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关键词： 大叶蒟   斑马鱼   抑郁症   蛋白质组学  

摘要： 该研究基于斑马鱼抑郁模型与定量蛋白质组学技术,评估大叶蒟提取物的抗抑郁活性并初步探讨其潜在的作用机制。采用慢性不可预知温和刺激(CUMS)法构建抑郁模型,将AB品系斑马鱼随机分为对照组、模型组、大叶蒟组及阳性对照氟西汀组,每组15尾。除对照组外,其余各组接受为期2周的CUMS造模,随后给予大叶蒟提取物连续干预3周。实验结束后,观察各组斑马鱼脑组织病理形态学变化,并检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、脑源性神经营养因子(BDNF)及5-羟色胺2A受体(5-HT2A)的表达水平。同时提取脑组织蛋白,运用定量蛋白质组学技术筛选各组差异表达蛋白(DEPs),并进行生物信息学分析;进一步采用蛋白免疫印迹法与实时荧光定量反转录验证关键DEPs的表达变化。结果表明,大叶蒟提取物可显著改善CUMS诱导的脑组织病理损伤,降低炎症因子TNF-α与IL-1β的水平,并回调BDNF及5-HT2A受体的异常表达。蛋白质组学共鉴定出11 633个蛋白,其中81个蛋白的表达水平经大叶蒟提取物干预后显著回调。蛋白免疫印迹法与实时荧光定量反转录聚合酶链式反应的验证进一步证实,大叶蒟可显著调节膜联蛋白A1(Anxa1)与转录因子JunB(JunB)的表达。综上,大叶蒟可能通过调控Anxa1及JunB等蛋白表达发挥抗抑郁作用。

关键词： 桑叶提取物   蛋鸡   免疫应激   肠道形态   炎症因子  

摘要： 本研究采用单因素试验设计,通过脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导蛋鸡免疫应激模型,旨在研究桑叶提取物(Mulberry Leaf Extract,MLE)对脂多糖诱导免疫应激状态下蛋鸡肠道形态和炎症因子基因表达的影响。试验选取600只35周龄健康且体重相近的京红1号蛋鸡,随机分为5组,分别为对照组(CON,基础饲粮)、LPS组、0.4% MLE(基础饲粮+0.4% MLE)、0.8% MLE(基础饲粮+0.8% MLE)和1.2% MLE(基础饲粮+1.2% MLE),每组8个重复,每个重复15只鸡。试验期84 d。试验期最后3 d,从各组选取8只体重相近蛋鸡,LPS、0.4% MLE、0.8% MLE和1.2% MLE组每天15:00分别注射1 mg/kg BWLPS,对照组注射等量生理盐水,末次注射24 h后采集样品。结果表明:与对照组相比,LPS攻毒后其回肠和空肠结构出现明显的肠黏膜损伤、坏死和脱落。与对照组相比,LPS组蛋鸡回肠绒毛高度降低(P<0.05),隐窝深度增加(P<0.05),绒隐比降低(P<0.05)。与LPS组相比,0.8% MLE组蛋鸡回肠绒毛高度增加(P<0.05),隐窝深度降低(P<0.05),绒隐比升高(P<0.05)。与对照组相比,LPS组蛋鸡回肠和十二指肠杯状细胞数量减少(P<0.05);与LPS组相比,0.8% MLE组蛋鸡回肠和十二指肠杯状细胞数量增加(P<0.05)。与LPS组相比,饲喂MLE降低IL-6和IL-1β相对表达量(P<0.05),增加STAT3和JAK3相对表达量(P<0.05)。在本试验条件下,日粮中添加0.8% MLE可缓解LPS诱导免疫应激蛋鸡的肠道损伤,其可能通过调控JAK3/STAT3通路抑制炎症。

关键词： 翻译后修饰   岩藻糖基化   单糖  

摘要： 岩藻糖基化是糖基化修饰常见的类型之一,其聚糖结构常见于细胞表面,广泛参与真核与原核生物的多种生理、病理活动,包括组织发育、细胞黏附、感染、炎症和肿瘤转移等。在肿瘤免疫治疗中,IgG型抗体的岩藻糖基化水平与抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC)呈负相关,因此岩藻糖基化的缺乏在肿瘤免疫治疗中潜力巨大。在抗感染方面,有研究表明岩藻糖基化修饰与微生物的毒力和侵袭性密切相关,机体可通过调节岩藻糖基化水平实现免疫防御。本文综述了岩藻糖基化的生物合成过程,并探讨了其抗肿瘤和感染免疫中的研究与应用。

关键词： 酱香型白酒   大回酒轮次   微生物群落   氨基酸   有机酸   关联分析  

摘要： 为阐明酱香型大回酒(3~5轮次基酒)酿造微生物群落与风味前体氨基酸和有机酸的关联,采用宏基因组学和靶向代谢组学系统分析堆积前、入窖前和出窖后酒醅样本。结果表明,氨基酸在窖内阶段显著上升,且在第4轮次出窖酒醅中增长率最高,各有机酸呈现了不同规律的变化趋势。优势细菌经窖内发酵后显著变化,由慢生芽孢杆菌属(Lentibacillus)和克罗彭斯特菌属(Kroppenstedtia)转为Acetilactobacillus绝对主导。优势真菌经堆积后显著变化,由水解型霉菌转为非酿酒酵母。KEGG分析表明微生物代谢功能由堆积阶段的分解代谢主导转向窖内的合成代谢主导。冗余分析和Mantel检验结果表明精氨酸和乙酸与细菌群落变化显著关联,己酸和精氨酸与真菌群落变化显著关联。相关性网络分析显示乙酸与各微生物的连接度最高,是该网络的中心节点。己酸与堆积阶段优势真菌均呈正相关,而这些真菌与乙酸或乳酸呈负相关。该研究揭示了大回酒酿造微生物与核心风味前体积累的动态关联规律,为酱香型白酒关键工艺调控提供了理论参考。

关键词： 枸杞   枸杞多糖   提取   分离纯化   药理作用  

摘要： 枸杞为药食同源中药材,枸杞多糖是其主要活性成分,现代研究证实其具有多种药理作用。枸杞多糖的提取方法有热水提取法、酶解法、超声波辅助提取法和超临界流体萃取技术等,提取率受不同提取方法影响差异明显,其中,微波辅助复合酶法提取率较高。分离纯化多采用色谱法、溶剂沉淀法和膜分离法等,其单糖组成以鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖等为主,不同纯化工艺的单糖组分不同。枸杞多糖药理作用广泛、具有抗肿瘤、保护视力、抗菌、保护肝肾功能及生殖系统等作用,部分药理作用的分子作用机制研究也较为深入。但目前枸杞多糖研究仍存在提取率较低、纯化工艺复杂、质量标准不统一问题。本综述可为枸杞多糖的进一步开发和研究提供参考。

关键词： 壳寡糖   BV-2细胞   脂多糖   M2极化   STAT3  

摘要： 目的:研究壳寡糖(COS)对脂多糖(LPS)诱导的BV-2小胶质细胞神经炎症的影响及潜在的分子机制。方法:建立LPS诱导的BV-2神经炎症模型,实验分为5组:对照组(CON组)、LPS组(100 ng/mL处理12 h)、LPS+COS低、中、高剂量组(50、100、200 μg/mL的COS预处理4 h后加入LPS处理12 h)。采用CCK-8法测定BV-2小胶质细胞活力,Griess法测定NO含量,实时荧光定量PCR分析促炎及抗炎细胞因子的mRNA表达水平。流式细胞术、Western Blot分析BV-2小胶质细胞M1表型标记物CD80、CD16、iNOS和M2表型标记物CD206和Arg-1的表达水平,以及pSTAT3/STAT3的表达情况。结果:与LPS组相比,加入COS预处理能够显著减少NO的释放。LPS处理的细胞显著上调小胶质细胞M1表型标记物(IL-1β、IL-6、TNF-α、iNOS、CD80、CD16)的表达,同时显著下调M2表型标记物(IL-4、TGF-β、CD206、Arg-1)的表达。与LPS组相比,不同浓度COS预处理可显著下调M1表型标记物的表达并上调M2表型标记物的表达。此外,LPS组的p-STAT3/STAT3的蛋白表达水平显著升高,而COS可有效逆转这种趋势。结论:COS促使LPS诱导的BV-2小胶质细胞由M1表型向M2表型转变,减轻LPS诱导的神经炎症,其机制可能与抑制STAT3的激活有关。

关键词： 鲜药   鲜石斛糜   多糖   质量控制   胰岛素抵抗   HepG2  

摘要： 目的 提升并完善鲜石斛糜的质量控制方法并探究其对HepG2细胞胰岛素抵抗(IR)的作用。方法 采用多组分分析模式分别建立鲜石斛糜总多糖、甘露糖的含量测定方法,据此优化鲜石斛糜质量标准。采用高糖、高胰岛素联合诱导HepG2细胞,构建IR-HepG2细胞模型。采用CCK-8法检测各浓度多糖对HepG2细胞的毒性作用,葡萄糖氧化酶法测定细胞上清液中葡萄糖消耗量,评价多糖对IR-HepG2细胞胰岛素抵抗的改善效果。结果 所建立的含量测定方法中总多糖在0.02~0.12 mg/mL范围内线性关系良好(R2=0.999 1),甘露糖在40~200μg/mL范围内线性关系良好(R2=0.999 0)。鲜石斛糜中总多糖、甘露糖的平均含量分别为62.02 mg/g和36.45 mg/g。CCK-8实验结果显示,0.2~0.8 mg/mL范围内鲜石斛糜多糖对HepG2细胞存活率无显著影响(P>0.05),无明显毒性;葡萄糖消耗量检测结果显示,各给药组IR-HepG2细胞葡萄糖消耗量均显著提高(P<0.05),其中0.6 mg/mL浓度组葡萄糖消耗量最高。结论 本研究建立的总多糖、甘露糖含量测定方法经方法学验证合格,可提升鲜石斛糜的质量控制;0.2~0.8 mg/mL鲜石斛糜总多糖含量对HepG2细胞无明显毒性,且能有效改善其胰岛素抵抗状态,其中0.6 mg/mL为该实验条件下的最优作用浓度,可为鲜石斛糜质量标准完善及降血糖药理研究打下坚实基础。

关键词： 小麦籽粒   含水率   蛋白含量   近红外光谱技术   样品温度   混合温度建模  

摘要： 目的:近红外光谱技术因具有快速无损、多指标同步检测的优势,已成为小麦质量指标检测的重要技术手段。然而,样品温度会显著影响近红外预测模型的精度与稳定性。本研究构建混合温度模型提高近红外模型的预测精度和稳定性。方法:采用不同温度(10℃、20℃、30℃)的小麦籽粒样品,分别建立小麦籽粒含水率和蛋白含量单一温度(10℃、20℃、30℃)和混合温度的近红外预测模型,使用不同温度(10℃、20℃、30℃)的小麦籽粒样品测试单一温度和混合温度模型,采用Rp、SEP、SEC/SEP、SEP/SECV及由这四个指标构建的综合评价指标(M值),以及CV进行评价。结果:小麦籽粒含水率10℃近红外模型在预测10℃样品时SEP为0.047,小于20℃(0.113)和30℃(0.176),在含水率和蛋白质含量的单一温度模型的其他评价指标也有类似趋势,表明在预测与建模温度一致样品时单一温度模型精度较高,在预测非建模温度样品时误差较大。配对分析显示,混合温度模型的Rp、SEC/SEP、SEP/SECV均显著高于单一温度模型,以及M值、CV显著低于单一温度模型(P < 0.05)。结论:混合温度建模可以整合多温度光谱信息,显著提高模型的稳定性和模型的预测性能。

关键词： 甲烷氧化细菌   盐度   蛋白质组学   甲烷生物氧化   海平面上升  

摘要： 【背景】甲烷氧化细菌是全球甲烷的关键生物汇,其盐度适应性机制对于理解海平面上升背景下甲烷通量变化具有重要意义。【目的】揭示不同类群甲烷氧化细菌对盐度胁迫的响应策略,探究其盐度适应机制的共性与特性。【方法】选取四株代表性甲烷氧化细菌(I型:Methylomonas sp. LW13、Methylococcus capsulatus Bath;II型:Methylosinus sp. LW4、Methylocystis iwaonis SD4),设置0.0-10.0 g/L NaCl盐度梯度,测定生长代时与甲烷氧化速率,并结合比较蛋白质组学分析盐度变化下的蛋白表达变化。【结果】随着盐度升高,四株菌的生长和甲烷氧化活性均受到抑制,在蛋白调控通路上的共同特征表现为跨膜转运、双组分信号转导和碳代谢相关通路的协同重构,通过减少离子摄入、增强离子外排、调整碳代谢过程并促进可溶性有机碳积累来缓解盐胁迫。然而,不同菌株的耐盐能力和蛋白表达响应方式存在明显差异。LW13在高盐条件下生长减缓,甲烷氧化速率下降,在10.0 g/L NaCl条件下生长停滞,其蛋白表达特征主要表现为维持转运和信号应答,同时下调鞭毛运动相关功能;Bath对盐度较为敏感,在7.5 g/L NaCl时生长完全被抑制,其蛋白表达重构幅度相对较小,变化主要集中于转运系统和碳代谢通路;LW4耐盐能力最强,在10.0 g/L NaCl条件下仍可维持甲烷代谢活性,并协同上调跨膜转运、鞭毛组装、呼吸链以及碳氮代谢相关蛋白;SD4在高盐下甲烷氧化亦明显受抑,在10.0 g/L NaCl条件下失去甲烷氧化功能,其蛋白表达主要依赖转运、信号感知及部分碳代谢通路的适应性调整。与此同时,四株菌培养体系中溶解性有机物浓度均升高,表明盐度胁迫可能改变甲烷碳的后续去向,促进部分碳向可溶性有机碳库转移。【结论】本研究深化了对不同类群甲烷氧化细菌盐度适应机制的认识,为理解盐渍化环境中甲烷生物汇功能的变化提供了理论依据。

关键词： 咖啡因检测   核酸适配体   电化学传感器  

摘要： 基于咖啡因(CAF)特异性核酸适配体,本研究设计并构建了一种新型构象开关电化学传感器,旨在实现CAF的简便、高灵敏检测。通过在核酸适配体序列两端分别修饰巯基(固定基团)与亚甲基蓝(信号分子),并将其自组装于金电极表面,成功制备了特异性响应CAF的发夹核酸适配体电化学探针修饰电极。实验系统优化了其制备与检测条件,确定最佳固定浓度100 nmol/L,最佳结合时间20 min,方波伏安法(SWV)测试频率为500 Hz。在优化条件下,该传感器对CAF表现出良好的线性响应,线性范围为1~30 μmol/L,线性回归方程为SI=(0.026 8×[CAF]+0.153 0)×100%([CAF]为CAF浓度,R2=0.998 2)。该传感器对CAF具备高特异性和良好选择性,同时传感界面具有良好的电化学稳定性与可再生性。该方法成功应用于可乐与咖啡饮料中CAF的实际检测,加标回收率结果较理想,证实了其在复杂基质中进行痕量分析的实用潜力。