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关键词： 驼肉   超声波   木瓜蛋白酶   嫩化   蛋白质组学   体外消化  

摘要： 本研究以驼肉为原料,系统解析了超声波协同木瓜蛋白酶嫩化处理对驼肉品质特性及体外消化行为的影响,并采用蛋白质组学方法深入探究其品质变化的分子机制。结果显示,与对照组相比,驼肉经协同处理后剪切力、蒸煮损失、硬度、咀嚼度及内聚性显著降低,弹性显著增加(P<0.05)。基于蛋白质组学技术共鉴定到5,048个蛋白质和23,609条肽段,协同处理通过激活钙信号与细胞凋亡通路、下调结构蛋白并富集消化系统通路,破坏肌原纤维并抑制应激修复,从而实现多通路协同嫩化与消化性提升;该过程进一步得到差异蛋白质与质构特性相关性分析的验证。通过体外模拟消化后,协同处理组的蛋白消化效率显著提高,其胃蛋白酶水解率(81.94%±1.27%)和总蛋白水解率(90.34%±1.72%)较对照组分别提升17.57%和18.06%。消化产物中总羰基含量显著上升,总巯基含量相应下降,表明适度氧化进一步支持消化性改善。此外,驼肉经协同处理其蛋白质构象发生显著改变,表现为内源荧光强度显著增强(P<0.05);电泳结果显示,协同处理组在35~100 kDa区间的蛋白条带密度较对照组减弱,显著提升驼肉嫩度。本研究从分子机制层面阐释了协同处理提升驼肉嫩化与消化品质的内在关联,旨在为驼肉品质的精准调控提供理论与技术支撑。

关键词： 子宫内膜异位症   当归多糖   氧化应激   自噬   Keap1/Nrf2/HO-1通路   SD大鼠  

摘要： 目的:基于Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)通路探讨当归多糖是否通过抑制氧化应激恢复细胞自噬,从而改善子宫内膜异位症(EMT)。方法:大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、小剂量当归多糖组、大剂量当归多糖组、孕三烯酮组、大剂量当归多糖+重组Keap1蛋白(rKeap1)组,每组12只。除正常对照组外,其他组均构建EMT模型,建模成功后给药1次/d,持续4周。测量大鼠异位子宫内膜组织的质量和体积,苏木精-伊红染色观察子宫内膜组织病理学特征,通过试剂盒检测活性氧、丙二醛、超氧化物歧化酶(SOD)水平;透射电镜观察子宫内膜组织中自噬小体数;免疫荧光染色检测子宫内膜组织中微管相关蛋白轻链3(LC3)相对荧光强度;蛋白质印迹法检测子宫内膜组织中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62、Keap1、细胞核Nrf2、HO-1蛋白水平。结果:与正常对照组子宫内膜组织比较,模型对照组异位子宫内膜组织腺体增多,细胞空泡化明显,炎性细胞浸润明显,活性氧、丙二醛水平及p62、Keap1表达增加,而SOD水平降低,自噬小体数减少,LC3相对荧光强度降低,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、细胞核Nrf2、HO-1表达减少(均P<0.05)。与模型对照组比较,小、大剂量当归多糖组及孕三烯酮组异位子宫内膜组织病理损伤减轻,异位子宫内膜组织质量和体积、活性氧、丙二醛水平及p62、Keap1表达减少,SOD水平升高,自噬小体数、LC3相对荧光强度增加,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、细胞核Nrf2、HO-1表达增加(均P<0.05)。rKeap1逆转了大剂量当归多糖对EMT大鼠氧化应激的抑制作用以及对自噬稳态的恢复作用。结论:当归多糖可能通过阻断Keap1激活Nrf2/HO-1通路,抑制大鼠氧化应激,恢复自噬稳态,从而改善EMT。

关键词： 13-17周龄   京粉6号蛋鸡   日粮   粗蛋白质   预测模型   验证  

摘要： 本实验旨在研究日粮不同蛋白质水平对13-17周龄京粉6号蛋鸡体重、胫骨质量、脏器发育和健康状况的影响,以验证前期所建立的京粉6号蛋鸡育成后期蛋白质生长需要预测模型的有效性。将160只12周龄京粉6号蛋鸡随机分为4组,每组10个重复,每重复4只鸡。对照组按照“京粉6号”蛋鸡手册的营养需要量配制日粮,模型组按照相应阶段生长需要预测模型值配制日粮。90%组与110%组在模型组基础上将蛋白质水平及氨基酸分别减少或增加10%。结果显示:1)在14和17周龄末,模型组胫重、胫骨指数、胫长和胫围相比于对照组无显著差异;在14周龄末,模型组体重相比于对照组显著降低(P<0.05),而在17周龄末,模型组体重相比于对照组无显著差异。2)在14和17周龄末,模型组脏器指数相比于对照组无显著差异。3)在14周龄末,模型组葡萄糖、甘油三酯和肌酐相比于对照组均显著升高(P<0.05);模型组白蛋白和谷草转氨酶均显著降低(P<0.05);在17周龄末,模型组肌酐和白蛋白相比于对照组均显著降低(P<0.05),但均在动物正常生理范围。结论:前期建立的京粉6号蛋鸡育成后期生长需要预测模型是有效的,可用于京粉6号蛋鸡育成后期的精准饲养及低蛋白日粮配制。

关键词： 金荞麦片   质量评价   指纹图谱   四级杆飞行时间质谱   模式识别   层次聚类分析   主成分分析   正交偏最小二乘法-判别分析   鞣质   酚   黄酮   苯丙素苷   氨基酸   有机酸   生物碱   萜   没食子酸   原儿茶酸   原儿茶醛   原花青素   儿茶素   表儿茶素   表儿茶素没食子酸酯   芦丁  

摘要： 目的对不同企业生产的金荞麦片进行质量评价。方法分别收集18批次A企业和20批次B企业生产的金荞麦片,HPLC法测定所有38批次金荞麦片指纹图谱,标定共有峰,采用四级杆飞行时间质谱(quadrupole time-of-flight mass spectrometry,Q-TOF-MS/MS)对共有峰进行成分鉴定,以量化共有峰面积为变量,对指纹图谱进行层次聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares- discriminant analysis,OPLS-DA)等模式识别分析,对样品中采用对照品比对确认且分离度较好的9个成分进行定量测定。结果 38批次金荞麦片指纹图谱标定共有峰33个;Q-TOF-MS/MS共鉴定成分53个,包括21个鞣质类成分、12个酚类成分、7个黄酮类成分、7个苯丙素苷类成分、2个氨基酸类成分、2个有机酸类成分、1个生物碱类成分及1个萜类成分,其中3个酚类成分(没食子酸、原儿茶酸和原儿茶醛)、5个鞣质类成分(原花青素B1、B2、B3、C1、C2)、4个黄酮类成分(儿茶素、表儿茶素、表儿茶素没食子酸酯和芦丁)采用对照品比对确认,除原花青素C2、B2和芦丁外的9个成分分离度较好,B企业生产的金荞麦片中这9个成分的平均含量均明显高于A企业(P<0.01)。HCA、PCA和OPLS-DA结果一致,均明显将A企业和B企业生产的金荞麦片区分为2类。共有峰30、29、16、17、2、21、10、11、18、20、27对应的成分(如原花青素C2、B2、C1、B1、B3、没食子酸、表儿茶素等)是引起2家企业生产的金荞麦片质量差异的标志性成分。结论 2家企业生产的金荞麦片存在明显质量差异。

关键词： 云南省文山州   药饲兼用植物   茎叶营养价值   糖、蛋白质和粗脂肪含量   隶属函数评价  

摘要： 本试验以近年云南省文山州畜禽等养殖户大量使用的饲药兼用植物芭蕉芋、绿叶山蚂蝗、波叶山蚂蝗、假地豆、苋和红果参的11个茎叶混合样品为研究材料,用分光光度法测定样品的可溶性糖、总淀粉和可溶性蛋白质含量,用凯氏定氮法和索氏提取法分别测定粗蛋白质和粗脂肪含量,用隶属函数评价样品营养价值的综合等级。结果表明:红果参的可溶性糖、总淀粉和粗脂肪含量均最高,分别约为(305.205±2.375) mg/g DW、(33.412±0.638)mg/g DW和(3.708±0.092)%,而绿苋的可溶性蛋白质和粗蛋白质含量均最高,分别约为(12.105±0.009) mg/g DW和(17.558±0.175)%;对于芭蕉芋居群,WS13的可溶性糖和可溶性蛋白质含量最高,分别约为(187.076±1.631) mg/g DW和(6.265±0.078) mg/g DW,WS9的总淀粉含量、WS2-1的粗蛋白质含量和WS8的粗脂肪含量均最高,分别约为(16.434±0.113) mg/g DW、(3.938±0.202)%和(2.673±0.036)%;可溶性糖、总淀粉、可溶性蛋白质、粗蛋白质和粗脂肪含量在不同样品间的差异均达到极显著水平;样品基于糖、蛋白质和粗脂肪含量的营养价值综合等级为:红果参>绿苋>紫红苋>芭蕉芋WS13>芭蕉芋WS2-1>芭蕉芋WS9>芭蕉芋WS8>绿叶山蚂蝗>芭蕉芋WS1>波叶山蚂蝗>假地豆。本研究可为文山州饲药兼用植物茎叶的饲料化开发和合理使用提供依据。

关键词： 大花红景天   转录因子   基因克隆   盐胁迫  

摘要： 本研究克隆大花红景天(Rhodiola crenulata)转录因子NAC家族成员之一RcNAC22基因,并对其进行生物信息学分析和功能验证。结果表明:RcNAC22基因全长为1 049 bp,含2个内含子、3个外显子,编码293个氨基酸。其蛋白质相对分子质量为33 625.02,属亲水蛋白,性质较稳定,不具有跨膜结构域和信号肽且亚细胞定位于细胞核,含有32个可磷酸化位点。RcNAC22基因包含1个NAM结构域(no apical meristem),第4结构域为转录抑制结构域NARD区,与狭叶红景天(R. kirilowii)亲缘关系最近。RcNAC22基因在6个器官(根、成熟茎、幼茎、叶、顶芽和花)中均有表达但主要存在于绿色器官(茎、叶、顶芽)中,同时受多种非生物胁迫和植物激素脱落酸(ABA)、水杨酸(SA)的诱导表达。RcNAC22蛋白对酵母细胞没有毒性,其全长基因和截短C端均具有自激活活性。此外,以丹参(Salvia miltiorrhiza)为转基因受体研究RcNAC22基因过表达对植物生长的影响,结果显示:提高RcNAC22基因表达量不会影响丹参的生长发育过程,但降低其对盐胁迫的耐受性。本研究揭示了RcNAC22基因的生物学功能,为进一步开展大花红景天分子生物学研究提供理论基础。

关键词： 花椒叶   抗菌肽   超声波   最小抑菌浓度   氨基酸组成  

摘要： 为提高花椒叶的综合利用价值和开发天然植物源抗菌肽,本研究在前期优化确定的酶解参数基础之上,以多肽提取率、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌效果为评价指标,采用单因素试验和响应面试验对超声波辅助酶法制备花椒叶抗菌肽的工艺进行了优化,并进一步分析了抗菌肽的氨基酸组成和评估了该抗菌肽的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明,在恒定超声波频率20 kHz下,超声波辅助酶法制备花椒叶抗菌肽的最佳超声工艺参数为脉冲超声工作间歇比5:3 s/s、超声波功率290 W、处理温度51 ℃、处理时间20 min,在此条件下的多肽酶法制备提取率为(58.6±0.7)%,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌圈分别为21.8 ±0.4 mm和17.0±0.4 mm,与未经超声波处理的对照组(提取率为43.05%±0.7%,抑菌圈直径分别为16.8±0.3mm和13.1±0.1mm)相比,分别提高了36.1%、 29.8%和29.7%。氨基酸组成分析表明,经超声辅助提取的花椒叶抗菌肽中含有较高水平的疏水性氨基酸(42.27%)和碱性氨基酸(12.94%),且超声并没有显著改变抗菌肽的氨基酸组成和含量。抑菌效果表明,经超声辅助提取的花椒叶抗菌肽对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的MIC分别为 0.5 mg/mL和1.0 mg/mL,MBC分别为1.0 mg/mL和4.0 mg/mL, 较未经超声波处理的对照组(分别为0.7 mg/mL和1.5 mg/mL 、1.5 mg/mL和6.0 mg/mL)显著降低。研究为超声波辅助酶法制备植物源活性多肽的提供了理论依据,同时为新型天然抗菌剂的开发奠定了基础。

关键词： A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗   多糖含量   批签发   趋势分析  

摘要： 经审查符合标准要求。每年度每个企业送检批次超过100批,合计每年度签发的MPV-AC单次人用疫苗剂量数量均超过3千万。趋势分析结果显示,两个企业在不同年度生产的MPV-AC产品A群和C群多糖含量检测结果趋势整体平稳,几乎全在警戒限(平均值±2SD)以内波动。不同年度的环比统计分析发现,2018—2021年期间在两个企业不同年度之间A群和C群多糖含量结果,以及不同年度随机抽取检测MPV-AC中A群和C群多糖含量检测结果与其企业自检结果之间均无显著性差异(P>0.05)。结论两个送检企业的MPV-AC产品中多糖含量稳定,产品质量一致性良好,这些产品的顺利签发不仅为国家免疫规划成功实施奠定了物质基础,也为未来相关疫苗质控的研究提供数据支持。

关键词： 抗猪抑制素血清   C57BL/6J雌性小鼠   超数排卵   卵母细胞数   2-细胞期胚胎数  

摘要： 目的制备兔抗猪抑制素多肽偶联钥孔血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)多克隆抗体,探究其对C57BL/6J小鼠超数排卵的影响。方法将人工合成的猪抑制素多肽偶联KLH蛋白免疫新西兰白兔,制备抗抑制素血清(anti-inhibin serum,AIS,即抑制素多克隆抗体)。将纯化后的AIS联合孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotropin,PMSG)经腹腔注射雌性C57BL/6J小鼠,48 h后再注射人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)诱导超数排卵,15 h后收集并计数超数排卵获得的卵母细胞数;在体外受精24 h后检测2-细胞期胚胎数。结果将KLH免疫新西兰白兔后制备AIS,采用间接ELISA法测定AIS效价,结果显示其效价可达1∶512000;AIS经硫酸铵沉淀法纯化后进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,结果显示在分子量为50 kDa及25 kDa处均出现了清晰可见的条带,符合免疫球蛋白G抗体亚型重链和轻链的理论分子量大小,表明成功制备出猪抑制素多克隆抗体。与常规超数排卵方法相比,AIS 10倍稀释联合PMSG处理可以显著增加小鼠超数排卵产生的卵母细胞数量(P<0.05),约为常规PMSG处理的1.5倍。结论本研究制备的猪抑制素多克隆抗体作为改良超数排卵试剂,可以提高C57BL/6J小鼠的超数排卵效果,在后续的市场应用中有较大前景。

关键词： 水平骨增量   引导性骨再生   骨移植   数字化技术   干细胞   组织工程  

摘要： 随着口腔种植学的长足发展,牙槽嵴骨量不足已成为影响种植成功率和长期稳定性的主要挑战之一。牙槽骨缺损根据其发生方向可分为水平向骨缺损、垂直向骨缺损以及复合性骨缺损。其中,水平向骨缺损尤为常见,常因拔牙后生理性吸收、长期缺牙、创伤或感染等病理性因素导致,严重影响种植体的初期稳定性和远期预后[1]。