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关键词： 人源类器官   伦理   干细胞   生物材料   胚胎模型  

摘要： 人源类器官作为近年来生命科学领域的重要突破，通过体外三维培养技术模拟人体器官结构与功能，为疾病建模、药物开发和个性化医疗提供了革命性工具。然而，其快速发展也引发复杂的伦理挑战，例如意识属性争议、人-非人嵌合体伦理风险、胚胎模型研究的边界问题等。为规范研究行为、平衡科技进步与伦理约束，国家科技伦理委员会生命科学伦理分委员会于2025年4月发布了《人源类器官研究伦理指引》。本文将从术语界定、基本原则、一般与特殊要求、监管机制等方面，系统解读该文件的核心内容与学术意义。

摘要： 【试题呈现】绵羊红细胞(SRBC)表面存在多种特异性抗原，可刺激动物免疫系统产生SRBC抗体。SRBC抗体的核心作用是结合SRBC进而导致溶血，是免疫学实验中最经典的工具抗体之一。以下为SRBC单克隆抗体的制备过程。步骤1 HGPRT酶缺陷(HGPRT-)骨髓瘤细胞的筛选(1)HGPRT-骨髓瘤细胞无法在HAT培养基上存活。为便于后续筛选杂交瘤细胞，需先用化学诱变剂处理正常骨髓瘤细胞以获得HGPRT-细胞。

关键词： 脐带间充质干细胞   外泌体   慢性阻塞性肺疾病  

摘要： 目的 探讨人脐带间充质干细胞外泌体（hUC-MSC EXO）对大鼠慢性阻塞性肺疾病（COPD）的缓解作用。方法 将50只SD大鼠随机分成5组：Control组（正常大鼠）、COPD组（COPD模型大鼠）、Aminophylline组（COPD模型大鼠2.3 mg/kg氨茶碱灌胃）、EXO组（COPD模型大鼠尾静脉注射hUC-MSC EXO）、FPS-ZM1组（COPD模型大鼠尾静脉注射FPS-ZM1），每组10只。造模、给药后检测各组大鼠肺功能，测定各组肺泡灌洗液中炎症细胞和炎症因子水平，计算各组肺组织干湿重比值，HE染色观察各组肺组织病理形态，检测各组肺组织中活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱苷肽（GSH）水平。Western blotting检测RAGE、p-PI3K、p-AKT蛋白表达情况。结果 与Control组比较，COPD组大鼠FEV1/FVC、PEF,SOD和GSH水平显著降低（P<0.05）; W/D比值，淋巴细胞、巨噬细胞和白细胞计数，IL-6、IL-1β和TNF-α水平，ROS和MDA水平，RAGE、p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT水平显著升高（P<0.05）。与COPD组比较，Aminophylline组、EXO组和FPS-ZM1组大鼠FEV1/FVC、PEF,SOD和GSH水平显著升高（P<0.05）; W/D比值，淋巴细胞、巨噬细胞和白细胞计数，IL-6、IL-1β和TNF-α水平，ROS和MDA水平，RAGE、p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT水平显著降低（P<0.05）。与Aminophylline组比较，EXO组大鼠FEV1/FVC、PEF,SOD、GSH水平显著升高（P<0.05）;W/D比值，淋巴细胞、巨噬细胞和白细胞计数，IL-6、IL-1β和TNF-α水平，ROS和MDA水平，RAGE、p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT水平显著降低（P<0.05）。与EXO组比较，FPS-ZM1组大鼠FEV1/FVC、PEF,SOD、GSH水平显著降低（P<0.05）; W/D比值，淋巴细胞、巨噬细胞和白细胞计数，IL-6、IL-1β和TNF-α水平，ROS和MDA水平，RAGE、p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT水平显著升高（P<0.05）。结论 hUC-MSC EXO能显著抑制COPD大鼠氧化应激和炎症反应，有效缓解大鼠COPD进展，其机制可能通过抑制RAGE/ROS信号通路实现的。

关键词： 放射性皮肤损伤   如意金黄散   中医外治   蛋白质组学   基质重塑  

摘要： 目的:探讨如意金黄散(RYJHS)对放射性皮肤损伤大鼠创面修复的促进作用及其潜在机制。方法:采用UHPLC-QE-MS对RYJHS化学成分进行非靶标检测。将75只雄性SD大鼠随机分为正常组(Normal)、模型组(Model)、三乙醇胺组(TEA)、RYJHS低频组(RYJHS-L)及RYJHS高频组(RYJHSH)。除正常组外，其余各组大鼠均在左侧臀部以90 Gy单次照射建立放射性皮肤损伤模型，随后药物连续治疗8周。通过创面拍照及ImageJ测量评估创面愈合情况。采用HE染色观察皮肤组织病理学改变，天狼星红染色、免疫组化评价胶原沉积。于辐照后4周取正常组、模型组及RYJHS高频组皮肤组织进行DIA定量蛋白质组学分析，并对差异蛋白进行功能富集分析。结果:UHPLC-QE-MS共获得1 490个可注释化合物，结合外用制剂理化性质筛选得到95个候选成分，为后续机制分析提供了化学物质基础。RYJHS可促进放射性皮肤损伤创面闭合，提高愈合率(P<0.01)，减轻表皮结构破坏及真皮炎性细胞浸润(P<0.001)，改善胶原沉积不足及纤维排列紊乱(P<0.001,P<0.000 1)，其中高频给药组作用更为明显。蛋白质组学共定量9 075个蛋白，其中模型组与正常组比较，共鉴定差异表达蛋白3 183个; RYJHS高频组与模型组比较，共鉴定差异表达蛋白1 614个。进一步分析显示，RYJHS可逆转1 186个异常表达蛋白，其主要包括表皮屏障功能、角化分化、紧密连接及细胞外基质重塑相关分子。GO富集分析显示，RYJHS干预后差异蛋白在生物学过程层面主要富集于中间丝组织、异生物刺激反应、胆固醇生物合成及角化等过程。KEGG富集分析显示，差异蛋白显著富集于肌动蛋白细胞骨架调控、内吞作用、MAPK信号通路、PI3K-Akt信号通路、内质网蛋白加工、泛素介导的蛋白水解、PPAR信号通路、NOD样受体信号通路及代谢通路等。结论:RYJHS可促进放射性皮肤损伤创面修复，改善组织学损伤及胶原相关基质重塑异常。蛋白质组学结果提示，其作用可能与表皮屏障重建、细胞结构稳态、炎症应答、信号转导及蛋白质稳态调节等过程有关。上述结果为后续开展关键靶点验证及功能研究提供了实验基础及理论依据。

关键词： 生物物理   相分离   空间约束   耗散粒子动力学模拟   平均场理论   动力学调控  

摘要： 建立粗粒化耗散粒子动力学（dissipative particle dynamics, DPD）模拟，并基于平均场理论及相分离动力学，研究空间约束对生物大分子相分离凝聚的调控作用．结果表明，通过降低分子运动自由度和增强局部相互作用，空间约束显著影响相分离的热力学平衡与动力学路径．不同几何约束（圆形、圆柱形和矩形）引导形成不同形态与空间分布的凝聚结构．与生物膜类似的高曲率约束促进致密、局域化的相分离，展现出“预润湿”效应．平均场相图进一步揭示，约束可降低相分离的浓度阈值，增强体系对微环境变化的敏感性．动力学模型结果呈现了约束与流体速度场耦合，这种耦合作用调控相分离的时空演化过程．色散关系稳定性与静态结构因子的分析表明，约束能够筛选特定的扰动模式，影响凝聚体的特征尺度与稳定性．研究结果证明了细胞膜作为空间约束在调控生物大分子相分离中的关键作用，为理解细胞内无膜区室的形成、定位及其功能调控提供了理论依据，并可为人工细胞设计与生物传感应用提供参考．

关键词： 牛磺酸   生产性能   免疫功能   细胞炎症反应   猪  

摘要： 本试验旨在研究日粮中添加不同剂量牛磺酸（Tau）对生长育肥猪生产性能和免疫功能，以及细胞培养液中添加不同浓度Tau对脂多糖（LPS）诱导IPEC-J2细胞炎症反应的影响。选择同一批次、90日龄、体重（43.31±2.74）kg的96头杜×长×大生长育肥猪分为4组，每组3个重复，每个重复8头猪同圈饲养。对照组饲喂基础日粮，试验组在基础日粮中分别添加0.25%、0.50%、0.75% Tau，试验从90日龄开始，180日龄结束，测定生产性能指标。于试验结束的当天早晨每个圈随机选择2头空腹猪进行前腔静脉采血，测定血清抗氧化和免疫指标。细胞炎症反应方面，对照组不做任何处理，培养基中添加Tau作用于LPS诱导的IPEC-J2细胞，分为对照组和LPS组（LPS+0、10、20、40、80 mmol/L Tau），处理后检测Caspase-3、BAX、Bcl-2和IL-1β的基因和蛋白表达量。结果表明：与对照组相比，0.50% Tau组平均日增重增加36 g（P<0.05），耗料增重比降低0.11，背膘最薄（P<0.05），0.75% Tau组平均日采食量增加97 g（P<0.05）；日粮中添加Tau提高了血清中的超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和总抗氧化能力（T-AOC）（P<0.05），降低了血清中丙二醛（MDA）含量（P<0.05）；0.50% Tau组免疫球蛋白IgA和IgG较对照组分别提高了8.84%和6.49%（P<0.05），而血清中白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量低于对照组（P<0.05）；与LPS组相比，培养基中添加Tau可下调Caspase-3、BAX和IL-1β的mRNA表达量（P<0.05），上调Bcl-2基因mRNA表达量（P<0.05），蛋白表达呈相同趋势。综合分析表明，日粮中添加Tau能够提高生长育肥猪的生产性能和免疫功能，降低耗料增重比，以添加0.50% Tau为宜，且Tau能够缓解LPS诱导的IPEC-J2炎症反应。

关键词： 毛竹   phe-novel-miR276   基因表达模式   功能分析  

摘要： 【目的】探究毛竹新miRNA phe-novel-miR276对木质素合成的调控作用，为毛竹材质改良与分子育种提供理论参考。【方法】采用生物信息学方法分析前期筛选获得的毛竹差异表达的新miRNA(phe-novelmiR276)；通过qRT-PCR检测其在毛竹不同组织中的表达模式，计算相对表达量并进行差异分析；克隆phenovel-miR276，构建过表达植物表达载体，经农杆菌介导转化水稻并筛选阳性转基因株系；测定转基因水稻与野生型水稻的木质素含量及POD、SOD活性，对比分析各项指标的组间差异。【结果】1）序列分析表明，phenovel-miR276与miR398家族具有高度同源性，推测其为miR398家族的新成员；2)phe-novel-miR276在毛竹根、茎和叶中均有表达，且根部相对表达量最高；3）间苯三酚染色显示转基因株系茎、叶木质素染色深度变浅，微量法测定木质素含量的结果表明其茎、叶木质素总含量显著降低；4)qRT-PCR检测显示，与野生型水稻相比，转基因株系中phe-novel-miR276的水稻同源靶基因Os10g36848（编码F5H）表达量显著下调。此外，转基因株系POD和SOD活性分别显著高于野生型。【结论】在毛竹中，phe-novel-miR276可通过下调靶向调控木质素合成相关基因的表达发挥调控作用，并间接影响植株抗氧化酶系统活性。

关键词： 中性粒细胞胞外捕获网   肿瘤上清   肿瘤微环境   佛波酯   蛋白质组学   NETosis  

摘要： 目的 基于蛋白质组学技术比较不同诱导条件下中性粒细胞胞外捕获网（NETs）的异同，阐明其共性核心机制与特异性调控通路，为精准靶向肿瘤相关NETs提供实验依据。方法 分离BALB/c小鼠骨髓中性粒细胞，分别以佛波酯（PMA）、肿瘤培养上清（TCM）诱导NETs形成，采用免疫荧光染色验证NETs生成；通过非靶向定量蛋白质组学检测蛋白表达谱；运用生物信息学分析差异蛋白/共同蛋白的亚细胞定位、GO注释、KEGG通路富集及蛋白互作网络分析。结果 PMA和TCM均可成功诱导NETs；两组共鉴定出8 966种共同蛋白，富含组蛋白、中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）、髓过氧化物酶（MPO）等经典NETs标志物，定位于细胞质与细胞膜，主导基础代谢、物质转运与结构组装。两组差异蛋白共2 765种，PMA-NETs高表达蛋白聚焦氧化磷酸化、活性氧（ROS）生成、吞噬体通路；而TCM-NETs高表达蛋白富集细胞周期、DNA修复、代谢重塑、补体凝血及肿瘤相关炎症通路。结论 PMA与TCM诱导的NETs共享保守核心蛋白与基础通路，同时又有明显的诱导条件特异性，二者同中有异；TCM诱导的NETs呈现出更贴近肿瘤微环境的表型倾向。这为区分经典化学诱导型NETs与肿瘤相关NETs的分子特征、开发针对性的靶向策略提供了理论依据。

关键词： 蜈蚣草   多糖   超声辅助纤维素酶法   降血糖   降血脂  

摘要： 目的 研究超声辅助纤维素酶法对蜈蚣草多糖的提取效果,并探究其降血糖血脂活性。方法 采用响应面优化蜈蚣草多糖超声辅助纤维素酶法提取工艺参数,并通过研究其对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性抑制率评估体外降血糖活性,通过研究其对胰脂肪酶抑制活性抑制率与甘氨胆酸盐和牛磺胆酸盐结合率评估体外降血脂活性。结果 蜈蚣草多糖最优提取工艺参数:料液比1:20（g:mL）、纤维素酶用量2.2%、超声功率316 W、超声温度51℃、超声时间22 min,在此条件下测得蜈蚣草多糖提取率为4.19%±0.08%。体外活性评价表明,蜈蚣草多糖具有一定的降血糖和降血脂生物学活性,蜈蚣草多糖对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration, IC50)分别为3.52 mg/mL和2.75 mg/mL;对胰脂肪酶的IC50为4.08 mg/mL,与甘氨胆酸盐和牛磺胆酸盐的半数有效浓度(half maximal effective concentration, EC50)分别为4.45 mg/mL和4.38 mg/mL。结论 超声辅助纤维素酶法可高效提取蜈蚣草多糖,蜈蚣草多糖是一种潜在的降血糖、降血脂功能性食品原料。

关键词： 构树叶多糖   仔猪   轮状病毒   回肠屏障功能   抗氧化能力  

摘要： 本试验旨在探究配方乳中添加构树叶多糖(BPP)对轮状病毒(RV)攻毒仔猪生长性能和回肠屏障功能的影响。选择24头7日龄健康“杜×长×大”仔猪,采用2×2因子设计,随机分为2组(每组12头),分别饲喂添加0和110 mg/kg BPP的配方乳。试验期24 d。试验第21天,从2组中各随机抽取6头仔猪进行RV攻毒,其余仔猪不攻毒。结果表明:1)RV攻毒显著降低仔猪平均日增重(ADG)(P<0.05),并诱导仔猪发生中重度腹泻(发生率83.33%);配方乳中添加BPP显著缓解RV攻毒导致的ADG降低(P<0.05),并显著降低中重度腹泻发生率(P<0.05)。2)RV攻毒显著降低回肠绒毛高度和绒隐比(P<0.05),显著提高回肠隐窝深度(P<0.05),同时显著提高回肠黏膜RV特异性免疫球蛋白M(RV-IgM)、蛋白质羰基和丙二醛(MDA)含量(P<0.05),并显著降低回肠黏膜总抗氧化能力(T-AOC)(P<0.05);配方乳中添加BPP显著缓解RV攻毒对回肠形态和回肠黏膜抗氧化指标的负面影响(P<0.05)。3)RV攻毒显著提高回肠黏膜半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)mRNA相对表达量及Bax/B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)(P<0.05);配方乳中添加BPP显著提高回肠黏膜黏蛋白1(MUC1)、闭合蛋白(Occludin)和Bcl-2 mRNA相对表达量(P<0.05),显著降低回肠黏膜Bax mRNA相对表达量及Bax/Bcl-2(P<0.05),并显著缓解RV攻毒对回肠黏膜屏障功能和细胞凋亡的负面影响(P<0.05)。综上所述,配方乳中添加BPP可通过提高回肠黏膜抗氧化能力,抑制细胞过度凋亡,改善肠道形态及屏障功能,从而有效缓解RV感染诱导的仔猪生长性能降低和腹泻发生。