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关键词： 聚多巴胺纳米粒子   自愈合可注射水凝胶   透明质酸   生物相容性  

摘要： 动态自愈合可注射水凝胶作为一种新型的智能柔性生物材料,在组织工程和再生医学等领域展现出了广阔的应用前景.生物安全性研究对评价植入型水凝胶载体的实际应用价值至关重要.本研究全面评价了负载聚多巴胺纳米粒子的基于氧化透明质酸和N-羧乙基壳聚糖动态交联的自愈合可注射水凝胶的体外和体内生物安全性.体外生物相容性实验结果表明纳米复合动态水凝胶无细胞毒性且无体外溶血反应.将水凝胶注射至大鼠皮下检测了组织相容性和血液相容性,28天后观察主要脏器(心、肝、脾、肺、肾)的病理学切片表明无体内毒性,在大鼠尾动脉处取血,分析血常规、肝、肾功能等指标表明无血液毒性.这些研究结果为纳米复合动态水凝胶的进一步临床应用研究提供重要的理论和实验基础.

关键词： 甘露聚糖结合凝集素相关蛋白19   单克隆抗体   制备   鉴定   应用  

摘要： 目的:制备针对MAp19 C末端4个独特氨基酸(简称EQSL,包括谷氨酸、谷氨酰胺、丝氨酸、精氨酸)的单克隆抗体,并用于泌尿系统癌组织芯片中的MAp19表达检测。方法:选择6周龄雌性BALB/c小鼠,以偶联的CSEQSL-COOH多肽作为免疫原进行腹腔注射免疫,并通过血清抗体效价筛选高效免疫小鼠。制备小鼠脾脏细胞与SP2/0细胞融合,筛选出分泌抗MAp19单抗的阳性杂交瘤细胞株。ELISA、Western blot、免疫荧光(IFA)等方法检测单克隆抗体的反应性和特异性。免疫组织化学法分析MAp19在泌尿系统癌组织中的表达。结果:获得4株阳性杂交瘤细胞株:2B23、2K21、3M2、4O17。Western blot和IFA结果显示,2B23和4O17单抗具有较好的反应性和特异性,能够特异性识别MAp19而不与甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MASP-2)等同源蛋白发生交叉反应,均为IgG2a亚型,反应效价分别为1∶32000和1∶512000。免疫组织化学分析显示MAp19在肾透明细胞癌、膀胱尿路上皮癌和前列腺癌组织中均有表达,且前列腺癌组织中MAp19表达显著高于癌旁组织。结论:成功制备了两株具有高特异性和高反应性的针对MAp19的单克隆抗体,为进一步研究MAp19在天然免疫中的功能及其在泌尿系统癌症中的作用提供了实验基础。

关键词： 胃黏膜损伤   枸杞多糖   茶多酚   氧化应激   炎症  

摘要： 本文旨在研究枸杞多糖(Lyeium barbarum polysaccharide,LBP)联合茶多酚(Tea polyphenol,TP)对阿司匹林诱导的胃黏膜损伤的保护作用和机制。将SPF级雄性昆明种小鼠随机分为5组,对照组、胃黏膜损伤模型组(模型组)、枸杞多糖治疗组(LBP组)、茶多酚治疗组(TP组)、枸杞多糖联合茶多酚治疗组(联合治疗组);除对照组外,其余各组小鼠连续灌胃阿司匹林6 d,诱导胃黏膜损伤,造模后给予药物治疗6 d,对照组小鼠给予等体积生理盐水灌胃,记录小鼠每日体重。12 d后处死小鼠,收集眼眶静脉血和胃黏膜组织,采用Guth评分明确胃黏膜损伤指数,利用HE染色评估胃黏膜组织病理学特征变化,ELISA法检测血清和胃黏膜组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性、丙二醛(MDA)含量,采用免疫组织化学(IHC)检测胃黏膜组织中的超氧化物歧化酶1(SOD1)和NF-κB因子的表达水平。在体外,采用阿司匹林乙醇溶液孵育人胃黏膜上皮细胞构建胃黏膜损伤细胞模型,检测并比较分析细胞内活性氧水平,采用Western blotting检测氧化应激信号通路相关蛋白p-NRF2和SOD1,以及炎症信号通路相关蛋白p-NF-κB和TNF-α的水平。胃黏膜损伤评价结果显示,与对照组相比,模型组小鼠胃黏膜损伤Guth指数评分显著提高,经各治疗组治疗处理后,Guth指数评分均显著降低(P<0.05),联合治疗组评分最低,且联合治疗组小鼠胃黏膜溃疡抑制率最高达72.41%。ELISA结果显示,与对照组相比,模型组小鼠血清和胃黏膜组织T-SOD活性显著下降,MDA含量显著升高;与模型组相比,各治疗组小鼠组织T-SOD活性均升高,MDA含量均显著降低,其中联合治疗组效应最明显。HE染色结果显示,与对照组比较,模型组小鼠胃黏膜腺体排列紊乱,黏膜上皮细胞大量坏死、脱落,出现炎症细胞浸润;与模型组相比,各治疗组小鼠胃黏膜损伤面积明显减小,程度明显减轻,联合治疗组进一步改善了胃黏膜组织的损伤,腺体排列规则有序,炎症细胞浸润减少。IHC结果显示,阿司匹林诱导胃黏膜损伤后,胃黏膜组织NF-κB磷酸化水平和SOD1表达量显著上升;与模型组相比,各治疗组黏膜组织磷酸化NF-κB和SOD1水平均显著下降,联合治疗组二者水平最低。体外试验表明,与对照组相比,阿司匹林处理后,胃黏膜上皮细胞活性氧水平显著上升,同时磷酸化的NRF2和NF-κB、SOD1以及TNF-α蛋白水平上调,施加LBP和/或TP处理的胃黏膜上皮细胞活性氧水平均降低,上述蛋白水平出现下调变化,联合治疗组效果最明显。枸杞多糖联合茶多酚对阿司匹林诱导胃黏膜损伤的保护作用涉及对氧化应激和炎症反应等机制的抑制。

关键词： 绿鳍马面鲀   体成分比较   蛋白   脂肪   脂肪酸   氨基酸  

摘要： 为比较野生和养殖绿鳍马面鲀营养成分的异同,以野生绿鳍马面鲀(体长20.0~21.7 cm,体质量120.95~170.66 g)和养殖绿鳍马面鲀(体长21.0~23.4 cm,体质量124.08~184.85 g)各10尾(每尾作为1个独立样本)为研究对象,测定了形体指标、常规营养成分、脂肪酸和氨基酸并进行比较分析。研究表明:养殖组的肝体比和脏体比显著高于野生组,肥满度无显著差异。绿鳍马面鲀肌肉粗蛋白含量在18.5%~20.2%(鲜质量),粗脂肪含量在0.8%~1.1%(鲜质量)。养殖组肌肉的粗蛋白和粗脂肪含量显著高于野生组,水分含量无显著差异;养殖组全鱼和肝脏的灰分含量显著低于野生组。养殖组和野生组全鱼脂肪酸组成相似。肌肉DHA和EPA含量(%总脂肪酸)分别在20.2%~24.7%及11.4%~15.8%;养殖组肌肉中饱和脂肪酸、20:4n-6和DHA含量显著低于野生组,但EPA含量显著高于野生组,长链多不饱和脂肪酸含量以及EPA+DHA含量差异不大。野生和养殖绿鳍马面鲀全鱼和肌肉氨基酸共检测18种,全鱼氨基酸组成类似,但养殖组肌肉必需氨基酸总量显著高于野生组,必需氨基酸中异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸及赖氨酸含量养殖组都显著更高。综上所述,绿鳍马面鲀的营养价值较高,以肌肉蛋白、脂肪、EPA含量及必需氨基酸含量评价,养殖绿鳍马面鲀的营养品质要优于野生绿鳍马面鲀。

关键词： 毛蚶   营养成分   脂肪酸   氨基酸   不同季节  

摘要： 本试验以经济贝类毛蚶的山东和浙江群体为研究对象,分别于2023年6月和2024年1月对两个群体毛蚶可食用部分的基本营养成分、维生素、矿物质元素、氨基酸及脂肪酸含量进行测定,比较其营养成分差异及其随季节的变化规律。该研究中各成分均采用食品安全国家标准中的方法进行测定。结果显示:毛蚶南北方群体中粗蛋白质、粗脂肪含量在各个季节都无显著性差异;北方群体水分含量在夏季显著高于南方,冬季则相反;两个群体必需氨基酸与非必需氨基酸比值在0.55~0.7,必需氨基酸与氨基酸总量比值在0.32~0.37,夏季北方群体的氨基酸评分(AAS)、化学评分(CS)以及必需氨基酸指数高于其他3个组别;毛蚶两个群体脂肪酸含量中的不饱和脂肪酸占比较大,且夏季南方群体高于北方,冬季相反;两个群体共检出两种维生素(维生素B2和维生素B5),且含量无明显季节变化;大多数金属元素南方高于北方,且钾元素含量最高,锰元素含量最低;总体来看,冬季毛蚶南方群体中呈味氨基酸显著高于另外三个组别,表明冬季南方毛蚶的味道更为鲜美;在基础营养成分和人体所需矿物质、必需氨基酸含量、必需脂肪酸含量等方面,冬季北方群体则显著高于其他组别。此结果可为毛蚶的营养生理及绿色健康养殖提供理论指导,为消费者的市场选择提供有价值的依据。

关键词： 锦带花桑黄   液体发酵   工艺优化   胞外多糖   抗肿瘤  

摘要： 对采自湖南的野生锦带花桑黄(Sanghuangporus weigelae)菌株CB 11进行鉴定,用单因素实验和正交实验优化液体发酵条件,用离子交换层析和葡聚糖凝胶层析分离胞外多糖CBDT 3,并用体外细胞实验检测CBDT 3对HeLa细胞的抑制作用。结果表明:CB 11菌株产胞外多糖的最佳液体发酵条件为培养基组成25 g·L^(-1)乳糖、5 g·L^(-1)酵母粉、1.5 g KH2PO_(4)·L^(-1)、1 g·L^(-1)MgSO_(4)·7 H2O、0.05 g·L^(-1)维生素B1,pH 6.5,温度26℃,转速160 r·min^(-1),发酵时间12 d,在此条件下胞外多糖产量2.51 g·L^(-1)。胞外多糖CBDT 3由葡萄糖、甘露糖、半乳糖、半乳糖醛酸及葡萄糖醛酸组成,抑制HeLa细胞的IC_(50)为13.5μg·mL^(-1),可诱导HeLa细胞凋亡。研究结果可为锦带花桑黄的开发利用提供参考。

关键词： 复合氨基酸   代谢组学   植物促生   次级代谢产物  

摘要： [目的]探究复合氨基酸对菌株Bacillus megaterium 153-1发酵代谢组分的调控。[方法]在发酵培养基中添加复合氨基酸(总浓度1‰),通过3 L发酵罐制备代谢产物;结合非靶向代谢组学分析差异代谢物,并利用小麦发芽试验和拟南芥根系发育试验验证农学效果。[结果]添加复合氨基酸(ET2处理组)显著上调3-吲哚乙酸、没食子酸等代谢物(FC值>10,P<0.001),苯丙烷类和色氨酸代谢通路是主要调控靶点。通过激活植物生长素合成基因(TAA1、YUC2和YUC8)增强了拟南芥根系发育,小麦平均总芽长提高66.72%,拟南芥根毛密度和侧根数量分别增加84.74%和33.94%。[结论]复合氨基酸通过重编程菌株Bacillus megaterium 153-1的代谢网络,促进植物激素和抗氧化物质的合成,为开发多功能微生物菌剂提供理论依据。

关键词： 超声协同微波   百合   提取率   多糖   工艺  

摘要： 为研究百合多糖提取工艺,以甘肃平凉生产的百合为原料,采用超声、微波、超声协同微波复合提取等方法对百合中多糖进行提取,通过单因素试验法研究各提取条件对多糖提取率的影响,比较不同方法提取多糖的提取率,并采用正交实验法和响应面法优化提取工艺。结果显示,超声协同微波提取得到的多糖提取率较高,多糖的提取率为19.37%。微波功率和超声功率是影响多糖提取率的主要因素。以多糖提取率为响应值,得到优化后最佳提取工艺为:微波功率为600 W、微波辐照时间为25 min、微波辐照温度为55℃、超声功率为480 W、超声时间为45 min、料液比为1∶25 g·mL^(-1),百合多糖的提取率为23.94%,与预测值(25.03%)差异不显著。相较于其他提取方法,该方法提取率高、操作简单、具有一定的研究价值。

关键词： 葛根多糖   肉鸡   生长性能   屠宰性能   肉品质  

摘要： 本试验旨在探究饲粮中添加葛根多糖(PLP)对白羽肉鸡生长性能、屠宰性能、肉品质以及血液相关指标的影响。选用健康1日龄爱拔益加肉鸡[(42.31±0.94)g]336只,随机分为4组(每组6个重复,每个重复14只,公母各占1/2):对照组饲喂基础饲粮,记为C组;试验组在基础饲粮中分别添加100、200、400 mg/kg PLP,分别记为PS、PM、PL组。试验期为42 d。结果显示:1)与C组相比,PM、PL组21、42日龄肉鸡体重显著提高(P<0.05),1~42日龄平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)显著提高(P<0.05),料重比(F/G)显著降低(P<0.05),其中添加200 mg/kg PLP作用效果在42日龄最佳。2)各组间血浆生化指标均无显著差异(P>0.05)。3)与C组相比,PM组肉鸡屠宰率显著提高(P<0.05),提升了4.29%,效果最佳;各组间其他屠宰性能指标均无显著差异(P>0.05)。4)与C组相比,试验组21、42日龄肉鸡血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性以及总抗氧化能力(T-AOC)显著提高(P<0.05),且丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05);但仅PM组21日龄肉鸡血清免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)含量显著升高(P<0.05)。5)与C组相比,PM、PL组21、42日龄肉鸡血清生长激素(GH)、游离四碘甲状腺原氨酸(FT4)含量显著提高(P<0.05)。6)与C组相比,PM、PL组胸肌、腿肌红度(a*)值、pH 24 h显著提高(P<0.05),胸肌亮度(L*)值、腿肌蒸煮损失显著提高(P<0.05),胸肌、腿肌剪切力显著降低(P<0.05)。综上所述,饲粮中添加200~400 mg/kg PLP能够提高肉鸡生长性能,增强血清抗氧化功能,改善肉品质,且对血浆生化指标无不良影响。其中,200 mg/kg PLP还能提高血清免疫性能,提高肉鸡屠宰率,效果较好。

关键词： 肉鸡   氨基酸   微生物群  

摘要： 在家禽饲料中添加氨基酸可对其生产性能产生积极影响,相关研究已有很多。但是,氨基酸对肠道菌群的影响尚未完全阐明,且在家禽上阐释氨基酸与肠道菌群关联的研究相对较少。家禽整体健康状况与其肠道健康密切相关,这是因为胃肠道具有消化吸收营养物质与免疫应答的功能,这些基本功能在很大程度上由定植于肠道的微生物群驱动。这些微生物群可产生丁酸盐、丙酸盐和乙酸盐等代谢物,为其自身创造适宜增殖的微环境。饲料、年龄、饲料添加剂的使用和病原体感染是影响胃肠道菌群的主要因素,这些因素的变化可能对鸡肠道菌群产生潜在影响,进而干扰机体健康,并最终影响鸡的生长、采食量与饲料转化率。本综述将重点探讨氨基酸在家禽肠道菌群组成中可能起到的作用。