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关键词： 拟柱孢藻   壳聚糖   黄原胶   絮凝   xDLVO理论  

摘要： 针对拟柱孢藻(Cylindrospermopsis raciborskii)在水中高度悬浮分散、传统絮凝剂沉降困难且去除效率低的问题,本研究构建了壳聚糖(CTS)与黄原胶(XG)天然多糖复合絮凝方法,分析了剂量配比、搅拌强度与静置时间对拟柱孢藻去除效果及絮体特征的影响,并结合微观形态分析、FTIR分析、界面热力学与xDLVO理论等解析其作用机制.结果表明,XG可显著提升CTS对拟柱孢藻的去除率与絮体尺寸,2.5 mg·L-1CTS与2.5 mg·L-1 XG对拟柱孢藻的去除率高达93.39%,相比单独使用CTS的作用效果提升40.31%,絮体等效直径从<570μm增至14110μm.同时,CTS-XG复合体系可显著缩短沉降时间,单独CTS组去除率静置10 min仅为47.20%,而CTS-XG组静置1 min可达91.70%;并且CTS-XG组絮体尺寸在600 r·min-1强剪切下仍可维持毫米级别,显著高于单独CTS组. Zeta电位、微观形态特征、界面热力学参数及xDLVO理论分析等多源表征结果一致表明,单独CTS絮凝主要依赖电荷中和机制,藻丝体间的桥联与聚集作用有限,导致去除率偏低及去除过程缓慢,而XG的投加可显著增强短程范德华作用与Lewis酸碱相互作用,促进聚合物网络生成与空间扩展,从而构建出结构更致密、稳定性更高且等效直径更长的复合絮体,实现更快的沉降过程与更高的去除率.上述研究结果为拟柱孢藻水华的快速、绿色絮凝沉降处置提供了可靠的数据支撑与工艺参考.

关键词： 黄精多糖   骨质疏松症   信号通路  

摘要： 骨质疏松症是一种临床常见的慢性退行性骨代谢疾病,其发病机制主要为成骨细胞减少、破骨细胞增多而致骨代谢失衡,中老年为高发人群。鉴于国内人口老龄化趋势日益显著,骨质疏松症及其引发的一系列疾病已成为中老年人群中不可忽视的常见病,极大地加重了家庭照护压力和社会医疗资源负担,成为亟待解决的公共卫生问题。当前常用的治疗药物主要有双膦酸盐、降钙素,雌激素等,虽能在短期内改善骨密度,但因不良反应多、经济成本高等问题而难以达到治疗和预防的预期。黄精作为传统中药材,是中医学中的一种药食同源的草本植物,在我国分布广泛。黄精多糖是黄精的主要成分之一,具有来源广泛、安全性高、不良反应小等优势,近年来多项研究证实,其可在抗骨质疏松症中发挥重要作用。多项体内外实验证实,黄精多糖能够干预骨重塑过程,可在促进成骨细胞生成、加速骨形成的同时抑制破骨细胞介导的骨吸收,调节骨形态发生蛋白等关键信号通路,改善氧化应激状态及炎症微环境,促进钙吸收与骨基质合成等,从而发挥防治骨质疏松症的作用。文章梳理了近年来国内外对黄精多糖防治骨质疏松症的相关研究,对其机制进行多维度探讨,深度挖掘潜在的作用靶点,并总结目前相关研究所存在的一些问题及可行的解决方法,旨在为中医药防治骨质疏松症贡献新的策略。

关键词： 普鲁兰多糖   κ-卡拉胶   可食性多糖膜   吸湿性   速溶   热封   食品包装  

摘要： 随着食品包装绿色化与便捷化需求日益增长,开发可降解、可食用的速溶包装材料成为重要研究方向。普鲁兰多糖(pullulan,PUL)虽具有良好的成膜性与速溶性,但其强亲水性导致薄膜吸湿性高,限制了实际应用。为改善这一缺陷,本研究将κ-卡拉胶(κ-Carrageenan,CAR)引入PUL基质中,制备了不同CAR添加量(0%-14%)的PUL/CAR复合膜,系统评价了CAR对复合膜微观结构、力学性能、光学性能、热封性能、吸湿性及溶解性能的影响。结果表明,适量CAR的添加(8%)能通过氢键作用与PUL形成致密、相容性良好的网络结构。相较于纯PUL膜,P-8%CAR复合膜的拉伸强度与断裂伸长率得到协同提升,同时吸湿率显著降低(在81% RH下从12.28%降至8.12%),水接触角增大,表面亲水性下降。尽管CAR的引入使薄膜溶解时间略有延长,但所有复合膜均在60秒内完全溶解,保持了优异的速溶性。进一步的肽粉包装应用试验表明,P-8%CAR薄膜在7 d的贮藏实验后使包装肽粉吸湿率仅增加至8.05%,能够有效延缓蛋白肽粉吸湿劣变,并在贮藏后仍保持良好的速溶性能(90 s内完全溶解)。综上,本研究通过构建PUL/CAR复合体系,成功开发出一种兼具较低吸湿性、良好力学性能、适宜热封强度及快速溶解特性的可食性包装膜,为速溶类食品的绿色包装提供了具有潜力的材料选择与理论依据。

关键词： 大熊猫   巴山木竹   竹叶   蛋白质   氨基酸  

摘要： 为探究大熊猫主食竹叶的氨基酸含量和质量对大熊猫随季节和海拔垂直迁移的觅食策略的影响,本研究以分布于陕西佛坪国家级自然保护区大熊猫活动区域的巴山木竹(Bashania fargesii)叶为研究对象,测定不同海拔、季节和龄级竹叶的氨基酸含量,采用氨基酸比值系数法评价竹叶营养价值。结果发现:巴山木竹叶富含大熊猫所需的17种氨基酸。在同一海拔或季节内,氨基酸含量在各海拔段及冬、春和秋季整体呈现出1年生大于2年生和多年生的趋势;粗蛋白与氨基酸含量随叶片成熟度增加而递减,1年生叶片含量显著高于2年生和多年生叶片;同龄级条件下,粗蛋白、总氨基酸、必需氨基酸、非必需氨基酸、滋味氨基酸和功能性氨基酸含量均以分布于海拔1500~1700 m的核心区及冬、春季竹叶中含量最高;巴山木竹叶氨基酸比例合理,不同海拔区域春、秋和冬季氨基酸比例接近或高于WHO/FAO理想氨基酸模式,赖氨酸为第一限制性氨基酸。综上,巴山木竹叶具有较高的氨基酸营养价值,其氨基酸含量与组成特征在季节、海拔及龄级间的差异显著,研究结果对于大熊猫栖息地的保护和管理具有重要意义。

关键词： 蛋白质   骨代谢   骨吸收   骨形成   膳食建议  

摘要： 随着全球老龄化人口的增多,中老年人群中与骨代谢相关的健康问题日益凸显,骨代谢研究逐渐成为当前生命科学与营养学领域研究的热点方向之一。本文旨在探讨蛋白质对骨代谢的调控作用,从植物蛋白、动物蛋白、双蛋白3方面分析其潜在作用机制。针对骨代谢失衡人群提出围绕蛋白质的推荐摄入量和膳食建议,为蛋白质营养干预策略在骨代谢疾病预防与管理中的应用提供科学依据。

关键词： 茭白壳   多糖   热水浸提法   抗氧化活性  

摘要： 以茭白壳为原料,采用热水浸提法提取多糖,以多糖提取率和DPPH自由基清除率为指标,通过单因素与正交实验优化提取工艺;利用HPLC分析多糖的单糖组成及分子量分布,并结合体外抗氧化实验评估其抗氧化活性。结果表明:在料液比1:60 g/mL、提取时间6 h、提取温度90℃的最优条件下,茭白壳多糖提取率达4.18%±0.09%,DPPH自由基清除率为56.65%;该多糖分子量范围为204~39 054 Da,主要由半乳糖、阿拉伯糖等单糖组成。当多糖质量浓度为10 mg/mL时,其FRAP值为(0.1216±0.0011)mmol/L,DPPH自由基和ABTS+自由基清除率分别为60.45%±0.66%和63.66%±0.23%。该提取工艺简便、重复性好,所得多糖抗氧化活性较高。

关键词： 甘蓝型油菜   BnaPUB51基因   表达分析   花粉育性   结实率  

摘要： 为探究U-box E3泛素连接酶家族中PUB51基因在调控甘蓝型油菜花粉发育中的功能,本研究通过同源克隆从甘蓝型油菜中双11中得到BnaPUB51-A10和BnaPUB51-C09 2个基因,采用生物信息学方法和RT-qPCR技术分析BnaPUB51基因家族特征及其在油菜中的表达模式,并通过拟南芥突变体鉴定了BnaPUB51同源基因调控花粉育性的功能。结果表明,甘蓝型油菜4个BnaPUB51的同源基因比较保守,其CDS全长1353~2097 bp,编码450~698个氨基酸,分子量在49.84~78.1 kDa,等电点(pI)预测范围在7.7~9.02,所有蛋白均为碱性;其启动子区存在响应生长发育、激素调控、非生物胁迫等顺式作用元件;RT-qPCR数据分析表明,BnaPUB51的表达具有组织特异性,在雄蕊中特异性高表达;在拟南芥突变体中证实PUB51基因的突变会显著降低结实率。本研究构建了BnaPUB51-A10和BnaPUB51-C09 2个基因的过表达载体,以期过表达BnaPUB51基因提高甘蓝型油菜花粉育性和结实率,为BnaPUB51基因的功能研究和利用提供理论依据。

关键词： 多房棘球绦虫   Nanos蛋白   干细胞   生发层  

摘要： 本研究旨在探讨多房棘球绦虫(Echinococcus multilocularis)干细胞相关基因Nanos-1/2(Em-Nos1/2)的分子特征、蛋白表达及其在虫体中的定位。首先对Em-Nos1/2基因进行生物信息学分析,通过构建原核表达载体pET28a-Em-Nos1/2,诱导表达并纯化重组蛋白,免疫家兔制备多克隆抗体;利用Western blot和免疫荧光技术分别检测抗体的特异性及天然蛋白在虫体中的定位。多房棘球蚴Em-Nos1/2系统进化分析显示,这两个基因在绦虫属中呈现高度保守性,而与吸虫纲物种的分化程度显著,但三维结构存在细微差异。构建原核表达载体pET28a-Em-Nos1/2,经诱导表达与蛋白纯化后,获得高纯度的重组Em-Nos1/2蛋白,并制备兔多克隆抗体,其效价可达1∶204 800。Western blot试验结果证实,所制备的多克隆抗体分别能特异性识别多房棘球绦虫的天然Em-Nos1/2蛋白。免疫荧光定位结果揭示,Em-Nos1/2蛋白均特异性表达于多房棘球蚴生发层。本研究成功制备了能特异性识别天然Em-Nos1/2蛋白的多克隆抗体,并证实其定位于多房棘球蚴生发层,为进一步探究Em-Nos1/2在多房棘球蚴干细胞中的生物学功能提供了关键工具和重要基础。

关键词： 非洲猪瘟病毒   I177L   原核表达   单抗制备  

摘要： 为获得非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)毒力相关蛋白I177L的特异性单克隆抗体,本研究通过构建原核表达质粒pDCP-I177L实现重组I177L蛋白的原核表达与纯化,经Western blot验证结果正确,重组I177L蛋白可被His-tag抗体及ASFV阳性血清特异性识别。以其为抗原免疫BALB/c小鼠,采用ELISA筛选阳性克隆并检测效价、通过间接ELISA和Octet?-R2系统分析抗体与灭活ASFV的特异性与亲和力,最终成功获得9株可特异性识别灭活ASFV的单克隆抗体,其中2号、9号、7号、1号、8号的单克隆抗体与ASFV亲和力较高,能够达到1×10-7 mol/L级别。该结果为后续I177L蛋白功能研究及相关检测技术开发奠定基础。

关键词： 白桦   BpbZIP36基因   基因克隆   抗旱功能  

摘要： 【目的】通过克隆BpbZIP36基因,构建植物表达载体,获得稳定转化白桦转基因植株,对转基因株系进行干旱胁迫,探究BpbZIP36基因抗旱功能。【方法】本研究以白桦c DNA为模板,克隆BpbZIP36基因,对测序获得的BpbZIP36基因序列进行生物信息学分析,构建p ROK2-BpbZIP36植物表达载体后转入白桦苗中,得到稳定转化转BpbZIP36基因白桦,对转BpbZIP36基因过表达白桦植株及对照进行干旱胁迫,研究BpbZIP36基因的抗旱功能。【结果】从白桦基因组数据库中获得一条b ZIP基因,开放读码框全长1 269 bp,编码422个氨基酸。多序列结果显示,白桦b ZIP36蛋白与其他各植物中b ZIP蛋白具有相似性,都具有保守的b ZIP结构域。q RT-PCR研究结果显示,BpbZIP36基因在根、茎、叶中均有表达,在茎和叶中,BpbZIP36基因的表达量在胁迫72 h时达到峰值,而在根中胁迫处理24 h时表达量最高,表明BpbZIP36基因能够被干旱胁迫诱导表达。对转基因白桦植株进行干旱胁迫后,生理指标和组织化学染色分析结果显示:干旱胁迫条件下3个过表达白桦株系的MDA、H2O2含量和相对电导率低于野生型,细胞膜完整性较好;过表达白桦的SOD、POD、CAT含量、相对含水量高于野生型,在过表达的3个株系中DAB染色棕色斑点少着色轻,说明过表达的3个株系中H2O2含量较少,继而反映出细胞受损程度低,过表达白桦抗旱能力强于野生型白桦。【结论】BpbZIP36基因过表达能够提高转基因白桦的抗干旱能力。