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关键词： 血红素氧合酶1   髓核间充质干细胞   脂多糖   炎症   椎间盘退变   核因子κB  

摘要： 背景:研究表明,血红素氧合酶1具有抗炎、抗凋亡作用,但它能否在髓核间充质干细胞中发挥抗炎保护作用尚不明确。目的:探讨血红素氧合酶1对炎症微环境下髓核间充质干细胞的保护作用及机制。方法:①从SD大鼠尾椎椎间盘中提取原代髓核间充质干细胞,通过流式细胞术、三系分化进行鉴定。②采用血红素氧合酶1过表达慢病毒感染髓核间充质干细胞,通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达以及Western blot检测血红素氧合酶1蛋白表达水平评估感染效率。③髓核间充质干细胞分为4组:对照组用DMEM/F-12完全培养基培养24 h,模型组、空载体组、血红素氧合酶1过表达组分别为未感染细胞、感染LV-Ctrl细胞、感染LV-HO-1细胞,3组均用添加5μg/mL脂多糖的DMEM/F-12完全培养基培养24 h。采用Western blot、免疫荧光检测炎症相关蛋白表达,Western blot检测核因子κB信号通路蛋白水平。结果与结论:①大鼠髓核间充质干细胞排列紧密,呈贴壁生长,多为纺锤形或梭形,通过流式细胞术检测髓核间充质干细胞具有较高的纯度,三系分化鉴定髓核间充质干细胞具有向脂肪细胞、骨细胞、软骨细胞分化的能力;②血红素氧合酶1过表达慢病毒感染的髓核间充质干细胞表达绿色荧光蛋白,血红素氧合酶1蛋白表达显著升高;③与模型组相比,血红素氧合酶1过表达组NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3、基质金属蛋白酶13、基质金属蛋白酶3、肿瘤坏死因子α蛋白表达均明显降低(P<0.05);④与模型组相比,血红素氧合酶1过表达组磷酸化核因子κB/核因子κB比值显著下降(P<0.05),磷酸化核因子κB抑制蛋白/核因子κB抑制蛋白也显著下降(P<0.05)。以上结果表明,血红素氧合酶1通过抑制核因子κB信号通路的激活,有效减少了脂多糖诱导的髓核间充质干细胞炎症反应。

关键词： 核酸适配体   动物疾病   诊断   指数富集配体系统进化(SELEX)   公共卫生  

摘要： 动物疾病的有效防控对畜牧业的可持续发展和全球公共卫生安全至关重要。近年来,核酸适配体技术凭借其高亲和力和高特异性识别目标分子的能力,在动物疾病诊断领域中获得广泛关注。相较于传统抗体,核酸适配体具备化学稳定性高、生产成本低、可设计性强和免疫原性低等优势,推动了其在动物疾病检测方面的广泛应用。本文详细阐述了核酸适配体的定义、分类、特点和指数富集配体系统进化(SELEX)技术的筛选过程,并总结了核酸适配体在病毒性动物疾病检测中的应用现状。此外,本文还讨论了核酸适配体技术面临的挑战和未来的发展方向,旨在为动物疾病防控领域的研究提供参考和借鉴。

关键词： 间充质干细胞   肺动脉高压   补气活血   中医药  

摘要： 肺动脉高压是世界范围内的重大疾病问题,作为一种血流动力学疾病其特征在于平均肺动脉压高于正常上限,与不良的血管重塑相关,右心室肥大并最终衰竭是致使肺动脉高压死亡的主要原因,药物治疗虽可暂时缓解肺动脉高压症状,但无法逆转肺血管重塑。间充质干细胞治疗肺动脉高压有其独特的优势,可通过改善肺血管重塑、调控炎症免疫、调控肠道菌群治疗肺动脉高压。根据干细胞可以修复损伤组织等特征可将其归属于中医学正气的范畴,并且干细胞与肾精在生命起源和生理功能等方面存在较多共性,骨髓干细胞循环与中医学祛瘀生新理论相似,可知干细胞与中医学所论气血精存在一定联系。使用补气活血类中药能够促进干细胞的增殖与分化,肺动脉高压的中医关键病机在于气虚血瘀,补气活血类中药亦能够改善肺血管重塑、减轻炎症反应、调控机体代谢、改善线粒体功能治疗肺动脉高压。基于此,文章总结了间充质干细胞、补气活血类中药治疗肺动脉高压的作用机制,并进一步探讨了两者联合治疗肺动脉高压的可行性,旨在为补气活血类中药联合间充质干细胞治疗肺动脉高压的临床应用和实验研究提供思路与参考。

关键词： 山茱萸   多糖   纯化   体外降糖活性   结构表征  

摘要： 探究山茱萸多糖的结构及体外降糖活性机制。以山茱萸为原料,采用超声水提法提取山茱萸多糖,经Sevage脱蛋白、醇沉、DEAE-52、Sephadex G-100柱层析分离纯化获得COP-1S、COP-2S、COP-3S,对3种多糖组分进行体外降糖活性评价,在此基础上,通过分子量、单糖组成、红外光谱等测定对多糖结构表征,并利用酶促动力学、荧光光谱等探究COP-2S对α-葡萄糖苷酶的抑制机理。降糖活性结果表明,3种多糖组分对α-淀粉酶抑制活性较弱,对α-葡萄糖苷酶均有明显抑制作用,抑制能力大小顺序为:COP-2>COP-1>COP-3,其中COP-2的IC_(50)为5.18 mg/mL;3种多糖的平均分子量分别为24.518×10^(3)、32.392×10^(3)、66.417×10^(3) Da,单糖组成均含有甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、木糖、阿拉伯糖,但组成比例差异较大,COP-1S中阿拉伯糖组成比例较高,COP-2S和COP-3S中均含有阿拉伯糖和半乳糖醛酸,但在COP-2S中的组成比例较高;紫外和红外光谱表明3种多糖不存在蛋白和核酸,均含有吡喃环结构,其中COP-2S和COP-3S同时含有α和β构型糖苷键,COP-1S为β构型;圆二色谱显示,3种多糖均增加了α-葡萄糖苷酶的β-转角和无规则卷曲比例,减少β-折叠比例,但仅有COP-1S增加了α-螺旋比例;酶促动力学分析表明,COP-2S对α-葡萄糖苷酶的抑制类型为混合竞争抑制,抑制常数K_(i)为0.2248 mg/mL;荧光光谱分析显示,COP-2S对α-葡萄糖苷酶的猝灭作用为静态猝灭,是一种以氢键和范德华力为主要驱动力的相互作用。本试验为山茱萸降糖高值化功能食品开发提供一定的理论依据。

关键词： 多孔配位聚合物   氨基酸功能化   铅离子   吸附机理   检测  

摘要： 镧系生物基多孔配位聚合物(Ln-BCPs)因其高度可调的孔道结构、丰富的官能团及独特的光化学特性,在重金属离子吸附与检测领域展现出独特优势。该研究通过后合成策略,在铽配位聚合物框架中引入L-天冬氨酸(L-Asp),构建了可对Pb(Ⅱ)高选择性吸附和高灵敏检测的新型材料Tb-Asp-CP,并结合量子化学计算揭示了其识别结合机制。密度泛函理论(DFT)计算表明,L-Asp主要通过羧基氧和氨基氮与Pb(Ⅱ)配位,其中静电作用贡献率达95.03%。Tb-Asp-CP对Pb(Ⅱ)的饱和吸附容量为478 mg/g,吸附行为符合Langmuir单层模型和准二级动力学模型,属于界面化学反应控制的单分子层吸附。该材料表现出优异的选择性和可重复利用性,对Pb(Ⅱ)的选择性系数达3.03~32.54,经5次吸附-解吸循环后仍保持71.8%的吸附效率。同时Tb-Asp-CP对Pb(Ⅱ)具有高检测灵敏度,检出限为3.19µg/L,在蔬菜样品中的加标回收率为86.9%~108%。理论模拟进一步证实,Pb(Ⅱ)优先与Tb-Asp-CP中由多个羧基氧构成的“富氧空腔”发生多齿配位,当Pb(Ⅱ)被该空腔吸附后,可能通过触发光致电子转移过程实现对Pb(Ⅱ)的高灵敏检测。该研究为开发高性能重金属离子吸附和检测材料提供了新思路和理论依据。

关键词： 黄芪多糖   非酒精性脂肪性肝病   TNF-α   SREBP-1c   脂质代谢  

摘要： 目的探讨黄芪多糖对肝脏脂质代谢的作用及机制。方法将21只C57BL/6小鼠适应性喂养1周后,随机分为正常组、模型组、黄芪多糖干预组,每组7只。正常组喂养普通饲料,其余两组喂养高脂饲料,饮水自由摄取。同时黄芪多糖干预组小鼠每日按剂量为50 mg/kg灌胃黄芪多糖,正常组和模型组灌胃等体积生理盐水,连续进行8周,构建NAFLD小鼠模型。测定记录各组小鼠体质量、肝脏质量,计算肝脏系数。采用HE染色法观察肝组织病理变化;检测肝组织中TNF-α含量;采用Western blotting法检测肝组织甾醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulatory element-binding protein-1c,SREBP-1c)蛋白表达情况;检测肝脏组织甘油三酯(triglyceride,TG)含量。结果造模结束后,测定相关指标得出,模型组小鼠的体质量(P<0.001)、肝质量(P<0.001)及肝脏系数(P<0.01)与正常组相比显著升高,而黄芪多糖干预组小鼠的体质量(P<0.001)、肝质量(P<0.001)、肝脏系数(P<0.05)与模型组相比显著下降;HE染色发现,模型组小鼠肝脏脂肪变性明显,而黄芪多糖干预组小鼠肝脏脂肪变性程度较轻,脂肪空泡数目减少;模型组小鼠肝组织TNF-α含量、SREBP-1c蛋白表达、TG含量与正常组比较显著升高(P均<0.001),而黄芪多糖干预组小鼠肝组织TNF-α含量、SREBP-1c蛋白表达、TG含量与模型组相比显著下降(P<0.05)。结论黄芪多糖对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病小鼠的脂质蓄积具有改善作用,其机制可能与调控TNF-α/SREBP-1c通路进而影响肝脏脂质合成有关。

关键词： 三维支架   淫羊藿苷   缓释微球   骨髓间充质干细胞   细胞增殖   成骨分化  

摘要： 背景:既往研究表明淫羊藿苷具有良好的促成骨分化潜能,但存在药物易流失、易降解、难以持续作用等缺点。目的:制备载有淫羊藿苷微球的三维支架,探索最佳载药浓度。方法:分离培养出兔骨髓间充质干细胞,通过检测细胞表型和多向分化能力进行鉴定。采用复乳溶剂挥发法制备淫羊藿苷载药微球,将其加入丝素蛋白/壳聚糖/纳米羟基磷灰石混合溶液中,通过真空冷冻干燥化学交联法制备含不同浓度(0,0.1,1,10,50,100μmol/L)淫羊藿苷的载药支架。通过CCK-8法、细胞活死染色、细胞划痕实验、茜素红染色、碱性磷酸酶染色、免疫印迹法检测含不同浓度淫羊藿苷缓释微球的三维支架对骨髓间充质干细胞增殖活性、迁移、成骨分化的影响。结果与结论:①CCK-8法及细胞活死染色实验显示载淫羊藿苷缓释微球的三维支架能促进骨髓间充质干细胞增殖,细胞活性增加,以10μmol/L淫羊藿苷组效果最佳(P<0.05);②茜素红染色、碱性磷酸酶染色结果显示10μmol/L淫羊藿苷组矿化结节、成骨分化能力高于对照组(P<0.05);③Western bolt显示淫羊藿苷促进了Ⅰ型胶原、骨钙素、Runt相关转录因子2、血管内皮生长因子蛋白表达,其中以10μmol/L淫羊藿苷组上调显著(P<0.05)。结果显示,10μmol/L淫羊藿苷为最佳载药缓释浓度。

关键词： 能量转换效率   D-π-A结构   小分子三苯胺衍生物   CsPbI_(3)钙钛矿太阳电池  

摘要： 采用Stille偶联和Suzuki偶联等经典反应,合成了2种D-π-A结构的小分子三苯胺衍生物N,N-双(4-甲氧基苯基)-4-[5-(4-吡啶基)-2-噻吩基]苯胺(H457)和N,N-双(4-甲氧基苯基)-4-[2,3-二氢-7-(4-吡啶基)噻吩基]苯胺(H459);将2种小分子三苯胺衍生物分别用结晶修饰和表面后处理修饰的方法沉积在FTO/c-TiO_(2)/m-TiO_(2)/CsPbI_(3)复合薄膜上,制备了CsPbI_(3)钙钛矿太阳电池,并测量了各种CsPbI_(3)钙钛矿太阳电池的能量转换效率.采用扫描电子显微镜(SEM)、X射线衍射(XRD)、紫外-可见吸收光谱(UV-Vis)、电流密度-电压(J-V)曲线和电化学阻抗等方法对CsPbI_(3)钙钛矿太阳电池进行了表征和机理研究.结果表明,修饰的CsPbI_(3)钙钛矿太阳电池的能量转换效率提高到15.82%,且被修饰的电池器件稳定性和使用寿命均得到提升.

关键词： 黄精   多糖   菌株筛选   益生菌发酵   响应面优化   益生元活性  

摘要： 多糖是黄精含量最高的活性成分,为了筛选通过微生物发酵黄精提高多糖含量的乳酸菌及优化发酵工艺,探索发酵物的益生元活性,本文从实验室保存的不同传统发酵食品中分离的12株植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)发酵黄精,通过单因素实验,系统考察了发酵时间(0~6 d)、接种量(0~9%v/v)、转速(0~200 r/min)和温度(20~40℃)对黄精发酵液中多糖含量的影响,利用响应面方法对发酵黄精工艺进行优化,并对发酵黄精冻干粉进行益生元活性分析。结果表明:12株菌均能在未添加营养物质的黄精培养基中正常生长,生物量在24~48 h内最高达到1×10^(8) CFU/mL,但48 h后生物量迅速下降。发酵48 h后,筛选到1株多糖含量提高25%的L6菌株。最佳发酵工艺参数为发酵时间3.8 d、接种量2.5%、温度35℃。在此优化条件下,发酵液中多糖含量达到1.30 mg/mL,比优化前显著(P<0.05)提高了57.71%。发酵后多糖分子量明显增加,多糖吡喃环结构发生变化,主要组成多糖的单糖中甘露糖和葡萄糖明显降解,半乳糖和半乳糖醛酸明显增加。此外,发酵物能够明显促进植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)CICC22213、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)CICC22175和干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)FBKL1.3022这3株益生菌增殖,具有潜在益生元活性,且主要短链脂肪酸乳酸和乙酸含量具有生物量依赖性。这一结果表明,通过工艺优化能够有效提升黄精发酵液中多糖的含量,为开发大健康发酵食品、根茎类药食同源食品提供了技术支撑。

关键词： 蛋白质互作网络   关键蛋白质   DANE   BiLSTM   蛋白质复合物   基因表达数据   Gavin  

摘要： 关键蛋白质在生物学和医学中扮演着至关重要的角色,它们直接影响疾病的发生和发展。现有研究表明,蛋白质复合物中包含大量关键蛋白质,且结合序列信息特征能够增强关键蛋白质识别的准确度与稳定性。基于蛋白质相互作用(PPI)网络,提出融合蛋白质复合物信息和基因表达数据的关键蛋白质识别模型DANE-BiLSTM。该模型首先利用DANE方法提取融合PPI网络和蛋白质复合物特征的节点表示;然后基于BiLSTM学习基因表达数据的特征,并且引入注意力机制优化节点表示;最后将两类节点表示进行组合,传入分类模块进行分类。该模型充分发挥了DANE方法和BiLSTM的优势。实验结果表明,DANE-BiLSTM模型与中心性方法、基于机器学习的算法相比,在准确度、精确度、召回率、F1分数和AUC方面都有明显提高;与其他基于深度学习的算法相比,AUC值均最优,其他指标也有所提高。