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关键词： 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌   核酸检测   快速检测   多重检测   聚合酶链反应   耐药菌筛查  

摘要： 为建立一种快速、准确的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)核酸即时检测方法,本研究首先针对16S rRNA、nuc和mecA基因设计特异性引物与荧光探针;以MRSA标准菌株制备梯度核酸标准品,优化qPCR体系并测序验证,完成方法构建。随后系统评估该体系的灵敏度、线性范围、重复性、特异性及抗干扰性能。最后,将优化后的方法应用于临床样本,并以临床实验室常用的鉴定方法(质谱法)为参比方法,验证其实用价值。本研究建立的MRSA核酸快速检测体系,可在30 min内完成对MRSA核酸的检测,对16S rRNA、nuc和mecA基因的灵敏度分别为1.0×10^(2)、1.0×10^(2)、1.0×10^(3)CFU/mL;线性范围分别为1.0×10^(2)-1.0×10^(9)、1.0×10^(2)-1.0×10^(9)、1.0×10^(3)-1.0×10^(9)CFU/mL;批内和批间的变异系数均小于5%;与多种病原体之间无交叉反应;2 g/L的血红蛋白和100μg/mL头孢曲松钠对检测无干扰;与质谱法相比,具有较好的一致性,灵敏度和特异性较高。结果表明,本研究构建的MRSA核酸快速检测方法兼具高灵敏度与操作简便性,为病原微生物核酸即时检测提供了新策略,可作为临床微生物快速筛查的可靠技术选项。

关键词： 咖啡   咖啡因   S-腺苷甲硫氨酸合成酶   基因克隆   表达模式  

摘要： S-腺苷甲硫氨酸合成酶(S-adenosylmethionine synthase,SAMS)是催化S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)合成的关键酶,广泛参与植物的表观遗传调控、氧化胁迫及生长发育等多项生物学过程。本研究克隆咖啡CaSAMS3基因的全长cDNA序列,对其编码蛋白进行理化性质、蛋白结构、保守结构域和进化特征分析,通过顺式作用元件分析和蛋白互作网络预测,探讨CaSAMS3参与的代谢过程,并结合qRT-PCR与亚细胞定位分析其表达模式。结果表明:CaSAMS3的开放阅读框长1173 bp,编码一个亲水性蛋白(分子量为42.57 kDa,等电点为6.07),其二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主,定位于细胞膜和细胞核;该蛋白具有典型SAMS保守结构域,与猕猴桃SAMS同源性最高;其启动子涉及光、激素、胁迫及生长发育相关响应元件,包含MYB和MYC结合位点;CaSAMS3存在组织特异性表达,且在发育阶段的表达趋势与咖啡因积累一致。本研究结果为解析CaSAMS3在咖啡因合成调控中的生物学功能提供重要理论依据,也为咖啡品质与抗性改良提供潜在靶点。

关键词： 损伤修复   肺上皮干细胞   慢性阻塞性肺疾病  

摘要： 慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺病)是一种涉及气道和肺实质进行性破坏和组织重塑的高度异质性疾病,已成为全球宏观经济负担的主要原因。肺组织具备强大的损伤修复能力以维持稳态;然而,在慢阻肺病中该程序常出现功能受损。肺上皮干细胞作为一群具有自我更新和多谱系分化潜能的细胞,明确其在慢阻肺病肺损伤修复过程发挥的作用对改善临床疗效十分关键。尽管慢阻肺病的肺上皮干细胞研究和应用尚在初级阶段,但已取得了阶段性突破,尤其多组学技术的发展推动了领域进展。本文旨在阐述已知成体肺上皮干细胞种类、微环境和分化轨迹,在慢阻肺病病理状态下介导的损伤修复机制,以及相应的治疗策略,以期为慢阻肺病精准干预带来新的理论依据与靶标。

关键词： 毛豆   蛋白质   菜用大豆   优质高产   栽培技术  

摘要： 毛豆是菜用大豆的俗称,主要以鲜嫩的豆荚为食用部分,富含蛋白质(约13%)、膳食纤维(约5%)和维生素C(约8 mg/100g),是城乡居民重要的“菜篮子”产品。自2024年起,五华县通过梅州市智农科技有限公司,在华城镇兴中村利用撂荒地实施“小块田”向“大块田”整治,集中连片打造1000亩毛豆绿色高产高效示范基地。

关键词： natural biomass   polysaccharide   flexible wearable devices   smart textiles  

摘要： Driven by rapid advancements in science and technology,public demand for textiles is undergoing a notable shift—moving beyond traditional fundamental functions such as warmth and aesthetics towards intelligent and functional *** biomass-derived polysaccharides are identified as critical materials for next-gen flexible wearable smart textiles due to their biocompatibility,biodegradability,renewability,and unique chemical ***,this review presents an overview of some common natural biomass-derived polysaccharide materials for preparing flexible wearable smart *** also introduces the basic structural features of common natural biomass-derived polysaccharides and discusses relevant modification ***,current preparation methods of natural biomass-derived polysaccharide materials for flexible wearable smart textiles are systematically summarized,and an in-depth exploration is carried out to dissect their respective advantages and inherent *** review also summarizes the performance characteristics,action mechanisms,and applicable scenarios of flexible wearable smart textiles based on natural polysaccharide ***,it discusses and analyzes the applications of flexible wearable smart textiles based on natural polysaccharide materials in healthcare,motion tracking,smart clothing,and energy storage and ***,existing challenges and potential directions in the field of natural polysaccharide materials-integrated smart textile systems are comprehensively summarized and ***,such insights are expected to steer the development of more efficient green flexible wearable devices based on these smart textiles.

关键词： 纳豆肽海参多糖片   心血管疾病   血脂   颈动脉粥样硬化  

摘要： 目的评估纳豆肽海参多糖片在心血管疾病(CVD)高危人群中的应用效果。方法选择32例心血管疾病高危患者为研究对象,在90 d的研究周期内服用纳豆肽海参多糖片,分别在基线期及服用15、30、90 d采集静脉血,检测安全性指标[白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白、血小板计数、白蛋白、丙氨酸氨基转氨酶(ALT)或天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、尿素、血清肌酐(Cr)]、血脂指标[甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]、血小板最大聚集率[二磷酸腺苷(ADP)诱导、花生四烯酸(AA)诱导]、血液流变学指标[全血粘度(高切、中切、低切、极低切)、血浆粘度]、凝血指标[凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)、凝血酶原国际标准化比值(INR)、D-二聚体(DD)],同时进行颈动脉彩超检查。对比患者不同时间安全性指标,血脂、血液流变学、凝血功能指标,血小板最大聚集率,颈动脉血流与结构指标;分析颈动脉血流与结构指标变化程度。结果32例患者全部完成了90 d的研究,依从性良好。①血脂指标:患者服用30 d的TG、TC、LDL-C较基线期显著下降(P<0.05),其中TG下降12.6%、TC下降9.6%、LDL-C下降13.7%。患者服用90 d的TC、LDL-C仍较基线期维持显著降低趋势(P<0.05),较基线期分别下降9.6%、22.0%。②血液流变学指标:患者服用15 d的血浆粘度较基线期略有下降(P<0.05);服用15、30 d的全血极低切粘度(1/s)、全血低切粘度(5/s)较基线期升高(P<0.05);服用15 d的全血中切粘度(30/s)、全血高切粘度(200/s)较基线期显著升高,服用90 d较基线期显著下降(P<0.05)。③血小板最大聚集率:患者服用15 d的血小板最大聚集率(AA诱导)较基线期略有下降(P<0.05)。④凝血指标:患者服用90的PT较基线期显著缩短,INR显著降低(P<0.05)。服用30 d的APTT较基线期略有延长(P<0.05);服用15、30 d的FIB较基线期显著升高(P<0.05);服用15 d的TT较基线期略有延长(P<0.05)。⑤颈动脉血流与结构指标:患者服用30 d的双侧血流速度较基线期显著提升(P<0.05),其中左侧提升12.9%,右侧提升10.4%。服用15 d的右侧内膜中层厚度(IMT)较基线期明显降低(P<0.05);服用90 d的双侧IMT较基线期降低(P<0.05),其中左侧降低17.7%,右侧降低16.1%。服用30 d,左侧和右侧颈动脉血流速度改善率分别为62.5%、56.3%;服用90 d,左侧和右侧IMT改善率分别为41.9%、57.1%。结论纳豆肽海参多糖片可以显著降低心血管疾病高危人群的血脂与全血粘度,降低颈动脉粥样硬化风险,提示其在心脑血管疾病防治中具有显著的作用。

关键词： 得克隆   双基质   气相色谱-串联质谱   电子电气产品  

摘要： 建立了气相色谱-串联质谱法,用于测定塑料基质电子电气产品中得克隆同分异构体。通过优化溶剂配比、熔融温度等制备参数,阳性样品中得克隆的均匀性相对标准偏差为0.20%~3.17%。样品经液氮冷冻粉碎,以20mL二氯甲烷为溶剂,在60℃下超声处理60 min,进样口温度280℃下进样检测。得克隆的质量浓度在0.5~100μg/L内与对应色谱峰面积线性关系良好,相关系数均不小于0.999 5。方法检出限均不大于0.01 mg/kg,方法定量限均不大于0.05 mg/kg,加标回收率86.3%~108.0%,测定结果的相对标准偏差为1.1%~9.5%(n=6)。该研究为电子电气产品中克隆的监管提供了标准化技术参考。

关键词： 外泌体   人羊膜间充质干细胞   人胚胎干细胞   miRNA   蛋白质组  

摘要： 目的:探讨不同性别来源人胚胎干细胞外泌体(human embryonic stem cell-derived exosome,hESC-exo)和人羊膜间充质干细胞外泌体(human amniotic mesenchymal stem cell-derived exosome,hAMSC-exo)在蛋白质组学和转录组学层面的差异。方法:构建符合外泌体研究的培养体系,通过超速离心分别从男女株人胚胎干细胞(human embryonic stem cell,hESC)和人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cell,h AMSC)中获得质量符合研究要求的外泌体(exosome,exo),采用液相色谱-串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)分析来定义蛋白质组学表征,进行高通量测序以确定微小RNA(microRNA,miRNA)谱。通过生物信息学分析确定外泌体调控的主要生物学过程和通路。结果:在蛋白质组学和转录组学层面,hAMSC-exo男株与女株表征类似,而h ESC-exo男株与女株间存在较大差异。miRNA图谱和蛋白质组分析揭示了hESC-exo主要与发育、代谢相关,hAMSC-exo主要与免疫、代谢相关。结论:通过蛋白质组学和miRNA测序对不同性别来源的hAMSC-exo和hESC-exo进行了系统分析,预测它们的生物学功能,揭示其在不同领域的应用潜力,为临床前和临床试验中选择更优来源细胞提供新的视角。

关键词： 间充质干细胞   外泌体   伤口愈合   再生医学  

摘要： 皮肤作为人体最大的器官,易受损伤且修复困难,尤其在慢性疾病及老龄化背景下,伤口愈合问题日益突出。传统修复方法存在耗时长、易感染等局限,而再生医学中的生物治疗策略展现出良好前景。间充质干细胞来源的外泌体因其低免疫原性、易储存、便于定量等优势,成为一种安全有效的“无细胞”治疗手段,主要通过旁分泌机制促进皮肤创面愈合。本文综述了不同来源的间充质干细胞外泌体在皮肤伤口愈合中的作用机制、递送方式及临床应用研究进展。

关键词： 梅花鹿   Zfx基因   基因克隆   组织表达  

摘要： 本研究旨在通过克隆梅花鹿Zfx基因并解析其分子特征,为设计梅花鹿Zfx干扰载体提供关键的序列靶点和理论依据。本试验采集梅花鹿睾丸组织,提取总RNA并反转录为cDNA,设计2对引物分段扩增Zfx基因CDS区,通过克隆测序获得全长序列,利用生物信息学工具分析其理化性质、亲疏水性、糖基化/磷酸化位点及二、三级结构,构建系统进化树、开展同源性分析并利用RT-qPCR检测其组织表达规律。结果显示,本研究成功克隆获得了梅花鹿Zfx基因CDS区,全长1479 bp。Zfx基因编码492个氨基酸。Zfx蛋白分子式为C_(2322)H_(3675)N_(635)O_(791)S_(28),相对分子量54041.18,理论等电点4.5,不稳定系数46.84,属不稳定亲水蛋白;含36个磷酸化位点(19个Ser、5个Tyr、12个Thr)和3个糖基化位点。二级结构以无规卷曲(68.70%)为主,三级结构预测与二级结构一致。系统进化树分析显示,梅花鹿与马鹿(鹿科)亲缘关系最近;与同属偶蹄目反刍亚目牛科的家牛、野牦牛、山羊、绵羊亲缘关系次之;与虎、家猫、家犬等非反刍动物亲缘关系较远。重叠区域的同源性分析表明,梅花鹿与马鹿、白尾鹿、虎、家牛等9个物种的Zfx基因序列同源性达97.05%,其中与马鹿的同源性最高。GO功能富集分析显示Zfx基因参与了性别决定等生物过程,而KEGG通路富集分析表明其参与了癌症相关通路。组织表达分析表明,梅花鹿Zfx基因在睾丸和肝脏中高表达,且均极显著高于肌肉组织(P<0.01)。综上,梅花鹿Zfx基因在物种进化中表现高度保守,蛋白结构特征提示其可能通过磷酸化修饰参与泛素-蛋白酶体降解途径,调控精子发生。