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关键词： SP3   人牙髓干细胞   成骨向分化  

摘要： 目的:本研究旨在探讨转录因子特异性蛋白3(specificity protein 3,SP3)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)成骨向分化的调控作用。方法:体外分离并培养hDPSCs,通过体外多向分化诱导,对其多向分化能力进行鉴定;通过定量实时逆转录聚合酶链反应(quantitative real-time reverse transcription polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测SP3在hDPSCs成骨向分化不同时期的动态表达;利用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术下调hDPSCs中SP3的表达;在成骨诱导培养条件下,通过qRT-PCR和Western blot检测Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)等成骨相关标志物的表达情况。同时,通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和茜素红S(alizarin red S,ARS)染色,对hDPSCs的成骨向分化潜能进行评估。结果:SP3在hDPSCs成骨向分化过程中呈时间依赖性上调;成骨向诱导后,抑制SP3表达的hDPSCs中,RUNX2和OPN的基因及蛋白表达水平均下调,ALP和ARS染色强度也均减弱。结论:抑制表达SP3可降低hDPSCs的成骨向分化潜能。

关键词： 胃癌   小核酸药物   小干扰核苷酸   微核糖核酸   反义寡核苷酸   核酸适配体  

摘要： 胃癌是全球范围内严重威胁人类健康的恶性肿瘤之一,疾病负担极为沉重。传统治疗的5年生存率仅维持在35.1%左右,尤其是晚期患者预后极差,亟须探索更精准、高效的新型治疗策略。近年来,随着分子生物学技术的突破,小核酸药物凭借其独特的靶向机制成为肿瘤治疗领域的研究热点。本文系统总结小核酸药物的作用机制,梳理其在胃癌治疗中的研究进展,以期为胃癌的精准治疗提供新的理论依据与实践参考。

关键词： 桃胶   多糖   重金属   DNA损伤   皮肤保护  

摘要： 构建了由硫酸镍(NiSO4)诱导人皮肤成纤维细胞(HFF-1)的重金属损伤模型,通过细胞存活率、形态学观察及DNA损伤标志物(γ-H2AX)检测系统评估了桃胶对重金属诱导的人皮肤成纤维细胞损伤的保护作用。研究结果显示,NiSO4(8 mmol/L)暴露12 h使HFF-1细胞存活率降至44.65%(p<0.01),与对照组相比,γ-H2AX在细胞中的表达水平显著升高至27.16倍;经8 mg/mL桃胶预处理的细胞存活率与模型组相比显著升高,为59.22%(p<0.01),细胞中γ-H2AX表达水平相比模型组显著降低,为对照组的3.8倍。通过组分分析显示,桃胶总糖含量为43.8%(苯酚-硫酸法测定),其多糖组分平均分子量为803.81 kDa(高效液相凝胶色谱测定),单糖组成主要为阿拉伯糖(47.96%)、半乳糖(33.16%)、木糖(13.41%)、甘露糖(3.52%)及鼠李糖(1.95%)(气相色谱-质谱分析)。研究结果表明,桃胶中富含的多糖成分可能通过减轻DNA损伤机制,有效缓解重金属对皮肤细胞的毒性作用。

关键词： 骨髓间充质干细胞   紫草素   骨质疏松症   MAPK信号通路   成骨   工程化干细胞  

摘要： 背景:紫草素是一种从紫草中提取的紫色萘醌类色素,具有多种生物学活性,还具有一定的骨保护作用,但作用机制尚不明确。目的:探讨紫草素促进骨髓间充质干细胞成骨分化的分子机制以及在治疗骨质疏松症中的潜在作用。方法:①用不同浓度(0.1,0.2,0.4μmol/L)紫草素干预骨髓间充质干细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖情况;②用不同浓度(0.1,0.2,0.4μmol/L)紫草素+成骨诱导液共同干预骨髓间充质干细胞7,14 d,分别进行碱性磷酸酶染色和茜素红染色;③用不同浓度(0.2,0.4μmol/L)紫草素+成骨诱导液共同干预骨髓间充质干细胞48 h,提取RNA进行RT-PCR分析;④用0.2μmol/L紫草素干预骨髓间充质干细胞30,60,120 min,通过蛋白质印迹检测MAPK信号通路中p-P38、p-ERK和p-JNK的表达;⑤18月龄C57BL/6小鼠给予紫草素干预2个月,取小鼠股骨进行Micro-CT扫描,取小鼠胫骨进行骨钙素免疫荧光检测。结果与结论:①CCK-8检测显示紫草素可以促进骨髓间充质干细胞的增殖;②碱性磷酸酶染色和茜素红染色显示紫草素可以促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化;③RT-PCR检测显示紫草素可以提高成骨相关基因骨钙蛋白、碱性磷酸酶、骨形态发生蛋白2和Runt相关转录因子2的mRNA表达水平;④蛋白质印迹检测显示紫草素可促进骨髓间充质干细胞MAPK信号通路中P38、ERK和JNK的磷酸化;⑤动物实验发现紫草素可以改善老年小鼠股骨的骨微结构,提高胫骨骨钙素的表达。结果表明:紫草素通过MAPK信号通路促进骨髓间充质干细胞成骨分化,改善骨质疏松小鼠的骨微结构。

关键词： 复合益生菌   黄芪多糖   绵羊   生长性能   血清指标  

摘要： 为研究单独或联合应用复合益生菌(酵母菌+枯草芽孢杆菌)和黄芪多糖对绵羊生长性能及血清相关指标的影响,试验选取64只体重(19.00±2.30)kg、健康的75日龄小尾寒羊×蒙古羊杂交公羊,随机分为4组。对照组绵羊饲喂基础日粮,益生菌组、黄芪多糖组、菌糖复合组分别在绵羊的基础日粮中添加0.1%复合益生菌(酵母菌含量≥7×108 CFU/g,枯草芽孢杆菌含量≥5×108 CFU/g)、0.1%黄芪多糖(含量为700 mg/g)和0.1%复合益生菌+0.1%黄芪多糖。每组共4个重复,每个重复共4只羊。试验期60 d。结果表明:(1)与对照组相比,益生菌组、黄芪多糖组和菌糖复合组绵羊的试验末重分别提高5.21%、5.72%和6.45%(P<0.05);平均日增重分别提高11.32%、12.77%和14.37%(P<0.05);料重比分别降低13.51%、16.94%和16.53%(P<0.05),各试验组间试验末重、平均日增重和料重比均无显著差异(P>0.05)。(2)益生菌组、黄芪多糖组、菌糖复合组绵羊血清生长激素(GH)水平分别较对照组提高17.89%、40.71%和41.28%(P<0.05),且黄芪多糖组、菌糖复合组较益生菌组分别提高了19.36%和19.84%(P<0.05)。(3)益生菌组绵羊血清TNF-α、IL-2、IL-12和IgG的含量分别较对照组提高11.91%、31.39%、26.01%和42.73%(P<0.05)。黄芪多糖组绵羊血清TNF-α、IL-2、IL-10、IL-12、IgM和IgG的含量分别较对照组提高12.20%、27.36%、16.28%、34.80%、21.27%和38.07%(P<0.05)。菌糖复合组绵羊血清TNF-α、IL-2、IL-6、IL-10、IL-12、IgM、IgG和IgA的含量分别较对照组提高26.33%、32.53%、19.07%、11.28%、45.64%、52.71%、38.01%和10.43%(P<0.05),且菌糖复合组TNF-α、IL-6、IgM和IgA的含量在试验组中最高(P<0.05)。(4)与对照组相比,益生菌组、黄芪多糖组、菌糖复合组绵羊的血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量分别提高14.03%、10.43%和28.83%(P<0.05);总抗氧化能力(T-AOC)含量分别提高19.21%、14.26%和37.22%(P<0.05);超氧化物歧化酶(T-SOD)含量分别提高24.65%、25.38%和32.50%(P<0.05);且菌糖复合组的GSH-Px、T-AOC含量在所有试验组中最高(P<0.05);菌糖复合组丙二醛(MDA)水平在所有组中最低(P<0.05),较对照组降低13.60%。综上所述,本研究条件下,基础日粮中分别单独添加0.1%复合益生菌(酵母菌+枯草芽孢杆菌)、0.1%黄芪多糖或二者联合添加,均对绵羊无毒副作用;均可显著提高绵羊平均日增重,降低料重比,促进绵羊生长;均可改善绵羊免疫和抗氧化功能。复合益生菌与黄芪多糖对绵羊生长性能、血清生化指标无互作效应,对血清抗氧化和免疫指标影响上存在互作效应,均表现为显著协同作用。

关键词： 黄豆酱   减盐   挥发性风味物质   氨基酸   有机酸   生物胺  

摘要： 过量食盐摄入导致的健康问题增加了人们对减盐调味品的需求。然而,在发酵过程中降低食盐含量会对发酵调味品的质量产生影响,进而引发新的问题和挑战。该研究从理化指标、细菌数量、生物胺含量及风味物质含量等多个方面考察了减盐对黄豆酱发酵的影响。结果发现,随着盐质量浓度的降低,80 g/L和100 g/L盐质量浓度下黄豆酱发酵体系pH值更低,总酸增加了80%以上;在发酵前期细菌数量较对照组高出1~2个数量级,其中腐败菌和大肠菌群数量明显增加;生物胺总量增加14.45%~19.65%,其中组胺和酪胺含量分别增加了27.60%~43.80%和49.76%~119.39%。此外,盐质量浓度降低后,黄豆酱中游离氨基酸含量下降,乳酸含量明显增加,琥珀酸含量减少,且挥发性风味物质中酸类含量增加0.31~2.90倍,而1-辛烯-3-醇等主要挥发性风味物质含量减少。该研究结果证实了减盐发酵使得黄豆酱品质与风味下降,食品安全风险增加,对研究环境因素影响黄豆酱发酵进程及其风味与品质等具有参考意义。

关键词： tetrahedral framework nucleic acids   celastrol   skin fibrosis   nanodrug delivery system   epithelial-mesenchymal transition  

摘要： Progressive skin fibrosis ultimately results in irreversible contractures,causing both joint dysfunction and cosmetic *** key pathological features of skin fibrosis include persistent inflammation and abnormal accumulation of the extracellular matrix(ECM),with epithelialmesenchymal transition(EMT)playing a critical role in disease ***,current therapeutic strategies for cutaneous fibrosis are largely palliative and often require repeated interventions,with limited ***(Cel)exerts anti-inflammatory and anti-fibrotic effects in skin tissue,but its clinical application is limited by poor bioavailability and a narrow therapeutic *** framework nucleic acid(tFNA),a novel nanocarrier system,exhibits multiple advantages,including enhanced cellular uptake,improved cell viability,and intrinsic anti-fibrotic and anti-inflammatory ***,this study applied tFNA-Cel complex(TCC)as an advanced nanotherapeutic agent,designed to exert a synergistic anti-fibrotic *** this study,an in vitro model of skin fibrosis was established using human keratinocyte(HaCaT)cells treated with 5 ng mL^(-1) transforming growth factor beta(TGF-β)for 24 *** results showed that TCC significantly inhibited EMT progression by reducingα-smooth muscle actin(α-SMA)levels and increasing E-cadherin *** to tFNA or Cel alone,TCC exhibited superior anti-fibrotic effects in the fibrosis model,as evidenced by modulation of SMAD family member 2(SMAD2)signaling and collagen I ***,the TCC group showed lower levels of nuclear factorκB p65(NF-κB p65),BCL-2-associated X protein(Bax),and reactive oxygen species(ROS)compared to the Cel or tFNA *** findings highlight TCC as a promising treatment for skin fibrosis,with its synergistic anti-fibrotic effects providing new therapeutic avenues.

关键词： 山桐子粕   蛋白质-多糖复合物   纤维素酶   溶解度   乳化活性  

摘要： 由蛋白质和多糖形成的复合体系较单一蛋白质和多糖组分具有更强的功能特性,且山桐子粕中富含蛋白质和多糖。该研究探究1%~5%(质量分数)的纤维素酶添加量对碱溶提取的山桐子粕蛋白质-多糖复合物的理化与功能特性的影响。结果表明,随着纤维素酶添加量由0%增加至5%时,复合物中蛋白质和多糖含量显著增加(P<0.05),但是总酚和黄酮含量无显著差异(P>0.05)。同时发现纤维素酶处理后,复合物的溶解度、持水力、持油力、乳化活性和乳化稳定性较对照组均有所改善,呈现先增加后降低的趋势,在3%添加量时达到最高水平,较对照组分别提升了36.22%、74.70%、53.91%、7.32%和58.00%(P<0.05)。该研究证实,通过调控纤维素酶的添加量可以获得理化与功能特性良好的蛋白质-多糖复合体系。研究结果为山桐子粕资源的综合加工利用提供技术支撑。

关键词： 人脐带间充质干细胞   外泌体   脂多糖   脓毒症脑病   血脑屏障   高迁移率族蛋白B1   基质金属蛋白酶9   神经炎症  

摘要： 背景:研究证实间充质干细胞来源外泌体作为细胞间通信递质可抑制神经炎症和促进血管新生,目前关于间充质干细胞来源外泌体减轻脓毒症脑病血脑屏障损伤的作用机制研究较少。目的:探究人脐带间充质干细胞来源外泌体对脓毒症脑病小鼠血脑屏障的保护作用及作用机制。方法:采用超速离心法从人脐带间充质干细胞培养基中分离外泌体。51只C57/BL6小鼠随机分为假手术组(n=17)、模型组(n=17)、治疗组(n=17),后2组腹腔注射脂多糖构建脓毒症脑病模型,治疗组在造模后0.5 h尾静脉注射50μg外泌体。24 h后,采用小鼠干湿比重法和伊文思蓝法检测小鼠脑组织含水量和血脑屏障通透性,尼氏染色检测小鼠海马区神经元损伤情况,免疫荧光染色观察脑皮质组织中闭锁小带蛋白1和咬合蛋白荧光强度,Western blot检测脑皮质组织中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、闭锁小带蛋白1、咬合蛋白、高迁移率族蛋白B1、Toll样受体4、核因子κB及基质金属蛋白酶9表达水平。结果与结论:①与假手术组相比,模型组小鼠脑组织含水量和伊文思蓝含量显著升高(P<0.05);与模型组相比,治疗组小鼠脑组织含水量和伊文思蓝含量显著降低(P<0.05);②尼式染色结果显示,与假手术组相比,模型组小鼠海马组织CA1区神经元细胞形态不规则、排列不整齐,神经元数量显著降低(P<0.05);与模型组相比,治疗组小鼠海马组织CA1区神经元细胞形态规则、排列整齐,神经元数量显著增加(P<0.05);③免疫荧光染色结果显示,与假手术组相比,模型组小鼠脑皮质组织中闭锁小带蛋白1和咬合蛋白荧光强度显著降低;与模型组相比,治疗组小鼠脑皮质组织中闭锁小带蛋白1和咬合蛋白荧光强度显著升高;④Western blot结果显示,与假手术组相比,模型组小鼠脑皮质组织中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、高迁移率族蛋白B1、Toll样受体4、核因子κB及基质金属蛋白酶9表达水平显著增加(P<0.05);与模型组相比,治疗组小鼠脑皮质组织中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、高迁移率族蛋白B1、Toll样受体4、核因子κB及基质金属蛋白酶9表达水平显著降低(P<0.05);⑤结果表明,人脐带间充质干细胞来源外泌体可以减轻脓毒症脑病小鼠血脑屏障损伤,降低血脑屏障通透性,其作用机制与外泌体抑制高迁移率族蛋白B1/Toll样受体4/基质金属蛋白酶9相关炎症通路有关。

关键词： 人工智能   蛋白质设计   专利分析  

摘要： 人工智能技术的突破性发展为蛋白质设计带来了革命性变革,推动其从传统实验试错模式转向基于数据驱动的“按需定制”范式。本文基于专利视角,利用全球专利数据库并结合生物信息学关键词、分类号构建检索式,系统分析了人工智能辅助蛋白质工程技术的全球发展态势。研究结果显示:2019年后,受AlphaFold等深度学习模型技术突破及政策驱动,全球专利公开数量呈现爆发式增长,年均增速超50%,中国以57.6%的占比成为核心参与者,与美国形成双极竞争格局(合计贡献近80%专利);专利技术构成集中于生物统计学、分子结构分析与生物学建模,核心创新主体中DeepMind通过“预测-设计-验证”闭环引领算法革新;中美对比分析表明,美国凭借高被引专利与域外布局占据技术壁垒,中国专利总量虽领先,但创新主体国际化布局明显不足且高价值专利稀缺,未来需通过参与国际化布局与提升专利申请质量进一步提升全球竞争力。