课程文献中心 更多>>

关键词： 干细胞   外泌体   工程化外泌体   口腔   牙髓再生   牙周再生   颅骨再生   唾液腺再生  

摘要： 背景:干细胞在口腔组织再生中显示出巨大潜力,但面临免疫排斥和肿瘤形成等挑战。外泌体是细胞分泌的纳米级细胞外囊泡,免疫原性降低,肿瘤风险减小,而且保留了干细胞的功能,如促进血管生成和组织修复等。目的:综述外泌体在口腔组织再生中的机制及作用,探讨外泌体工程策略及在口腔再生医学应用中的挑战和未来方向。方法:检索万方和PubMed数据库从建库至2025年发表的相关文献,以“干细胞,外泌体,牙髓再生,牙周再生”等为中文检索词,以“exosomes,stem cells,dentistry,regenerate”等为英文检索词进行检索,最终纳入94篇文献进行综述分析。结果与结论:(1)外泌体较干细胞免疫原性低、无致瘤风险、稳定性高且易储存运输,还可穿透致密组织定向传递,能规避干细胞治疗面临的伦理及免疫排斥等问题,是更安全有效的治疗选择;(2)外泌体在牙髓、牙周、颅面骨、唾液腺、神经和皮肤等口腔组织再生中成效显著,能通过多种机制促进组织修复与再生,展现出广阔的应用前景;(3)预处理、分离纯化、靶向修饰等工程化策略可强化外泌体功能,提升外泌体治疗潜力和临床可行性,但目前相关技术仍有局限,未来需进一步优化以推动外泌体的广泛应用。

关键词： 干细胞   外泌体   炎性微环境   少突胶质细胞   信号通路   调节机制  

摘要： 背景:神经损伤后炎症微环境与少突胶质细胞的动态相互作用是神经退行性疾病和脱髓鞘疾病的核心病理环节。干细胞源性外泌体凭借天然的低免疫原性、高效的屏障穿透能力、靶向递送多样促修复因子特性,在调控少突胶质细胞分化和炎症微环境方面发挥了促进神经修复与再生的关键作用。目的:探讨干细胞源性外泌体调控炎性微环境促进少突胶质细胞存活、分化和髓鞘修复的作用机制,为干细胞源性外泌体通过多组分协同(miRNA、蛋白、代谢物)和微环境适配治疗神经疾病提供“无细胞治疗”新范式。方法:检索中国知网、万方数据库、PubMed数据库中2010-2025年发表的文献,中文检索词为“外泌体,干细胞,工程化,诊断,炎性微环境、少突胶质细胞,信号通路”,英文检索词为“Stem cell-derived exosomes,Oligodendrocytes,Inflammatory microenvironment,signaling pathway,regulatory mechanisms”,剔除与研究主题无关的文献,根据纳入及排除标准,对符合纳入标准的65篇文献进行综述分析。结果与结论:(1)概述了外泌体的生物学特性及在中枢神经系统中的作用,分析了炎性微环境对少突胶质细胞的影响及外泌体的调控机制,包括miRNA介导的信号通路调节、抗炎因子分泌和免疫细胞功能调控等方面;(2)阐述炎症微环境对少突胶质细胞生物学行为的调控机制及在疾病发生发展中的作用;(3)提出基于靶向肽修饰和功能分子负载的工程化外泌体递送系统,结合中药活性成分调控策略构建无细胞治疗新范式;(4)从分子层面解释外泌体功能网络与髓鞘动态平衡之间的深度互作关系,为开发外泌体靶向递送系统干预神经系统脱髓鞘疾病提供了治疗新方向。

关键词： 唑来膦酸   可溶性微针   透明质酸   脂多糖   破骨细胞   巨噬细胞   穿透性  

摘要： 背景:唑来膦酸是治疗骨吸收的有效药物,但全身使用不良反应较大。可溶微针是一种高效的局部透皮给药方式,能够有效穿透黏膜屏障,局部递药以避免药物不良反应。目的:制备载唑来膦酸的可溶性微针贴片,表征微针贴片的机械强度、穿透性以及对破骨细胞分化的影响。方法:以聚乙烯醇溶液作为背衬基质溶液,以透明质酸溶液或含有不同质量浓度(1,5,10 mg/mL)唑来膦酸的透明质酸溶液作为微针针尖部基质溶液,通过两步浇筑法分别制备空白可溶性微针贴片与载唑来膦酸的可溶性微针贴片,表征微针的形貌、载药量。将载10 mg/mL唑来膦酸可溶性微针分别压入锡箔纸或猪牙龈组织中,评估微针的穿透能力;将载10 mg/mL唑来膦酸可溶性微针插入Parafilm M膜中,观察各层Parafilm M上微针穿透的孔洞,评估微针穿透深度。将载10 mg/mL唑来膦酸可溶性微针插入猪牙龈组织中,在不同时间点观察微针溶解情况。将空白可溶性微针浸提液、载1 mg/mL唑来膦酸可溶性微针浸提液分别与RAW264.7细胞共培养,通过CCK-8实验、活死染色检测微针的生物安全性。将RAW264.7细胞分3组培养:空白组不加入任何药物,脂多糖组加入100 ng/mL脂多糖(诱导破骨分化),唑来膦酸微针组同时加入100 ng/mL脂多糖与载1 mg/mL唑来膦酸可溶性微针浸提液,通过抗酒石酸酸性磷酸酶染色与RT-qPCR检测分析破骨细胞分化情况。结果与结论:①普通光学显微镜下可见载唑来膦酸可溶性微针的结构均匀,针头锋利且整个针尖呈现良好的金字塔形态,与背衬结合紧密、无缺损和气泡,针尖高度约为595μm,相邻针尖距离约495μm。载1,5,10 mg/mL唑来膦酸可溶性微针的载药量分别为(24.07±1.33),(203.4±9.14),(576.74±9.46)μg,表明可以通过调节微针基质溶液中的药物浓度来控制微针的载药量。②将微针插入锡箔纸或猪牙龈组织后在组织表面形成有效的药物输送微孔,将微针插入Parafilm M膜后穿透深度大约为252μm,说明微针具备足够的机械强度和组织穿透性能,能够穿透黏膜屏障形成有效微孔,输送药物到牙龈组织深部。③CCK-8实验、活死染色显示,空白可溶性微针、载唑来膦酸可溶性微针均无明显的细胞毒性。抗酒石酸酸性磷酸酶染色与RT-qPCR检测显示,脂多糖组破骨细胞数量及抗酒石酸酸性磷酸酶、c-Fos、基质金属蛋白酶9、组织蛋白酶K mRNA表达均高于空白组(P<0.05),唑来膦酸微针组破骨细胞数量及抗酒石酸酸性磷酸酶、c-Fos、基质金属蛋白酶9、组织蛋白酶K mRNA表达均低于脂多糖组(P<0.05)。表明在炎性状态下,载唑来膦酸可溶性微针可有效抑制破骨细胞的分化。

关键词： 五加皮   外泌体样纳米囊泡   骨髓间充质干细胞   转化生长因子β1信号通路   Smad2/3   成骨分化   骨质疏松   转录组测序   工程化干细胞  

摘要： 背景:五加皮及其提取物具有促成骨作用,但五加皮来源外泌体样纳米囊泡的成骨效应及机制尚未阐明。目的:探讨五加皮来源外泌体样纳米囊泡促进人骨髓间充质干细胞成骨分化的分子机制及对骨质疏松症的预防作用。方法:(1)采用梯度密度离心法提取人骨髓间充质干细胞;采用差速离心、蔗糖梯度密度离心法分离五加皮来源外泌体样纳米囊泡;(2)以0,2.5,5μg/mL五加皮来源外泌体样纳米囊泡干预人骨髓间充质干细胞,采用碱性磷酸酶染色、茜素红染色、qRT-PCR及Western blot检测成骨分化水平;(3)转录组测序筛选关键通路并用转化生长因子β1受体抑制剂验证;(4)构建卵巢切除骨质疏松大鼠模型,腹腔注射五加皮来源外泌体样纳米囊泡干预12周,Micro-CT分析骨微结构,组织学染色检测成骨蛋白表达。结果与结论:(1)五加皮来源外泌体样纳米囊泡呈典型的杯托状或圆盘形;(2)体外实验证实,五加皮来源外泌体样纳米囊泡剂量依赖性地促进骨髓间充质干细胞成骨分化,表现为碱性磷酸酶活性升高、矿化结节增多及成骨基因表达上调;(3)转录组分析显示,五加皮来源外泌体样纳米囊泡通过激活转化生长因子β1/Smad2/3信号通路,上调转化生长因子β1及磷酸化Smad2/3蛋白表达,且转化生长因子β1受体抑制剂可部分抑制它的促成骨效应;(4)动物实验结果显示,5 mg/kg五加皮来源外泌体样纳米囊泡干预后,卵巢切除大鼠骨密度、骨体积分数及骨小梁厚度均显著增加(P<0.05),胶原纤维生成明显,且骨组织中Runt相关转录因子2、骨钙素及转化生长因子β1蛋白表达上调;主要脏器组织学观察未见明显毒性变化。结果表明,五加皮来源外泌体样纳米囊泡通过激活转化生长因子β1/Smad2/3通路促进人骨髓间充质干细胞成骨分化,并有效改善骨质疏松。

关键词： 乳腺肿瘤   乳腺肿瘤干细胞   混合谱系激酶结构域样蛋白   乳酸化  

摘要： 背景:混合谱系激酶结构域样蛋白是坏死性凋亡途径中关键执行蛋白之一,在多种疾病中发挥重要作用,但其乳酸化对乳腺肿瘤干细胞形成和分化的作用机制尚不清楚。目的:探究混合谱系激酶结构域样蛋白第230位赖氨酸(K230)乳酸化对乳腺肿瘤干细胞干性表达的影响。方法:质谱分析乳腺肿瘤MCF-7贴壁细胞和成球干细胞中蛋白乳酸化程度差异,筛选获得与肿瘤干细胞相关的混合谱系激酶结构域样蛋白及其乳酸化位点。构建混合谱系激酶结构域样蛋白K230R突变质粒载体,转染乳腺肿瘤MCF-7细胞,CCK-8和划痕实验检测细胞增殖和迁移能力;细胞悬浮成球实验验证混合谱系激酶结构域样蛋白K230R突变对乳腺肿瘤干细胞形成的影响;蛋白质免疫印迹检测肿瘤干细胞干性及上皮-间充质转化相关蛋白表达。结果与结论:乳腺肿瘤干细胞中混合谱系激酶结构域样蛋白K230位乳酸化修饰程度较高;与野生型组相比,K230R突变组细胞划痕愈合率及干细胞成球率显著降低,上皮相关蛋白表达显著升高,间质相关蛋白和干性相关蛋白表达显著降低。研究表明:混合谱系激酶结构域样蛋白K230位点乳酸化促进乳腺肿瘤细胞上皮-间充质转化,增强乳腺肿瘤干细胞干性表达,从而促进乳腺肿瘤的发生和发展。

关键词： 电针   针刺   神经干细胞   骨髓间充质干细胞   脂肪间充质干细胞   增殖   分化  

摘要： 背景:干细胞具有自我更新和多向分化潜能,可通过直接分化或者旁分泌、免疫调节微环境等促进组织的修复。而针刺可以通过多通路协同作用促进干细胞的增殖与分化,拓展了针刺的应用范围。目的:综述干细胞的种类及其分化潜能,并探讨针刺促进干细胞增殖和分化的作用及机制。方法:从PubMed数据库和中国知网中检索2025年3月之前的文献,以“Electroacupuncture,Acupuncture,Neural stem cells,Bone marrow mesenchymal stem cells,Adipose mesenchymal stem cells”为英文检索词,以“电针,针刺,神经干细胞,骨髓间充质干细胞,脂肪间充质干细胞”为中文检索词,纳入与针刺促进干细胞增殖分化相关的文献,排除与主题无关的内容,最终筛选出76篇文献进行归纳分析。结果与结论:(1)干细胞属于肾精的范畴,干细胞与肾精起协同作用,可以用于指导肾精亏虚型疾病的治疗,用中医理论解释现代医学;(2)针刺可以激活多种信号通路和调控生长因子表达从而促进内源性或外源性干细胞的增殖和分化,为临床治疗提供新思路;(3)尽管针刺在干细胞增殖分化过程中发挥重要作用,然而在应用过程中也面临着众多挑战;干细胞工程化标准的建立与针刺疗法的创新发展是深入探究针刺与干细胞疗法联合作用机制的首要前提,确保治疗效果的稳定性和高效性。

关键词： 糖尿病足溃疡   人脐带间充质干细胞   外泌体   封闭式负压引流   溃疡愈合率   白细胞介素6   血管内皮生长因子   血小板衍生生长因子  

摘要： 背景:间充质干细胞来源外泌体在调控细胞凋亡、促进细胞再生与改善创面微环境方面有重要作用,成为糖尿病足溃疡治疗研究的热点方向。目的:探讨人脐带间充质干细胞来源外泌体在糖尿病足溃疡修复中的临床应用价值。方法:回顾性分析2022年5月至2025年4月治疗的72例糖尿病足溃疡患者资料,其中36足溃疡创面采用人脐带间充质干细胞来源外泌体治疗(观察组),36足溃疡创面采用封闭式负压引流术治疗(对照组)。比较两组患者治疗2周后的溃疡愈合率、不良事件发生率、血清中炎症标志物、生长因子水平,两组患者创面愈合总时间以及随访期的溃疡复发率。结果与结论:(1)治疗2周后,观察组溃疡愈合率(48.03±6.12)%明显高于对照组(30.13±6.38)%,差异有显著性意义(P<0.05);(2)两组患者溃疡均愈合,其中观察组愈合时间为(30.42±2.30) d,较对照组(43.94±3.46) d显著缩短,差异有显著性意义(P<0.05);(3)对照组和观察组治疗期间不良事件发生率分别为13.89%,19.44%,差异无显著性意义(P > 0.05);(4)两组患者血清白细胞介素6、C-反应蛋白、降钙素原水平均显著下降,且观察组下降幅度更大,差异有显著性意义(P<0.01),两组患者血清血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、血小板衍生生长因子水平均明显升高,且观察组升高幅度更大,差异有显著性意义(P<0.01);(5)观察组溃疡愈合后获平均9.4个月随访,5例患者溃疡复发,对照组溃疡愈合后获平均9.8个月随访,10例患者溃疡复发,观察组复发率显著低于对照组(13.9%,27.8%),差异有显著性意义(P<0.05)。结果表明,与封闭式负压引流术相比,应用人脐带间充质干细胞来源外泌体修复糖尿病足溃疡可有效抑制炎症、促进溃疡愈合、降低复发率,且未增加相关不良事件风险,兼具疗效与安全性。

关键词： 多糖   水凝胶   可逆共价键   组织修复   智能敷料   伤口敷料   综述  

摘要： 背景:根据伤口微环境开发出多功能生物活性智能敷料用于实时监测创面微环境,是一种加速伤口愈合的重要策略。多糖基水凝胶因独特的优势在伤口敷料领域获得了广泛关注。目的:综述多糖基水凝胶的合成方法、功能特性及在皮肤损伤修复中的应用进展。方法:以“水凝胶,多糖,可逆共价键,伤口敷料,创面修复”为中文检索词,检索万方数据库和中国知网,以“Hydrogels,polysaccharide,reversible covalent bonds,Wound dressings,wound repair”为英文检索词,检索PubMed和Web of Science数据库,根据纳入与排除标准,最终纳入125篇文献进行综述。结果与结论:多糖基水凝胶的交联方式可以分为物理交联、化学交联两种,其中动态的化学键由于能够对某些刺激做出响应,对于开发生物活性智能敷料具有重要意义。多糖富含羧基、羟基、胺基等官能团,可以很容易进行接枝改性,从而满足临床应用的功能需要,例如智能抗菌、消炎、促愈合且无不良反应。随着临床需求的不断多元化和精细化,水凝胶敷料的功能也从先前单一的覆盖保护功能转变为现在的多种功能集合,包括黏附和止血、抗菌、抗炎和抗氧化、物质输送、自我修复、刺激响应和伤口监测等。

关键词： 褐藻   多糖提取   碱提法   响应面法   螯合  

摘要： 褐藻是一类极具应用潜力的海洋生物,其提取物褐藻多糖可作为高效生物吸附材料用于环境修复,在环境治理领域具有重要价值。文章针对海蒿子(Sargassum pallidum)多糖的提取问题,采用碱法提取工艺,通过单因素实验初步考察影响多糖提取工艺的关键因素,再结合Plackett-Burman试验与响应面分析法,完成提取工艺的优化。研究结果表明,最优提取工艺为液料比(w/w)为131∶1、碱液浓度为0.75%、提取时间为12 h、提取温度为50℃,在此条件下多糖得率可达24%。针对所得粗多糖的离子色谱分析显示,其含古罗糖醛酸、甘露糖醛酸、岩藻糖等多种酸性单糖片段,其中甘露糖醛酸(ManA,M)与古罗糖醛酸(GulA,G)的摩尔分数分别为0.54和0.46,高含量古罗糖醛酸片段为阳离子螯合提供了关键位点。傅里叶变换红外光谱进一步证实,多糖分子中存在羧基、磺酸基等酸性基团,为其阳离子螯合潜能提供了结构基础。本研究优化的提取工艺为海蒿子褐藻多糖的高效开发提供了理论依据,其结构表征结果也为后续探索其生物活性及环境应用奠定了基础。

关键词： 重症干眼   角膜缘干细胞缺乏   巩膜镜  

摘要： 患者男性,84岁,因“双眼视力下降伴异物感不适2年,逐渐加重”就诊,眼部检查显示右眼视力0.1^(-),左眼PL=CF/15 cm,裂隙灯提示双眼角膜上皮呈漩涡状损伤表现,基质透明。Pentacam角膜地形图和前节光学相干层析成像(OCT)显示右眼角膜形态高度不规则。眼表检查显示双眼泪膜破裂时间(BUT)为1 s,Schirmer试验为1 mm/5 min,角膜荧光素钠染色评分(CFS)为15分。患者1年前因“新冠感染后双眼异物感、黏性分泌物1个月余”曾于我院就诊,检查显示双眼全角膜上皮糜烂伴卷丝,晶状体混浊,药物治疗后眼表症状缓解,但视物模糊持续加重。后续右眼行白内障超声乳化(Phaco)+人工晶状体(IOL)植入术,术后1周裸眼视力自0.03改善至0.5。左眼突发感染角膜炎(铜绿假单胞菌感染),药物治疗后感染得以控制,残留瘢痕,其后双眼视力持续下降。患者本次诊断为“双眼重症干眼,角膜缘干细胞缺乏症”,综合评估主诉、体征与感染风险后,予以右眼巩膜镜配戴治疗,戴镜后视力最佳可达0.9^(-),角膜上皮缺损缓解,用药数量减少,患者恢复生活自理。讨论体会:当前,疑难性眼表疾病合并重度干眼的治疗手段有限,药物负担重、疾病转归通常欠佳,巩膜镜可以为此类患者重建眼表光学表面,改善眼表炎症状态,提高视力转归与生活质量,是安全、有效的最终治疗手段。