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关键词： 间充质干细胞   肿瘤治疗   肿瘤微环境  

摘要： 间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)能黏附于塑料表面,表达CD73、CD90和CD105等特异性分化簇;在体外可分化为成骨、软骨或脂肪细胞;且不表达CD14、CD34、CD45、CD11b、CD19和HLA-DR等分子标记。MSCs在肿瘤治疗中扮演着复杂的角色,既是潜在的“盟友”,也是“敌人”。一方面,MSCs能够通过调节信号通路和免疫反应抑制肿瘤生长和转移,发挥抗肿瘤效应;另一方面,MSCs也可能增强肿瘤细胞的侵袭性、转移能力和血管生成,从而促进肿瘤发展。MSCs对肿瘤的影响取决于其自身特性、肿瘤微环境以及信号通路的激活或抑制。因此,在肿瘤治疗中,需综合考虑这些因素,通过优化MSCs的来源和特性、调控肿瘤微环境、调控信号通路等策略,将MSCs从潜在的“敌人”转化为“盟友”。本文综述了MSCs的特征、在肿瘤治疗中的双重作用及其机制,并提出“化敌为友”的思路和策略,以实现基于MSCs的肿瘤治疗的突破性进展,并安全有效地应用于临床治疗。

关键词： 黄精多糖   罗伊氏粘液乳杆菌   后生元   肠道菌群   认知障碍  

摘要： 后生元在加工稳定性、贮藏稳定性及食用安全性方面优于活菌及其合生元。滇黄精(Polygonatum kingianum *** Hemsl.)是我国传统药食同源植物,其富含的黄精多糖(Polygonatum kingianum polysaccharides,PKP)不仅自身具有降糖降脂的生物活性,还可作为益生菌的优质碳源。该研究将PKP与一株源自健康人粪便且具有显著抗炎效果的罗伊氏粘液乳杆菌WX-94(Limosilactobacillus reuteri WX-94)共培养,经灭活后制备后生元(***),系统评价其对长期高脂高蔗糖饮食诱导的大鼠认知功能障碍的改善作用及机制。结果显示,经过8周干预,***能有效缓解HFHS饮食导致的大鼠认知功能下降、海马区炎症浸润及尼氏体损伤,显著改善脂代谢紊乱,降低海马中炎症因子(IL-6、TNF-α、IL-1β)和脂多糖水平,同时提高超氧化物歧化酶和还原型谷胱甘肽含量,减轻脑组织氧化应激损伤,其效果优于合生元(PKP+***)及基于MRS培养基的后生元(***)。此外,***显著抑制海马区Toll样受体4(TLR4)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、髓样分化因子88(MyD88)基因表达,并提升脑源性神经营养因子(BDNF)水平,还可重塑肠道菌群结构,提高乳杆菌属、鼠李糖乳酪杆菌、普雷沃菌属和格氏乳杆菌等有益菌丰度,降低螺杆菌属和颤螺菌属等条件致病菌比例,促进短链脂肪酸(尤其是丁酸和丙酸)生成。相关性分析表明,***对肠道菌群与代谢产物的调节与行为学及海马指标显著相关。研究揭示了黄精多糖协同罗伊氏粘液乳杆菌后生元在改善西式饮食诱导认知障碍方面的潜力,并证实了黄精多糖增强罗伊氏粘液乳杆菌通过抑制TLR4/NLRP3/MyD88信号通路改善脑源性神经营养因子,重塑肠道菌群并提升短链脂肪酸含量发挥的调控肠脑轴改善认知障碍的功效,为认知健康的营养干预策略提供了新思路。

关键词： PRRSV   铁蛋白   多表位疫苗   核酸疫苗   免疫原性   中和抗体  

摘要： 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)对全球养猪业危害严重,现有疫苗存在免疫效果或安全性不足的缺陷。为提高核酸疫苗的免疫原性,本研究基于PRRSV结构蛋白(GP3、GP4、GP5)和非结构蛋白(NSP2、NSP7、NSP12)的8个B细胞表位,通过柔性连接肽串联,并在N端引入树突状细胞肽(DCpep)、通用T细胞表位PADRE及肠微褶皱细胞肽(Mpep),构建多表位抗原NGP。进一步将铁蛋白(Ft)与NGP融合,构建真核表达质粒pcDNA3.1-NGP-Ft,以评估Ft对DNA疫苗的免疫增强作用。试验前期通过原核表达系统制备重组蛋白MBP-NGP,并免疫小鼠验证其免疫原性。Western blot和间接免疫荧光(IFA)证实NGP及NGP-Ft在细胞中成功表达。小鼠免疫结果显示,pcDNA3.1-NGP-Ft组相较于pcDNA3.1-NGP组,ELISA抗体效价、中和抗体水平、脾淋巴细胞增殖能力及γ干扰素(IFN-γ)分泌量均增强(P<0.05)。淋巴结生发中心分析表明,Ft融合抗原可延长淋巴结内抗原滞留,促进免疫应答。本研究首次证实Ft可有效提升PRRSV多表位DNA疫苗的体液与细胞免疫水平,为新型纳米颗粒疫苗的研发提供了理论依据。

关键词： 帕米尔牦牛   FGF10基因   基因克隆   组织表达  

摘要： 本研究旨在探究牦牛FGF10基因的结构和功能,并分析其在帕米尔牦牛8个组织中的表达规律。以帕米尔牦牛肌肉组织cDNA为模板,采用PCR技术克隆FGF10基因的CDS区,通过生物信息学方法对该基因序列进行分析,结合qRT-PCR对帕米尔牦牛8个不同组织样本的FGF10基因表达水平进行定量检测。结果表明,帕米尔牦牛FGF10基因的编码序列(CDS区)长度为642 bp,共编码213个氨基酸。同源性比对结果表明,帕米尔牦牛与野牦牛和家牛的相似性最高,为100%;与小家鼠的相似性最低,为90.1%。生物信息学分析结果显示,帕米尔牦牛FGF10蛋白的分子式为C_(1049)H_(1639)N_(299)O_(307)S_(13),原子总数、不稳定指数和总平均亲水指数分别为3307、45.07和-0.358,表明该蛋白为稳定性亲水蛋白。信号肽分析证明FGF10蛋白属于分泌型蛋白,且含跨膜螺旋结构,经亚细胞定位分析发现,该蛋白主要分布在胞外环境中。其分子结构中包含2个N糖基化位点,同时存在47个潜在磷酸化位点。此外,FGF10蛋白的二级结构以无规则卷曲为主要构成形式,与FGFR1、FGFR2和FLT1等蛋白存在互作关系。FGF10基因在8个组织中的表达规律分析结果表明,不同组织间的表达存在差异,其中,背最长肌组织中的相对表达量最高,显著高于其余7个组织(P<0.01)。

关键词： 水稻   独脚金内酯   生长素   矮化多蘖   OsCCD8/DMT1  

摘要： 分蘖数是调控水稻产量的关键农艺性状之一。本研究获得1个新的矮化多分蘖自然突变体dmt1(dwarf and multi-tiller 1)。表型分析显示, dmt1的分蘖数高达(155.07±18.53)个,是野生型HY67的12.64倍;同时,其株高、穗长、结实率、粒长、千粒重等农艺性状均显著低于HY67。组织切片结果表明, dmt1分蘖数增多的表型可能源于分蘖芽的提早伸长。遗传学分析证实, dmt1的矮化多分蘖表型受1个主效隐性基因控制。通过图位克隆和基因沉默技术,成功克隆得到DMT1基因。该基因是独脚金内酯(SLs)合成通路中的关键基因D10/OsCCD8(LOC_Os01g54270)发生点突变产生的新等位变异,编码产物仅包含OsCCD8蛋白N端的279个氨基酸。RT-qPCR结果显示, SLs和IAA通路相关基因在dmt1突变体与野生型HY67中的表达量存在显著差异。此外,外源施加IAA可以显著诱导DMT1基因的表达,并提高SLs合成途径中的中间产物CL和5-DS的含量。上述结果说明, DMT1是介导IAA与SLs通路互作的关键节点。本研究结果丰富了D10/OsCCD8基因的功能认知,为解析其蛋白结构域的功能提供了理想材料,对水稻高产育种具有重要理论指导意义。

关键词： 黄芪多糖   肺癌   荷瘤小鼠   机体免疫   调节作用  

摘要： 目的探讨黄芪多糖对肺癌荷瘤小鼠机体免疫、肿瘤细胞生长的调节作用。方法选取无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级的C57BL/6J小鼠72只,随机分为模型组(等量生理盐水灌胃)、阳性对照组(顺铂6.0 mg/kg腹腔注射)、低剂量组(黄芪多糖溶液50 mg/kg灌胃,浓度为1.0 mg/mL)、高剂量组(黄芪多糖溶液100 mg/kg灌胃,浓度为1.0 mg/mL)各18只,对比各组小鼠造模后第14天肿瘤体积、肿瘤瘤体质量、抑瘤率、外周血中T淋巴细胞、肿瘤组织中Survivin蛋白表达,采用流式细胞技术检测各组小鼠肿瘤组织中肿瘤细胞的分期分布情况。结果阳性对照组、低剂量组、高剂量组的肿瘤体积、肿瘤质量与模型组比较均更低(P<0.05);阳性对照组的肿瘤体积、肿瘤质量与低剂量组、高剂量组小鼠比较明显更低(P<0.05),抑瘤率相较于低剂量组、高剂量组则明显更高(P<0.05);高剂量组的肿瘤体积、肿瘤质量均低于低剂量组(P<0.05),抑瘤率高于低剂量组(P<0.05);低剂量组、高剂量组外周血中CD4^(+)T淋巴细胞(cluster of differentiation 4,CD4^(+))、CD4^(+)/CD8^(+)T淋巴细胞(cluster of differentiation 8,CD8^(+))高于模型组和阳性对照组(P<0.05),CD8^(+)水平低于模型组和阳性对照组(P<0.05);高剂量组外周血中CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)高于低剂量组(P<0.05),CD8^(+)水平低于低剂量组(P<0.05);阳性对照组、低剂量组、高剂量组的肿瘤组织中Survivin蛋白评分低于模型组(P<0.05),阳性对照组的Survivin蛋白评分低于低剂量组、高剂量组(P<0.05),高剂量组Survivin蛋白评分低于低剂量组(P<0.05);阳性对照组、低剂量组、高剂量组的肿瘤组织中S期细胞占比高于模型组(P<0.05),阳性对照组的S期细胞占比高于低剂量组、高剂量组(P<0.05),高剂量组S期细胞占比高于低剂量组(P<0.05)。结论黄芪多糖通过调节肺癌荷瘤小鼠免疫功能、降低Survivin蛋白表达,达到抑制肿瘤细胞生长的效果。

关键词： 南美白对虾   镉   蛋白质组   富集机制   抗氧化酶  

摘要： 本研究基于串联质量标签(tandem mass tag,TMT)标记蛋白质组学技术,探究南美白对虾在0.2 mg/L Cd2+胁迫6 d后肝胰腺组织的蛋白质表达变化,以阐明典型海洋甲壳类生物的Cd富集耐受机制。结果显示:与对照组相比,胁迫组共鉴定出369个差异蛋白,其中214个上调表达、155个下调表达。基因本体(gene ontology,GO)分析表明,差异蛋白在生物学过程中主要参与细胞过程、代谢过程等,细胞组成涉及细胞和蛋白质结合复合物等,分子功能以催化活性、结合功能为主;真核生物直系同源蛋白簇(eukaryotic orthologous groups,KOG)注释显示其显著富集于翻译后修饰、能量代谢等功能;京都基因和基因组数据库(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)分析揭示上调蛋白与内质网中蛋白质加工通路相关,下调蛋白集中于核糖体及精氨酸和脯氨酸代谢通路。Cd胁迫下,锌指蛋白、金属硫蛋白、钙连蛋白、钙网蛋白、热激蛋白(heat shock proteins,HSPs)中的部分蛋白质(HSP60、HSP70、HSP90)及谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPx)等抗氧化酶表达均显著上调。这些蛋白质可能通过调控Cd2+结合与外排、修复错误蛋白、缓解内质网应激及清除活性氧,构成南美白对虾应对Cd胁迫的分子响应网络。

关键词： 热裂解质谱(Py-MS)   蛋白质   脂肪酸   核酸   原位检测  

摘要： 质谱技术的持续创新推动了多元化分析系统的快速发展,催生出多种能够满足不同检测需求与应用场景的仪器平台及方法体系。热裂解质谱(pyrolysis-mass spectrometry,Py-MS)联用技术凭借其独特的在线分析特性,在复杂样品的原位实时检测方面展现出显著优势。该技术基于有机化合物的热不稳定性,通过高温裂解使大分子物质解聚生成低分子质量产物,进而依据特征裂解产物的指纹图谱及其相对丰度与母体物质的对应关系实现定性与定量分析。为进一步提升Py-MS对难挥发样品的分析性能,研究人员开发了以四甲基氢氧化铵(tetramethylammonium hydroxide,TMAH)为衍生试剂的在线甲基化改进方法——原位热辅助水解甲基化质谱(in situ thermally assisted hydrolysis and methylation mass spectrometry,in situ THM-MS)技术。该技术通过在热裂解过程中同步进行甲基化反应,有效提高裂解产物的挥发性并改善其质谱响应特性,现已在蛋白质、核酸、脂类等生物大分子的快速检测中得到成功应用。Py-MS技术凭借其强大的分析能力与现场检测优势,已拓展至化工材料表征、生物医药分析、环境污染物监测、微生物鉴定、文物考古及法医物证检验等多个交叉学科领域。本文介绍了应用于Py-MS的3种典型热裂解装置,并对用于蛋白质、核酸及脂质等生物样品的研究进展进行综述。

关键词： 肾结石   通淋排石汤   中医证候   红细胞免疫功能   核苷酸寡聚化结构域样受体蛋白3   单核细胞趋化蛋白-1   前列腺素E_(2)  

摘要： 目的探讨通淋排石汤辅助治疗肾结石的疗效及对患者中医证候、红细胞免疫功能、血清核苷酸寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide oligomerization structural domain-like receptor protein 3,NALP3)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)、前列腺素E_(2)(prostaglandin E_(2),PGE_(2))等指标的影响。方法选取2022年1月至2024年6月南阳南石医院收治的肾结石患者112例作为研究对象,用随机数字表法分为对照组和试验组,每组56例。2组均行输尿管软镜碎石术,对照组术后给予盐酸坦索罗辛缓释胶囊,试验组在对照组治疗的基础上加用通淋排石汤,2组均治疗2周,并随访6个月。比较2组随访6个月后的疗效;治疗前和随访6个月后的中医证候、视觉模拟评分法(Visual Analog Scale,VAS)评分;治疗前和治疗2周后的肾功能,红细胞免疫功能,血清NALP3、MCP-1、PGE_(2)水平及随访期间不良反应的发生情况。结果与对照组比较,试验组随访6个月后的总有效率更高(P<0.05)。与治疗前比较,随访6个月后,2组的血尿、排尿涩痛、腰腹疼痛、排尿中断、便干评分,VAS评分均降低(P<0.05),且试验组的上述评分均更低(P<0.05)。治疗2周后,2组的尿24 h尿蛋白定量(24 h urinary protein,24 h UPro)及血清胱抑素C(cystatin C,Cys-C)、血肌酐(serum creatinine,Scr)、NALP3、MCP-1、PGE_(2)水平均降低(P<0.05),且试验组均低于对照组(P<0.05);2组的外周血红细胞免疫复合物受体花环率(red blood cell immune complex receptor rosette rate,RBC-ICR)、免疫复合物受体花环率(immune complex receptor rosette rate,ICRRR)及C3b受体花环率(c3b receptor rosette rate,C3bRR)水平均降低(P<0.05),但试验组均高于对照组(P<0.05)。随访期间,2组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论通淋排石汤辅助治疗肾结石可有效调节患者的血清NALP3、MCP-1、PGE_(2)水平,减轻机体炎症反应,并可改善患者中医证候及肾功能,缓解疼痛程度,同时对患者红细胞免疫功能的影响较小,进而有利于提高疗效,且具有良好的安全性。

关键词： 牙源性间充质干细胞   水凝胶   基质硬度   力学转导   牙周组织再生   力学微环境   牙周炎   组织工程   三维支架  

摘要： 牙周组织的完全性功能再生(即牙槽骨、牙骨质与牙周韧带的同步重建)是口腔再生医学面临的重大挑战。牙源性间充质干细胞(DMSCs)因其多向分化潜能与免疫调节特性,是实现这一目标的理想种子细胞。水凝胶作为细胞载体,其核心优势在于能够通过精确调控的理化性质(如基质硬度、拓扑结构、降解动力学)模拟细胞外基质,构建主动调控干细胞命运的力学与生化微环境。本文系统综述了载DMSCs水凝胶在牙周组织修复中的应用与研究进展。文章首先分析了不同水凝胶体系的材料学特性,进而重点阐述了水凝胶通过基质硬度等力学属性调控DMSCs分化的具体分子机制:刚性水凝胶通过激活整合素-粘着斑激酶(FAK)-蛋白激酶B(Akt)哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号轴驱动成骨分化;诱导细胞骨架重构,促使Yes相关蛋白(YAP)/转录共激活因子PDZ结合基序(TAZ)去磷酸化并发生核转位,启动成骨相关基因的转录;同时稳定Wnt/β连环蛋白(Wnt/β-catenin)并激活Wnt信号通路,上调Runt相关转录因子2(Runx2)及Osterix等成骨关键转录因子的表达。此外,作为生物活性因子的程序化控释载体,水凝胶能够选择性激活Smad家族蛋白(Smad)信号亚型,促成骨因子特异性激活Smad1/5/8通路,促牙周韧带形成因子则激活Smad2/3通路,从而实现DMSCs向成骨、成牙骨质或成纤维谱系的精准定向分化。目前,该领域面临的关键科学问题包括水凝胶性能在再生过程中的动态适配、复杂口腔微环境(如微生物、机械力、炎症)的稳定控制、干细胞高效定向分化策略以及临床转化可行性。未来研究方向将集中于开发智能响应型水凝胶、结合3D生物打印技术构建个性化仿生支架,以及设计具有免疫调控功能的复合材料体系,以期最终实现牙周组织的结构与功能一体化再生。