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关键词： 大口黑鲈   仔鱼   蛋白质   生长性能   抗氧化和免疫  

摘要： [目的]探究饲料蛋白质水平对大口黑鲈仔鱼生长性能、肠道组织、抗氧化和免疫能力的影响。[方法]设计了5种等脂饲料，其蛋白质含量分别为45% (CP45)、48% (CP48)、51% (CP51)、54% (CP54)和57% (CP57)。健康的大口黑鲈仔鱼随机分为5组，每组3个重复，每个重复7 500尾[ (1.25 ± 0.00) mg]，实验为期21 天。[结果] 随着饲料蛋白质含量的升高，大口黑鲈仔鱼的最终生物量和存活率先升高后降低，CP54组的最终生物量显著高于其余各组，并且CP51和CP57组显著高于CP45和CP48组，CP51、CP54和CP57组的存活率显著高于CP45和CP48组，但各组间最终体重、增重率和特定生长率无显著差异。以存活率和最终生物量为基础确定的大口黑鲈仔鱼饲料蛋白质最适水平为54.80%～55.25%。各组间肠道绒毛高度、绒毛宽度和肌层厚度无显著性差异。CP51、CP54和CP57组的丙二醛(MDA)含量显著低于CP45组，CP51和CP57组的MDA含量显著低于CP48组。各组间过氧化氢酶、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、碱性磷酸酶和酸性磷酸酶活性无显著差异，但随着蛋白质含量的增加，T-SOD的活性具有升高趋势(P = 0.07)。以MDA水平和T-SOD活性为基础确定的大口黑鲈仔鱼饲料蛋白质最适水平为51.00%～55.16%。[结论]在20～24 ℃条件下，大口黑鲈仔鱼在适宜饲料蛋白质水平下有更高的存活率、最终生物量和抗氧化能力，基于最佳的存活和最终生物量，大口黑鲈仔鱼适宜蛋白质水平为54.80%～55.25%。该研究结果为大口黑鲈仔鱼人工育苗阶段专用配合饲料的研发与精准配制提供科学理论依据，对提升苗种培育成活率、优化养殖生产效益有重要指导作用。

关键词： broad   黑腹果蝇   肠道干细胞   Jak/STAT   EGFR  

摘要： 蜕皮激素信号通路(ecdysone signaling)通过促进干细胞增殖与分化,在成年黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)肠道稳态维持中具有重要作用。然而,其下游靶基因broad(br)在该过程中的功能尚不明确。本研究证明,br基因对肠道干细胞(intestinal stem cells,ISCs)的维持及肠道损伤修复过程不可或缺。克隆分析结果显示,br同时调控ISCs的增殖与分化。敲低br表达会严重阻碍干细胞向肠上皮细胞(enterocytes,ECs)的分化,而过表达br则会促进其分化。进一步分析发现,敲低br会导致ISCs中Jak/STAT信号通路活性降低,而上调Jak/STAT或EGFR信号通路的活性都可以显著挽救br敲低导致的表型。这些结果表明,在成年果蝇中,br可能通过Jak/STAT和EGFR信号通路调控ISCs的增殖与分化。本研究揭示了br基因在果蝇成虫ISCs中的作用,并初步探讨了其机制。

关键词： 数据库   蛋白质质量   氨基酸消化率   DIAAS   FAO/IAEA合作  

摘要： 在全球人口持续增长、气候变化加剧及膳食结构深度转型的多重背景下,建立精准、可靠的蛋白质营养评价体系已成为保障全球粮食安全与促进公众健康的核心科学命题。由联合国粮食及农业组织(FAO)与国际原子能机构(IAEA)联合主导的“人类食品蛋白质和氨基酸回肠消化率数据库”建设项目,旨在构建全球首个标准化、可扩展、开放获取的蛋白质消化率核心数据平台,以系统解决可消化必需氨基酸评分(DIAAS)方法从理论走向实践所面临的关键数据瓶颈。本文梳理了该数据库的建设背景与发展历程,包括从2022年维也纳会议确立共识、2024年巴黎会议明确技术框架至2025年数据库工作持续推进的完整演进路径;阐述了数据库采纳的多层级方法学纳入标准(包括人体回肠造口术、双同位素示踪法等金标准方法,猪模型等最佳预测模型,以及经体内验证的体外消化模型);介绍了数据库的结构设计、核心变量体系(涵盖食品描述、蛋白质定量、氨基酸谱、真回肠消化率及DIAAS计算值等模块)及其严谨的质量控制框架。在此基础上,探讨了数据库在精准营养政策制定(如膳食指南修订、食品标签革新)、可持续膳食转型科学决策、新型蛋白质源开发与评价,以及填补中低收入国家蛋白质质量数据缺口等方面的重要应用前景。该数据库的建成与开放,将推动全球蛋白质营养评价进入一个由高质量数据驱动、全球协同创新和应用的新时代,为实现联合国可持续发展目标提供科学支撑。

关键词： 浓香型白酒酒糟   酒糟多糖   工艺优化   抑菌活性   抗氧化活性  

摘要： 酒糟是酿酒工业的主要副产物,具有产量大、资源化利用率低的特点。以浓香型白酒酒糟为原料,采用热水浸提法提取多糖,通过单因素试验与正交试验优化提取工艺,并对所得多糖的体外抑菌及抗氧化活性进行系统评价。结果表明,最佳提取工艺条件为提取温度50℃,提取时间90 min,料液比1∶15(g∶mL),乙醇体积分数95%,在此条件下多糖得率可达12.53%。抑菌活性试验表明,当多糖质量浓度大于0.8 mg/mL时,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均具有抑制作用,且对大肠杆菌的抑菌效果优于金黄色葡萄球菌;DPPH自由基清除试验表明,该多糖的抗氧化活性具有质量浓度依赖性,在0~1.0 mg/mL内清除率随质量浓度升高而上升,质量浓度达0.6 mg/mL时清除率可达59.33%。综上,试验优化的酒糟多糖提取工艺高效可行,所得多糖兼具显著的抑菌与抗氧化活性,研究结果为白酒工业副产物的高值化利用提供了理论依据,也为功能食品与天然活性成分的开发提供了新思路。

关键词： FIPV S1蛋白   真核表达   单克隆抗体   间接ELISA   猫传染性腹膜炎病毒  

摘要： [目的] 预测和分析猫传染性腹膜炎病毒(Feline Infectious Peritonitis Virus,FIPV)S蛋白的结构和潜在功能,进而对其进行克隆表达,研制多克隆抗体与单克隆抗体,并建立针对FIP的间接ELISA检测方法,为疫苗开发和疾病诊断提供理论实验依据。[方法] 利用生物信息学软件对FIPV S蛋白的生物学特性进行预测分析,据此将其划分为S1、S2和RBD等结构域。将S蛋白全长及各结构域分别克隆至真核表达载体pcDNA3.1中,构建出四种重组质粒,经筛选后选定S1蛋白进行真核表达。将表达纯化后的蛋白免疫小鼠,获取能够结合FIPV S1蛋白的多克隆抗体。同时取免疫小鼠脾细胞进行细胞融合,经有限稀释法及四轮亚克隆筛选,最终获得6株杂交瘤细胞。经Western blot和间接免疫荧光(IFA)试验鉴定多抗血清与单克隆抗体特异性。以纯化所得的S1蛋白为抗原,建立针对FIP的间接ELISA检测方法。[结果] 构建了重组真核表达质粒,成功表达纯化出FIPV重组蛋白S1,分子量约为130 kDa。重组蛋白经镍离子金属亲和层析纯化后,获得浓度为0.5 mg·mL-1的可溶性重组S1蛋白。Western blot和IFA结果显示,多抗血清和单克隆抗体都可有效结合蛋白,显示出较高的检测灵敏度。所获得的6株单抗重链均为IgM,轻链均为Kappa型,且6株杂交瘤细胞株均能稳定分泌抗S1单克隆抗体;基于FIPV重组蛋白S1建立的间接ELISA检测方法具有高特异性和灵敏度的特点,重复性和符合率均良好。[结论] 本研究成功通过真核表达获得FIPV S1蛋白,制备出特异性良好的多克隆抗体与单克隆抗体,并据此建立了可靠的间接ELISA检测方法,为FIPV S1蛋白的结构与功能研究、FIP诊断技术优化及疫苗研发提供了重要研究工具与技术支持。

关键词： 光纤荧光检测   定量聚合酶链式反应   光纤耦合系统设计   基因检测  

摘要： 针对现有实时荧光定量PCR仪体积大且光学系统难以匹配热对流式q PCR快速检测的问题,本文提出一种适配热对流式PCR系统的四通道光纤荧光检测技术。基于光纤耦合原理,建立数值孔径匹配、光斑尺寸控制理论模型,设计消色差耦合镜组与伽利略式缩束系统,通过光学仿真,验证镜组93%的高耦合效率及信号放大效果。采用p UC19质粒标准品及20例临床疑似HPV样本为研究对象,完成荧光检测可行性验证、重复性分析及与商用仪器的对比实验。结果表明,本文研究的荧光检测系统可在40个循环内对10~2copies/μL的低浓度p UC19质粒稳定检出相近Ct值,检出Ct值与样本浓度对数线性相关系数大于0.995,重复性检测变异系数低于2.5%。HPV样本检测与商用q PCR仪阳性检出率一致,Ct值一致性相关系数达0.994。综上,该四通道光纤荧光检测系统适配性与检测性能优异,为便携式热对流式q PCR仪的研发提供了可靠光学技术方案。

关键词： 蛋白质转型   体外消化   个性化蛋白质需求   蛋白质质量数据库  

摘要： 面对全球人口持续增长以及在地球边界内运作的环境压力，蛋白质来源向着可持续、营养充足的转型更为迫切。准确评估由氨基酸组成、消化率和吸收率决定的蛋白质质量至关重要。经充分验证后，体外消化模型将成为传统动物实验方法的有力替代方案。来自植物、微生物、真菌、藻类、昆虫等的新型蛋白质源为减少环境影响提供了机遇，但也引入了新的、未知的因素，这些因素除了与加工方法、食品基质和配料相关的复杂性外，还可能影响消化和生物利用度。因此，需要建立可靠的、高通量的标准化方案，包括基于高效人体交叉试验的体内验证，以评估食品的蛋白质质量，并为不同人群提供个性化蛋白质推荐。建立一个全面、标准化的蛋白质质量数据库，对于指导研究、支持食品工业、提供政策制定依据，以及确保全球范围内获得营养充足且可持续的膳食至关重要。

关键词： 水凝胶   软骨修复   黄芪多糖   抗氧化  

摘要： 将不同浓度的黄芪多糖联合聚乙烯醇、壳聚糖作为材料,采用冻融循环法制备新型多糖复合水凝胶,并对其进行综合性能评价和比较。结果显示,引入适量的黄芪多糖显著改善了水凝胶的综合性能,新型复合水凝胶抗拉伸强度达1.93MPa,断裂伸长率超过550%,具有良好的柔韧性和承载能力;含水率低于80%与天然软骨接近,并具有适宜的溶胀行为;溶血率小于1%,对HaCaT细胞无明显的细胞毒性,能促进细胞增殖;在体外具有DPPH、ABTS·+自由基清除能力和Fe3?还原能力;以上各项性能均优于聚乙烯醇/壳聚糖水凝胶。综上表明,含黄芪多糖的复合水凝胶兼具力学支撑与抗氧化微环境调节功能,为构建多功能软骨修复材料提供了新的思路。

关键词： 肾纤维化   滇黄精变种多糖   转化生长因子-β1   网络药理学   HK-2细胞  

摘要： 探究湖南怀化产区滇黄精变种中分离纯化的多糖组分PKVP-1的结构特征及其抗肾纤维化作用。采用高效液相离子色谱、甲基化分析及气相色谱-质谱联用技术对PKVP-1的结构进行表征,同时结合网络药理学方法筛选其作用靶点并进行通路分析,通过分子对接验证其与关键蛋白的结合能力,后续再利用转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的HK-2细胞模型开展细胞水平的功能验证。结构表征结果显示,PKVP-1由葡萄糖和果糖组成,二者摩尔比为8.68∶91.32,糖苷键连接方式主要为α-葡萄糖与β-果糖;网络药理学筛选出258个共同作用靶点,KEGG富集分析提示其核心通路涉及视黄醇代谢,分子对接结果表明PKVP-1中的主要单糖与TGF-β1具有较强的结合能力。细胞实验结果显示,25~400 mg/mL的PKVP-1对细胞无明显毒性作用,其中50~200 mg/mL的PKVP-1可显著抑制TGF-β1诱导的细胞过度增殖,逆转细胞形态向长梭形的转化,且能呈剂量依赖性地降低TGF-β1和α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)的蛋白表达,同时促进E-钙黏蛋白(E-Cadherin)的蛋白表达。综合以上研究结果可知,PKVP-1可能通过与TGF-β1结合,抑制上皮-间质转化过程,进而发挥抗肾纤维化作用。

关键词： 芒果   涂膜处理   低温   贮藏保鲜   果实品质  

摘要： 芒果为典型冷敏型热带水果,传统冷藏易诱发冷害,导致营养流失和品质劣变。为提升其低温贮藏稳定性,以攀枝花芒果为对象,采用魔芋葡甘聚糖(KGM)、壳聚糖(CTS)、海藻酸钠(SA)及其与纳米TiO2复合物进行涂膜处理,以清水为对照(CK),在13℃下贮藏15 d,测定色泽、水分、营养及氧化相关指标。结果表明,各涂膜均不同程度延缓芒果成熟与品质劣变,其中KGM-TiO2复合膜效果最佳。与对照组相比,该处理使可溶性固形物降低17.9%,维C提高31.7%,丙二醛减少34.2%,失重率降低42.3%,果皮色差下降45.2%,并有效抑制糖酸转化、膜脂过氧化降解。综上,KGM-TiO2复合膜通过构建致密阻氧层并协同抗氧化,可显著缓解芒果冷害、延长货架期,为热带冷敏果蔬冷链保鲜提供技术支持。