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关键词： 银屑病   铁皮石斛多糖   鞘脂代谢   鞘氨醇激酶1  

摘要： 目的探究铁皮石斛多糖(DOP)通过介导鞘氨醇激酶1(SPHK1)水平调控鞘脂代谢改善银屑病样状态的作用及具体机制。方法建立白细胞介素(IL)-22诱导的银屑病细胞模型和咪喹莫特(IMQ)诱导的动物模型,并进行DOP干预。通过KEGG通路富集分析银屑病患者脂质代谢物差异;CCK-8法检测HaCaT细胞增殖活力;ELISA检测炎症因子和磷酸鞘氨醇-1-磷酸(S1P)水平;Western blot检测鞘脂代谢和NF-κB通路相关蛋白表达水平;qPCR检测SPHK1 mRNA水平;HE染色观察病理状态;银屑病面积和严重程度指数(PASI)评分评估银屑病样症状。结果KEGG通路富集分析显示银屑病进展中伴随鞘脂代谢紊乱及S1P水平上调。细胞实验中,与对照组相比,IL-22组细胞增殖活性显著上调,炎症因子IL-17A、IL-23及IL-1β水平显著上调,鞘脂代谢相关蛋白SPHK1、SPHK2、SPTLC2、ASAH1水平及S1P水平均显著上调(P<0.05);与IL-22组相比,DOP干预后细胞增殖活性显著下调,炎症因子水平显著下调,鞘脂代谢相关蛋白均下调,SPHK1变化差异最显著,S1P水平显著下调(P<0.05)。qPCR和Western blot验证过表达(overexpression,OE)-SPHK1成功转染细胞。OE-SPHK1进一步提高了IL-22造成的S1P高表达,DOP干预后S1P水平显著下调(P<0.05)。Western blot结果显示,DOP干预能显著下调细胞模型中IKKβ、p-p65/p65水平,SPHK1过表达会抑制DOP的干预效果(P<0.05)。动物实验进一步证实了DOP能够有效缓解小鼠银屑病样皮肤损伤和炎症,并且抑制鞘脂代谢蛋白表达和NF-κB通路激活。结论SPHK1可能是DOP恢复鞘脂代谢平衡,抑制NF-κB通路激活改善银屑病模型的异常增殖和炎症反应的关键作用靶点。

关键词： 脱细胞真皮基质   脂肪间充质干细胞   外泌体   烧伤   皮肤   炎症   凋亡   创面愈合  

摘要： 背景:脱细胞真皮基质、脂肪间充质干细胞外泌体均可促进创面修复,但二者联合应用于烧伤创面是否有治疗效果目前尚缺乏研究。目的:探讨脱细胞真皮基质联合脂肪间充质干细胞外泌体对深Ⅱ度烧伤创面愈合的促进作用。方法:取40只SD大鼠,制作深Ⅱ度烧伤创面,随机分为对照组、脱细胞真皮基质组、脂肪间充质干细胞外泌体组、脱细胞真皮基质+脂肪间充质干细胞外泌体组(以下简称为联合组),每组10只。给予相应治疗后,观察创面愈合情况,治疗2,8,14 d取创面组织行病理组织学观察及免疫组织化学染色,治疗2 d行免疫荧光染色及TUNEL染色观察细胞凋亡情况。结果与结论:①治疗14 d,联合组创面愈合率及愈合面积均高于其他3组(P<0.05);②苏木精-伊红染色显示,与其他3组比较,联合组创面上皮化更完整,胶原纤维排列更整齐;Masson染色显示,与其他3组比较,联合组胶原纤维含量增多(P<0.01);③免疫组化显示,联合组促炎症因子表达低于其他3组(P<0.01);抗炎症因子表达高于其他3组(P<0.01);联合组新生血管多于其他3组(P<0.01);④免疫荧光显示,联合组BAX和Caspase3平均荧光强度低于其他3组(P<0.01);而BCL-2平均荧光强度高于其他3组(P<0.01);⑤TUNEL染色显示,联合组凋亡指数低于其他3组(P<0.01)。结果表明,脱细胞真皮基质+脂肪间充质干细胞外泌体联合治疗可促进胶原纤维再生,抑制炎症反应及细胞凋亡,加快烧伤创面的愈合。

关键词： 盐津乌骨鸡   饲粮赖氨酸水平   氨基酸模式   生长性能   养分表观代谢率  

摘要： 【目的】试验旨在探讨1~42日龄盐津乌骨鸡适宜的赖氨酸水平及氨基酸平衡模式。【方法】采用2因素试验设计,设置5个饲粮赖氨酸水平(0.90%、1.00%、1.10%、1.20%、1.30%)和3个氨基酸模式(模式Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ,赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、精氨酸的比例分别为:100∶45∶73∶114、100∶40∶67∶105、100∶38∶63∶106)。所有饲粮的代谢能水平均为12.6 MJ/kg、粗蛋白质(CP)水平为18%。选取1日龄健康、体重相近的盐津乌骨鸡450只,随机分入15个组,每个组5个重复,每个重复6只鸡,试验期42 d。试验期间以重复为单位测定试验鸡生产性能;31~33日龄进行代谢试验,测定饲粮总能、粗蛋白质和必需氨基酸的代谢率;43日龄时,每重复选取2只试验鸡采集血液样品,测定血清生化指标。【结果】①饲粮赖氨酸水平为1.10%和1.20%时,试验鸡终末体重(FBW)和平均日增重(ADG)显著高于0.90%和1.00%赖氨酸组,料重比(F/G)显著低于1.00%赖氨酸组(P<0.05);氨基酸模式Ⅱ时,试验鸡的FBW和ADG较高,F/G低于其他模式(P<0.05);两试验因素对盐津乌骨鸡的FBW、ADG和F/G有显著的交互作用(P<0.05)。②氨基酸模式Ⅲ时,试验鸡血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性显著低于其他模式(P<0.05);两试验因素对盐津乌骨鸡血清白蛋白(ALB)含量有显著的交互作用(P<0.05),赖氨酸水平为1.30%时,模式Ⅱ的试验鸡血清中白蛋白含量最高。③氨基酸模式Ⅱ时,试验鸡总能、粗蛋白质表观代谢率以及部分氨基酸(蛋氨酸、组氨酸和亮氨酸)表观利用率显著高于模式Ⅲ(P<0.05);两试验因素对盐津乌骨鸡的蛋氨酸表观利用率有显著的交互作用(P<0.05),模式Ⅱ下,1.30%赖氨酸组试验鸡的蛋氨酸表观利用率较高。【结论】在本试验条件下,综合生长性能、血清生化指标和养分表观代谢率的结果,推荐1~42日龄盐津乌骨鸡的适宜赖氨酸水平为1.10%~1.20%,赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、精氨酸的比例为100∶40∶67∶105。

关键词： 2型糖尿病   酸敏感离子通道1/钙离子-钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ通路,ASIC1/CaMKⅡ通路   黄芪多糖   细胞焦亡  

摘要： 目的:探究黄芪多糖对2型糖尿病(T2DM)大鼠心肌组织酸敏感离子通道1(ASIC1)/钙离子-钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ(CaMKⅡ)通路及心肌细胞焦亡的影响。方法:将30只无特定病原体(SPF)级SD雄性大鼠随机分为对照组、T2DM组、黄芪多糖组,每组10只。T2DM组、黄芪多糖组大鼠高脂高糖喂养4周后腹腔注射链脲佐菌素(STZ)35 mg/kg,72 h后若随机空腹血糖(FPG)>16.7 mmol/L则表明模型建立成功;黄芪多糖组大鼠继续灌胃黄芪多糖(400 mg/kg),持续8周;对照组喂养普通饲料。血糖仪检测大鼠FPG;试剂盒检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18含量;超声心动图检测左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、左室舒张末期内径(LVEDD)、二尖瓣舒张早期流速峰值(E)/二尖瓣舒张晚期流速峰值(A)比值;采用苏木精-伊红(HE)检测大鼠心肌组织病理形态;采用Masson染色检测大鼠心肌组织中胶原沉积情况;采用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测ASIC1、CaMKⅡ、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)抗体、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、C半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-1蛋白水平;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测ASIC1、CaMKⅡ、NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA水平。结果:与对照组相比,T2DM组大鼠FPG、TC、TG、IL-1β、IL-18增高(P<0.05);与T2DM组相比,黄芪多糖组大鼠FPG、TC、TG、IL-1β、IL-18降低(P<0.05)。与对照组相比,T2DM组大鼠LVEF、E/A、LVFS减少,LVEDD增加(P<0.05);与T2DM组相比,黄芪多糖组大鼠LVEF、E/A、LVFS增加,LVEDD减小(P<0.05)。与对照组相比,T2DM组大鼠心肌纤维紊乱、断裂,心肌间隙可见胶原大量沉积;与T2DM组相比,黄芪多糖组大鼠心肌纤维损伤改善,心肌间隙胶原沉积减少。与对照组相比,T2DM组大鼠心肌组织ASIC1、CaMKⅡ、NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白及mRNA表达增加(P<0.05);与T2DM组相比,黄芪多糖组大鼠心肌组织ASIC1、CaMKⅡ、NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白及mRNA表达降低(P<0.05)。结论:黄芪多糖可改善T2DM大鼠心功能及心肌组织病理损伤,下调ASIC1/CaMKⅡ通路,并抑制心肌细胞焦亡。

关键词： 树莓粗多糖   中波紫外线   皮肤光损伤   氧化应激   代谢组学  

摘要： 该研究采用非靶向代谢组学初步探究树莓粗多糖(raspberry crude polysaccharides,RCP)缓解皮肤中波紫外线(ultraviolet B,UVB)光损伤的作用机制。采用UVB诱导BALB/c小鼠皮肤光损伤模型,苏木精-伊红染色观察小鼠皮肤组织病理变化;微板法检测小鼠皮肤组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)活力;酶联免疫吸附测定小鼠皮肤组织中IL-6、TNF-α和基质金属蛋白酶3(matrix metalloproteinases-3,MMP-3)水平。通过非靶向代谢组学检测小鼠皮肤代谢物的变化。结果表明,RCP能够缓解UVB诱导的表皮增厚、局部角化过度,纤维组织增生和炎性细胞浸润的症状;明显提高UVB光损伤小鼠皮肤组织中SOD和CAT活力,降低IL-6、TNF-α和MMP-3水平。通过非靶向代谢组学从小鼠皮肤中共鉴定出58种差异代谢产物。富集分析显示,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢途径是RCP干预后最显著富集的氨基酸代谢途径。相关性分析结果表明,丙氨酸与SOD呈显著正相关,DL-天冬酰胺、谷氨酸、L-谷氨酰胺和N-乙酰基-L-天冬氨酸与SOD呈显著负相关。综上,RCP对UVB皮肤光损伤的防护作用可能是通过调控丙氨酸、天冬氨酸及谷氨酸代谢途径,从而减轻UVB对皮肤造成的氧化应激。

关键词： 氨基酸   维生素   早产儿   宫外生长发育迟缓   影响因素  

摘要： 目的探讨早期足量补充氨基酸复合维生素治疗早产儿宫外生长发育迟缓(EUGR)的有效性。方法选取2021年9月至2023年4月在邯郸市第一医院出生及治疗的94例EUGR早产儿作为研究对象(迟缓组),根据干预方式的不同分为实验组(高剂量氨基酸复合维生素)及对照组(低剂量氨基酸联合维生素),观察两组患儿体格生长指标及血清实验室指标变化。选取同期本院出生的非EUGR早产儿58例作为正常组。收集患儿临床资料,Logistic回归模型分析早产儿EUGR发生的影响因素。结果与对照组相比,实验组患儿体重增加速度、身长增加速度增加,恢复出生体重时间、住院时间缩短,差异有统计学意义(t值介于2.428~4.425之间,P<0.05);与对照组相比,实验组总蛋白、入院时前白蛋白、瘦素水平升高,差异有统计学意义(t值分别为5.421、3.550、6.323,P<0.05);与正常组相比,迟缓组胎龄较小,出生体重较轻,前白蛋白水平较低,窒息、机械通气占比较高,差异有统计学意义(χ^(2)/t值介于3.436~13.462之间,P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示小胎龄、低出生体重、窒息、机械通气、入院时低前白蛋白均为早产儿EUGR发生的危险因素(OR值介于2.168~9.403之间,P<0.05)。结论早期足量补充氨基酸复合维生素有利于EUGR早产儿体格生长;小胎龄、低出生体重、窒息、入院时低前白蛋白、机械通气均为早产儿EUGR发生的独立危险因素。

关键词： 肉糜蛋白   水分子   相互作用   影响因素   研究进展  

摘要： 随着人们生活水平的不断提高,肉糜制品因营养丰富、食用方便快捷而逐渐成为餐桌上的新宠。肉糜中的蛋白含量较高且氨基酸比例均衡,对肉糜蛋白进行深度加工和改性可进一步优化其加工适应性和产品稳定性,扩大应用市场。本文着重探讨肉糜蛋白与水分子之间的相互作用机制,分析影响两者关系的关键因素,如pH值、离子强度、温度等,为提高肉糜蛋白的加工性能、开发新型肉糜制品提供理论依据和技术支持,为食品工业的创新发展提供参考。

关键词： 脂肪源性干细胞   脱钙骨基质   桡骨   节段性骨缺损   成骨   新西兰大白兔   组织工程  

摘要： 背景:脱钙骨基质是临床常用的骨修复材料,但在临床应用中发现存在成骨能力不足的问题,将脱钙骨基质与具有成骨潜力的细胞复合可有效提高成骨能力。目的:探讨脱钙骨基质复合脂肪源性干细胞提高桡骨节段性骨缺损修复能力的可行性。方法:以猪骨为原材料制备脱钙骨基质,采用酶解贴壁法体外分离、培养新西兰大白兔脂肪源性干细胞,流式细胞术检测细胞表型,并进行成骨、成脂诱导分化。将脂肪源性干细胞接种到脱钙骨基质复合培养3 d,倒置显微镜、扫描电镜观察脂肪源性干细胞在脱钙骨基质上的生长情况。取新西兰大白兔24只,随机分成4组,分别为空白对照组、脱钙骨基质组、脂肪源性干细胞-脱钙骨基质组和自体骨组,建立双侧桡骨节段缺损(12 mm)模型,按组别植入相应材料,术后4,8,12周通过拍摄X射线片、苏木精-伊红染色评价骨修复情况。结果与结论:①培养的细胞贴壁聚集生长,呈长梭形,CD44、CD71高表达,CD34、CD45、CD106低表达;成骨诱导分化后茜素红染色可见被染成橘红色的矿化结节;成脂诱导分化后油红O染色可见细胞内染成鲜红色的脂滴;②脂肪源性干细胞紧密复合于脱钙骨基表面,生长状态良好,并向孔隙内部生长;③X射线片和组织学观察显示,脂肪源性干细胞-脱钙骨基质组新西兰大白兔骨缺损修复情况优于空白对照组、脱钙骨基质组,与自体骨组相当。结果表明,负载脂肪源性干细胞可有效弥补脱钙骨基质成骨能力的不足。

关键词： 浙贝母花   多糖   秀丽隐杆线虫   抗氧化   组成分析  

摘要： 本研究的目的是系统比较浙贝母(Fritillaria thunbergii Miq.)鳞茎与花两个部位的水提物及多糖类成分的体外抗氧化活性,并深入探究花多糖的组成及其在模式生物秀丽隐杆线虫中的抗氧化作用及初步机制,为花的利用提供实验依据。首先采用水提法制备了浙贝母鳞茎水煎液(FTD)、鳞茎多糖(FTP)、花水煎液(FTFD)及花多糖(FTFP),采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH),2,2'-联氨-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(2,2'-azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate),ABTS)自由基清除实验和铁离子还原抗氧化能力(ferric reducing antioxidant power,FRAP)测定法比较不同提取物的体外抗氧化活性。其次使用秀丽隐杆线虫模型评价上述筛选出的最优活性成分的抗氧化作用,然后通过分析转基因秀丽隐杆线虫CF1553(sod-3p::GFP)和CL2166(gst-4p::GFP)的荧光强度,探讨其对抗氧化应激相关基因表达的影响。最后分析其单糖组成和分子量。结果表明,花部位的提取物(FTFD和FTFP)的抗氧化活性显著优于鳞茎提取物(FTD和FTP)。其中,FTFP(1 mg/mL)表现出最强的铁离子还原能力(0.97±0.011 mmol/L)、较高的DPPH自由基(76.58%±0.68%)和ABTS阳离子自由基(58.63%±8.58%)清除能力。体内实验表明,经FTFP(0.04~4 mg/mL)处理的线虫对热应激和氧化应激的抵抗能力显著增强,并呈浓度依赖性上调抗氧化基因sod-3和gst-4的表达。单糖组成分析表明,FTFP是一种以半乳糖醛酸(GalA,70.02%)为主的酸性杂多糖,并含有鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖;高效凝胶渗透色谱法分析其主要含有两个组分,平均分子量分别为363.05 kDa和26.04 kDa。综上所述,浙贝母花多糖是其发挥抗氧化作用的主要活性成分,不仅能有效清除自由基,还能通过上调sod-3和gst-4的表达增强机体抗氧化应激能力。本研究为浙贝母花资源的开发与保健食品利用提供了重要的理论依据。

关键词： 人胎盘来源的间充质干细胞   人脐静脉内皮细胞   细胞增殖   粘附能力   迁移   血管形成  

摘要： 【目的】本实验的目的是探究人胎盘来源的间充质干细胞(PDMSCs)对人脐静脉内皮细胞(HuVECs)的影响。【方法】以PDMSCs分泌的条件培养液培养的HuVECs细胞为实验组,以纯DMEM培养基培养的HuVECs细胞为对照组。通过MTS法检测各组HuVECs细胞增殖力。【结果】俩组对比可知:不同时间点的条件培养液均可促进HUVEC的增殖但与时间并无正比关系。【结论】胎盘来源的间充质干细胞分泌的生物活性物质在血管生成过程中发挥了重要作用,在治疗性血管生成中条件培养液可能会成为一种有用材料。