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关键词： 黄芪多糖   军垦肉羊   超数排卵   抗氧化   免疫   生殖激素  

摘要： 为了探究不同添加量的黄芪多糖(Astragalus polysaccharide,APS)对军垦肉羊超数排卵效果、血清抗氧化、免疫指标及生殖激素的影响,试验将40只、2~3岁、体重约60 kg的军垦肉羊母羊随机分为4组,每组10只,其中3组分别在日粮中添加0.05%、0.10%、0.20%APS,以不添加APS的为对照组,统计军垦肉羊发情率、超数排卵后卵泡数、黄体数、胚胎总数、可用胚胎数、未受精卵数;于试验第0,15,30天采集母羊颈静脉血,测定母羊血清中抗氧化指标[谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)]、免疫指标[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6)]和生殖激素[雌二醇(E2)、孕激素(P4)、促黄体素(LH)、促卵泡激素(FSH)]水平。结果表明:0.10%APS组卵泡数、黄体数、胚胎总数、可用胚胎数均显著高于对照组和0.20%APS组(P<0.05),与0.05%APS组差异不显著(P>0.05);0.05%、0.10%、0.20%APS组发情率和未受精卵数与对照组均差异不显著(P>0.05)。第0天,0.05%、0.10%、0.20%APS组各指标与对照组均差异不显著(P>0.05)。第15天,0.10%APS组GSH-Px、SOD、CAT活性显著高于其他组(P<0.05),MDA浓度显著低于对照组(P<0.05);0.10%APS组TNF-α质量浓度显著低于其他组(P<0.05),IFN-γ、IL-2质量浓度显著高于对照组和0.05%APS组(P<0.05),IL-6质量浓度显著低于对照组和0.05%APS组(P<0.05);0.05%、0.10%APS组P4水平显著高于对照组和0.20%APS组(P<0.05),0.01%APS组LH水平显著高于对照组和0.05%APS组(P<0.05)。第30天,0.05%、0.10%、0.20%APS组GSH-Px、SOD、CAT活性显著高于对照组(P<0.05),MDA浓度显著低于对照组(P<0.05),0.10%APS组GSH-Px、SOD活性显著高于0.05%、0.20%APS组(P<0.05);0.10%APS组IFN-γ质量浓度显著高于其他组(P<0.05),IL-6质量浓度显著低于其他组(P<0.05),0.05%、0.10%、0.20%APS组IL-2质量浓度显著高于对照组(P<0.05);0.10%APS组LH、FSH水平均显著高于对照组、0.05%、0.20%APS组(P<0.05)。说明在日粮中添加0.10%APS能改善军垦肉羊的超数排卵效果,提高抗氧化能力、免疫性能和相关生殖激素水平。

关键词： 凝结魏茨曼氏菌   阴离子交换树脂   亚硒酸钠   硒胞外多糖   硒含量   降血糖活性  

摘要： 为了开发一种硒胞外多糖(Selenium exopolysaccharide,Se-EPS)的高产量制备方法,本文选择耐高温的凝结魏茨曼氏菌P-L1在阴离子交换树脂的辅助下,以20 mg/L的比例添加亚硒酸钠进行发酵以制备Se-EPS。同时,使用红外光谱对其结构进行分析,并探究了其体外降血糖活性。结果显示:初始细菌浓度、阴离子交换树脂的使用及发酵时间均对Se-EPS的产量有显著影响。初始细菌浓度1×10^(6) CFU/mL、发酵8 d时,Se-EPS的产量高达19.1 g/L,是初始细菌浓度1×10^(5) CFU/mL下Se-EPS产量的5.4倍,是常规发酵(无阴离子交换树脂辅助)胞外多糖(Exopolysaccharide,EPS)产量的19.5倍。Se-EPS中的硒含量最高可达213μg/g。红外光谱分析显示,硒元素可能以Se-O与Se=O键的形式结合在EPS上。凝结魏茨曼氏菌P-L1 EPS和Se-EPS均具有较高的体外降血糖活性。而Se-EPS的体外降血糖活性显著高于EPS,在1 mg/mL时Se-EPS对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性的抑制率较EPS分别提高了28%和16%。本研究为凝结魏茨曼氏菌Se-EPS产品的开发和应用提供理论支持与技术参考。

关键词： 花生叶片   DNA提取   改良CTAB法   多酚   多糖  

摘要： 花生叶片富含多酚、多糖及其他次生代谢物,常规方法或商品化试剂盒无法从中提取高品质DNA,严重阻碍了花生分子生物学研究。本研究以传统CTAB法为基础,根据CTAB裂解液各组分在DNA提取过程中所发挥的作用,以及细胞中DNA和多酚、多糖等物质在空间上的相分离特性,进行改良优化。首先用PVP和高浓度EDTA组成预处理液,对花生组织进行预处理,从源头上阻断酚类氧化,去除过量多酚、多糖等杂质的同时,有效降低了花生叶片组织黏度;再用高浓度CTAB(3×)裂解液对预处理后的花生组织进行裂解,可以彻底清除蛋白及中性多糖等杂质。结果表明,相比传统CTAB法,改良CTAB法提取的花生叶片基因组DNA纯度极高,OD_(260)/OD_(280)值为1.8~1.9,OD_(260)/OD_(230)值大于2.0,并且提取结果稳定性好;DNA完整性高,能有效扩增出4 kb左右大片段DNA序列;DNA稳定性得到提升,室温(25℃)放置2个月无明显降解迹象。同时,改良CTAB法DNA提取效率大大提升,10 mg叶片即可获得3μg总DNA,即使使用衰老叶片也能高效提取到高品质DNA。上述研究表明,改良CTAB法提高了花生基因组DNA的纯度、完整性、稳定性和提取效率,适合应用于花生分子生物学研究,尤其是珍稀材料的遗传鉴定,同时为富含多酚、多糖等次生代谢产物样本DNA的提取提供了重要参考。

关键词： N-糖基化   糖链分析   糖组学   眼部疾病   质谱分析   液相色谱  

摘要： N-糖基化是一种重要的蛋白质翻译后修饰,可以影响蛋白质的功能,在多种生物学过程中起着关键作用。目前的研究已经发现了蛋白质N-糖基化的改变与多种眼部疾病的发生发展密切相关。而N-糖基化检测方法能够发现蛋白中N-糖链的改变,因此,了解各类检测方法及其在眼部疾病中的应用价值具有重要意义。文章系统综述了蛋白质N-糖基化检测方法的研究现状,包括毛细管电泳、液相色谱及质谱检测等技术,并详细讨论了这些技术在糖尿病视网膜病变、年龄相关性黄斑变性、春季角结膜炎和特应性角结膜炎等眼部疾病研究中的具体应用。

关键词： 雅鱼鱼糜   多糖种类   品质特性   脂质氧化   蛋白氧化  

摘要： 为研究不同种类多糖对雅鱼鱼糜品质特性的影响,该试验以雅鱼鱼糜为研究对象,分别将魔芋葡甘聚糖(konjac glucomannan,KGM)、枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharide,LBP)、酵母β‑葡聚糖(yeast beta glucan,YG)以1%的添加量,加入到雅鱼鱼糜中制作成混合鱼糜样品,测定不同贮藏时间下雅鱼鱼糜的食用品质、脂质氧化及蛋白氧化程度变化。结果表明:与空白组相比,添加KGM能够显著降低鱼糜的蒸煮损失(P<0.05),改善其冻融损失,有效减少贮藏期间的水分流失,增强鱼糜的乳化稳定性;添加YG可以显著提高鱼糜的硬度、弹性、咀嚼性以及胶着性(P<0.05),有效促进鱼糜凝胶三维网络结构的致密性、均匀性,同时也使鱼糜的蛋白溶解度有所上升,阻止蛋白氧化的发生;LBP的添加对鱼糜的储能模量G′与损耗模量G″有提升效果,促使鱼糜凝胶具有更好的黏弹性,改善鱼糜的凝胶品质。由此可知,3种多糖的添加对鱼糜在贮藏期间的品质均有不同程度的改善作用。

关键词： 弥漫性大B细胞淋巴瘤   骨髓间充质干细胞   条件培养液   增殖   凋亡   工程化干细胞  

摘要： 背景:骨髓微环境与弥漫性大B细胞淋巴瘤生长、存活和耐药性之间的关系是近些年的研究热点,而弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞条件培养液对骨髓间充质干细胞的影响未见报道。目的:探讨弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞条件培养液对骨髓间充质干细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用Ficoll密度梯度离心法从健康供者骨髓血中分离骨髓间充质干细胞,并通过贴壁法进行纯化;使用SU-DHL-2和OCI-LY3两种弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞培养上清液制备条件培养液。按培养基的不同进行细胞分组:对照组骨髓间充质干细胞仅用L-DMEM完全培养液培养,CM-SU-DHL-2组、CM-OCI-LY3组骨髓间充质干细胞用20%SU-DHL-2细胞条件培养液或20%OCI-LY3细胞条件培养液和80%L-DMEM完全培养液培养。通过CCK-8、EDU、结晶紫染色观察骨髓间充质干细胞的增殖情况,划痕实验评估骨髓间充质干细胞的迁移情况,流式细胞术检测骨髓间充质干细胞的细胞周期、凋亡情况,Real-time PCR和Western blot检测骨髓间充质干细胞中P21、P16、Bcl-2、BTK mRNA和蛋白表达水平。结果与结论:①与对照组相比,SU-DHL-2和OCI-LY3细胞条件培养液显著促进骨髓间充质干细胞的增殖(P<0.05),可能与P21和P16蛋白低表达密切相关(P<0.05);②与对照组相比,SU-DHL-2和OCI-LY3细胞条件培养液显著促进骨髓间充质干细胞的迁移(P<0.05);③与对照组相比,SU-DHL-2和OCI-LY3细胞条件培养液抑制骨髓间充质干细胞的凋亡(P<0.05),可能与Bcl-2、BTK mRNA和蛋白高表达密切相关(P<0.05)。研究结果表明,弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞条件培养液可促进骨髓间充质干细胞的增殖并抑制凋亡。

关键词： 冬小麦   叶片氮含量   籽粒蛋白质含量   植被指数   纹理特征   预测模型  

摘要： 为实现冬小麦收获前籽粒蛋白质含量的快速预测,基于2022—2024年的氮肥运筹试验数据,结合灰度共生矩阵提取纹理参数,通过多光谱植被指数与纹理特征的融合,构建小麦叶片氮含量预测模型,再通过叶片氮含量将光谱模型和籽粒蛋白质含量连接起来,建立冬小麦籽粒蛋白质含量预测模型。结果表明,利用灌浆初期剔除土壤背景后的植被指数和纹理特征数据能较好预测小麦叶片氮含量,其模型为y=0.281exp(0.097 x),r^(2)为0.787,RMSE为0.221 g·kg^(-1);冬小麦开花期、灌浆初期、灌浆中期和灌浆后期的叶片氮含量与籽粒蛋白质含量相关性均达到极显著水平(P<0.01),相关系数分别为0.780、0.810、0.704和0.714;灌浆初期,利用指数函数构建的籽粒蛋白质预测模型的精度最优,其函数模型为y=7.160exp(0.018 x),r^(2)为0.697,RMSE为0.096 g·(100 g)^(-1)。因此,可以基于植被指数、纹理特征和灌浆初期叶片含氮量间接实现冬小麦籽粒蛋白质含量预测。

关键词： 5-氨基水杨酸   多糖复合凝胶珠   pH响应   优化  

摘要： 为实现5-氨基水杨酸(5-ASA)的结肠靶向递送并提升其胃肠稳定性,基于离子凝胶技术构建复合多糖凝胶载药体系。通过单因素实验结合Box-Behnken响应面法系统优化制备工艺,确定最佳参数为:海藻酸钠/果胶质量比3∶1、总多糖质量分数4.5%、CaCl_(2)质量分数2.5%、交联时间3.5 h、壳聚糖质量分数2.5%、固化时间40 min。此条件下药物包封率达(50.74±2.06)%。体外溶胀实验显示该复合凝胶珠具有显著的pH响应特性:pH 1.2模拟胃液中溶胀率(SR)最低达(85.00±1.41)%,pH 6.8模拟小肠液和pH 7.4模拟结肠液中SR分别升至最大达(2267.50±118.08)%、(2251.50±200.11)%后发生崩解。体外模拟释放实验进一步证实其具有潜在的结肠靶向释放特性:2 h时在胃液中的累积释放率仅为(4.85±0.35)%,4 h时在小肠液中的上升至(39.35±2.59)%,而9 h时在结肠液中的高达(98.10±2.49)%。这些发现表明,该复合凝胶珠在胃肠道运输过程中有效地保护了5-ASA,同时使其在结肠中靶向释放。

关键词： 猪圆环病毒2型   衣壳蛋白   单克隆抗体   中和活性   抗原表位鉴定  

摘要： 本研究旨在制备猪圆环病毒2型(PCV2)衣壳蛋白(Cap)的单克隆抗体,并对其识别的抗原表位进行鉴定,为Cap蛋白结构和中和抗原表位特性的研究提供数据支持。试验通过细胞杂交瘤技术,共筛选出6株单克隆抗体,命名为2B6、3D4、3F6、4C4、5G4和6A7。经酶联免疫吸附试验(ELISA)检测,所有单抗杂交瘤细胞传代稳定,小鼠腹水单抗效价达最高达1:1.28×10^(7)。Western blot及间接免疫荧光试验(IFA)鉴定抗体特异性及中和活性,结果显示单抗均能特异性识别PCV2,且2B6和4C4单抗具有PCV2中和活性,中和效价均为1:128。进一步利用Western blot鉴定单抗识别的抗原表位,结果表明,2B6、3D4、3F6和6A7识别抗原表位^(203)ENSIYDQDYN^(212),4C4和5G4识别抗原表位^(223)EFNLKDPPLNPK^(234)。综上,本试验成功筛选出2株具有PCV2中和活性的单抗,并鉴定其识别的抗原表位,为后续阐明PCV2的致病机制、表位疫苗设计等奠定基础。

关键词： 蒸汽爆破   铁皮石斛   多糖   理化性质   抗氧化活性  

摘要： 为探究蒸汽爆破技术对铁皮石斛多糖提取效率及其结构和活性的影响,本试验以原料粒径和压力两个关键的汽爆条件为变量,研究不同汽爆条件下铁皮石斛中多糖得率、总糖和糖醛酸含量的变化,并对各多糖样本的结构和抗氧化活性等进行表征。结果表明,铁皮石斛经汽爆处理后,其多糖得率、总糖和糖醛酸含量均提高,以粒径(0.5,1) cm、汽爆压力1.5 MPa处理240 s组的多糖(DOP_(1.0-1.5M))得率及其总糖和糖醛酸含量最高,较未汽爆组(DOP)分别增加25.52、17.43和5.02个百分点。汽爆预处理明显改变了铁皮石斛中多糖的表观结构,使其不规则度增加。铁皮石斛多糖由甘露糖和葡萄糖组成,汽爆对其多糖的单糖组成影响不大,但葡萄糖的摩尔比显著增加。红外光谱分析结果与多糖得率的检测结果相匹配。体外抗氧化评价也表明,适当条件的汽爆预处理可以提升铁皮石斛中多糖的抗氧化活性,同样以DOP_(1.0-1.5M)的活性最优。本研究为铁皮石斛多糖的高效优质获取及高值化开发利用提供了理论参考和技术支撑。