课程文献中心 更多>>

关键词： 溃疡性结肠炎   成本效用分析   乌帕替尼   维得利珠单克隆抗体   乌司奴单克隆抗体   药物经济学模型  

摘要： 目的分析维得利珠单克隆抗体(VDZ)、乌司奴单克隆抗体(UST)和乌帕替尼(UPA)治疗中重度溃疡性结肠炎(UC)患者的成本-效用。方法构建为期54周的决策树-马尔可夫混合模型, 以中重度UC患者为模拟研究队列, 评估患者接受三种药物治疗的成本-效用。通过单因素及概率敏感性分析验证结果的稳健性。结果基准案例分析显示, UPA的治疗成本(62 385元)最低, 其次为VDZ(73 695元)和UST(163 492元)。同时, UPA的质量调整生命年(QALY)最高(5.06), 其次为UST(5.01)和VDZ(4.97)。以传统治疗药物为参照, 可以得出UPA的增量成本-效用比(ICUR)最低(149 262元/QALY), 其次为VDZ(502 789元/QALY)和UST(1 136 364元/QALY)。单因素敏感性分析中, 药物成本与术后缓解效用值是对ICUR影响最显著的因素。概率敏感性分析表明, 在支付意愿阈值为257 094元/QALY时, UPA具有100%的成本-效用可接受概率。结论在当前我国医保支付体系下, UPA可能是治疗中重度UC最具成本-效用优势的选择, 但受限于间接比较的疗效数据与部分结构性假设, 未来需更多真实世界研究予以验证。

关键词： lncRNA-NR＿037840.3   牙髓干细胞   炎症条件   成骨及成牙向分化  

摘要： 目的 初步探讨炎症条件下lncRNA-NR＿037840.3对牙髓干细胞（dental pulp stem cells,DPSCs）成骨及成牙向分化的影响，并分析其可能相关的机制。方法 收集2023年12月至2024年12月于首都医科大学附属北京口腔医院就诊患者因正畸治疗需要拔除的前磨牙6颗，取出牙髓组织后行DPSCs分离培养与传代。采用慢病毒转染分别构建稳定敲低和过表达lncRNA-NR＿037840.3的DPSCs并进行验证，记为敲低对照组、敲低实验组、过表达对照组、过表达实验组。采用质量浓度10μg/L肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激作为体外炎症模拟条件。常规成骨及成牙向诱导条件下，第0、3、5、7、14天采用实时荧光定量PCR检测DPSCs中lncRNANR＿037840.3的表达情况。炎症条件下对4组行成骨及成牙向分化诱导，并行碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性检测、茜素红染色、钙沉积量测定，通过Western blot检测牙本质涎磷蛋白（dentin sialophosphoprotein,DSPP）、牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1,DMP1)、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)、β-连环蛋白（β-catenin）和磷酸化β-连环蛋白（phosphorylated β-catenin,p-β-catenin）的表达情况。结果倒置显微镜配套荧光滤光片下观察可见4组明显荧光表达，敲低实验组lncRNA-NR＿037840.3相对表达量低于敲低对照组，过表达实验组lncRNA-NR＿037840.3相对表达量高于过表达对照组。常规成骨及成牙向诱导条件下，lncRNA-NR＿037840.3相对表达量随诱导时间延长总体呈上升趋势。在质量浓度10μg/L TNF-α刺激下成骨及成牙向分化诱导，与过表达对照组比较，过表达实验组ALP活性升高、相对钙沉积量增加，差异均有统计学意义（t值分别为8.096、23.590,P值分别为0.015、0.002）；其矿化结节形成增多，DSPP、DMP1和RUNX2蛋白表达呈一定增强趋势。与敲低对照组比较，敲低实验组ALP活性降低、相对钙沉积量减少，差异均有统计学意义（t值分别为4.365,6.583,P值分别为0.049、0.022）；其矿化结节形成减少，DSPP、DMP1、RUNX2、β-catenin和p-β-catenin蛋白表达呈一定减弱趋势。结论 在质量浓度10μg/L TNF-α刺激下，lncRNA-NR＿037840.3可促进DPSCs成骨及成牙向分化，其作用可能与β-catenin磷酸化水平变化相关。

关键词： 自然杀伤细胞   单倍体相合造血干细胞移植   巨细胞病毒  

摘要： 目的:观察供者自然杀伤(NK)细胞过继输注在单倍体相合造血干细胞移植(haplo-HSCT)术后预防巨细胞病毒(CMV)感染的安全性及临床疗效。方法:前瞻性纳入18例接受haplo-HSCT的患者,于移植当日输注供者外周血来源的NK细胞;以本院血液科既往行haplo-HSCT且未接受NK细胞输注的18例患者作为历史对照。观察输注期间及输注后48h的生命体征、细胞治疗相关急性毒性反应;监测粒细胞植入后至移植后3个月的CMV感染发生情况、急性移植物抗宿主病(GVHD)发生率及生存情况。结果:NK细胞输注剂量为(4.83±1.37)×10～7/kg。1例患者输注后出现体重增加,经利尿治疗后恢复;3例患者出现轻度肝功能异常,经保肝治疗后好转;无患者出现发热、皮疹及毛细血管渗漏相关表现。18例患者中,7例(38.9%)出现CMV阳性,显著低于历史对照组的14例(77.8%)(P<0.05)。两组急性GVHD发生率无统计学差异。NK细胞输注组死亡4例,其中2例死于血栓性微血管病,1例死于肝静脉闭塞综合征,1例死于疾病复发;对照组死亡4例,其中3例死于血栓性微血管病,1例死于疾病复发。结论:供者NK细胞与haplo-HSCT共输注的安全性良好,可有效降低移植后CMV感染风险,为移植后CMV感染预防提供了新策略。

关键词： 科罗索酸   微乳   天然多糖   增效   缓释   α-淀粉酶   α-葡萄糖苷酶   降血糖  

摘要： 目的 以天然多糖部分替代化学表面活性剂制备增效型科罗索酸微乳，并研究其体外降糖活性。方法 采用HPLC法测定科罗索酸在不同油相、表面活性剂和助表面活性剂中的溶解度，筛选适宜组分;通过相容性试验、拟三元相图法及粒径分析，确定增效型科罗索酸微乳的最佳制备工艺，并对所得微乳的理化性质、储藏稳定性及体外释放性进行测定。以阿卡波糖为阳性对照，采用α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制实验，评价增效型科罗索酸微乳的体外降血糖活性。结果 增效型罗索酸微乳的最佳处方为:油相为油酸，表面活性剂为香菇多糖-吐温60(2∶1)，油相-表面活性剂(1∶9)，制备温度30℃。所得微乳的平均粒径为60.28±0.79 nm，多分散系数为0.27±0.01,Zeta电位为-30.77±1.55 m V，呈均一稳定的纳米分散体系。4℃或常温(25℃)条件下储藏15 d稳定性良好，60℃下易失稳。体外释放实验显示:增效型科罗索酸微乳在10 h内的累计释放量显著低于科罗索酸溶液(32.12%vs 50.91%)，具有一定的缓释性。酶抑制实验显示:增效型科罗索酸微乳对α-淀粉酶与α-葡萄糖苷酶的抑制率均高于游离科罗索酸溶液，与阿卡波糖无显著差异。结论 天然多糖替代部分化学表面活性剂可构建稳定、增效的科罗索酸微乳，为开发低毒、高效的降血糖功能递送系统提供新策略。

关键词： 间充质干细胞   急性髓系白血病   骨髓微环境   化疗耐药   复发  

摘要： 随着新药研发和移植技术的发展,急性髓系白血病(AML)的治疗已取得显著进展,但多数患者仍面临复发的临床困境。骨髓间充质干细胞(BM-MSC)作为骨髓微环境的重要细胞组分,可通过促进AML细胞增殖并降低其对化疗药物的敏感性参与AML耐药及复发。本文综述了AML细胞重塑BM-MSC进而介导AML耐药和复发的具体机制,以及靶向BM-MSC治疗AML的最新研究进展,以期为从调控骨髓微环境角度治疗AML提供理论依据。

关键词： 输血前检查   抗球蛋白法   CD38   抗-CD38  

摘要： 目的:制备兔源抗人CD38多克隆抗体,通过封闭红细胞表面的CD38抗原,消除达雷妥尤单抗(DARA)对输血前相容性检测的干扰。方法:采用重组hCD38-His蛋白免疫新西兰大白兔,制备兔抗人CD38多克隆抗体;通过SDS-PAGE分析抗体纯度及分子量,直接抗球蛋白法(DAT)评估其与抗人球蛋白的反应性,间接抗球蛋白法(IAT)评估其消除DARA干扰的效果及对意外抗体检测的影响;通过检测红细胞主要血型抗原,评估兔源抗人CD38多克隆抗体对血型抗原检出结果的影响。结果:SDS-PAGE分析结果显示兔源抗人CD38多克隆抗体纯度高,分子量与理论预期符合;经兔源抗人CD38多克隆抗体处理后的红细胞DAT检测呈阴性,提示兔源抗-CD38与抗人球蛋白无反应性。IAT检测结果显示,兔源抗-CD38抗体可有效封闭红细胞CD38抗原,消除DARA对IAT检测方法的干扰,且不会影响低浓度意外抗体的检出。红细胞血型主要抗原检测结果显示,兔源抗-CD38处理不会影响血型抗原的检出。结论:兔抗人CD38多克隆抗体能够稳定、有效消除DARA对输血前相容性检测的干扰,且不影响红细胞血型抗原及意外抗体的检测,操作简便,为临床输血前相容性检测提供新的方法。

关键词： 六妹羊肚菌   粗多糖   抗炎   抗氧化   肝纤维化  

摘要： 本研究旨在系统探究六妹羊肚菌Morchella sextelata菌盖粗多糖（CPPM）对硫代乙酰胺（TAA）诱导小鼠肝纤维化的保护作用及其机制。采用水提醇沉法制备CPPM，并通过高效凝胶渗透色谱-多角度激光光散射-示差折光检测联用技术（HPSEC-MALLS-RID），分析其以葡萄糖为核心的单糖组成及分子量分布。体外实验表明，CPPM具有显著的浓度依赖性自由基清除能力，在4μg/mL浓度下，其对DPPH·、ABTS+·、·OH及O2·–的清除率分别达到73.8%、90.4%、85.5%和47.2%。同时，CPPM在100 μg/mL浓度内对LO2及AML12细胞无毒性，并能有效逆转过氧化氢(H2O2)诱导的肝细胞活力下降，显著提升细胞内谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性（P<0.05），降低丙二醛（MDA）含量，并通过线粒体凋亡通路调控凋亡相关基因（Bcl-2、Bax和Caspase-3/9）以保护肝细胞。体内研究通过构建硫代乙酰胺（TAA）诱导的小鼠肝纤维化模型，发现与模型组相比，CPPM （100–400 mg/kg）干预能剂量依赖性地显著降低肝脏指数（P<0.05），改善肝功能指标，表现为血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）活性降低。血清学分析进一步证实，CPPM能显著下调肝纤维化关键标志物—Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）、层粘连蛋白（LN）及透明质酸（HA）的水平（P<0.05），并有效调控炎症与纤维化相关因子，如降低转化生长因子-β1 （TGF-β1）水平，维持白细胞介素-10 （IL-10）的表达。肝组织病理学结果（HE及Masson染色）直观显示，CPPM治疗能显著减轻肝小叶结构破坏、纤维间隔增宽及炎性细胞浸润，其中高剂量组改善最为明显。本研究表明，羊肚菌菌盖粗多糖通过其强大的体外抗氧化与抗肝细胞凋亡活性，在体内通过改善肝功能、抑制细胞外基质（ECM）过度沉积、调控炎症相关因子表达及减轻病理损伤等多通路整合机制，发挥显著的抗肝纤维化作用。研究结果为将羊肚菌菌盖粗多糖开发成为辅助干预肝纤维化的功能性食品或膳食补充剂提供了坚实的实验依据。

关键词： 枸杞多糖   椎间盘退变   PI3K/Akt/mTOR   髓核细胞   代谢平衡  

摘要： 目的 探讨枸杞多糖对椎间盘退变过程中髓核细胞合成与分解代谢的平衡作用，并揭示其作用机制。方法 体内实验：通过手术穿刺法建立SD大鼠腰椎间盘退变模型，随机分为假手术组、模型组、枸杞多糖低、中、高剂量组。干预结束后番红O-固绿染色和苏木精-伊红（HE）染色观察椎间盘组织形态学变化，TUNEL染色法检测各组髓核组织中细胞的凋亡情况，蛋白免疫印迹法检测髓核组织中合成代谢标志物Ⅱ型胶原蛋白（typeⅡcollagen,COL2）和聚集蛋白聚糖（aggrecan,ACAN）、分解代谢标志物基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)和聚集蛋白聚糖酶-2(ADAMTS-5)蛋白的表达。体外实验：分离培养大鼠髓核细胞，采用白细胞介素-1β构建退变模型。实验分为对照组、模型组、枸杞多糖干预组及枸杞多糖+PI3K抑制剂组。采用CCK-8法与流式细胞术分别评估细胞增殖与凋亡情况；qPCR分别检测合成代谢标志物（COL2、ACAN）、分解代谢标志物（MMP-13、ADAMTS-5）的mRNA水平，蛋白质印迹法检测PI3K/Akt/mTOR通路关键蛋白（p-PI3K、p-Akt、p-mTOR）的磷酸化水平。结果 体内实验：与模型组相比，各枸杞多糖干预组（尤其是中、高剂量组）的椎间盘组织退变得到显著缓解。组织学染色显示，其髓核结构更为完整，番红O-固绿着色加深，表明蛋白多糖流失减少；TUNEL染色提示髓核细胞凋亡率显著下降。蛋白质印迹分析进一步证实，枸杞多糖能剂量依赖性地上调COL2与ACAN的表达，同时下调MMP-13和ADAMTS-5的表达（均P<0.05）。体外实验：枸杞多糖能显著提升由白细胞介素-1β诱导的退变髓核细胞的活力，并有效抑制细胞凋亡。其分子机制表现为：促进PI3K/Akt/mTOR通路关键蛋白（p-PI3K、p-Akt、p-mTOR）的磷酸化，并同样呈现出促进COL2与ACAN表达、抑制MMP-13与ADAMTS-5表达的代谢平衡调节作用。而加入PI3K抑制剂后，枸杞多糖的上述保护效应被明显阻断（均P<0.05）。结论 枸杞多糖在体内外均能有效延缓椎间盘退变进程。其作用机制可能为激活PI3K/Akt/mTOR信号通路，进而正向调控髓核细胞的合成与分解代谢平衡。

关键词： 核酸适体   适体信标   体外进化   药物靶标   分化簇47   分化簇133   功能筛选   免洗检测  

摘要： 目的 本研究通过构建具有靶标诱导荧光开启特性的核酸适体信标探针，筛选获得靶向CD47和CD133的响应型适体信标，并探讨其在膜蛋白药物靶标分析、靶点验证及药物开发中的应用价值。方法 采用课题组前期建立的基于微珠展示及功能筛选的适体信标体外进化平台，构建包含发夹结构的随机文库，通过乳液聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)将文库单克隆化展示于微珠表面，经酶促修饰引入荧光基团与淬灭基团，形成低背景茎环结构。分别以CD47和CD133重组蛋白为模型膜蛋白药物靶标，进行多轮荧光激活细胞分选(fluorescence-activated cell sorting, FACS),直接富集兼具靶标结合能力和构象响应能力的适体信标序列。在细胞水平对筛选获得的候选序列进行荧光恢复效率及特异性验证，评估其作为“响应型”探针在免洗条件下识别靶标阳性细胞、分析膜蛋白靶标表达和可及性的性能。结果 经过3轮功能筛选，分别获得富集的CD47和CD133适体信标文库。从两种文库中各选取多个高频序列进行合成与功能验证，细胞水平实验显示，候选适体信标在靶标结合后可产生荧光恢复信号，并在免洗条件下有效区分靶标阳性与阴性细胞系，表现出良好的细胞膜靶标识别特异性。该类探针可用于分析CD47和CD133等膜蛋白药物靶标在细胞膜上的表达差异、动态分布和靶标可及性，为药物作用机制研究与候选药物筛选提供简便、高效的工具。结论 本研究以CD47和CD133为代表性膜蛋白药物靶标，建立并验证了核酸适体信标探针用于膜蛋白靶标分析的策略。适体信标将核酸适体的可编程识别能力与靶标诱导荧光开启机制相结合，能够在低背景、免洗条件下实现细胞膜靶标的原位检测，体现出区别于传统抗体标记或常规荧光适体探针的创新性。该技术不仅为CD47、CD133等膜蛋白药物靶标的实时分析提供了新型分子工具，还可应用于小分子药物与靶蛋白结合竞争性筛选、抗体或细胞治疗药物的细胞结合活性评价，以及药物开发早期阶段的靶点验证与先导化合物筛选，为面向膜蛋白药物靶标的开关式探针标准化制备及功能分析提供了有力支撑。

关键词： 丝状黄芪   片状黄芪   药食同源   感官评价   扫描电镜   多糖   红外光谱   体外抗氧化活性  

摘要： 目的 研究丝状黄芪和片状黄芪在感官特征、活性成分及体外抗氧化活性等方面的差异。方法 用沸水冲泡黄芪，扫描电镜观察黄芪冲泡前后的结构变化;对冲泡液进行感官评价，并测定总多糖、总皂苷和总黄酮的含量;提取冲泡液中的黄芪多糖，并用傅里叶红外光谱扫描分析;比较提取得到的两种黄芪多糖的DPPH自由基和ABTS自由基清除能力。结果 丝状黄芪的表面结构更有利于活性成分的溶出，其冲泡液的香气和味道以及多糖、总皂苷、总黄酮含量均显著优于片状黄芪;由丝状黄芪提取的黄芪多糖的自由基清除能力更强。结论 作冲泡使用时，丝状黄芪更具有综合优势和应用前景。