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关键词： 小麦   TaHsc70-2   克隆   生物信息学   表达分析   非生物胁迫  

摘要： 从小麦品种中国春中克隆热激蛋白基因TaHsc70-2，对其进行生物信息学分析，并分析其在不同激素[生长素（IAA）、赤霉素(GA3)、玉米素（ZT）和脱落酸（ABA）]和胁迫（干旱、盐、高温、低温）处理下的表达情况。结果表明，共克隆得到3个TaHsc70-2基因：TaHsc70-2-5A、TaHsc70-2-5B、TaHsc70-2-5D，分别编码648、647、648个氨基酸，与拟南芥和二穗短柄草Hsc70-2基因具有相似的基因结构、蛋白质三级结构以及相同的保守基序排列和位置。TaHsc70-2蛋白序列高度保守，与大麦、二穗短柄草同源蛋白亲缘关系较近。蛋白质互作预测分析结果表明，TaHsc70-2蛋白与含J结构域、HATPase＿c结构域的蛋白质具有互作关系。TaHsc70-2基因启动子区域包含多种与胁迫、激素、生长发育和光信号响应相关的顺式作用元件。TaHsc70-2基因在小麦不同时期不同组织中均有表达，且在根中的表达量较高。TaHsc70-2基因在不同激素处理下具有不同程度的表达，在ZT、高温和干旱处理下均上调表达。推测TaHsc70-2基因在小麦生长发育及非生物胁迫的响应中起着重要作用。

关键词： 图论   分子动力学模拟   蛋白质结构网络   变构调控  

摘要： 蛋白质构象动态与其功能调控密切相关，其中别构效应在分子识别、信号转导和分子机器运作中发挥核心作用。解析蛋白质变构过程中残基间长程关联与信号传递机制，有助于揭示调控网络并创新药物设计。蛋白质结构网络方法结合图论分析与分子动力学模拟，构建了从整体层面理解构象调控路径与通信特征的理论框架，已成为研究蛋白质结构-功能关系的重要策略。本文系统综述了当前蛋白质网络建模方法，按网络构建原理与关注维度，将其分为三类：接触网络、相互作用网络与动态协同网络，分别关注结构邻近性、能量耦合关系与协同运动特征。通过典型案例分析，阐释三类方法在识别关键通信残基和解析构象调控路径中的适用性与差异。本文旨在为蛋白质网络建模方法的发展及其在别构机制研究中的应用提供理论支撑与方向指引。

关键词： 一点红   4CL基因家族   基因克隆   生物信息学   组织特异性表达分析  

摘要： 一点红为民间药食两用植物，具有较高的药用价值、营养及观赏价值，开发前景广阔。4香豆酸:辅酶A连接酶（4-coumarate:CoA ligase,4CL）是苯丙烷类代谢途径的关键酶，然而目前关于一点红4CL基因家族的研究尚属空白。该文旨在克隆一点红4CL基因家族成员，并对其理化性质、保守结构、进化关系及组织表达模式进行系统分析，为揭示该家族在一点红生长发育及次生代谢中的潜在功能奠定基础。该文基于一点红转录组数据，利用PCR技术克隆Es4CL基因家族成员；采用生物信息学方法系统分析其理化性质、亚细胞定位、二级结构、保守基序、基因结构、结构域及系统进化关系；通过qPCR检测各成员在不同组织中的表达模式。结果表明：（1）序列与理化特征：共克隆获得15个Es4CL成员，编码蛋白分子量为10 392.83～71 225.32 Da，等电点5.19～9.02；其中8个酸性基因成员、7个碱性基因成员、2个不稳定基因成员、6个亲水性基因成员、9个疏水性基因成员，均无信号肽，6个成员含跨膜结构域，亚细胞主要定位于质膜、叶绿体及细胞质。（2）结构与进化特征：二级结构均由无规则卷曲、α-螺旋及延长链组成；共含6个Motif，其中Motif 5包含BOX I,Motif 2包含BOX II功能域；具有2种结构域（4CL、AFD＿Class＿I superfamily）;15个成员编码区由1个外显子组成；系统进化分析显示Es4CL15与水稻5个成员以及At4CL3聚在一个分支，Es4CL12、Es4CL13和Es4CL14与At4CL1、At4CL2、At4CL4聚在一个分支。（3）组织表达模式：Es4CL15在各组织中的表达量均为最高且各成员呈现组织特异性表达。该研究系统阐明了Es4CL基因家族的基本特征，为其在苯丙烷类代谢调控及黄酮类化合物生物合成中的功能研究提供了理论基础，也为后续利用基因工程技术改良植物性状、提高植物抗逆性、提高有效物质黄酮类含量等应用研究提供了基因资源。

关键词： 中药多糖   人工智能   质量控制   机器学习   智能评价模型  

摘要： 中药多糖作为中药发挥药理活性的关键成分之一，其质量与药物的疗效与安全性密切相关。传统的多糖分析方法存在一定局限，如在多糖分离、鉴定和定量方面存在分析时间长、操作复杂、高通量分析困难的问题，且对复杂体系的解析能力不足。近年来，人工智能技术的引入为中药多糖分析带来了变革性机遇，显著提高了多糖的分析效率与准确性，降低了主观误差，增强了数据处理能力，为中药多糖的质量控制与评价提供了新的智能化解决方案。本文综述了作为人工智能核心分支的机器学习及其子领域的深度学习等AI技术融合近红外光谱、中红外光谱、高效液相色谱等现代分析技术在中药多糖质量监控方面的研究进展与应用，解析如何从技术层面提升智能评价模型的鲁棒性，为智能化分析平台构建提供新技术新方法。

关键词： 草莓   TCP2   基因克隆   亚细胞定位   表达分析   非生物胁迫  

摘要： 为探究植物特有的重要调控因子TCP2在草莓生长发育和非生物胁迫应答中的作用，从栽培草莓红颜中克隆得到FaTCP2基因，并对该基因进行生物信息学、不同组织和果实发育时期，以及在低温、干旱、盐胁迫条件下的表达特征分析，明确了编码蛋白的亚细胞定位。基因克隆与鉴定结果表明：FaTCP2的开放阅读框为1 368 bp，编码455个氨基酸，蛋白理论相对分子质量为49.64 ku、理论等电点为7.48，具有TCP家族保守结构域，为亲水性不稳定蛋白，无跨膜区和信号肽。同源比对和系统进化树分析表明，FaTCP2与蔷薇科植物中的同源基因编码蛋白具有较近的亲缘关系，其中与蔷薇属的月季同源性最高。启动子顺式作用元件分析表明，FaTCP2启动子中含有光响应、激素响应、胁迫响应、转录因子结合等多种调控元件。亚细胞定位观察发现，FaTCP2定位于细胞核。表达特征分析表明，FaTCP2在草莓叶中相对表达量最高，在根和匍匐茎中表达量最低；在果实发育过程中，FaTCP2在白果期和始红期表达量最高；低温、干旱和盐胁迫均能显著诱导草莓FaTCP2的表达，其中盐胁迫对FaTCP2的表达量的影响最大。本研究为进一步探究FaTCP2转录因子参与草莓生长发育和非生物逆境响应中的分子机制提供了基础。

关键词： 蓝靛果   多糖   化学结构   免疫调节   细胞极化  

摘要： 目的 旨在从蓝靛果（L. caerulea）中分离提取出一种新型纯化蓝靛果多糖（THP-2），探究其免疫调节活性。方法 采用超声辅助水提醇沉法和凝胶柱层析等技术对L. caerulea进行多糖分离提取与纯化工艺，通过凝胶渗透色谱、离子色谱、高碘酸氧化与smith降解、红外光谱、核磁共振波谱以及刚果红实验等多组学方法，系统表征THP-2的相对分子质量、纯度及化学结构进行表征和分析。体外细胞实验采用DC2.4细胞和Raw264.7细胞模型对THP-2免疫调节活性进行初步评价。结果 本研究从L. caerulea中分离纯化出一种新型多糖组分THP-2，其化学组成和结构特征与既往文献报道的蓝靛果多糖（THP）存在显著差异。该多糖的平均相对分子质量为123 090，单糖组分包括糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖、木糖、葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸，摩尔比为27.84:52.28:8.47:6.05:2.75:0.90:0.88:0.83。糖苷键分析表明，THP-2主要由（1→5）、（1→3）、（1→4）、（1→6）、（1→3,4）、（1→6,4）等糖苷键组成。免疫活性研究表明，THP-2能够显著激活DC2.4细胞的共刺激分子CD80、CD86、CD40、MHC-Ⅱ的表达（P<0.05），促进促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α的分泌（P<0.05），同时上调Raw264.7细胞的共刺激分子CD80、CD86、CD40的表达（P<0.05），增强促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达（P<0.05）。此外，THP-2还能促进DC2.4细胞与Raw264.7细胞NO合成相关分子iNOS表达（P<0.05），增加NO分泌量（P<0.05），上调胞内促炎相关蛋白p-p65、p-IκB表达水平（P<0.05），增加DC2.4细胞的p-Akt蛋白含量（P<0.05）。结论 本研究成功从L. caerulea中分离纯化出一种新型多糖组分THP-2，并对其化学结构进行了系统鉴定和表征。THP-2主要通过激活NF-κB信号通路和PI3K/Akt通路促进DC2.4细胞成熟分化，并通过NF-κB通路促进Raw264.7细胞向M1型巨噬细胞分化的能力。

摘要： 血液蛋白质组学分析可以高精度地模拟血管生物老化。本研究旨在评估血压与蛋白质组学血管老化之间的关系，及其在高血压与心血管事件之间的潜在中介作用。方法和结果：本研究在英国生物银行（UK Biobank）45 387名参与者中，筛选21种主要富集于心脏与血管的蛋白，采用Light GBM算法构建蛋白质组学血管衰老特征指标（血管年龄差值）。分别分析不同血压分级、连续收缩压/舒张压与血管年龄差值的相关性，并通过中介分析明确蛋白质组学血管衰老在高血压和心血管事件关联中的中介效应。

关键词： 东方蜜蜂   Plk1基因   基因克隆   组织特异性   发育阶段   表达模式  

摘要： 为探究Polo样激酶1（Polo-like kinase 1，AcPlk1）基因在东方蜜蜂（Apis cerana）生长发育中的功能，本研究克隆了该基因的编码区（CDS），利用生物信息学工具分析AcPLK1蛋白的理化性质、结构特征、保守基序和系统进化关系；采用RT-qPCR检测AcPlk1基因在卵、幼虫、蛹及成虫等不同发育阶段，以及刚出房工蜂7种组织（触角、咽下腺、脑、表皮、中肠、脂肪体和毒腺）中的表达差异。结果显示，AcPlk1的CDS长2 553 bp，编码850个氨基酸；AcPLK1蛋白分子量约为96.90 ku，等电点为9.13，是亲水性胞内蛋白，主要定位于细胞核；该蛋白含有122个潜在的磷酸化位点，二级结构以无规卷曲和α螺旋为主。东方蜜蜂与9种膜翅目昆虫的PLK1蛋白均含有5个保守基序，氨基酸序列一致性较高。表达图谱分析显示，卵期AcPlk1基因的表达量最高；从幼虫期开始，其表达量随日龄逐渐上升，在11日龄（蛹期）出现高峰；在成虫期，表达量呈先升后降趋势，于6日龄达到峰值。在7种组织中，AcPlk1基因在咽下腺的表达量显著高于其他组织。综合以上结果，AcPLK1是一个序列保守的亲水性核蛋白，AcPlk1基因在卵期、6日龄成虫和咽下腺组织中特异性高表达，该基因可能在东方蜜蜂胚胎发育、蛹期变态和工蜂哺育相关生理功能中发挥作用。

关键词： 异基因造血干细胞移植   自身免疫性溶血性贫血  

摘要： 目的 探讨儿童异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后自身免疫性溶血性贫血(AIHA)的临床特征。方法 回顾性分析武汉儿童医院血液内科2018年6月—2024年12月收治的372例allo-HSCT患儿中发生AIHA的3例病例，总结临床资料并文献复习。结果 AIHA发生率为0.9%,原发病均为良性疾病(极重型再生障碍性贫血1例，先天性中性粒细胞缺乏症2例)。造血干细胞来源于无关脐血、外周血及亲缘外周血。所有患儿均接受白消安+环磷酰胺清髓预处理及环孢素+吗替麦考酚酯+甲氨蝶呤预防移植物抗宿主病。临床表现为急性进行性贫血，Coombs试验均阳性。一线治疗采用甲强龙联合丙种球蛋白冲击，其中1例联用利妥昔单抗。所有患儿均存活。结论 AIHA是儿童allo-HSCT后罕见但严重并发症，积极治疗可获得良好预后。

关键词： 高危   神经母细胞瘤   自体干细胞移植   异体干细胞移植  

摘要： 高危神经母细胞瘤(NB)是最难治的儿童颅外恶性实体瘤之一。作为多模式综合治疗的一部分，自体干细胞移植有效提升了高危NB的无病生存率。在联合应用GD2单抗治疗后，自体干细胞移植使得高危NB的无病生存率及总体生存率均得到了有效提高。目前异体干细胞移植多用于复发、难治性神经母细胞瘤的治疗。