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关键词： 霍山石斛   多糖   提取工艺   纯化工艺   正交试验  

摘要： 目的 优化霍山石斛多糖提取纯化工艺。方法 在单因素试验基础上，以料液比、提取时间、提取次数为影响因素，多糖提取率为评价指标，正交试验优化提取工艺；以酶解温度、酶料比、酶解时间为影响因素，脱除率为评价指标，正交试验优化淀粉酶脱淀粉工艺、胰蛋白酶除蛋白工艺。再检测精制多糖理化性质。结果 最佳提取工艺为液料比1∶40、提取时间2 h、提取次数2次，多糖提取率为37.60%。最佳脱淀粉工艺为酶解温度85℃、酶料比6.6∶1、酶解时间50 min,脱除率为97.91%。最佳脱蛋白工艺为酶解温度40℃、酶料比3 500∶1、酶解时间40 min,脱除率为97.73%。精制多糖中碳水化合物含量为95.77%,糖醛酸含量为1.25%,乙酰基含量为6.93%,由甘露糖-葡萄糖(4.71∶1)组成。结论 该方法稳定易行，可用于提取纯化霍山石斛多糖。

关键词： 山慈菇多糖   肝细胞癌   转录组学   细胞焦亡   NLRP3信号通路   甘露糖   葡萄糖  

摘要： 目的 分析山慈菇多糖（Cremastrae Pseudobulbus Pleiones Pseudobulbus polysaccharide,CPP）的化学组成并进行多糖结构表征，并探究其抗肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）的药效及作用机制。方法 采用苯酚-硫酸法、考马斯亮蓝法检测CPP样品的总糖及蛋白含量，结合紫外光谱法、红外光谱法、扫描电子显微镜分析、PMP柱前衍生化-HPLC法、凝胶渗透色谱对CPP进行结构表征。雄性Balb/c小鼠于右前肢腋下接种H22原代细胞，随机分为模型组、索拉非尼（30 mg/kg）组及CPP低、中、高剂量（200、400、800 mg/kg）组，每组10只，另取10只正常小鼠作为对照组。连续给药16 d，计算抑瘤率；采用苏木素-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色法观察小鼠肿瘤组织病理变化；取模型组和CPP中剂量组小鼠肿瘤组织，利用转录组学测序技术分析CPP发挥抗HCC活性的作用机制，结合京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）、基因本体（gene ontology,GO）富集分析等探究CPP抗HCC的关键信号靶点及作用通路；通过Western blotting、qRT-PCR、ELISA法进行体内机制验证。结果 CPP中的总糖质量分数为95.19%，蛋白质量分数为0.33%。结构表征结果显示，CPP是以α构型糖苷键连接的吡喃型糖环，呈不规则卷曲状，由甘露糖和葡萄糖（物质的量比为2.388∶1）组成，重均相对分子质量为1.27×10～5。动物实验结果显示，CPP低、中、高剂量组对H22荷瘤小鼠模型的抑瘤率分别为45.13%、48.68%、35.94%，抗HCC最佳剂量为400 mg/kg；病理切片显示模型组肿瘤组织病变显著，各给药组均有所改善，以CPP中剂量组胞核碎裂更为明显。转录组学结果显示CPP可能通过调节NOD样受体热蛋白结构域3(NOD like receptor family pyrin domain containing 3,NLRP3)信号通路发挥抗HCC作用。Western blotting结果显示，与模型组比较，CPP中剂量组小鼠肿瘤组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(cystein-asparate protease-1,Caspase-1)和消皮素D(gasdermin D,GSDMD)表达水平显著降低（P<0.05、0.01、0.001）;ELISA结果显示，与模型组比较，CPP中剂量组肿瘤组织中白细胞介素-1β(interleukin 1β,IL-1β)和IL-18水平显著降低（P<0.001）。结论 CPP的抗HCC作用可能与抑制NLRP3炎症小体的激活，阻断Caspase-1/GSDMD介导的细胞焦亡通路有关。

摘要： 胃癌为消化系统高发恶性肿瘤，化疗耐药与远处转移是临床治疗主要瓶颈。铁死亡是一类铁离子依赖、脂质过氧化累积介导的程序性细胞死亡，广泛参与胃癌增殖、侵袭、转移及化疗耐药进程。蛋白质翻译后修饰（post-translational modification,PTM）作为蛋白质功能的核心调控方式，可通过泛素化、磷酸化、棕榈酰化、乳酸化等共价修饰，动态调控铁死亡核心蛋白的稳定性、活性及相互作用，进而决定胃癌细胞铁死亡敏感性。当前相关研究已突破单修饰、单靶点的线性研究思路，聚焦多修饰交叉串扰调控网络。全文系统梳理铁死亡调控通路，阐释各类PTM调控胃癌铁死亡的分子机制与串扰规律，总结当前研究进展并展望未来方向，为开发靶向PTM-铁死亡轴的胃癌治疗策略提供理论参考。

关键词： 淀粉   非淀粉多糖   肠道微生物   短链脂肪酸   链长分布   晶型结构  

摘要： 多糖是单胃动物日粮中含量最高、结构最为多样的一类营养物质,其化学结构显著影响着机体能量释放、肠道微生态环境和代谢稳态.过去十多年,链长分布测定、淀粉晶体解析以及微生物组学的发展,使多糖在动物体内的消化过程被重新审视:淀粉的酶解不仅由唾液淀粉酶、胰淀粉酶与刷状缘酶逐步完成,还受到细胞壁、蛋白基质、食糜流动和pH等生理因素的精细调控,其多尺度结构决定了葡萄糖释放速率及抗性淀粉的形成;非淀粉多糖主要在后肠依赖微生物通过结构识别、寡糖截留与逐级发酵并生成短链脂肪酸,以支持机体能量供应、肠道屏障功能和免疫调节.本文综述多糖的化学结构、消化生理和微生物生态的最新研究进展,总结多糖的体内消化规律,并强调从底物结构到微生物功能的因果关联,为精准营养设计与改善肠道利用效率提供参考.

关键词： 玄参   多糖   肝靶向作用   荧光标记物   组织分布   高效凝胶渗透色谱-荧光检测器(HPGPC-FLD)  

摘要： 目的 探讨玄参多糖肝靶向作用。方法 异硫氰酸荧光素构建荧光标记物，考察其在PBS、血浆中的稳定性，分析其在小鼠体内的组织分布，高效凝胶渗透色谱-荧光检测器(HPGPC-FLD)法测定其在肝脏中的含量。结果 荧光标记率为75%,稳定性良好。多糖仅在肝脏中出现荧光，而脑、心、脾、肺、肾中均未发现，并且其含量在给药后1～8 h升高，8 h达到最大值，24 h基本消除。结论 玄参多糖具有良好的肝靶向性，可为将其作为肝靶向制剂的载体材料提供依据。

关键词： GhMYB1   陆地棉   干旱   表达特性   GUS  

摘要： 植物MYB家族成员庞大且广泛存在于各物种中，在参与植物的生长发育、抗病性、抗逆性等方面发挥重要作用。前期研究发现陆地棉GhMYB1转录因子与抗旱基因GhHSP70-26优异启动子互作，推测GhMYB1参与了干旱响应途径。为探究GhMYB1响应干旱胁迫的特点，本研究对陆地棉GhMYB1进行克隆，结果表明，其编码区全长为1 244 bp，编码421个氨基酸；亚细胞预测GhMYB1定于细胞核中，属于R2R3型MYB转录因子。通过转录组数据分析发现，与根和茎相比，GhMYB1在陆地棉叶片中的表达量最高，并且其表达受到盐、高温和干旱诱导，尤其是干旱胁迫12 h时表达量最高。为验证干旱胁迫下GhMYB1的表达特性，利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法测定自然干旱胁迫下抗旱和敏感陆地棉材料叶片中GhMYB1的表达量，发现二者均在干旱胁迫7 d时表达量达到最高。为了解GhMYB1响应干旱诱导的机制，克隆了其启动子序列1 737 bp，利用Plant CARE分析发现其上包含多个与逆境响应和激素响应元件；进一步构建pGhMYB1:GUS植物表达载体，瞬时转化烟草，与未胁迫时相比，甘露醇模拟干旱胁迫3 h和12 h后GUS蛋白活性逐渐增高。上述试验结果表明陆地棉GhMYB1基因能响应干旱胁迫，其启动子具有干旱诱导活性，推测该基因可能在陆地棉抗旱中发挥重要作用，这为进一步探究其抗旱功能及分子调控机制提供了重要的理论基础。

关键词： 核酸定量检测   人类免疫缺陷病毒   抗体确证   抗体不确定  

摘要： 目的 分析常规人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)筛查人群应用HIV-1核酸定量检测补充试验在HIV感染诊断中的价值及临床意义。方法 选取河南省各艾滋病检测实验室在2023年1月—2024年12月进行HIV抗体筛查有反应并送确证实验室样本9 976份，经抗体确证试验后对HIV-1抗体不确定样本进行HIV-1核酸定量检测，并分析其检测结果与抗体阳转随访结果的一致性。结果 9 976份HIV抗体筛查有反应样本均予以抗体确证试验，确证阳性7 816份(78.35%),不确定1 254份(12.57%),阴性906份(9.08%)。1 254份抗体确证不确定样本中检出HIV-1核酸定量检测值>5 000拷贝/mL样本343份，占27.35%。HIV抗体确证不确定样本中，HIV-1核酸定量检测>5 000拷贝/mL的样本其抗体带型以gp160带型、p24+gp160带型及gp41+gp120+gp160带型为主，其占比均高于同数目抗体条带组内其他带型(P<0.05)。经随访，HIV-1核酸定量检测值>5 000拷贝/mL的343份样本抗体阳转率为99.71%,50～5 000拷贝/mL的742份样本抗体阳转率为35.54%,<50拷贝/mL的169份样本未出现抗体阳转，其HIV-1核酸定量结果与HIV抗体阳转结果的一致性Kappa值为0.92。结论 对HIV抗体确证不确定或阴性样本采用核酸定量检测进行补充试验，可及时有效筛查出HIV感染人群，为HIV早期诊断提供依据。

关键词： OBE理念   产教融合   干细胞质量控制   人才培养  

摘要： 随着产业的快速发展和医学技术的不断进步，培养复合型医学人才的需求日益迫切。以干细胞临床转化质控需求为导向的人才培育路径，可输送具备质控思维与实操能力的医学检验技术人才。本研究基于OBE理念，探讨产教融合背景下干细胞质量控制检验人才培养的新模式，构建“基础-应用-创新”递进式培养体系。同时，通过高校与企业双方合作，在课程设置上融合理论与实操，推行双导师制，引入虚拟仿真平台与真实临床案例，并建立三级考核制度，以期强化实践教学，实现合作育人，助力健康中国战略。

关键词： 鸡血藤   SsLAR2   儿茶素   生物信息学   基因功能  

摘要： 目的 克隆鸡血藤（密花豆Spatholobus suberectus的干燥藤茎）无色花色素还原酶基因Ss LAR2，开展生物信息学及基因功能研究，以期解析其在儿茶素生物合成中的作用。方法 以鸡血藤c DNA作为模板，通过RT-PCR技术克隆Ss LAR2，并对其开展系统的生物信息学分析。构建Ss LAR2过表达载体，遗传转化本氏烟草，测定转基因植株中总黄酮含量、儿茶素含量以及儿茶素合成途径中关键酶基因的表达水平。结果 Ss LAR2基因全长1 092 bp，编码363个氨基酸，相对分子质量为40 513.75，等电点为5.75。Ss LAR2蛋白为亲水性蛋白，存在跨膜区域，与木豆、毒羊豆及相思子等多种植物中的LAR蛋白同源性较高。Ss LAR2启动子序列中包含光响应元件，以及茉莉酸甲酯、赤霉素、水杨酸等多种植物激素的响应元件。基因功能分析表明，过表达Ss LAR2能显著提高转基因植株中总黄酮和儿茶素的含量以及儿茶素合成途径中关键酶基因的表达水平。结论 鸡血藤Ss LAR2基因能够促进植物的儿茶素合成，为深入解析鸡血藤儿茶素生物合成的调控机制，开展相关的分子育种工作提供重要的基因资源和理论依据。

摘要： 近期，国际期刊《食品》（Foods）发表了一项关于山楂活性成分的最新研究，为高血脂人群带来了天然食疗新方向。研究团队将小鼠分为正常组、高脂组和山楂多糖组，其中的高脂组小鼠体重和脏器重量显著增加，脂肪堆积明显，血清脂质水平升高。实验连续8周对小鼠进行山楂多糖干预，即用实验模拟长期油腻饮食，观察山楂多糖对体重、血脂、肝脏及肠道菌群的影响。