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关键词： 杭白菊   黄酮   多酚   多糖   抗氧化活性   抗炎活性  

摘要： 本试验以不同花期及花序开放形态下的杭白菊作为研究材料,对其黄酮、酚类化合物和多糖含量进行了多成分综合评价,分析杭白菊在不同花期、花序开放形态下各类化学成分的动态变化规律及其与抗氧化、抗炎活性的相关性。结果显示,杭白菊蕾期的黄酮和酚类化合物含量及抗炎抗氧化活性均高于其他时期,管状花未开放的杭白菊的总酚含量为21.23 mg·g-1,总黄酮含量为15.27 mg·g-1,1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)抗氧化活性(TEAC值)为65.48和80.63 mg·g-1,一氧化氮(NO)抑制率为68.76%;同一花期下,杭白菊的总酚和总黄酮含量多表现为未开放>部分开放>完全开放状态;蕾期杭白菊的多糖含量最低,晚花期全开放杭白菊的多糖含量最高,达到133.83 mg·g-1。通过聚类分析和主成分分析(PCA),将不同花序开放形态下的杭白菊样品分为3类:蕾期、初花期未开放样品为第Ⅰ类;初花期部分开放、全开放、盛花期未开放为第Ⅱ类;盛花期部分开放和全开放、晚花期部分开放和全开放为第Ⅲ类。其中,木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、木犀草苷、异绿原酸C、异绿原酸A和槲皮苷为不同花期及花序开放形态样品杭白菊的主要差异化合物。相关性分析结果显示,酚类和黄酮类化合物与杭白菊的抗氧化、抗炎活性具有明显相关性,其中木犀草苷、木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷与抗氧化活性的相关性最好,隐绿原酸和异绿原酸C与抗炎活性的相关性最好。综上,杭白菊中黄酮、多酚和多糖类化合物的含量同时受花期和花序开放形态的影响,且黄酮、酚类化合物含量与抗氧化和抗炎活性密切相关。

关键词： 平胃散加味方   芪桂苓合剂   急性肺损伤   PI3K-Akt信号通路  

摘要： 目的:通过腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)建立急性肺损伤(acute lung injury,ALI)大鼠模型,探究平胃散加味方改善ALI的作用及可能作用机制。方法:将72只大鼠随机分为空白组,模型组,阳性对照组(醋酸泼尼松,3 mg·kg-1),平胃散加味方低、中、高剂量组(7.6、15.2、30.4 mg·kg-1),灌胃给药7 d后,除空白组腹腔注射生理盐水外,其余各组通过腹腔注射LPS构建大鼠ALI动物模型,造模24 h后取材。测定大鼠动脉血气值和淋巴细胞数量;计算大鼠肺指数和肺组织湿/干质量比(mW/mD);酶联免疫吸附试验检测大鼠血浆和支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中TNF-α、IL-6和IL-1β水平;苏木精-伊红染色观察肺组织病理变化;免疫蛋白印迹法检测肺组织中PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达水平。结果:动物实验结果表明,与模型组相比,平胃散加味方组大鼠动脉血氧分压水平升高(P<0.01),炎症细胞数量降低(P<0.01);肺指数和肺组织mW/mD降低(P<0.05,P<0.01);血浆和BALF中TNF-α、IL-6和IL-1β因子水平降低(P<0.05,P<0.01);肺组织形态损伤得到改善(P<0.01);肺组织中PI3K、p-Akt蛋白表达减少(P<0.05,P<0.01)。结论:平胃散加味方可有效缓解LPS诱导的ALI炎症反应,保护肺组织,其机制可能与抑制PI3K-Akt信号通路的表达有关。

关键词： 香菇   近红外光谱   化学计量学   多糖   蛋白   快速检测  

摘要： 为快速检测香菇中多糖与蛋白含量,研究利用化学计量法分别测定不同产地共124份香菇的多糖与蛋白含量并作为参比,利用近红外光谱技术采集124份样品的光谱数据,利用马氏距离剔除异常值后,结合肯纳德-斯通(Kennard-Stone,KS)划分样本集,对近红外光谱进行不同方式预处理,利用最优预处理方法采用竞争自适应权重加权(competitive adaptive reweighted sampling,CARS)和变量组合整体分析-遗传算法(variable combination population analysis-genetic algorithm,VCPA-GA)提取特征波长,结合偏最小二乘法(partial least squares regression,PLSR)、支持向量回归(support vector regression,SVR)和冠豪猪算法优化-小二乘支持向量机(crested porcupine optimizer - least squares support vector machine,CPO-LSSVM)3种建模方法构建6种数学模型,对各模型的预测精度进行对比分析。建模结果表明,对于多糖含量的最优预测模型为萨维茨基-戈雷滤波平滑(Savitzky-Golay,SG)-乘性散射校正(multiplicative scatter correction,MSC)+CARS+CPO-LSSVM,其预测集相关指数分别为预测决定系数(Prediction coefficient of determination,R2p)为0.9489,预测均方根误差(Root Mean Square Error of Prediction,RMSEP)为0.0102 g/g,相对分析误差(ratio of performance to deviation,RPD)为4.4238;对于蛋白含量的最优预测模型为标准正态变换预处理(standard normal variate,SNV)+CARS+SVR,其预测集相关指数分别为Rp为0.9280,RMSEP为0.0125 g/g,RPD为3.8056。该研究对于香菇多糖和蛋白的预测,化学法和近红外仪器法测定间无显著差异,证实了近红外光谱技术应用于香菇主要品质成分快速检测的可行性与优越性,能够满足对香菇多糖和蛋白含量的检测。

关键词： 嗜酸乳杆菌   特异性引物   锁核酸   实时荧光定量PCR  

摘要： 随着益生菌产业的快速发展,菌株水平的精准鉴定已成为保障产品质量及追溯污染来源的核心环节,该文旨在建立一种嗜酸乳杆菌LIHUO 1978(Lactobacillus acidophilus)的株特异性定量检测技术。该文以嗜酸乳杆菌LIHUO 1978的全基因组信息为基础,以比较基因组数据分析作为依据,设计嗜酸乳杆LIHUO 1978的株特异性引物,通过锁核酸(locked nucleic acid, LNA)修饰增强引物特异性,并建立实时荧光定量PCR检测体系。结果表明,该研究所设计的引物特异性强,能够在7株嗜酸乳杆菌中对菌株LIHUO 1978进行特异性验证;所建立的定量检测方法,灵敏度高,最低检出限为103 CFU/mL,构建的标准曲线R2为0.993 2,具有良好的线性关系;在复合菌粉和乳酸菌饮料中,该方法稳定性强,可在不同混菌产品及食物基质干扰条件下实现LIHUO 1978菌株的准确检出。该研究建立了株特异性的嗜酸乳杆菌LIHUO 1978的定量检测体系,不仅为该菌株在多种产品中的定量检测提供了技术支持,并且为其他益生菌菌株的定量检测提供了参考。

关键词： 黄芪   均一多糖   硒多糖   分子结构   体外降血糖活性  

摘要： 取黄芪干粉,采用水提醇沉法提取粗多糖,经Sevage法脱蛋白、透析除杂质后先后采用常规DEAE-52纤维素层析法、常规Sephacryl S-400凝胶色谱和高效液相Sephacryl S-300凝胶色谱分离纯化,得到一种高纯度的均一黄芪多糖(PAPS-1),其分子量为15 388 D,单糖组成为葡萄糖、甘露糖、半乳糖和阿拉伯糖。采用Na2SeO3硒化PAPS-1得到均一黄芪硒多糖(PAPS-1-Se),原子荧光光谱法测得其硒含量为40μg/g,原子能谱分析进一步证实硒元素均匀修饰到PAPS-1。通过对PAPS-1-Se体外降血糖活性的研究,证实PAPS-1-Se具有显著的降血糖活性,表明其具有良好的药用价值。

关键词： 核桃仁   氨基酸   脂肪酸   矿物质元素   α-葡萄糖苷酶  

摘要： 为评价不同产地核桃仁营养成分,开发功能性核桃产品,研究以来自不同产地共9个核桃品种为研究对象。分别测定其营养成分,并对核桃酶解产物进行降血糖活性评价。结果表明:9种核桃在脂肪、蛋白质等方面均具有显著差异(P<0.05);新疆核桃的单不饱和脂肪酸平均含量为23.09%,云南核桃平均含量为21.85%;云南核桃锰元素(110.53 mg·kg-1)的含量高于新疆核桃(13.80 mg·kg-1),9号(山西晋龙)核桃样品钙含量高达1 464.63 mg·kg-1;9种核桃必需氨基酸的平均含量为40.92 mg·g-1,疏水性氨基酸平均含量为42.34 mg·g-1,必需氨基酸与非必需氨基酸的含量比值的变幅为39.33%~42.25%。以α-葡萄糖苷酶抑制率为指标,对9种核桃乳及核桃蛋白酶解液进行降糖活性评价发现:核桃蛋白酶解液的降血糖效果显著高于核桃乳酶解液,核桃蛋白酶解产物对α-葡萄糖苷酶具有较好的抑制效果是5号(新疆新丰),其抑制率为73.88%。综合分析,核桃酶解后具有降血糖活性,且其蛋白酶解产生的特异性肽段是功能核心,可为功能性核桃产品开发及品种选择提供参考。

关键词： 蜜环菌   多糖   工艺优化   抗氧化活性   酶抑制动力学   荧光淬灭   中药现代化技术  

摘要： 以蜜环菌为原料,采用超声波辅助酶(纤维素酶和木瓜蛋白酶质量比2∶1)法提取蜜环菌多糖。通过单因素和响应面实验,考察料液比(g∶mL,下同)、超声时间、酶解温度、酶解时间对蜜环菌粗多糖得率的影响,并优化工艺条件。通过紫外荧光和红外荧光光谱对蜜环菌多糖进行表征,并对其进行体外抗氧化、降糖能力,以及酶抑制动力学进行研究。结果表明,以水为提取溶剂,超声波辅助酶法提取蜜环菌多糖的最佳工艺条件为:料液比1∶26,酶解温度50 ℃,超声时间19 min,酶解时间131 min,在该条件下,蜜环菌粗多糖得率为49.17%±0.06%。;蜜环菌多糖对DPPH自由基、羟基自由基和ABTS+自由基的清除作用都呈现出剂量依赖性;蜜环菌多糖对α-淀粉酶的半数抑制质量浓度(IC50)为0.0944 mg/mL,对α-葡萄糖苷酶的IC50=0.278 mg/mL。蜜环菌多糖对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶均呈竞争性抑制,其相互作用方式为范德华力和氢键,且反应是自发进行的。

关键词： 微小隐孢子虫   核酸   定性标准样品   均匀性   稳定性  

摘要： 目的 按照GB/T 15000《标准样品工作导则》所规定的标准样品制备流程和工艺制备微小隐孢子虫核酸检测用标准样品。方法 通过犊牛传代获取大量微小隐孢子虫虫株C1HN(亚型为ⅡdA19G1)卵囊,纯化后提取DNA并溯源,溯源性检验正确后分装保存,通过微小隐孢子虫巢式PCR和荧光定量PCR(qPCR)对制备的标准样品进行均匀性检验、冻融稳定性检验、短期和长期稳定性检验,通过多家单位合作的方式联合定值。采用SPSS 27.0软件进行统计学分析,数据采用单因素方差分析和配对样本t检验。结果 PCR结果显示,扩增片段大小约为830 bp,与国标检测方法结果一致。测序结果显示,该片段与C1HN虫株上的2号、7号、8号染色体上的SSU rRNA片段序列一致性为99.65%,与感染虫株完全一致,亚型为ⅡdA19G1。均匀性检验结果显示,样品Ct值为15.00±0.36,组间均方为0.17,组内均方为0.11,差异无统计学意义(F=1.49,P > 0.05);冻融稳定性结果显示,样品反复冻融第0、3、7、14天的Ct值别为15.67±0.25、15.68±0.22、15.69±0.27、15.71±0.27,差异无统计学意义(t=0、0.31、0.50、0.71,均P > 0.05);短期稳定性结果显示,4℃下样品储存第0、1、2、3、4、5、10天的Ct值分别为16.48±0.28、16.48±0.25、16.49±0.28、16.50±0.25、16.53±0.26、16.56±0.25、16.57±0.24,差异无统计学意义(t=0、0.04、0.34、0.46、1.56、1.60、1.84,均P > 0.05);25℃下样品储存第0、1、2、3、4、5、10天的Ct值分别为16.20±0.18、16.21±0.14、16.21±0.13、16.22±0.14、16.23±0.14、16.24±0.14、16.25±0.15,差异无统计学意义(t=0、0.17、0.28、0.47、0.61、1.09、1.40,均P > 0.05);37℃下样品储存第0、 1、 2、 3、 4、 5、 10天的Ct值分别为16.21±0.17、 16.22±0.16、 16.23±0.16、 16.24±0.17、 16.26±0.18、16.247±0.18、16.259±0.19,差异无统计学意义(t=0、0.33、0.56、1.10、1.20、1.34、1.89,均P > 0.05);长期稳定性结果显示,-20℃下样品储存第0、30、90、180、270、360天的Ct值分别为15.67±0.11、15.67±0.21、15.67±0.21、15.67±0.25、16.67±0.24、15.67±0.23,差异无统计学意义(t=0、0.01、0.11、0.23、0.37、0.39,均P > 0.05),第180、360天巢式PCR结果显示,特异性条带大小均约为830 bp,测序结果与先前一致;所有单位出具的标准样品复核报告均证明制备的标准样品可作为微小隐孢子虫核酸检测定阳性样品。结论 制备的标准样品达到了GB/T 15000《标准样品工作导则》的要求,溯源性可靠、均匀性良好、稳定性符合要求、定值结果正确。

关键词： 大球盖菇   生长特性   遗传多样性   氨基酸组成   营养价值评价  

摘要： 以河南省不同地区收集的13个大球盖菇菌株为试材,采用菌丝生长速度测定法、ITS序列分子系统进化分析及子实体氨基酸组成与营养价值评价的方法,研究了不同菌株在生长特性、遗传多样性及营养品质方面的差异,以期筛选出生长快、营养品质优良的备选菌株。结果表明:13个菌株菌丝均洁白浓密,但生长速度差异显著,其中Sr-4(0.219 cm·d-1)和Sr-6生长最快,Sr-3、Sr-5等生长较慢;基于ITS序列的分子系统进化分析将13个菌株聚为3类,Sr-4与Sr-6聚为独立类群;13个菌株均检测出16种水解氨基酸,种类一致但含量不同,Sr-4总氨基酸含量最高(23.95 g·kg-1),Sr-9最低(15.64 g·kg-1),且氨基酸组成模式均为鲜味氨基酸>甜味氨基酸>苦味氨基酸>芳香族氨基酸;营养评价表明,所有菌株必需氨基酸/总氨基酸为36.54%~37.97%、必需氨基酸/非必需氨基酸为57.59%~61.22%,接近FAO/WHO 推荐模式,甲硫氨酸为第一限制氨基酸;聚类热图按照氨基酸的含量将13个大球盖菇菌株划分为3类。综合来看,Sr-4在菌丝生长速度、总氨基酸及鲜味、甜味氨基酸含量上表现突出,是兼具高产潜力与优良品质的备选菌株。

关键词： 代谢能   粗蛋白质   吉山黑鸡商品代蛋鸡   生长性能  

摘要： 【目的】本试验以生长性能、屠宰性能、器官指数、血清生化指标和抗氧化指标为评价指标,旨在研究13~18周龄吉山黑鸡商品代蛋鸡适宜饲粮代谢能和粗蛋白质水平。【方法】选取1 152只健康状况良好、体重相近的12周龄吉山黑鸡商品代蛋鸡,随机分为9组,每组8个重复,每个重复16只。采用3×3双因子(代谢能水平为:10.67、11.09和11.51 MJ/kg;粗蛋白质水平为:15.00%、16.00%和17.00%)试验设计,共配制9种试验饲粮。试验正试期6周。试验期间统计平均日采食量、平均日增重和料重比,试验结束时,每个重复取1只鸡,测定屠宰性能、器官指数、血清生化指标和抗氧化指标。【结果】①饲粮代谢能水平为10.67 MJ/kg时,蛋鸡末重和平均日增重显著低于11.09和11.51 MJ/kg组(P<0.05)。料重比随代谢能水平的升高而显著降低(P<0.05)。饲粮代谢能和粗蛋白质水平对料重比有显著互作效应(P<0.05)。②饲粮代谢能和粗蛋白质水平对屠宰性能无显著影响(P>0.05)。③饲粮代谢能和粗蛋白质水平对肌胃指数和脾脏指数有显著互作效应(P<0.05)。④饲粮代谢能水平为11.09 MJ/kg时,蛋鸡血清总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、总蛋白、白蛋白和尿素氮含量显著低于10.67和11.51 MJ/kg组(P<0.05)。⑤饲粮代谢能水平为11.51 MJ/kg时,蛋鸡血清总抗氧化能力显著低于10.67 MJ/kg组,谷胱甘肽过氧化物酶活性显著低于11.09 MJ/kg组(P<0.05)。饲粮粗蛋白质水平为15.00%时,蛋鸡血清总抗氧化能力和超氧化物歧化酶活性显著低于16.00%和17.00%组(P<0.05)。【结论】综合考虑各项指标,推荐13~18周龄吉山黑鸡商品代蛋鸡适宜的饲粮代谢能和粗蛋白质水平分别为11.09 MJ/kg和16.00%。