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关键词： 肺炎克雷伯菌   碳青霉烯酶   基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱   核酸质谱技术  

摘要： 目的建立基于核酸质谱技术快速鉴定肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶基因型的方法。方法收集2021年1月至2023年9月徐州医科大学附属医院分离的56株非重复耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP),通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术和VITEK-2 Compact完成菌株鉴定及药敏分析。设计特异性单碱基延伸引物,结合多重聚合酶链反应(PCR)扩增与核酸质谱技术,在同一反应体系中检测碳青霉烯酶基因型特征峰,分析核酸质谱结果与PCR结果的一致性。结果56株CRKP中KPC、NDM、OXA-232及KPC+NDM联产型菌株各14株。各亚型特征峰无交叉干扰;核酸质谱对KPC、OXA-232及KPC+NPM联产耐药菌株检测结果与PCR结果的一致率为100.00%,仅误将1株NDM菌株划分为NDM+OXA联产型菌株,总体检测一致率为98.21%(55/56)。药敏试验结果显示,KPC及NDM型菌株对亚胺培南耐药率为100.00%,而OXA-232菌株对亚胺培南耐药率为0。结论核酸质谱技术可高效、精准鉴定CRKP碳青霉烯酶基因型,与PCR结果高度一致,为临床快速分型及耐药监测提供了可靠工具。

关键词： 山药多糖   硒化山药多糖   生长性能   器官指数   免疫功能   蛋雏鸡  

摘要： 试验旨在研究山药多糖及其硒化物(硒化山药多糖)对蛋雏鸡生长性能、免疫器官指数、血清生化、免疫指标的影响。选取1日龄海兰褐健康蛋雏鸡120只,随机分为3组,每组4个重复,每个重复10只。对照组饲喂基础饲粮,山药多糖组、硒化山药多糖组分别在基础饲粮中添加0.15 g/kg的山药多糖和硒化山药多糖。预试期7 d,正式试验期28 d。结果显示:硒化山药多糖组蛋雏鸡的末重、平均日采食量、平均日增重显著高于对照组(P<0.05),末重显著高于山药多糖组(P<0.05)。硒化山药多糖组蛋雏鸡的脾脏指数和法氏囊指数显著高于对照组(P<0.05),脾脏指数显著高于山药多糖组(P<0.05)。硒化山药多糖组蛋雏鸡血清总胆汁酸(TBA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量显著低于对照组(P<0.05),血清葡萄糖(GLU)、钙(Ca)和磷(P)含量显著高于对照组(P<0.05)。硒化山药多糖组蛋雏鸡血清白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)的含量及溶菌酶(LZM)活性均显著高于对照组(P<0.05),血清IL-2和IL-6的含量显著高于山药多糖组(P<0.05)。研究表明,硒化山药多糖能够提高蛋雏鸡生长性能和免疫器官指数,改善血清生化和免疫指标,其综合效果优于山药多糖。

关键词： 有氧运动   运动预处理   皮下移植瘤   心脏机能  

摘要： 目的:探讨有氧运动预处理对皮下移植瘤小鼠心脏机能的影响及可能的分子机制。方法:24只6周龄雄性BALB/c小鼠。适应性喂养、运动1周后,随机分为对照(C)组、肿瘤(M)组、运动预处理(EM)组,每组8只。EM组小鼠有氧运动干预4周后,C组小鼠接种0.2 ml生理盐水于左后肢偏上部皮下,E组和EM两组在相同位置接种0.2 ml ***结肠癌细胞悬液。3周后,利用心脏超声检测各组小鼠心脏机能,而后取材进行HE染色检测心肌细胞横截面积(cross-sectional area,CSA),Western Blot检测心肌合成与分解代谢相关蛋白的表达。结果:(1)与C组相比,M组小鼠体重较低(P<0.05)、心脏体重比较低(P<0.05);左心室射血分数(ejection fraction,EF)、短轴缩短率(fractional shortening,FS)、每搏输出量(stroke volume,SV)均较低(P<0.05),心肌CSA较低(P<0.01),心肌蛋白肌肉环状指蛋白1(muscle ring finger 1,MuRF-1)和肌肉萎缩盒F蛋白(muscle atrophy F-box,MAFbx/Atrogin-1)表达较高(P<0.01,P<0.05),哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(the mammalian target of rapamycin,m TOR)、p-mTOR和p-mTOR/mTOR表达较低(P<0.01,P<0.01,P<0.05)。(2)与M组相比,EM组小鼠心脏体重比较高(P<0.05);左心室舒张末期后壁厚度(left ventricular posterior wall diameter in diastole,LVPWd)、EF、FS和SV均较高(P<0.05),心肌CSA较高(P<0.05),心肌蛋白MuRF-1和Atrogin-1表达较低(P<0.05),mTOR、p-mTOR和pmTOR/mTOR表达较高(P<0.05)。结论:4周有氧运动预处理改善结肠癌皮下移植瘤小鼠心肌萎缩与心脏收缩功能,这可能与运动调控心肌蛋白MuRF-1和Atrogin-1表达显著减少、p-mTOR和m TOR表达显著增加相关。

关键词： 骨髓间充质干细胞   脊髓损伤   神经病理性疼痛   致痛因子  

摘要： 目的探究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)治疗对脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)神经病理性疼痛大鼠的影响及其作用机制。方法将大鼠随机分为假手术(sham)组、骨髓损伤模型(SCI)组、SCI+BMSCs组、SCI+BMSCs+LY294002组(n=15)。利用Sprague-Dawley大鼠诱导SCI模型,并对SCI大鼠损伤脊髓中注射BMSCs和PI3K抑制剂LY294002。测定大鼠(basso-beattie-bresnahan,BBB)评分、爪机械缩回阈值(paw mechanical withdrawal threshold,pMWT)和热刺激下的爪热缩回潜伏期(paw thermal withdrawal latency,pTWL)。苏木精-伊红染色、免疫荧光染色、酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和Western Blot实验探讨BMSCs移植对SCI大鼠的作用。利用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导大鼠脊髓神经元细胞(rat spinal cord neurons,RSCN),并将其与BMSCs及其外泌体共培养,通过Annexin VFITC/PI试剂盒、ELISA和Western Blot实验探讨BMSCs及其外泌体对RSCN的作用。结果SCI造模后第5天大鼠BBB评分≤5,且第20天BBB评分<10分,HE染色脊髓组织结构疏松、形成大量空泡、神经元细胞萎缩即认为SCI模型成功。与sham组比较,SCI组BBB评分、pMWT和pTWL值降低(P<0.001),脊髓中IBA1荧光强度、促炎细胞因子和疼痛相关因子的水平增加(P<0.001),抑制PI3K/AKT信号通路激活。BMSCs移植通过激活PI3K/AKT通路(P<0.001),对脊髓损伤大鼠具有保护作用。注射LY294002减弱BMSCs对SCI大鼠损伤脊髓修复作用。LPS诱导RSCN细胞凋亡促炎细胞因子水平(P<0.001),MSCs或BMSCs-exo与RSCN共培养可激活PI3K/AKT信号通路,减少LPS诱导的细胞凋亡和促炎细胞因子生成(P<0.05)。结论BMSCs通过外泌体激活神经元中的PI3K/AKT信号通路,抑制TNF-α、SP、NE、5-HT水平,促进SCI大鼠功能恢复。

关键词： 菊芋多糖   仔猪   生长性能   抗氧化  

摘要： 文章旨在研究菊芋多糖(Inulin Polysaccharides,IPs)对仔猪生长性能、血清及肠道抗氧化指标的影响。试验将432头三元杂交去势公猪根据体重[(7.64±0.39)kg]随机分为4组,每组9个重复,每个重复12头,分别配置制IPs添加量为0、350、700和1400 mg/kg的试验日粮,预饲期3 d,正试期28 d。结果表明,与对照组相比,700和1400 mg/kg的IPs组仔猪末重显著提高5.05%和7.28%(P<0.05),日增重显著提高9.17%和11.64%(P<0.05),料重比显著降低7.21%和7.59(P<0.05),1400 mg/kg的IPs组采食量显著提高3.16%(P<0.05)。血清:700和1400 mg/kg的IPs组T-AOC能力显著提高(P<0.05),350~1400 mg/kg的IPs组过氧化氢酶(CAT)活性显著提高(P<0.05),1400 mg/kg的IPs组蛋白质羰基(PCO)含量显著降低(P<0.05);回肠:350~1400 mg/kg的IPs组总抗氧化能力(T-AOC)和过氧化氢酶(CAT)活性显著提高(P<0.05),丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05),700和1400 mg/kg的IPs组蛋白质羰基(PCO)含量显著降低(P<0.05)。700和1400 mg/kg的IPs组超氧化物歧化酶1(SOD1)、过氧化氢酶(CAT)的mRNA表达量显著提高(P<0.05),350~1400 mg/kg的IPs组谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、核因子E2相关因子2(NRF-2)的mRNA表达量显著提高(P<0.05)。结论:添加700 mg/kg的菊芋多糖能显著提高仔猪抗氧化能力和生长性能。

关键词： 蛋白质结构   蛋白质测序技术   AlphaFold   胰岛素精神  

摘要： 蛋白质是生命活动的主要承担者,其结构的发现历程在生命科学史上占据重要地位。本文以氨基酸小分子为逻辑起点,逐步深入到蛋白质三维结构,系统地剖析科学家探索蛋白质结构过程中的曲折历史及科学方法,凸显蛋白质结构与功能的内在关联及技术发展对科学研究的推动意义。借助科学家的探索历程介绍,培养学生勇于创新、严谨治学的科研精神。

关键词： 小麦   miRNA   干旱   过表达   功能  

摘要： miR167家族是植物界中一个保守的miRNA家族,在植物生长发育及逆境胁迫响应中发挥重要调控作用。为了明确小麦Tae-miR167在逆境胁迫中的功能,该研究对小麦Tae-miR167家族序列进行了鉴定及序列分析,通过qRT-PCR方法分析Tae-miR167成熟体在小麦不同器官中的差异性表达和逆境胁迫表达情况;克隆Tae-miR167c前体序列,构建过表达载体转化拟南芥,研究过表达Tae-miR167c株系对干旱胁迫响应的功能。结果表明:(1)Tae-miR167家族共有18个序列,成熟序列有3种,二级结构都有典型茎环结构。(2)Tae-miR167的3种成熟体在小麦多数器官中都有表达,其相对表达量在根、叶和种子中较高;成熟体Tae-miR167b和Tae-miR167c可分别响应低温和PEG胁迫处理,表达上调。(3)过表达Tae-miR167c前体的拟南芥株系在渗透胁迫下发芽率和根长显著增大;转基因幼苗耐旱性增强,含水量、可溶性糖含量、叶绿素含量显著升高。(4)靶基因预测显示,Tae-miR167c可以与F-box蛋白结合,参与调控逆境胁迫响应。综上表明,小麦Tae-miR167c在干旱胁迫下显著上调,过表达Tae-miR167c的转基因株系增强了干旱胁迫耐受性。该研究结果丰富了Tae-miR167的功能研究,可为小麦种质创新提供新的基因资源。

关键词： 蛋白质氧化   机理   机体健康   分析   抑制  

摘要： 食品在加工及储藏过程中极易发生蛋白质氧化,导致蛋白质结构的改变及消化特性的下降,对机体的消化器官等部位易造成损伤。该文综述近年来蛋白质氧化对其结构、消化特性及机体健康的影响,归纳常用的蛋白质氧化分析技术以及抑制蛋白质氧化的常用手段,以期为进一步揭示蛋白质氧化机制进而抑制蛋白质氧化,以最大程度保留食品营养价值、延长储藏期及降低食品资源浪费提供理论依据。

关键词： 暗纹东方鲀   营养品质   矿物质   氨基酸   脂肪酸  

摘要： 分析比较上海、江苏、广东地区3家养殖厂的暗纹东方鲀肌肉的营养成分,并评价其营养价值,为河豚鱼市场的发展以及暗纹东方鲀品质评价提供数据支持和理论基础。测定3个地区的暗纹东方鲀肌肉中的常规营养成分、矿物元素、氨基酸和脂肪酸的含量。结果表明,3个地区的暗纹东方鲀肌肉中粗蛋白、粗脂肪含量均具有显著差异(P<0.05),其中,常规营养成分中广东地区的暗纹东方鲀水分(74.82 g/100 g)和蛋白质(22.10 g/100 g)含量是最高的。3个地区的暗纹东方鲀肌肉中常量元素K含量较高,江苏地区的含量最高(2323.87 mg/kg)。氨基酸方面,上海地区的暗纹东方鲀的必需氨基酸/总氨基酸(44.68)、必需氨基酸/非必需氨基酸(80.75)最高,且符合联合国粮农组织/世界卫生组织评分标准,必需氨基酸指数按高低依次为江苏>上海>广东。脂肪酸方面,江苏地区的暗纹东方鲀肌肉中多不饱和脂肪酸总量(82.77 mg/100 g)显著高于上海和广东地区(P<0.05),且二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸含量最高(52.03 mg/100 g),以及动脉粥样硬化指数(0.34)和血栓形成指数(0.19)最低。该研究表明,江苏地区采样的暗纹东方鲀肌肉中营养品质相对较高,河豚鱼营养元素丰富,对其进行营养成分检测及评价具有重要意义。

关键词： 大豆   GmYUC2   基因   耐荫性   自然变异   KASP分子标记  

摘要： YUC2是生长素生物合成中的限速酶之一,参与植物对荫蔽胁迫的响应。该研究以大豆极耐荫品种‘贡豆7号’为材料进行GmYUC2基因克隆,基于394份中国南方大豆自然变异群体的重测序数据及3个环境下的耐荫指数(STI)表型鉴定数据,对大豆荫蔽胁迫响应基因GmYUC2序列进行自然变异分析及开发KASP分子标记。结果表明:(1)从‘贡豆7号’中克隆到GmYUC2基因,其CDS序列长1148 bp,编码382个氨基酸,编码蛋白均含有FMO-like、Pyr-redox-2和Pyr-redox-3结构域。(2)GmYUC2基因存在4个SNP变异位点,其中3个SNP变异位于内含子中,1个SNP变异位于5_prime_UTR区,SNP2与SNP3之间连锁程度最高(r^(2)=0.9888),其次为SNP1与SNP4(r^(2)=0.921934),SNP1与SNP2之间连锁程度最低(r^(2)=0.475691)。(3)基于这4个SNP变异位点在394份群体中鉴定出4种单倍型,其中Hap1单倍型与参考基因组Wm82一致,Hap2、Hap3和Hap4均由Hap1经过一步突变而来,Hap2所对应种质的STI极显著小于Hap1,说明携有Hap2单位型大豆种质耐荫性比携有Hap1的强。(4)在荫蔽条件下,极耐荫种质和不耐荫种质中的GmYUC2基因表达量均上调,并且强耐荫种质中该基因的表达量显著高于极不耐荫种质。(5)利用GmYUC2基因的3个SNP变异位点开发的KASP分子标记对18份大豆材料进行验证,基因型和表型的鉴定结果具有88.89%的高度一致性。该研究成功克隆了GmYUC 2基因,并发现其在大豆响应荫蔽胁迫过程中具有重要作用,开发出的KASP分子标记可用于大豆资源苗期耐荫性鉴定。该研究为进一步深入解析大豆GmYUC2基因的主要功能和表达调控机制提供了参考,为高效准确地进行大豆耐荫性的分子标记辅助育种提供了理论基础。