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关键词： 杨树   SOS1   盐胁迫   启动子  

摘要： 【目的】SOS1(salt overly sensitive1)作为定位于质膜上的Na+/H+反向转运蛋白,在植物盐胁迫响应中扮演着关键角色。比较分析杨属(Populus)不同树种的SOS1基因启动子,为理解和应用SOS1基因及其启动子进行抗逆改良奠定基础。【方法】以杨属不同树种作为试验材料,通过实时定量PCR分析SOS1基因的表达模式,进一步从新疆杨(***)、胡杨(***)和俄罗斯杨(***)中克隆了SOS1基因的启动子片段,与GUS(β-glucuronidase)报告基因连接并转化毛白杨(***)获得转基因植株,利用转基因毛白杨通过GUS组织化学染色和酶活性定量研究了启动子的组织特异性和对盐胁迫的响应。【结果】不同树种中SOS1基因的表达模式差异明显,例如,盐胁迫下在新疆杨茎中SOS1基因上调表达,胡杨变化不显著,俄罗斯杨则下调表达。3个启动子片段均可驱动GUS基因在转基因毛白杨叶、茎、根中表达,具有启动子活性,在茎和根中的活性较高。新疆杨的SOS1启动子在茎的表皮和皮层中有活性,而在韧皮部、形成层、木质部中的活性极低;俄罗斯杨的SOS1启动子则在木质部中活性较高,而在形成层和树皮中活性极低;胡杨的SOS1启动子在各个部位均有活性,尤其是在形成层中活性最高。在盐胁迫条件下,3个启动子的活性均上调。【结论】不同杨树SOS1基因启动子均可响应盐胁迫但具有差异明显的组织特异性。

关键词： 脑肿瘤   正电子发射断层摄影术   氨基酸   放射疗法   综述  

摘要： 放疗作为恶性脑肿瘤的核心治疗,其精准实施取决于对肿瘤边界和治疗反应的准确评估。氨基酸PET,特别是具有良好肿瘤对比度的18F-酪氨酸(18F-FET)PET显像,在放疗管理中具有重要价值,可显著提升复发肿瘤的诊断准确性,并指导个体化治疗。本文综述近年18F-FET PET显像在辅助放疗计划、治疗反应监测及预后评估中的应用现状。

关键词： 人教版   基因   蛋白质   比较分析  

摘要： 以“基因指导蛋白质的合成”这一节为例,通过对新旧课程标准的内容要求以及新旧教材内容、教材插图及栏目设置4个维度的比较,为高中生物学教学提供相应的参考依据。

关键词： 生物质谱   蛋白质   蛋白质组   蛋白质网络  

摘要： 质谱(mass spectrometry)是一种将分子离子化并根据其质荷比(m/z)进行分离和检测的分析技术,可对物质进行精确的定性和定量。质谱技术应用于生物大分子尤其是蛋白质分析,形成了生物质谱的技术体系。可以说,生物质谱技术发展的很多里程碑是以蛋白质研究挑战为核心驱动力的,生物质谱技术的每一次突破,也加深了研究者对蛋白质结构和行为的理解。本文将对蛋白质研究驱动的生物质谱技术做一概述,包括质谱技术的发展历史和技术框架、生物质谱技术的前沿进展、生物质谱技术应用热点和趋势以及我国生物质谱技术的发展。

关键词： 布鲁氏菌   Bp26蛋白   单克隆抗体   表位鉴定  

摘要： 为制备布鲁氏菌Bp26蛋白单克隆抗体并对其进行生物学特性鉴定,本研究利用原核表达系统制备Bp26重组蛋白,以纯化的Bp26蛋白免疫Balb/c小鼠,通过杂交瘤技术制备针对布鲁氏菌Bp26蛋白的单克隆抗体,采用免疫印迹和间接免疫荧光试验鉴定其特异性,并通过ELISA测定亲和力常数及阻断活性,最后采用斑点杂交试验鉴定抗原识别表位。结果表明:1)成功表达布鲁氏菌Bp26蛋白,其相对分子质量在26 ku左右。2)获得2株Bp26单克隆抗体细胞株(6E8和4C4)。免疫印迹显示,2株Bp26单抗与重组Bp26蛋白和布鲁氏菌菌体Bp26蛋白均有较强的特异性反应;间接免疫荧光试验表明,Bp26单抗能够特异性识别感染巨噬细胞的羊种布鲁氏菌M5-90株,但不能识别感染巨噬细胞的M5-90△Bp26株。ELISA显示,单抗6E8和4C4的亲和力常数分别为2.58×10^(-7)和2.34×10^(-7)mol/L,抗体阻断率均达到80%以上。斑点杂交结果显示,单抗6E8识别表位氨基酸序列为23ASPDMAILNL32,单抗4C4为73GINIQPIYVYPD84。综上,本研究成功制备了针对布鲁氏菌Bp26蛋白不同抗原表位的2种单克隆抗体,其具有较好的特异性、结合力及阻断活性,不仅为进一步探索布鲁氏菌Bp26蛋白的生物学特性奠定基础,而且为布鲁氏菌诊断技术的建立提供技术支持。

关键词： 吲哚菁绿   肝细胞癌   骨桥蛋白   近红外二区荧光成像技术  

摘要： 目的:探究骨桥蛋白单克隆抗体与吲哚菁绿偶联在细胞和动物肝细胞癌模型中荧光成像的应用。方法:在本研究中,设计了一种新型的近红外二区荧光成像剂ICG-OPN mAb,将骨桥蛋白单克隆抗体(OPN mAb)与吲哚菁绿(ICG)偶连以增强ICG靶向肿瘤的特异性。然后,评估了新型荧光成像剂ICG-OPN mAb在肝细胞肝癌细胞Huh-7和异种移植肝癌模型中的靶向结合能力以及对于Huh-7细胞的毒性。结果:超高效液相色谱-串联质谱结果显示ICG-OPN mAb的保留时间为12.619min,纯度为95.01%。同时,在Huh-7细胞和异种移植肝癌模型中ICG-OPN mAb的荧光强度均强于单独的ICG成像。结果表明,骨桥蛋白单克隆抗体可以增强近红外二区荧光成像剂吲哚菁绿的靶向结合肝癌的能力。结论:新型的近红外二区荧光成像剂ICG-OPN mAb有望未来应用于肝细胞肝癌患者影像导航精确切除手术中。

关键词： 核磁共振   蛋白质结构与动力学   相互作用与功能  

摘要： 本文概述了研究蛋白质动力学的核磁共振波谱的基本概念和方法,并分析了其在不同时间尺度的应用能力。结合过去十年蛋白质设施核磁共振分析系统涉及的蛋白质动力学研究成果,阐述了近年来在蛋白质结构、动力学、相互作用与功能关系研究的进展。文章重点讨论了以下六个方面:(1)天然无规蛋白质(IDP/IDR)的动力学和相互作用与功能的关系;(2)甲基转移酶的构象动态性及功能调控与催化特异性的关系;(3)单次跨膜蛋白质的胞外区域动态结构、跨膜区多聚结构与受体自抑制及跨膜信号传递的关系;(4)免疫受体近膜区及其胞内区域的动态相互作用与受体活化调控的关系;(5)GPCR膜蛋白的大幅度动态性与多步骤配体选择性的关系;(6)细胞原位环境蛋白质的动力学和相互作用与蛋白质折叠的关系。

关键词： 盐地碱蓬多糖   非酒精性脂肪肝   巨噬细胞极化   高脂饮食   炎症因子  

摘要： 目的:研究盐地碱蓬多糖调控巨噬细胞极化对高脂饮食诱导非酒精脂肪肝(Non-alcoholic Fatty Liver Disease,NAFLD)小鼠肝损伤的缓解作用及机制。方法:60只雄性C57BL/6J小鼠随机分为6组,分别为对照组(Control)、高脂饮食组(High Fat Diet,HFD)、高脂饮食+低、中、高剂量(100、200、400 mg/kg盐地碱蓬多糖干预组(HFD+LSS组、HFD+MSS组和HFD+HSS组)和高脂饮食+阿托伐他汀干预组(HFD+Ato组)。除对照组饲喂小鼠正常维持饲料,其他组均喂食脂肪供能比为60%的高脂纯化饲料。阿托伐他汀干预组剂量为1 mg/kg,干预组均每日灌胃给药,连续干预12周。每周称量小鼠体重,12周后检测小鼠脏器指数、外周血及肝脏生化指标和组织病理学变化,蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)和实时荧光定量PCR(Realtime-PCR,qRT-PCR)方法检测肝脏巨噬细胞极化相关蛋白及其mRNA表达水平,ELISA及qRT-PCR方法检测炎症相关因子及其mRNA表达水平。结果:12周实验结束后,与HFD组相比,盐地碱蓬多糖低、中、高干预组小鼠体重及肝脏指数均极显著降低(P<0.01),其他脏器指数也出现不同程度降低。血清和肝脏总胆固醇(Total Cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)水平极显著降低(P<0.01)。此外,血清中低密度脂蛋白(Low-Density Lipoprotein,LDL)水平极显著降低(P<0.01),高密度脂蛋白(High-density Lipoprotein,HDL)水平极显著升高(P<0.01),天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate Aminotransferase,AST)和丙氨酸氨基转移酶(Alanine Aminotransferase,ALT)水平极显著降低(P<0.01)。组织病理学观察显示肝脏脂肪蓄积减少,肝细胞脂肪变性减轻。盐地碱蓬多糖干预组小鼠肝脏M1型巨噬细胞标志物诱导型一氧化氮合酶(Inducible nitric Oxide Synthase,iNOS)和分化群86(Cluster of Differentiation 86,CD86)的蛋白表达水平极显著降低(P<0.01),M2型巨噬细胞标志物分化群206(Cluster of Differentiation 206,CD206)和精氨酸酶-1(Arginase-1,Arg-1)的蛋白表达水平极显著升高(P<0.01)。同时,q RT-PCR检测的巨噬细胞极化标志物转录组水平与WB检测的蛋白表达水平趋势一致。盐地碱蓬多糖干预组血清肿瘤坏死因子α(Tumor Necrosis Factor-alpha,TNF-α)、白细胞介素1β(Interleukin-1 beta,IL-1β)、白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)水平极显著降低(P<0.01),白细胞介素10(Interleukin-10,IL-10)水平升高(P<0.01)。肝脏中TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA表达水平极显著降低(P<0.01),IL-10的mRNA表达水平极显著升高(P<0.01)。结论:盐地碱蓬多糖能够降低高脂饮食诱导的肝脏脂肪蓄积及损伤,缓解NAFLD的发生发展,其作用机制可能与盐地碱蓬多糖调节巨噬细胞极化从而降低炎症水平有关。

关键词： 中山麻鸭   SOCS1基因   生物信息学   组织表达  

摘要： 为获得中山麻鸭细胞因子信号转导抑制因子1(Suppressor of Cytokine Signaling 1, SOCS1)基因CDS序列,明确其生物学功能,了解其在不同阶段不同组织中的表达模式,本研究以中山麻鸭雏鸭、青年鸭和成年鸭为研究对象,通过TA克隆获得CDS序列,并对序列进行生物信息学分析,采用RT-qPCR方法检测SOCS1基因在不同年龄段不同器官的表达差异。结果发现,中山麻鸭SOCS1基因CDS区长624 bp,含有22个稀有密码子,编码207个氨基酸;中山麻鸭SOCS1基因与北京鸭、凤头潜鸭和天鹅的核苷酸序列相似性分别为100%、99.4%、97.6%;进化树结果表明,中山麻鸭SOCS1基因与北京鸭的亲缘关系最近,说明SOCS1基因编码序列具有种属特异性;其编码的蛋白分子量为23.104ku,理论等电点9.71,不含N-糖基化位点,存在24个磷酸化位点,属亲水性碱性蛋白;SOCS1蛋白二级结构以无规则卷曲和α-螺旋为主,三级结构与二级结构基本一致,且SOCS1蛋白含有一个中央SH2结构域和一个SOCS盒结构域,不存在信号肽和跨膜结构,为非分泌型蛋白,主要存在于细胞核中;该蛋白共存在10个主要互作蛋白;SOCS1基因在雏鸭、青年鸭和成年鸭的各组织中均表达,在雏鸭和青年鸭的心脏表达量最高,在成年鸭的肌肉中表达量最高,且差异极显著。本研究初步阐明了SOCS1蛋白的理化性质、结构特性、功能特点及SOCS1 mRNA在雏鸭和成年鸭不同组织中的表达情况,为深入探究SOCS1基因在生物学调控中的作用机制提供了参考。

关键词： 益生菌   包埋   多糖   微胶囊   递送体系  

摘要： 益生菌因其显著的健康功效被广泛应用于食品和医药领域,但环境胁迫(如胃酸、胆盐)和加工条件(如高温、氧气)易导致其存活率下降。多糖基微胶囊技术通过物理或化学方法将益生菌包埋于天然多糖基质中,可显著提升菌体的胃肠道耐受性和稳定性。该文综述近年来常用多糖材料的特性及其对包埋效率的影响、多糖包埋益生菌的功能化修饰机制以及多糖基益生菌微胶囊的制备方法。同时,针对现有技术的局限性(如包埋率低、缓控释性能不足)提出未来研究方向。