课程文献中心 更多>>

关键词： 枸杞多糖   肠道菌群   2型糖尿病   短链脂肪酸   糖脂代谢   炎症  

摘要： 背景:枸杞多糖作为一种天然活性成分,具有降低血糖以及改善糖尿病相关症状的潜力。然而,从肠道菌群的角度,枸杞多糖对糖脂异常影响的潜在因素尚未完全阐明。目的:探究枸杞多糖在2型糖尿病中的作用及相关机制。方法:从18只8周龄雄性SD大鼠中随机选取6只为空白对照组,其余12只大鼠给予高糖高脂饲料饲养8周+尾静脉单次注射1%链脲佐菌素溶液构建2型糖尿病模型,造模成功后随机分为模型对照组(n=6)和枸杞多糖组(n=6)。枸杞多糖组大鼠按照200 mg/(kg·d)的剂量灌胃枸杞多糖溶液,2 mL/次,1次/d,连续灌胃12周,收集大鼠血清及粪便。通过16S rDNA测序分析肠道菌群,采用α多样性、β多样性及主成分分析等方法表征菌群丰度与结构特征;采用液相色谱-质谱联用法检测短链脂肪酸水平;通过ELISA法检测糖脂代谢、胰岛素抵抗及炎症反应相关指标。结果与结论:①与模型对照组相比,枸杞多糖组高密度脂蛋白胆固醇水平升高,总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇水平降低,说明枸杞多糖改善了2型糖尿病大鼠的脂质积累,并抑制体质量减轻;②与模型对照组相比,枸杞多糖组白细胞介素6、肿瘤坏死因子α以及血糖水平降低,胰岛素以及胰高血糖素样肽1水平升高,说明枸杞多糖有效抑制了炎症反应和胰岛素抵抗;③枸杞多糖显著改善了肠道菌群的组成,增加了Lachnospiraceae_NK4A136_group、Clostridia_UCG-014_unclassified、Monoglobus、Phascolarctobacterium、Candidatus_Saccharimonas、Desulfovibrionaceae unclassified以及Desulfovibrio丰度,减少了Muribaculaceae_unclassified和Enterorhabdus丰度;④枸杞多糖还显著提高了短链脂肪酸水平,并且Clostridia_UCG-014_unclassified、Candidatus_Saccharimonas和Muribaculaceae_unclassified可能参与调节丁酸的生成,以改善2型糖尿病大鼠的糖脂代谢,Lachnospiraceae_NK4A136_group、Monoglobus和Desulfovibrionaceae unclassified可能参与调节异丁酸的生成,以抑制胰岛素抵抗以及改善脂代谢;⑤枸杞多糖可通过增加Firmicutes_unclassified、Clostridia_UCG-014_unclassified、Intestinimona和Colidextribacter以及抑制Kineothrix的丰度来改善2型糖尿病大鼠的炎症反应。

关键词： 成骨分化   iRBMSCs   骨髓间充质干细胞  

摘要： 骨髓间充质干细胞的稳定标准化来源,是骨修复组织工程研究与应用的重要前提。为解决这一核心问题,本研究以新西兰兔为研究对象,分离原代兔骨髓间充质干细胞(RBMSCs),通过逆转录病毒表达SV40大T抗原(LTA)对其进行永生化处理,成功建立了永生化细胞系iRBMSCs。为验证该细胞系的成骨分化能力,研究采用碱性磷酸酶(ALP)染色与定量、茜素红染色等体外实验方法,证实MOI=30的骨形态发生蛋白9(BMP9)可有效诱导iRBMSCs的成骨分化;同时借助微计算机断层扫描(μCT)和组织学检查,发现iRBMSCs与GelMA水凝胶在体内诱导成骨分化过程中存在协同作用。研究进一步证实,所建立的iRBMSCs无致瘤性且能维持长期增殖活性,为骨缺损修复工程提供了稳定可靠的细胞系来源,也为骨修复组织工程的后续研究与临床应用奠定了重要基础。

关键词： 运动性心脏肥大   病理性心脏肥大   异丙肾上腺素   串联质量标签   过氧化物酶酰基辅酶A氧化酶1   半乳糖凝集素3  

摘要： 背景:将运动性心脏肥大的机制造福病理性心脏肥大患者,是当前心血管研究的热点领域之一,然而,运动性和病理性心脏肥大两者差异的分子机制尚未完全阐明。目的:以运动性和病理性心脏肥大模型小鼠为研究对象,基于心脏蛋白质组学寻找病理性心脏肥大的潜在干预靶点。方法:将21只6-8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、运动组和异丙肾上腺素组,每组7只。运动组小鼠持续训练8周建立运动性心脏肥大模型,异丙肾上腺素组小鼠皮下注射异丙肾上腺素7 d建立病理性心脏肥大模型,通过心脏质量指数、心胫比、苏木精-伊红染色、麦胚芽凝集素染色和天狼星红染色验证造模成功后,应用串联质量标签技术揭示2种不同心脏肥大模型的差异蛋白表达水平和功能特征。结果与结论:①与对照组相比,运动组与异丙肾上腺素组小鼠的心脏质量指数和心胫比显著升高(P<0.001,P<0.05);与对照组相比,异丙肾上腺素组小鼠心肌细胞排列紊乱,观察到大量炎症细胞浸润,心肌细胞损伤明显;②与对照组相比,运动组与异丙肾上腺素组小鼠的心肌细胞横截面积显著增加(P<0.05,P<0.01);异丙肾上腺素组心肌纤维化面积显著高于对照组(P<0.01);③运动组和对照组相比,有46个差异表达蛋白;异丙肾上腺素组和对照组相比,有302个差异表达蛋白;运动组和异丙肾上腺素组相比,有340个差异表达蛋白;3个比较组差异表达蛋白中,2个交集蛋白为过氧化物酶酰基辅酶A氧化酶1和半乳糖凝集素3;④基因本体和京都基因与基因组百科全书富集分析提示,运动可能通过上调过氧化物酶酰基辅酶A氧化酶1促进脂肪酸代谢等诱导心脏生理性肥大,异丙肾上腺素可能通过下调过氧化物酶酰基辅酶A氧化酶1导致过氧化物酶体失调引发脂毒性等诱导心脏病理性肥大。结果提示:过氧化物酶酰基辅酶A氧化酶1和半乳糖凝集素3可能成为病理性心脏肥大的干预靶点。

关键词： 骨-脑轴   文献计量学   干细胞   可视化分析   神经炎症   骨质疏松   研究热点   骨髓  

摘要： 背景:近年来,多项研究证实骨骼系统与中枢神经系统之间存在紧密联系,使得骨-脑轴成为跨学科领域的研究热点,但目前尚无研究对该领域进行文献计量学和可视化分析。目的:运用文献计量学方法全面分析骨-脑轴领域的研究趋势、热点以及未来发展方向,为后续研究提供一定的数据支持和参考依据。方法:在Web of Science核心合集数据库中进行系统文献检索,收集2015-2024年发表的与骨-脑轴研究相关的文献,运用VOSviewer和Citespace等可视化工具,分析发文趋势、合作网络、机构贡献以及关键词共现等情况。结果与结论:①研究最终纳入7461篇文献,近10年间(2015-2024年)骨-脑轴领域的发文量呈现显著增长趋势,骨-脑轴研究已成为近年来的学术热点,研究热度持续升温;②美国和中国在骨-脑轴研究及出版中占据主导地位,其中美国以2397篇文献位列第一,中国以2307篇紧随其后,分别占总发文量的32.1%和30.9%;哈佛医学院(Harvard Medical School)和浙江大学(Zhejiang University)是发文量和研究中心性均较高的研究机构;③Wang Wei教授是发文量最大的作者,其研究主要聚焦于骨髓与神经炎症的交互作用;④《Bone》期刊收录文献最多,共计超过800篇,是骨-脑轴领域的主要出版平台;而《PLOS ONE》期刊收录的文献被引用次数最高,平均每篇被引频次达45次,显示其在该领域的影响力;⑤“Bone Marrow”(骨髓)、“Stem Cells”(干细胞)、“Osteoporosis”(骨质疏松)和“Neuroinflammation”(神经炎症)为核心关键词,反映了骨-脑轴研究的基础方向;最新研究前沿包括“Extracellular Vesicles”(细胞外囊泡)、“Alzheimer’s Disease”(阿尔茨海默病)、“Inflammation”(炎症)和“Oxidative Stress”(氧化应激),显示出炎症和神经退行性疾病在该领域中的重要性;⑥综合前沿研究和关键词,未来研究方向包括探索骨源性因子和神经递质在骨-脑轴中的具体作用机制,揭示炎症、氧化应激和细胞外囊泡在神经退行性疾病及骨代谢紊乱中的分子机制,以及推动基础研究向临床应用的转化。

关键词： 县级   非洲猪瘟   核酸检测   生物安全  

摘要： 【目的】调查县级非洲猪瘟病毒核酸检测实验室运行情况,探寻改进途径,健全基层动物疫病防控体系,保障畜牧业可持续发展。【方法】对县级实验室运行现状展开调查分析,指出基础设施、检测能力、生物安全等方面取得的成绩与不足,剖析存在的核心问题。【结果】发现存在硬件投入失衡、功能适配性不足,质控机制缺失、检测准确率受限、制度执行乏力、生物安全风险突出等问题。针对性提出聚焦硬件升级、优化功能布局,健全质控体系、夯实检测质量根基、强化制度执行、筑牢生物安全防线等对策建议。【结论】县级非洲猪瘟病毒核酸检测实验室是基层防控重要力量,运行效果影响生猪产业安全与公共卫生稳定,但存在问题,未来需通过一系列手段提升运行效率,筑牢防控根基,助推畜牧业高质量发展。

关键词： 花生   AhbHLH1   基因表达   非生物胁迫   激素调控  

摘要： 【目的】克隆AhbHLH1基因CDS序列,构建表达载体,探讨该基因编码的蛋白质理化性质和亚细胞定位等。明确该基因在花生中的组织表达特异性、在非生物胁迫及激素处理下的表达变化模式。【方法】以粤油7号花生cDNA为模板,通过RT-PCR克隆获得AhbHLH1基因完整CDS序列,采用同源重组方法构建p35S:AhbHLH1-eGFP融合表达载体;利用相关生物信息学分析工具对AhbHLH1蛋白进行理化性质分析;通过拟南芥原生质体瞬时转化体系结合共聚焦显微镜观察AhbHLH1蛋白的亚细胞定位;利用MEGA软件构建系统进化树;通过实时荧光定量(RT-qPCR)分析AhbHLH1在花生不同组织以及在高温、干旱和盐胁迫下的表达变化,并进一步检测该基因在茉莉酸甲酯、生长素和脱落酸处理下的响应模式。【结果】AhbHLH1基因CDS序列全长828 bp,编码的蛋白质具有亲水性且不稳定,主要为无规卷曲结构,无信号肽与跨膜结构域,亚细胞定位于细胞核;系统进化分析显示,AhbHLH1与豆科植物bHLH36同源蛋白亲缘关系更近,而与拟南芥AtbHLH125亲缘关系较远;RT-qPCR结果表明,AhbHLH1基因具有显著的组织表达特异性,主要在花生根中高表达;与正常对照组相比,AhbHLH1表达水平在高温处理6 h时显著降低,处理12和48 h时显著升高;在盐胁迫处理6 h时表达量急剧升高,随着处理时间的延长逐渐降低,但仍显著高于对照组;在干旱胁迫下AhbHLH1基因表达水平在处理1 h时显著上调,处理4 h时达到峰值,而后随着干旱处理时间的延长逐渐降低,干旱16 h后显著低于正常对照组,复水1 h时其表达量显著回升,但随复水时间的延长表达水平显著降低;茉莉酸甲酯显著诱导AhbHLH1表达,脱落酸持续抑制其表达,生长素则呈现复杂的时序性调控模式。【结论】AhbHLH1为核定位的bHLH类转录因子,具有显著的根组织表达特异性。该基因在花生响应高温、盐和干旱胁迫过程中表达水平发生显著变化,并可响应茉莉酸甲酯、生长素和脱落酸等激素信号,表明该基因可能参与花生响应非生物胁迫及激素调控的应答过程。

关键词： 纤维素酶   基因克隆与表达   酶学性质   羧甲基纤维素钠   钻井液  

摘要： 纤维素衍生物是油田钻井液的关键处理剂,凭借优良的增黏与降滤失性能,在调控钻井液流变性、增强悬浮稳定性、稳固井壁及控制滤失方面发挥着关键作用。本研究以纤维素酶CelC7(-105)为探针,通过NCBI Blast序列比对,筛选出一株同源达81.52%的新型纤维素酶基因celA(GenBank:ORX77188),并成功实现其克隆与异源表达。对重组酶CelA的酶学性质系统分析表明:其最适反应温度为45℃,经60℃热处理2 h后仍能保持50%以上的残余酶活性。在最适反应条件(50℃、pH 6.0)下,该酶可显著降低钻井液黏度,6 min内降黏效率可达78.15%。此外,CelA在50 000 mg/L高矿化度条件下仍保留21.43%的酶活性。本研究获得的纤维素酶CelA性能优良,可为高温、高矿化度等复杂油藏条件下的生物酶解堵技术提供具有应用潜力的菌株与酶制剂。

关键词： 补阳还五汤   急性脊髓损伤   蛋白质组学   转录组学  

摘要： 背景:研究表明补阳还五汤对脊髓损伤症状的改善和脊髓功能恢复有积极治疗作用,但其治疗通路尚不明确。脊髓组织中存在大量可作为疾病标志物的蛋白质或多肽。目的:探讨补阳还五汤通过调控蛋白质组与转录组学相关通路对急性脊髓损伤大鼠模型的保护机制。方法:将36只SD大鼠随机分为空白组、模型组和补阳还五汤组,后2组采用Allen’s改良法建立急性脊髓损伤大鼠模型。通过BBB评分评估运动功能恢复,尼氏染色观察病理形态,同位素相对标记与绝对定量技术蛋白质组学与RNA-seq转录组学筛选差异蛋白及基因进行GO富集分析和KEGG通路分析,通过与STRING互作网络数据库构建PPI网络,寻找关键通路,并通过Western blot、免疫组化和RT-PCR验证核心靶点。结果与结论:(1)运动学评分:与空白组对比,模型组大鼠下肢BBB运动评分明显较低(P<0.001),斜板试验倾斜角度明显较小(P<0.001);与模型组对比,补阳还五汤组大鼠下肢BBB运动评分较高(P<0.05);斜板试验倾斜角度明显较大(P<0.001)。病理形态学观察:空白组可见形态结构相对正常的神经元细胞,细胞结构完整,间隙正常,可见清晰的核仁核膜;模型组细胞坏死严重,结构紊乱,细胞核固缩,大部分核仁、核膜消失,存在大量组织空洞,有炎性细胞浸润;补阳还五汤组可见形态不规则、结构相对完整的神经元细胞,肿胀较轻,组织空洞和细胞坏死减少。(2)从GO功能注释和KEEG信号通路注释分析结果可知,差异蛋白质主要富集到急性期反应、蛋白质激活级联调节过程的调节、急性炎症反应的调节、血小板α颗粒、血液微粒、囊泡腔、丝氨酸型内肽酶抑制剂活性等分子功能,参与了map04142溶酶体、map04612抗原处理和呈递、map03013核质运输、map04964近端小管碳酸氢盐回收、map04610补体和凝血级联、ap00511其他聚糖降解、地图03040拼接体、map03410基底切除修复、map00531糖胺聚糖降解、冠状病毒病-COVID-19通路等信号通路;经过PPI构建,共分析出FGG、FN1、FGB、HSP90B1、CASP3等20个核心差异蛋白,FGG、FN1、FGB、CXCL1、CXCL13等20个核心差异基因。(3)Western blot检测表明补阳还五汤能够抑制脊髓组织中髓样分化因子88与P-IKBα蛋白的表达;免疫组化检测表明补阳还五汤能够抑制脊髓组织中BAX、Caspase-3蛋白的表达,促进BCL-2蛋白表达,抑制细胞凋亡;RT-PCR结果表明补阳还五汤能够抑制脊髓组织中髓样分化因子88、CXCL1的表达。上述结果提示,补阳还五汤可能通过抑制Toll样受体4/髓样分化因子88/核因子κB通路减轻炎症反应,通过调控BAX/BCL-2平衡,抑制Caspase-3表达阻止凋亡,从而保护脊髓组织。

关键词： 蛋白质组学   代谢组学   冠心病   血瘀证   生物学基础  

摘要： 背景:冠心病的发病机制复杂,单一组学方法在理解疾病复杂的生物学途径方面存在局限性,而多组学方法可以从不同水平揭示分子间的相互作用网络,克服单一组学方法的局限性。目的:通过蛋白质组学和代谢组学探究冠心病模型小鼠的病理机制。方法:选取健康SPF级8周龄雄性C57BL/6小鼠作为实验动物,随机分为假手术组和模型组。通过结扎冠状动脉左前降支建立冠心病小鼠模型,假手术组仅穿线不结扎。28 d后用心动超声检测小鼠心功能,用TTC染色心脏组织,采用超高效液相色谱-串联质谱技术筛选组间差异蛋白质和代谢物并进行联合组学分析。结果与结论:①与假手术组相比,模型组小鼠心功能降低,左室射血分数与左室短轴缩短率显著下降(P<0.05),心肌梗死面积显著增加(P<0.01);②蛋白质组学结果显示有420个差异蛋白质,其中Serum amyloid A protein、protein kinase D等282个蛋白表达上调,Protein YIPF5、E3 ubiquitin-protein ligase等138个蛋白表达下调;KEGG通路数据库富集显示,其主要涉及ATP依赖性染色质重塑、肾素-血管紧张素系统等通路;③代谢组学结果显示有155个差异代谢物,其中Thromboxane、Tromethamine等56个代谢物上调,N-Acetyl-D-Tryptophan、D-Xylulose 5-Phosphate等99个代谢物下调;KEGG分析显示其与嘌呤代谢途径、甘油磷脂代谢途径相关;④联合分析发现26个差异蛋白质与16个差异代谢物存在相关性,其中涉及ATP1A3、Hexokinase等蛋白以及Cytochalasin B、Gluconasturtiin等代谢物。结论:冠心病发生发展的病理机制与能量代谢网络紊乱、炎症-凝血级联反应激活以及离子稳态调控失衡密切相关。

关键词： 人参皂苷Rg3   丝素蛋白水凝胶   干细胞   软骨分化   甲基丙烯酰化改性   脂质体  

摘要： 背景:人参皂苷Rg3具有潜在的软骨保护及修复价值,但它的应用存在水溶性差、半衰期短、生物利用度低等缺点。为改善药物的药代动力学特性,将药物负载脂质体嵌入甲基化明胶、多糖类或丝素蛋白基水凝胶中已成为软骨组织工程研究的热点。目的:制备载人参皂苷Rg3脂质体甲基丙烯酰化丝素蛋白水凝胶,进一步分析该水凝胶对小鼠骨髓间充质干细胞成软骨分化的作用。方法:(1)采用薄膜分散法制备人参皂苷Rg3脂质体,将Dil标记的脂质体与小鼠骨髓间充质干细胞共培养,鬼笔环肽染色检测细胞摄取脂质体情况。制备甲基丙烯酰化丝素蛋白(记为SilMA),将人参皂苷Rg3脂质体与SilMA混合,通过光交联制备复合水凝胶(记为SilMA@LipoRg3),评估该水凝胶的微观形貌、力学性能、流变性能、溶胀性能与药物缓释性能。(2)采用不同浓度的SilMA水凝胶浸提液或SilMA@LipoRg3水凝胶浸提液培养小鼠骨髓间充质干细胞,通过CCK-8检测与活死细胞染色评估材料的细胞相容性。分别采用1/8浓度的SilMA水凝胶浸提液、SilMA@Lipo-Rg3水凝胶浸提液培养小鼠骨髓间充质干细胞,成软骨诱导后,qPCR检测Ⅱ型胶原蛋白、SOX9、聚集蛋白聚糖mRNA表达,阿尔新蓝和番红O染色检测细胞内蛋白多糖、糖胺聚糖表达。结果与结论:(1)鬼笔环肽染色显示,Dil标记的脂质体能够被小鼠骨髓间充质干细胞成功摄取。扫描电镜显示SilMA@Lipo-Rg3水凝胶呈现疏松多孔的网格结构。压缩实验与流变性能测试显示,与SilMA水凝胶相比,SilMA@Lipo-Rg3水凝胶的压缩刚度略有下降;两种水凝胶的溶胀性能无明显差异。SilMA@Lipo-Rg3水凝胶具有良好的缓释性能,可持续释放人参皂苷Rg314 d以上。(2)CCK-8检测与活死细胞染色显示,SilMA、SilMA@Lipo-Rg3水凝胶具有良好的细胞相容性。q PCR检测显示,SilMA@Lipo-Rg3组细胞内Ⅱ型胶原蛋白、SOX9、聚集蛋白聚糖mRNA表达高于SilMA组(P<0.05);阿尔新蓝和番红O染色显示,SilMA@Lipo-Rg3组细胞内蛋白多糖、糖胺聚糖表达多于SilMA组。结果表明,SilMA@Lipo-Rg3水凝胶可促进小鼠骨髓间充质干细胞的成软骨分化。