课程文献中心 更多>>

关键词： 代谢相关脂肪性肝病   蛋白质组学   生物标志物   ADGRG1   精准医疗  

摘要： 代谢相关脂肪性肝病(MASLD)已成为全球疾病负担最重的慢性肝病之一，其诊疗理念已从单纯的肝病管理，转向以代谢紊乱为核心的多系统疾病的综合管理。当前传统无创指标在解析MASLD分子机制及实现个体化风险分层方面存在局限性。蛋白质组学技术可通过分析疾病特异性标志物，为MASLD的精准诊疗提供新方案。本文系统梳理MASLD相关蛋白质组学研究进展，重点探讨黏附G蛋白偶联受体G1(ADGRG1)作为兼具肝脏损伤与肝外风险预警的标志物的潜在价值，分析当前蛋白质组学面临的核心挑战，并展望多组学整合在MASLD精准医疗中的应用前景。

关键词： 诺丽果渣   氨基酸   多酚   皂苷   糖类  

摘要： 目的 系统分析诺丽果渣中多酚、黄酮、多糖等11类营养功能成分。方法 参照国家或行业标准方法,对诺丽果渣中多酚、黄酮、多糖及其单糖组成、蛋白多肽、皂苷、膳食纤维和挥发性成分等进行测定分析。结果 诺丽果渣中总黄酮含量为57.88 mg/g,总多酚为4.57 mg/g,总多糖为37.65 mg/g,粗蛋白为8.16%,总皂苷为19.9 mg/g;黄酮酚类以芦丁(28.86 mg/g)为主,蛋白质水解后富含天冬氨酸(7.99 mg/g)、谷氨酸(6.88 mg/g)和胱氨酸(7.66 mg/g)。必需氨基酸占总氨基酸的33.8%,接近世界卫生组织(World Health Organization, WHO)/联合国粮食及农业组织(Food and Agriculture Organization of the United Nations, FAO)推荐值(36%)。多糖主要由甘露糖(33.49%)、葡萄糖醛酸(2.56%)、半乳糖醛酸(27.00%)、葡萄糖(24.89%)、半乳糖(8.77%)和阿拉伯糖(3.29%)组成。膳食纤维中纤维素、半纤维素和木质素含量分别为32.10%、13.27%和20.27%。挥发性成分中9,12-十八碳二烯酸(Z,Z)-甲酯含量最高(64.32%),并含有辛酸(1.67%)和角鲨烯(11.47%)。结论 本研究系统分析了诺丽果渣的主要功能成分,为其进一步高值化开发利用提供了数据与实践依据。

摘要： 美国加利福尼亚大学洛杉矶分校的Keriann M. Backus团队发现了使用硅醚激活的化学蛋白质组学的小分子结合位点。近日，相关研究成果发表于《自然-化学》。在化学探针与药物发现研究中，基于质谱的化学蛋白质组学与光亲和标记的结合，已成为靶标发现和作用机制解析的主流策略。然而，光交联产生的肽段-化合物加合物给定量结合位点的发现带来了分析上的挑战。研究人员建立了“硅醚赋能化学蛋白质组相互作用与靶标结合”（SEE-CITE）方法。

关键词： 黑水虻幼虫   猪   消化能   代谢能   回肠氨基酸消化率  

摘要： 本研究旨在测定黑水虻幼虫粉（black soldier fly larvae meal， BSFLM）对生长育肥猪的消化能（digestible energy，DE）、代谢能（metabolizable Energy，ME）及标准回肠氨基酸消化率(standardized ileal digestibility of amino acids，SID AA)。试验一，选取18头健康、体重相近（43.5±1.7 kg）的[杜×（长×大）]阉公猪，随机分为玉米饲粮（corn diet， CD）、玉米-豆粕饲粮（corn-soybean meal diet， CSBMD）和黑水虻幼虫粉饲粮（BSFLM diet， BSFLMD），每组6头猪，试验期12 d（7 d适应期 + 5 d粪尿收集期），采用全收粪尿法测定玉米、豆粕和BSFLM的猪DE和ME。试验二，选取9头回肠瘘管猪（50.8±2.4 kg），采用3×2的不完全拉丁方设计，配制BSFLM半纯合饲粮、豆粕半纯合饲粮和无氮饲粮，每组3头猪，共2期，每期7 d（5 d适应期+2 d回肠食糜收集期），采用外源指示剂法结合无氮饲粮法测定BSFLM和豆粕的猪SIDAA。结果表明：BSFLM的CP含量（38.71%）与豆粕相近，但EE（36.16%）、Ca及各种氨基酸含量均高于豆粕，且富含多种不饱和脂肪酸和功能性脂肪酸。BSFLM的猪DE和ME分别为21.94和19.47 MJ·kg-1，显著高于豆粕和玉米（P<0.01）。BSFLM中，除色氨酸外，其它必需氨基酸的猪SID均超过80%，其中赖氨酸的SID显著高于豆粕（P<0.05），蛋氨酸、苏氨酸、亮氨酸、异亮氨酸和苯丙氨酸的SID也呈提高趋势。综上，BSFLM在猪饲料中的整体营养价值优于豆粕，在猪饲料中适量替代豆粕可减少能量原料与晶体氨基酸的添加。

摘要： 在创新驱动发展战略和健康中国战略深入推进的关键时期，精准医疗成为破解重大疾病防治难题、提升全民健康水平的关键力量。核酸适体作为生物医学领域的前沿技术，凭借其独特的分子属性和功能优势，在疾病诊断、靶向治疗、药物递送等领域展现出巨大潜力，正为构建更高效、更精准、更普惠的精准医疗服务体系提供关键支撑。核酸适体是由20～80个核苷酸构成的单链DNA或RNA分子，具备强稳定性、高重复性、免疫原性低或无免疫原性和位点特异化学修饰敏感性四个关键特性。

关键词： 夏枯草多糖   理化特征   SARS-CoV-2   刺突蛋白   病毒进入抑制剂   细胞保护  

摘要： 目的 探讨夏枯草多糖（PVP）对严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）刺突蛋白（SP）诱导细胞损伤的保护作用及其阻断病毒进入的潜在机制。方法 通过水提醇沉法制备PVP，采用多角度激光光散射-示差折光联用技术（SEC-MALLS-RI）测定其绝对分子量，通过离子色谱及扫描电镜表征其单糖组成与微观形态，将过表达人血管紧张素转换酶2（ACE2）的人胚胎肾293T细胞（hACE2-293T细胞）分为SP 1.5625、3.125、6.25、12.5、25 mg·L-1组、PVP 3.125、6.25、12.5、25、50、100 mg·L-1组和SP+PVP(PVP0、3.125、6.25、12.5、25、50、100 mg·L-1处理2 h后加入SP 25 mg·L-1)组，分别作用48 h，通过CCK-8法检测细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡，使用PVP 3.125、6.25、12.5、25、50和100 mg·L-1与携带荧光素酶报告基因的Omicron假病毒（PsV）处理hACE2-293T细胞，采用以下4种方式进行时间添加实验：多糖与病毒预孵育、多糖与细胞预孵育、病毒吸附期间加入多糖和病毒吸附后加入多糖，同时设细胞对照和PsV组，评估PVP对SP介导的病毒进入过程的影响。采用表面等离子共振（SPR）技术定量检测PVP与SP、ACE2蛋白的结合动力学及竞争抑制效能。结果 PVP由2个分子量的多糖构成，绝对重均分子量（Mw）分别为35.119 ku（76.81%）和7.348 ku（23.19%）；主要单糖组分和摩尔百分比分别为葡萄糖26.25%、木糖22.49%、半乳糖19.37%和鼠李糖11.96%；表面较平滑，呈不规则团块状聚集。与细胞对照组相比，PVP组hACE2-293T细胞活力无明显变化，细胞凋亡率显著降低；SP 25 mg·L-1组细胞活力显著降低，细胞凋亡率显著增加。与SP 25 mg·L-1组相比，PVP 12.5、25、50和100 mg·L-1处理可显著抑制SP诱导的hACE2-293T细胞活力下降和凋亡。时间添加实验结果显示，PVP在多糖与病毒预孵育、多糖与细胞预孵育及病毒吸附期间加入多糖，3种给药模式下均能显著抑制假病毒进入，半数抑制浓度(IC50)分别为43.11、18.91和25.25 mg·L-1。SPR动力学分析表明，PVP与SP和ACE2蛋白均具有较高的表观亲和力，表观平衡解离常数（KD）分别为7.624和5.560μmol·L-1，且随PVP浓度升高SP和ACE2蛋白的结合响应值呈明显下降趋势。结论 PVP可直接干扰SP与ACE2受体的结合，有效阻断SP介导的病毒吸附和进入，对SP诱导的细胞损伤发挥显著保护作用。

关键词： 曲茎石斛   WRKY转录因子   低温胁迫   基因克隆   表达分析  

摘要： 为了挖掘曲径石斛的抗寒机制，扩大曲径石斛在北方栽培范围，提高其药用价值，以曲茎石斛为材料，在低温(4℃)胁迫3、6、9、12、24、48 h后分别采集根、茎、叶不同组织部位，根据兰科相关物种WRKY基因序列设计特异性引物，以c DNA为模板进行PCR扩增，对测序结果进行比对分析，并对WRKY48基因进行系列生物信息学分析，同时采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测WRKY48基因在不同组织不同时间低温胁迫下的表达水平。研究结果表明，获得的曲茎石斛WRKY48基因片段长度为969 bp，该基因编码322个氨基酸，蛋白分子量为34.99 ku;理论等电点(pI)为5.39，为亲水性蛋白，定位于细胞核，含有特征性的WRKY保守结构域。实时荧光定量分析结果表明，WRKY48基因在曲茎石斛根、茎、叶中均有表达，其中在茎中的表达量最高，在叶中表达量最低;茎、叶中WRKY48基因的相对表达量在低温胁迫处理24 h达到最高，明显高于处理组0 h;根中WRKY48基因的相对表达量在低温胁迫处理6 h达到最高，且明显高于处理0 h。推测在曲茎石斛应答低温胁迫中WRKY48基因可能起到关键的调控作用，该结果可为下一步研究曲茎石斛的抗寒机制和选育抗寒性品种提供基础理论参考。

关键词： CRISPR-Cas技术   动物病原体   多重检测   反式切割活性  

摘要： 病原体感染呈现多样性和复杂性的趋势，给动物疾病诊断和防治带来了严峻挑战。在病原体多重检测的过程中，传统核酸检测方法如聚合酶链式反应、等温扩增技术和全基因组测序存在操作复杂、成本高昂、依赖专业设备和人员等局限，因而迫切需要一种准确、快捷、便携的病原体多重检测技术。CRISPR-Cas系统是存在于许多原核生物中的适应性免疫系统。而基于CRISPR-Cas的反式切割技术，是一种能精准靶向和切割核酸的新型检测技术，该技术无需专业设备，即可在现场实现amol/L水平的检测。本文通过梳理近5年来CRISPR-Cas系统相关的研究进展，重点对CRISPR-Cas反式切割系统的分类，CRISPR-Cas反式切割技术在动物病原检测中的研究成果和应用现状，以及CRISPR-Cas反式切割系统的信号富集策略进行综述，并进一步阐述CRISPR-Cas技术在动物多重病原检测中的优势和发展前景，以期为进一步发展基于CRISPR-Cas反式切割系统的多重核酸检测技术提供参考。

关键词： H9N2亚型禽流感病毒   免核酸提取技术   逆转录实时荧光定量PCR   磁珠法  

摘要： 目的系统评估多种免核酸提取技术应用于H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus, AIV)核酸检测的可行性。方法选取12株H9N2 AIV鸡胚株和细胞株, 统一稀释至血凝滴度1∶8, 制成H9N2亚型病毒工作液。分别采用不同温度和加热时间、冷冻-解冻循环、0.5% Triton X-100、蛋白酶K及机械研磨等免核酸提取技术处理, 处理后直接作为模板进行逆转录实时荧光定量PCR(reverse transcription quantitative real-time polymerase chain reaction, RT-qPCR)检测, 以磁珠法提取核酸作为对照, 比较各组Ct值差异。结果所有免核酸提取技术的Ct值均高于磁珠法(P<0.05)。80 ℃加热3 min后H9N2 AIV的Ct值为21.30±1.29, 较磁珠法的Ct值(15.38±1.51)高约5.92个循环, 0.5% Triton X-100作用后H9N2 AIV的Ct值为18.76±1.31, 较磁珠法高约3.38个循环。蛋白酶K单独或与0.5% Triton X-100联合作用检测结果均为阴性。结论 80 ℃加热3 min为本研究评估方法内相对最佳的免核酸提取技术, 0.5% Triton X-100在H9N2 AIV检测中表现良好。本研究为实验室H9N2 AIV分离株的快速初步筛查提供了简便、高效的检测策略。

关键词： 妊娠期糖尿病   KCNQ1基因   单核苷酸多态性   交互作用  

摘要： 目的 探讨缓慢激活延迟整流钾通道（postassium voltage-gated channel subfamily KQT-like member 1, KCNQ1）基因多态性与妊娠期糖尿病（gestational diabetes mellitus, GDM）的关联及交互作用。方法 采用病例对照研究设计，于2022年7月至2023年6月在北京大学第一医院选取GDM患者（n=503）和年龄匹配的健康对照组（n=503），采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法对KCNQ1基因的5个单核苷酸多态性位点（rs2237895、rs2237896、rs151290、rs8234和rs2283228）进行基因型检测，采用条件logistic回归分析各位点与GDM的关联；采用广义多因子降维法分析位点之间的交互作用，采用多元线性回归分析各位点与血糖水平的关联。结果 校正孕前体质指数、产次、妊娠合并慢性高血压和妊娠24周增重后，KCNQ1基因rs2237896位点（OR=1.44, 95%CI:1.06～1.95, P=0.020）和rs2283228位点在显性模型下与GDM发病风险相关联（OR=1.41, 95%CI:1.04～1.90, P=0.025）。广义多因子降维法发现rs2237896和rs2283228对GDM发病风险存在有统计学意义的交互作用（P=0.011）。校正孕前体质指数、产次、妊娠合并慢性高血压和妊娠24周增重后，rs2237896位点（β=0.070, 95%CI:0.010～0.130, P=0.023）、rs151290位点（β=0.094, 95%CI:0.032～0.155, P=0.003）、rs8234位点（β=0.070, 95%CI:0.001～0.138, P=0.047）和rs2283228位点在显性模型下与空腹血糖水平相关（β=0.076, 95%CI:0.017～0.134, P=0.012）;rs2237896(β=0.260, 95%CI:0.007～0.513, P=0.044)和rs2283228位点在显性模型下与75克口服葡萄糖耐量试验1 h血糖水平相关（β=0.347, 95%CI:0.098～0.596, P=0.006）。结论 KCNQ1基因rs2237896和rs2283228位点多态性与GDM存在关联，且二者对GDM存在交互作用。