是天冬氨酸和苏氨酸真可利用率显著优于山东和广东水解羽毛粉。樱桃谷公鸭对福建、山东、广东水解羽毛粉干物质和粗蛋白质消化率相差较小。

关键词： 脓毒症相关急性肾损伤   有氧糖酵解   PI3K/AKT/HIF-1α通路   芍药苷   肾小管上皮细胞  

摘要： 目的探讨芍药苷(paeoniflorin,PF)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的肾小管上皮细胞(HK-2细胞)有氧糖酵解的影响及其作用机制。方法本研究分为预实验和正式实验两部分。①预实验:体外培养HK-2细胞,CCK-8实验检测细胞活力,RT-qPCR检测炎症因子mRNA的水平,进行LPS最佳造模浓度筛选、芍药苷毒性实验和浓度筛选。正式实验:将HK-2细胞分成对照组(CON组)、LPS组、LPS+PF组和LPS+PF+740Y-P组。通过建立LPS诱导的SA-AKI肾小管细胞损伤的体外模型,分别给予PF和PI3K激活剂740Y-P干预,造模24 h后取材,CCK-8实验检测细胞活力;细胞外酸化率(extra cellular acidification rate,ECAR)试剂盒检测ECAR;ELISA检测IL-1β、IL-18、乳酸(lactic acid,Lac)以及乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA);Western blot检测p-PI3K、p-AKT、HIF-1α、丙酮酸激酶2(pyruvate kinase 2,PKM2)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)的表达;免疫荧光观察有氧糖酵解关键酶PKM2的表达和分布情况。结果①筛选出LPS最佳造模浓度为20.0μg/mL,芍药苷安全剂量为0~100.0μmol/L,芍药苷的最佳治疗浓度为25.0μmol/L。②与CON组相比,LPS组细胞活力明显下降(P<0.05),ECAR明显升高(P<0.05),IL-1β、IL-18、Lac、LDHA水平明显增加(P<0.05),p-PI3K、p-AKT、HIF-1α、p-PKM2、NLRP3蛋白相对表达量明显增加(P<0.05),细胞核内PKM2荧光强度明显增强(P<0.05)。与LPS组相比,LPS+PF组ECAR明显下降(P<0.05),IL-1β、IL-18、Lac、LDHA水平明显下降(P<0.05),p-PI3K、p-AKT、HIF-1α、p-PKM2、NLRP3蛋白相对表达量明显减少(P<0.05),细胞核内PKM2荧光强度明显减弱(P<0.05)。与LPS+PF组相比,LPS+PF+740Y-P组ECAR明显升高(P<0.05),IL-1β、IL-18、Lac、LDHA水平明显增加(P<0.05),p-PI3K、p-AKT、HIF-1α、p-PKM2、NLRP3蛋白相对表达量明显增加(P<0.05),细胞核内PKM2荧光强度明显增强(P<0.05)。结论芍药苷通过抑制PI3K/AKT/HIF-1α信号通路,降低HK-2细胞有氧糖酵解水平,减轻炎症反应。

关键词： 蓝莓花青素   小鼠睾丸类器官   精原干细胞  

摘要： 【目的】本试验旨在利用小鼠睾丸类器官探究蓝莓花青素对类器官生长发育以及精原干细胞命运的影响,为花青素添加剂改善种公畜的生殖能力方面提供科学依据。【方法】以体外构建具有曲细精管样结构的小鼠睾丸类器官为试验材料,分别添加浓度为0,50,100,200,500μg/mL的蓝莓花青素处理,用TUNEL检测类器官中细胞的凋亡情况,免疫荧光检测类器官中组织结构及支持细胞与生殖细胞的数量变化,RT-PCR检测类器官中精原干细胞的命运走向。【结果】(1)类器官构建试验结果表明:构建的小鼠睾丸类器官具有睾丸组织结构特征,包含曲细精管样结构以及支持细胞、生殖细胞、管周肌样细胞、间质细胞在内的重要细胞类型;(2)组织结构试验结果表明:当蓝莓花青素处理浓度为200μg/mL时,睾丸类器官直径的前期生长速度显著低于对照组(P<0.01),但后期生长加快,并于16 d时与对照组生长状况相当。此外,处理浓度为200μg/mL组,其生殖细胞与支持细胞数量相较于对照组明显增多(P<0.01),而处理浓度为500μg/mL组,其支持细胞数量呈现出显著降低(P<0.01);(3)细胞凋亡试验结果表明:当蓝莓花青素处理浓度为500μg/mL时,睾丸类器官中细胞凋亡信号强度显著高于其他组(P<0.01);(4)精原干细胞命运走向试验结果表明:当蓝莓花青素处理浓度为200μg/mL时,未分化精原细胞标志物Plzf表达水平显著上升(P<0.05),分化标志物Stra8表达水平显著下降(P<0.05)。【结论】睾丸类器官的培养过程中添加适量的蓝莓花青素可以增强类器官中精原干细胞的自我更新能力,维持精原干细胞的干性,促进类器官的生长发育,但剂量过高则会引起细胞不可逆的损伤,影响睾丸类器官的形成效率。

关键词： 机械力   牙髓干细胞   牙周膜干细胞   衰老  

摘要： 机械力对体内绝大部分的器官及组织的发育及修复具有非常重要的调控作用。主流研究趋向于证实机械力对体内牙源性干细胞发育及再生功能存在一定程度的调节作用。本文对影响衰老牙源性间充质干细胞功能机械力的类型以及响应机械刺激的潜在机制进行概述和总结。

关键词： 大鲵   Galectin-3   生物信息学分析   实时荧光定量PCR   嗜水气单胞菌  

摘要： 为明确中国大鲵Galectin-3基因的分子生物学特征以及染菌前后的表达模式,通过RT-PCR技术对大鲵Galectin-3基因进行了扩增,通过生物信息学技术分析其理化性质和蛋白结构,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测了嗜水气单胞菌侵染前后中国大鲵不同组织中Galectin-3的表达情况。结果表明,大鲵Galectin-3基因CDS区长度为351 bp,编码116个氨基酸,理论等电点(pI)为5.87,相对分子质量为13.53 ku,为稳定的亲水蛋白,定位于细胞质;结构分析显示,大鲵Galectin-3蛋白含有一个GLECT结构域;系统发育进化树显示,大鲵Galectin-3氨基酸序列与双条吻蚓的亲缘关系最近。qRT-PCR结果显示,大鲵Galectin-3在所测各组织中均有表达,且在皮肤中的相对表达量最高;在大鲵肝脏、肌肉、肠和肾脏组织中,嗜水气单胞菌感染12 h,Galectin-3的相对表达量显著上升并达到最高值;而在大鲵脾脏和皮肤组织中,嗜水气单胞菌感染48 h,Galectin-3的相对表达量显著上升并达到最高值。综上,在外源菌的侵染下大鲵Galectin-3基因在早期积极响应表达,揭示Galectin-3基因可能参与了大鲵的免疫调控作用。

关键词： 脂肪干细胞   成骨分化   糖尿病性骨质疏松   糖尿病   骨组织工程  

摘要： 糖尿病(DM)患者长期高血糖所致骨质疏松及骨愈合延迟等骨骼并发症已成为显著降低其生活质量的临床难题,其核心机制与脂肪干细胞(ADSCs)成骨分化能力受损密切相关。在骨组织工程中,ADSCs因取材微创、增殖迅速及多向分化能力被视为骨缺损修复的种子细胞,但DM病理环境显著抑制了ADSCs的成骨潜能,进而影响了糖尿病骨病的治疗效率。因此,探索高糖环境下ADSCs成骨能力障碍的深层机制对优化糖尿病骨病的治疗策略具有重要意义。本文系统回顾并总结了高糖环境中ADSCs迁移能力下降、增殖活性降低、衰老凋亡加速及成骨分化障碍的潜在机制。高糖环境可通过激活氧化应激、晚期糖基化终产物积聚以及扰乱Wnt/β-catenin、PI3K/Akt/mTOR、Notch等关键信号通路,从而抑制成骨相关基因的表达。此外,表观遗传修饰中DNA甲基化及非编码RNA网络可共同沉默成骨基因。深入阐明上述机制不仅有助于理解糖尿病骨病的发病机理,更为制定干预策略提供了方向。本综述旨在推动ADSCs再生医学在DM中的应用,并为进一步开发DM患者自体ADSCs修复和治疗骨缺损的策略提供理论依据。

关键词： 超声波提取   山楂   多糖   工艺优化  

摘要： 山楂中含有大量对人体有益的物质,其中多糖相较于其他活性成分含量更多。多糖具有一定抗血糖、抗血脂作用,且具有良好的抗氧化能力。以超声波辅助提取法对山楂中多糖的提取工艺进行优化,根据单因素试验和正交试验的结果最终得出多糖的最佳提取工艺为:料液比1∶40(g/mL)、乙醇浓度85%、超声时间40min、温度60℃,在此条件下测得多糖的得率为15.33%,旨在为食品中多糖的高效提取及合理应用提供理论参考。

关键词： 日粮   蛋白质   能量   育肥效果   生长性能  

摘要： 近年来,我国的农业产业向着智能化和机械化的方向发展,肉牛也从役用为主转变为肉用为主,并且随着我国经济发展迅速以及人们生活水平提升,选择消费优质肉类已成趋势;牛肉中蛋白质、铁、磷、钙和维生素C的含量丰富,胆固醇和脂肪含量低,氨基酸的组成接近人体需要,另外牛肉中还富含能够减缓细胞衰老的亚油酸,这些使得牛肉消费量逐年增长。随着牛肉的需求量增加,日粮中的营养水平成为影响肉牛生产效益的关键一环。多个试验研究表明,日粮中能量、蛋白水平直接影响肉牛的生长性能、肉品质、养殖效益等;能量、蛋白水平偏低,拉长肉牛的育肥时间,且肉品质下降,能量、蛋白水平偏高,瘤胃pH下降,引起肉牛瘤胃中的纤维分解菌活性下降,饲料消化率下降,料肉比升高,养殖效益下降,因此,供给适宜水平的营养日粮对于提高肉牛的生长性能、养殖效益和改善肉品质具有重要意义。

关键词： 慢性不可预测性温和应激法   抑郁症   酸枣仁多糖   NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3信号通路  

摘要： 目的探讨酸枣仁多糖(ZSSP)对慢性不可预测性温和应激(CUMS)抑郁症小鼠抑郁行为的影响及作用机制。方法将60只SPF级昆明雄性小鼠随机均分为对照组、模型组、小剂量组、中剂量组、高剂量组和盐酸氟西汀(Flu)组,除对照组外,其余5组均采用CUMS法制备小鼠抑郁症模型,小剂量、中剂量和高剂量组分别采用50、100、150 mg/kg的ZSSP进行灌胃处理,对照组和模型组用0.9%氯化钠注射液灌胃,Flu组用10 mg/kg的Flu灌胃。比较各组小鼠抑郁症行为学评分及血清炎症介质[白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-18]、海马组织中Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-1水平。结果与对照组比较,模型组、小剂量组、中剂量组、高剂量组和Flu组糖水偏好率下降,强迫游泳不动时间、悬尾不动时间均延长,矿场总路线缩短,血清IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-18水平均升高,海马组织中TLR4、NF-κB、NLRP3、Caspase-1水平均升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,小剂量组、中剂量组和高剂量组糖水偏好率升高,矿场总路线延长,强迫游泳不动时间、悬尾不动时间均缩短,血清IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-18水平及海马组织中TLR4、NF-κB、NLRP3、Caspase-1水平均下降,且小剂量组、中剂量组、高剂量组小鼠抑郁症行为学评分、血清IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-18水平及海马组织中TLR4、NF-κB、NLRP3、Capase-1水平均呈现明显剂量依赖性,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论ZSSP具有良好的抗抑郁作用,尤其是高剂量ZSSP抗抑郁效果更明显,其作用机制可能与抑制TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路激活有关。

关键词： 痰涂片抗酸杆菌   结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术   涂阴肺结核   老年   诊断效能  

摘要： 目的 探讨痰涂片抗酸杆菌(AFB)与痰结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Xpert MTB/RIF,简称Xpert)联合检测在涂阴肺结核老年患者中的诊断效能,为临床诊疗提供参考。方法 选取2023年1月至2024年12月苏州市第九人民医院收治的92例疑似涂阴肺结核老年患者的临床资料,进行回顾性分析。所有患者均行痰涂片AFB检查、痰Xpert检测和痰结核分枝杆菌培养。以痰培养阳性或临床诊断结果(包括影像学、临床症状及抗结核治疗有效)为金标准,分析疑似涂阴肺结核老年患者的诊断结果,比较痰涂片AFB、痰Xpert联合检测涂阴肺结核的诊断效能,分析痰涂片AFB、痰Xpert联合检测与金标准的一致性。结果 92例疑似涂阴肺结核老年患者中,最终确诊肺结核患者67例,非结核性疾病患者25例。痰涂片AFB阳性22例,其中确诊结核20例,非结核2例;痰Xpert阳性52例,其中确诊结核50例,非结核2例;痰培养阳性37例,全部确诊结核。痰涂片AFB联合痰Xpert检测的准确度为88.04%,敏感度为88.06%,特异度为96.00%,阳性预测值为96.61%,阴性预测值为73.33%,均高于痰涂片AFB单一检测(均P<0.05)。痰涂片AFB联合痰Xpert检测与痰 Xpert 单独检测比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。一致性分析结果显示:痰Xpert单独检测和痰涂片AFB联合痰Xpert检测的一致性均良好(Kappa值=0.768、0.801,均P<0.05),痰涂片AFB单独检测的一致性中等(Kappa值=0.492,P<0.05)。结论 在涂阴肺结核老年患者的诊断中,痰涂片AFB单独检测的敏感度较低,而痰Xpert单独检测具有较高的诊断效能,能提高诊断的敏感度和准确率。通过痰涂片AFB与痰Xpert联合检测可进一步提高诊断的敏感度,有助于涂阴肺结核老年患者的早期诊断和及时治疗。