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关键词： D-氨基酸   氨基酸消旋酶   肠道菌群   宿主互作  

摘要： D-氨基酸(D-amino acids,D-AAs)是L-氨基酸(L-amino acids,L-AAs)的旋光异构体,广泛参与宿主生理和病理过程,如神经系统调节、肾脏功能维持及炎症性肠病发生等。人体内的D-AAs主要来源于肠道菌群代谢,其合成主要依赖于细菌中的氨基酸消旋酶(amino acid racemases,AARs)。这类酶可催化L-AAs与D-AAs的立体异构转化,生成的D-AAs调控细菌细胞壁重塑、生物被膜扩散及芽孢萌发等关键过程,从而影响细菌的环境适应能力与致病性。本文系统综述了细菌D-AAs代谢及关键酶AARs的功能,重点探讨肠道菌群D-AAs代谢及其与宿主互作的研究进展,为靶向微生物-宿主代谢对话的疾病干预和治疗提供理论依据。

关键词： 幽门螺杆菌   核酸   23S rRNA基因   仪器法   手工法  

摘要： 目的 分析不同核酸提取方法对幽门螺杆菌23S rRNA基因检测结果的影响。方法 收集2022年12月—2023年2月深圳市龙岗中心医院20例行胃镜检查且幽门螺杆菌呼气试验结果已知患者术中采集的胃黏膜组织。分别采用基因突变检测试剂盒(手工法)和全自动核酸提取仪(仪器法)配套核酸提取试剂提取幽门螺杆菌核酸,比较2种方法提取核酸耗时差异。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测幽门螺杆菌23S rRNA基因,比较2种核酸提取方法幽门螺杆菌23S rRNA基因突变结果差异。比较呼气试验和2种核酸提取方法幽门螺杆菌阳性率差异。结果 2种核酸提取方法RT-qPCR检测幽门螺杆菌阳性例数均高于呼气试验,但3组差异无统计学意义(P=0.931)。2种核酸提取方法A2142G、A2142C基因检测结果均为阴性,A2143G阳性各6例,差异无统计学意义(P=1.000)。仪器法提取核酸耗时45 min,远低于手工法(150 min)。结论 仪器法提取核酸的质量、浓度均可以满足幽门螺杆菌23S rRNA基因检测要求,且耗时远低于手工法。

关键词： 氧还原反应   ZIF-8   钴胺素   粒径调节   无金属催化剂  

摘要： 昂贵的铂碳作为阴极氧还原催化剂是限制燃料电池商业化应用的原因之一。本文开发了一种以无金属碳基材料(N/C)替代传统铂碳的新型燃料电池氧还原催化剂。在制备过程中,采用钴胺素的解离作用获得5,6-二甲基苯并咪唑核苷酸,随后与硝酸锌和二甲基咪唑进行共沉淀反应。这一方法有效加速了ZIF-8的成核过程,成功制备出表面富含官能团且粒径小于100 nm的金属有机框架前驱体。经过热解处理后,拓展了孔隙结构并丰富了氧还原活性位点密度。电化学测试结果表明,所制备的N/C催化剂在0.1 mol/L碱性电解液中展现出卓越的氧还原反应(ORR)活性:起始电位达到1.135 V(***),半波电位为0.808 V(***),极限电流密度高达-5.58 mA·cm^(-2)。这些性能指标与商业Pt/C催化剂相当,证实了该无金属催化剂在实际应用中的巨大潜力。

关键词： 玉米醇溶蛋白   桃胶多糖   纳米颗粒   性质表征   稳定性  

摘要： 蛋白-多糖复合物可以作为包埋体系的壁材,在递送生物活性成分过程中提高其活性和生物利用度。本研究采用反溶剂沉淀法制备玉米醇溶蛋白(Zein)-桃胶多糖(Peach gum polysaccharides,PGP)纳米颗粒,通过多种表征手段,详细分析了Zein-PGP纳米颗粒的互作机制和微观结构,并对Zein-PGP复合物的抗氧化性能和稳定性进行了评价。结果表明,Zein与PGP形成纳米颗粒的主要作用力为氢键和疏水相互作用,这两种力提升了复合物的稳定性,且PGP的加入显著增强了复合物的自由基清除能力(P<0.05)。当Zein:PGP质量比为1:1时,纳米颗粒具有较好的稳定性,其粒径、PDI和电位分别为156.73±5.17 nm、0.15±0.01和-31.43±0.44 mV,复合物的α-螺旋、β-折叠及β-转角相对含量分别为45.0%、12.0%、15.0%,同时PGP的加入能淬灭Zein的内源性荧光。本研究不仅为Zein和PGP的综合利用提供了新思路,也为Zein-PGP纳米颗粒在食品领域递送生物活性成分的应用提供了理论依据。

关键词： 大豆   GmARA6a   亚细胞定位   盐胁迫   功能分析  

摘要： 囊泡运输在植物响应盐胁迫过程中起关键作用,ARA6(RabF1)通过促进内体与质膜间囊泡介导的物质转运,在调节植物的耐盐能力上发挥积极影响。本研究对大豆GmARA6a基因进行克隆及生物信息学分析;通过BFA、WM处理以及与AtARA6共定位探究GmARA6a的亚细胞定位;探究该基因在不同组织及盐胁迫下的表达模式;利用拟南芥ara6突变株、GmARA6a回补株系和过表达株系研究GmARA6a基因在调控植株耐盐性方面的作用。结果表明,大豆中克隆的GmARA6a基因长603 bp,编码200个氨基酸,具有ARA6家族的4段共有序列、1段效应结合区以及N端独特的“MGCXSS”结构域。GmARA6a定位于细胞膜以及多囊泡体(MVB)上。在大豆根中GmARA6a被盐胁迫诱导上调表达。盐胁迫下,拟南芥ara6突变株出现盐敏感表型;而GmARA6a过表达株系生长良好,抗氧化能力增强,膜损伤、脂质过氧化程度降低,H_(2)O_(2)、O_(2)^(-)积累量下降;通过分析相关基因表达水平,表明GmARA6a可能通过SOS信号通路、囊泡运输途径调控植株耐盐性。本研究结果为进一步探究GmARA6a的功能提供参考。

关键词： 非对称场流分离   山药多糖   抗氧化活性  

摘要： 山药多糖具有重要的生物活性,本文采用超声辅助热水提取法提取了棒山药和小白嘴山药多糖,通过酶解法去除蛋白质,采用非对称场流分离技术在线联用多角度光散射检测器和示差折光检测器(AF4-MALS-dRI)、傅里叶变换红外光谱和刚果红实验对山药多糖的结构进行了表征,对比了Berry和Debye 2种光散射函数数学模型对山药多糖摩尔质量和回转半径表征结果准确性的影响,研究了山药多糖的抗氧化活性.结果证明2种山药多糖均具有β-D-吡喃环结构,其中棒山药多糖具有相对松散的三螺旋结构.在2 mg/mL质量浓度下,棒山药多糖的OH和DPPH自由基清除率分别为(93.9±0.29)%和(88.2±0.58)%,高于小白嘴山药的抗氧化活性.结果表明相对松散的三螺旋结构有利于山药多糖的抗氧化活性.

关键词： 黄芪多糖   过敏性鼻炎   TLR4/MyD88信号通路   Th1/Th2失衡   大鼠  

摘要： 【目的】探讨黄芪多糖对过敏性鼻炎(AR)大鼠的治疗作用及机制。【方法】采用卵清蛋白(OVA)和氢氧化铝腹腔注射联合卵清蛋白局部鼻部刺激法建立过敏性鼻炎大鼠模型。将建模成功的大鼠随机分为模型组,地塞米松组,黄芪多糖低、高剂量组,每组10只。另选10只健康大鼠作为正常组。分别在治疗前和治疗结束后评估各组大鼠鼻部过敏症状总积分。治疗结束后,采用苏木精-伊红(HE)染色法观察鼻黏膜病理组织形态,酶联免疫吸附分析(ELISA)法检测血清γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)、IFN-γ/IL-4、免疫球蛋白E(IgE)水平,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测鼻黏膜组织中T细胞表达的T-box蛋白(T-bet)、GATA结合蛋白3(GATA-3)和Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)信号通路相关蛋白表达水平。【结果】与正常组比较,模型组大鼠鼻黏膜细胞大量脱落,黏膜下层周围腺体增生,水肿和嗜酸性粒细胞浸润,症状总积分及IL-4、IgE、GATA-3、TLR4、MyD88、磷酸化的核因子κB(p-NF-κB)水平显著升高(P<0.05),IFN-γ、IFN-γ/IL-4、T-bet水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,地塞米松组及黄芪多糖低、高剂量组鼻黏膜组织水肿和炎性细胞浸润程度减轻,上皮细胞脱落较少,鼻黏膜组织结构较为完整,症状总积分及IL-4、IgE、GATA-3、TLR4、MyD88、p-NF-κB水平显著降低(P<0.05),IFN-γ、IFN-γ/IL-4、T-bet水平显著升高(P<0.05);与地塞米松组比较,黄芪多糖低、高剂量组症状总积分及IL-4、IgE、GATA-3、TLR4、MyD88、p-NF-κB水平显著降低(P<0.05),IFN-γ、IFN-γ/IL-4、T-bet水平显著升高(P<0.05)。【结论】黄芪多糖能够有效改善过敏性鼻炎大鼠鼻部过敏症状,抑制炎症反应,调节免疫功能,其作用机制与TLR4/MyD88信号通路介导的Th1/Th2失衡有关。

关键词： 普鲁士蓝纳米颗粒   纳米酶   牙髓炎   牙髓干细胞  

摘要： 目的本研究旨在探究普鲁士蓝纳米颗粒(PBNPs)对牙髓干细胞(DPSCs)的抗炎效果及作用机制。方法采用CCK-8实验研究不同浓度的PBNPs对DPSCs细胞活力的影响。采用1μg/mL LPS刺激DPSCs建立炎症反应性牙髓干细胞(iDPSCs)模型,通过qRT-PCR和ELISA检测PBNPs对iDPSCs中TNF-α、IL-1β和IL-6等炎症因子水平的影响。通过流式细胞术检测PBNPs对iDPSCs中活性氧(ROS)水平的影响。通过ALP染色检测PBNPs对iDPSCs成牙本质向分化的影响。通过Western blot检测JNK通路和NF-κB通路相关蛋白表达情况。结果0~20μg/mL PBNPs对DPSCs的细胞活力无显著影响。PBNPs能够抑制iDPSCs中TNF-α、IL-1β和IL-6等炎症因子的表达,能够降低iDPSCs的ROS水平,并促进iDPSCs成牙本质向分化。PBNPs可以抑制JNK和p65蛋白的磷酸化。结论PBNPs可以有效抑制iDPSCs炎症因子的表达并降低氧化应激水平,可能通过JNK通路和NF-κB通路发挥抗炎作用。

关键词： 人脐带间充质干细胞   细胞治疗   肺动脉高压   野百合碱   小鼠模型   肺血管染色  

摘要： 目的探究人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)对肺血管内皮的修复作用。方法从健康新生儿脐带中分离获得hUCMSCs,通过流式细胞术和三系分化对间充质干细胞相关表面标记和分化能力进行鉴定。通过腹腔注射野百合碱,建立肺动脉高压小鼠模型,尾静脉注射hUCMSCs,在d 10、20、30,检测小鼠的右心室相关功能指标,取肺组织切片进行HE和免疫荧光染色,同时取肺组织RNA进行转录组测序。结果分离获得的间充质干细胞符合国际细胞治疗协会提出的标准。模型小鼠在3个检测时间点的RVSP、RVHI及RV/LV+S,均明显高于对照组小鼠;HE染色观察到肺血管壁明显增厚,在同组织部位的免疫荧光染色观察到CD31的表达量降低,α-SMA的表达量升高,而hUCMSCs注射后逆转了这些变化。转录组测序提示了一些可能的治疗机制。结论hUCMSCs对肺动脉高压的肺血管内皮具有持久的修复作用。

关键词： 蛹虫草   多糖   响应面法   提取工艺   热水浸提  

摘要： 基于响应面法(RSM)优化蛹虫草多糖的提取工艺,旨在提升多糖提取率并降低生产成本。采用热水浸提法结合苯酚-硫酸显色法测定多糖含量,通过单因素实验考察提取温度、提取时间及料液比等关键参数对多糖提取率的影响规律,进而基于单因素实验结果设计响应面实验进行工艺优化。响应面优化结果显示,蛹虫草多糖的最佳提取工艺参数为:提取温度80℃,提取时间4 h,料液比1∶30(g/mL)。在此条件下多糖平均实际提取率达到4.18%,与模型预测值吻合度高,相对误差较小,显著提升了多糖提取效率。为蛹虫草多糖的规模化提取及产业化应用提供了科学依据,具有重要的实践指导意义和应用前景。