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关键词： 鲷鱼鱼糜   银耳多糖   肌原纤维蛋白   构象  

摘要： 为探究银耳多糖对鲷鱼鱼糜品质特性的影响,将不同添加量(0%、0.075%、0.15%和0.30%)银耳多糖与4 mg/mL的鲷鱼鱼糜肌原纤维蛋白进行复配形成溶液,测定肌原纤维蛋白溶解度、浊度、总巯基,并利用拉曼光谱、荧光光谱、紫外光谱和扫描电镜等,以检测肌原纤维的蛋白氧化变性程度、微观结构及构象变化。结果表明,0.075%的银耳多糖能显著提高鱼糜肌原纤维蛋白的溶解度、降低浊度;添加银耳多糖能显著降低蛋白质的氧化程度(P<0.05),其中0.30%的银耳多糖处理组总巯基含量最高,为115.93 nmol/mg。随着银耳多糖添加量的增加,鱼糜蛋白的α-螺旋逐渐展开,主要转变为β-折叠;0.075%银耳多糖处理组的蛋白结构表面结构紧密、平滑,0.30%银耳多糖处理组出现了较大程度的蛋白聚集。总体而言,银耳多糖在鱼糜肌原纤维蛋白中的应用表现出积极的结构调控、抑制蛋白氧化作用,对改善鱼糜蛋白品质具有潜在应用价值。

关键词： PTPN3   蛋氨酸   亮氨酸   乳腺上皮细胞   PI3K   mTOR  

摘要： 为了研究非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶3(PTPN3)基因介导氨基酸促进乳腺上皮细胞(MECs)乳合成的功能及作用机理,试验利用过表达和敲低PTPN3基因方法分析PTPN3基因对MECs乳蛋白合成、乳脂肪合成、细胞增殖、细胞自噬及PI3K-mTOR信号通路的影响;同时通过敲低PTPN3基因并添加蛋氨酸(Met)或亮氨酸(Leu)分析PTPN3基因在氨基酸抑制细胞自噬过程中的功能及PTPN3基因在氨基酸刺激PI3K-mTOR信号通路激活过程中的介导作用。结果表明:PTPN3基因能显著提高β-酪蛋白表达量、三酰甘油浓度、细胞中脂滴数量,促进细胞增殖,并显著抑制细胞自噬(P<0.05)。PTPN3基因过表达可显著提高PI3K和mTOR蛋白的磷酸化水平(P<0.05);敲低该基因则结果相反。Met和Leu能显著提高PTPN3蛋白表达水平(P<0.05),而添加Met和Leu并敲低PTPN3基因会显著降低Met和Leu对PI3K和mTOR的磷酸化水平(P<0.05)。说明PTPN3基因可介导氨基酸刺激PI3K-mTOR信号通路的激活,进而调节MECs的乳合成、细胞增殖和细胞自噬作用。

关键词： 氨基酸   营养评价分析   聚类分析  

摘要： 为探明不同种类食品中氨基酸含量、构成特征及其营养价值差异,本研究采用酸水解法对样品进行前处理,利用全自动氨基酸分析仪测定其氨基酸组成与含量,通过氨基酸营养评价和聚类分析全面比较其营养价值差异。结果表明,32个不同样品氨基酸含量及构成存在明显差异。聚类分析树状谱系图将32个样品分为6类,每类所含样品数分别为6、7、2、5、8、4种。动物皮及其制品、动物结缔组织、鱼胶及其制品等胶原蛋白含量较高的食品中,甘氨酸是含量最高的氨基酸;蛋、纯乳、豆及其制品类中谷氨酸的含量占比最高。氨基酸营养价值评价结果为蛋类和纯乳制品的蛋白质营养价值最理想,豆类及其制品次之。此外,在32个样品中,91%的样品中蛋氨酸相对不足,而鸡蛋蛋白中充足的蛋氨酸可弥补其他动物蛋白中蛋氨酸的不足。营养评价结果和聚类分析结果显示,2种评价模式具有一定相关性,可为食品真假判定提供依据。

关键词： 黑斑原   野生   驯养   养殖   肌肉   氨基酸   脂肪酸  

摘要： 黑斑原(Glyptosternum maculatum)是西藏重要的冷水性经济鱼类,为探究野生和养殖黑斑原肌肉营养价值差异,以野生、驯养和养殖的黑斑原为研究对象,对其肌肉的常规营养成分、氨基酸、脂肪酸进行了测定。结果显示,野生、驯养和养殖黑斑原常规营养成分之间存在显著差异(P<0.05);野生鱼的粗脂肪质量分数显著高于驯养鱼和养殖鱼(P<0.05);驯养鱼的粗蛋白质量分数显著高于野生鱼和养殖鱼(P<0.05);养殖鱼的水分质量分数显著高于野生鱼和驯养鱼(P<0.05)。野生、驯养和养殖的黑斑原均检测出17种氨基酸,其中养殖鱼和驯养鱼在总氨基酸含量上存在显著差异(P<0.05),养殖鱼最高,驯养鱼最低,且野生鱼、驯养鱼和养殖鱼的总非必需氨基酸含量与总氨基酸含量差异一致。根据AAS和CS标准,野生、驯养和养殖黑斑原第一限制性氨基酸均为蛋氨酸+胱氨酸,第二限制性氨基酸为缬氨酸。野生鱼饱和脂肪酸总量、单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸含量均显著高于驯养鱼和养殖鱼(P<0.05)。其中C12:0、C17:0、C18:3n6w为野生鱼特有脂肪酸,C22:1n9、C24:1n9、C22:2n6为养殖鱼特有脂肪酸,C15:0、C20:0为野生鱼和养殖鱼特有。野生鱼和养殖鱼DHA+EPA含量均显著高于驯养鱼(P<0.05)。综上,野生和养殖黑斑原肌肉营养品质高于驯养黑斑原,这为黑斑原肌肉品质的改善提供了基础数据。

关键词： 连翘叶   多糖   提取方法   理化性质   结构表征   抗氧化活性  

摘要： [目的]分析不同提取方法所得连翘叶多糖(FLP)理化性质与抗氧化活性的差异。[方法]采用热水提取法、超声波辅助提取法、酶辅助提取法提取连翘叶多糖,测定总糖、蛋白质和糖醛酸含量。利用红外光谱仪和高效液相色谱仪分析多糖的结构,通过自由基清除试验比较多糖的抗氧化能力。[结果]酶辅助提取法所得多糖具有最高的得率(4.59%)、总糖含量(64.43%)和最低的蛋白质含量(1.41%)。3种多糖具有相似的单糖组成与红外结构。3种多糖均具有清除DPPH自由基、ABTS+自由基、羟基自由基的能力和铁离子还原能力,其中超声波提取多糖抗氧化活性较强。[结论]相比于热水提取法,酶辅助提取法能提高连翘叶多糖的得率与纯度,但其抗氧化活性较低,而超声波辅助提取法能提高连翘叶多糖的抗氧化活性。

关键词： 大麦   亮氨酸富集重复型类受体激酶   基因克隆   亚细胞定位   表达特性  

摘要： 解析亮氨酸富集重复型类受体激酶(leucine rich repeat receptor-like kinase,LRR-RLK)基因的功能和作用机制有利于揭示大麦发育和胁迫响应的分子机制。本研究以北青7号、Ynbs突变体和Morex等8个大麦品种(或品系)为材料,克隆了HvLRR-RLK-510基因的2904 bp CDS序列。8个材料HvLRR-RLK-510基因的CDS序列和编码蛋白氨基酸序列的相似性均高于99.00%。该蛋白具有亮氨酸富集重复结构域、跨膜结构域和激酶结构域等LRR-RLK的关键结构域,与小麦、水稻和拟南芥等作物LRR-RLK聚为1个亚类。RT-PCR检测和荧光定量检测结果表明,该基因在8个材料拔节期幼穗、叶鞘、叶、根和茎中差异表达,具有器官特异性和基因型依赖性,在幼穗中的表达更高效、基因型依赖性更低;亚细胞定位结果表明,编码蛋白位于本氏烟草叶细胞的细胞膜和液泡膜上。本研究为全面解析大麦HvLRR-RLK-510基因的功能和作用机制提供了基因资源和理论支持。

关键词： 陆封型马苏大麻哈鱼   二倍体   三倍体   肌肉   蛋白质组学  

摘要： 为解析二倍体与三倍体陆封型马苏大麻哈鱼肌肉蛋白质组学差异,本实验选取相同养殖条件下的2龄二倍体(700~800 g)和三倍体(1250~1500 g)各9尾,取背鳍以下侧线以上肌肉进行基于DIA模式的蛋白质组学分析,结果共筛选出492个差异表达蛋白(245上调、247下调),其中检测到4个与肌肉功能相关的关键蛋白。结果发现,三倍体组肌球蛋白重链9(myosin-9,MYH9)、肌球蛋白轻链3(myosin light polypeptide 3,MYL3)、肌红蛋白(myoglobin,MB)和胶原蛋白ⅩⅩⅤⅢ型(collagen,typeⅩⅩⅤⅢ,COL28)的蛋白丰度显著高于二倍体组。将差异表达蛋白进行GO富集分析,显著富集的条目共57个,其中生物过程34个,主要涉及对硒离子的响应、对过氧化氢的响应和对活性氧的响应等功能条目。细胞组成10个,主要涉及呼吸链复合体Ⅲ、线粒体呼吸链复合体Ⅲ和蛋白酶体核心复合物等功能条目。分子功能13个,主要涉及谷胱甘肽二硫还原酶(NADP)活性、谷胱甘肽二硫化物氧化还原酶活性和氧化还原酶活性等功能条目,上述主要涉及的条目共有谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、细胞色素b(cytochrome b,CYTB)、蛋白酶体(proteasome,PSM)和谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase,GR)4个蛋白参与。KEGG显著富集通路共224条,主要富集在脂肪的消化和吸收、MAPK信号通路和肌醇磷酸盐代谢等通路上。上述主要富集到的通路中共享的差异表达蛋白包括载脂蛋白A-I(apolipoprotein A-I,APOA-1)、磷脂酸磷酸酶3(phospholipid phosphatase 3,PLPP3)、14-3-3ε(14-3-3 protein epsilon,YWHAE)、甘油-3-磷酸脱氢酶NAD+(glycerol-3-phosphate dehydrogenase,GPDH)和磷酸丙糖异构酶(triosephosphate isomerase,TIM)5个蛋白。推测三倍体肌肉可能通过影响抗氧化系统和脂代谢等过程发挥作用,这为三倍体技术对陆封型马苏大麻哈鱼肌肉生长及品质改良的分子机制提供了重要的科学依据,并为进一步的遗传育种研究提供了关键数据。

关键词： 枸杞   果皮   果肉   细胞壁果胶多糖   酶活抑制活性  

摘要： 为探明枸杞果皮和果肉细胞壁果胶多糖的组成与活性差异,分别提取枸杞果皮与果肉细胞壁果胶多糖,采用紫外—可见分光光度和傅里叶红外光谱法分析了果皮与果肉细胞壁果胶多糖的基本结构特征,采用阴离子交换色谱和凝胶渗透色谱法检测果皮与果肉细胞壁果胶多糖的单糖组成与分子量分布,并通过酶活抑制实验分析二者对胰脂肪酶和α-淀粉酶的抑制作用。结果显示,枸杞果皮的细胞壁果胶多糖含量均显著高于果肉(P<0.05);果皮与果肉细胞壁果胶多糖均主要由阿拉伯糖、半乳糖、半乳糖醛酸、鼠李糖、木糖和葡萄糖组成,且果皮果胶的分子量更高;果肉果胶多糖的胰脂肪酶半抑制浓度(IC_(50))为4.334 mg·mL^(-1),抑制效果较果皮好;而果皮果胶对α-淀粉酶的抑制效果(IC_(50)为6.939 mg·mL^(-1))优于果肉细胞壁果胶,且二者均为混合型抑制,表明果皮和果肉果胶多糖均具有潜在的调节机体糖脂代谢的作用。研究结果为枸杞加工皮渣副产物的高值化利用提供了理论依据和开发思路。

关键词： 中华绒螯蟹   雌蟹   抱卵   氨基酸   脂肪酸  

摘要： 为探究养殖中华绒螯蟹雌蟹抱卵前后不同组织(肝胰腺、性腺、肌肉)中营养成分的变化,采用生化分析方法对其脂肪酸和氨基酸组成进行了测定分析。结果显示,抱卵前,除C18∶0、C15∶1n5、C17∶1n7、C20∶5n3外,养殖中华绒螯蟹雌蟹肝胰腺中各类脂肪酸的质量分数高于肌肉和性腺组织。抱卵后,雌蟹肝胰腺和肌肉中的大部分饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸的质量分数显著下降(P<0.05)。抱卵前总必需氨基酸和总非必需氨基酸的相对比例在雌蟹肌肉、性腺和肝胰腺中的排序依次为:肌肉>性腺>肝胰腺。相比抱卵前,抱卵后肝胰腺和肌肉中总必需氨基酸(ΣEAA)和总非必需氨基酸(ΣNEAA)含量显著增加(P<0.05)。其中,亮氨酸是必需氨基酸的主要成分,谷氨酸是非必需氨基酸的主要成分。研究结果揭示了群体抱卵前后养殖中华绒螯蟹雌蟹脂肪酸和氨基酸组成变动可能与雌蟹早期胚胎发育的能量需求和代谢适应有关。

关键词： 膝关节骨关节炎   艾灸   足三里   氨基酸代谢   软骨损伤  

摘要： 目的:观察艾灸“足三里”对膝关节骨关节炎(KOA)大鼠膝关节软骨氨基酸代谢的影响,探讨艾灸缓解KOA膝关节软骨损伤的机制。方法:将30只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组与艾灸组,每组10只。模型组与艾灸组大鼠予双侧膝关节腔内注射L-半胱氨酸与木瓜蛋白酶混合液制备KOA模型。艾灸组予艾灸双侧“足三里”,每次30 min,每日1次,连续30 d。造模前后及干预后,测量大鼠膝关节直径;干预后,检测大鼠机械性痛阈值,HE染色法观察大鼠膝关节软骨组织形态,透射电镜观察大鼠膝关节软骨细胞超微结构,ELISA法检测大鼠膝关节滑膜组织基质金属蛋白酶-13(MMP-13)与白细胞介素-1β(IL-1β)含量,液相色谱-质谱联用(LC-MS)技术检测大鼠膝关节软骨氨基酸代谢物表达。结果:与正常组比较,模型组膝关节软骨面粗糙,色泽暗沉,细胞出现簇集、核固缩及空泡样变性,内质网明显减少且结构异常,膝关节直径增加(P<0.01),机械性痛阈值降低(P<0.05),膝关节滑膜组织MMP-13和IL-1β含量均升高(P<0.01),膝关节软骨脯氨酸、甘氨酸、赖氨酸、天冬氨酸、丙氨酸、甲硫氨酸、丝氨酸表达量升高(P<0.05)。与模型组比较,艾灸组膝关节软骨组织损伤改善,膝关节直径降低(P<0.01),机械性痛阈值升高(P<0.05),膝关节滑膜组织MMP-13和IL-1β含量均降低(P<0.05),膝关节软骨脯氨酸、甘氨酸、赖氨酸、天冬氨酸、组氨酸、谷氨酸表达量降低(P<0.05)。结论:艾灸“足三里”能改善KOA模型大鼠膝关节肿胀、疼痛、软骨细胞损伤和滑膜炎症反应,可能通过甘氨酸、脯氨酸、赖氨酸和天冬氨酸等氨基酸代谢途径调控KOA免疫反应和软骨的合成与分解,发挥抗炎镇痛和软骨保护作用。