课程文献中心 更多>>

关键词： 阴道萎缩   局部雌激素治疗   Shc转化蛋白1   非标记定量蛋白质组学   生物信息学   GO分析   KEGG分析  

摘要： 目的 采用蛋白质组学联合生物信息学探究大鼠阴道萎缩局部雌激素作用前后改变显著的差异蛋白,并推测该蛋白发挥作用的可能机制。方法 36只健康6~8周龄雌性生育龄未孕SD大鼠分为去势大鼠组(OVX组)、去势大鼠局部雌激素使用组(OVX+E2组)及假手术组(sham组)。收集三组的阴道标本进行非标记定量蛋白质组学分析,筛选差异蛋白,对差异蛋白中与雌激素代谢相关的蛋白进行分析得出局部雌激素作用后改变显著的差异蛋白,对差异蛋白进行GO及KEGG分析,推测蛋白发挥作用的可能机制。结果 OVX+E2组与OVX组差异蛋白共102种,74种上调,28种下调;sham组与OVX组差异蛋白共655种,494种上调,161种下调。在OVX+E2组与OVX组筛选出的差异蛋白中,与雌激素代谢通路相关的差异蛋白Shc转化蛋白1表达上调。在sham组与OVX组筛选出的差异蛋白中,与雌激素代谢通路相关的差异蛋白均表达上调,包括蛋白基质金属蛋白酶9、Shc转化蛋白1及角蛋白14、42、35、33B、23、17。OVX+E2组与OVX组差异蛋白的GO分析发现Shc转化蛋白1参与的差异显著通路是Shc-EGFR复合物,分子功能分析发现Shc转化蛋白1参与的差异显著通路是磷酸酪氨酸残基结合。KEGG分析中Shc转化蛋白1参与差异显著上调通路是上皮细胞的细菌侵袭通路。差异蛋白相关性分析表明与Shc转化蛋白1关系显著的差异蛋白是伪足富集的非典型激酶1、桩蛋白、MHCⅡ类抗原。结论 局部雌激素可能通过上调Shc转化蛋白1改善去势大鼠阴道萎缩。Shc转化蛋白1可能通过形成Shc-EGFR复合物影响磷酸酪氨酸残基结合、参与上皮细胞的细菌侵袭通路、与非典型激酶1、桩蛋白、MHCⅡ类抗原构成互作网络发挥作用。

关键词： 热带病病原体   核酸快速诊断   教学改革   第二课堂   科研实践   创新学习  

摘要： 在热带病跨境传播防控与公共卫生应急体系建设的背景下,针对传统课堂教学中存在的理论与实践脱节、热带病相关前沿技术覆盖不足、学生创新能力培养欠缺等问题,该研究构建了理论铺垫-技术实操-项目攻坚-成果转化的四级本科第二课堂科研实践体系。该体系通过优化课程模块、搭建精准化实践平台、创新教学模式与评价机制,推动本科学生深度参与热带病病原体核酸快速诊断技术的设计、优化与验证全过程。为验证体系实效,开展了针对性实践应用。结果显示,学生创新项目参与率从15%提升至85%,科研实践相关竞赛获奖率达40%,核心实验技能考核优秀率达90%。该体系有效培育了学生的科研思维、实践能力与创新意识,为应用型、创新型热带病防控与医学技术人才的培养提供了可行路径。

关键词： 氨基酸代谢紊乱   冠心病   同型半胱氨酸   支链氨基酸   芳香族氨基酸   动脉粥样硬化   风险预测  

摘要： 鉴于氨基酸代谢紊乱与冠心病(coronary heart disease,CHD)发生发展密切相关,文章旨在系统梳理相关氨基酸代谢异常与CHD的关联、作用机制及临床应用前景。采用系统综述的方法,围绕同型半胱氨酸、支链氨基酸、芳香族氨基酸等,分析其代谢异常在CHD相关病理过程中的作用,同时探讨氨基酸代谢产物及肠道菌群的潜在影响。明确了多种氨基酸代谢异常与CHD风险存在关联,其通过参与动脉粥样硬化、血栓形成及内皮功能障碍等病理过程影响疾病进展;氨基酸代谢指标在CHD风险预测、辅助诊断及治疗干预中展现出临床应用潜力。因此,氨基酸代谢紊乱作为CHD防治的新靶点,尽管相关研究仍有矛盾与不足,但具临床价值和研究潜力,为心血管疾病研究提供了新的方向。

关键词： 饲料蛋白质   饲料脂肪   生长性能   抗氧化能力   蛋脂代谢   黑斑蛙  

摘要： 本研究探讨了饲料中不同蛋白质与脂肪水平对黑斑蛙(Pelophylax nigromaculatus)生长、肝脏抗氧化能力及蛋脂代谢的影响。设计蛋白质水平(38.5%、41%、43.5%、46%)和脂肪水平(8%、10%)的4×2交互实验,共配制8种实验饲料,投喂初始体重为(15.00±0.10) g的黑斑蛙幼蛙8周。实验结果表明:41P10L组黑斑蛙增重率最高,但与38.5P10L、41P8L组间并无显著性差异(P>0.05),且38.5P10L组蛋白质效率最高(P<0.05); 46%蛋白质组黑斑蛙平均血清总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、白蛋白、尿素氮含量最高, 43.5%蛋白质组黑斑蛙平均血清甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇含量最高,均显著高于38.5%蛋白组(P<0.05)。肝脏油红染色结果表明, 10%脂肪水平时黑斑蛙肝脏脂肪沉积加重,且43.5%、46%蛋白质水平时肝脏脂肪沉积更明显(P<0.05)。46%蛋白质组血清平均谷丙转氨酶活性和谷草转氨酶活性显著高于38.5%蛋白质组(P<0.05)。肠道消化酶活性、肝脏抗氧化酶活性和丙二醛含量随着饲料蛋白质和脂肪水平的升高均呈现上升趋势。46%蛋白质组肝脏mtor、s6k表达量显著高于38.5%蛋白质组(P<0.05); 10%脂肪组cpt1表达量显著高于8%脂肪组(P<0.05)。综上所述,在本实验条件下, 41%饲料蛋白质水平下虽然能够获得更高的增重率,但会导致蛋白质效率降低, 43.5%与46%蛋白质水平则更易引起肝脏脂肪沉积加重和肝脏损伤。综合生长、蛋白质利用效率及肝脏健康等关键指标,黑斑蛙饲料的适宜蛋白质水平为38.5%,脂肪水平为10%。

关键词： 文蛤   丙氨酸   GWAS   TWAS   WGCNA  

摘要： 【目的】通过多组学手段,系统解析文蛤丙氨酸含量的遗传基础与调控网络,为风味性状分子育种提供理论依据。【方法】以300只2龄文蛤为材料,测定足组织游离氨基酸含量,综合运用全基因组关联分析(GWAS)、表达全基因组关联分析(eGWAS)、全转录组关联分析(TWAS)及加权基因共表达网络分析(WGCNA),从遗传变异、基因表达及共表达网络层面解析文蛤鲜味氨基酸—丙氨酸含量的遗传基础与多层次调控网络。【结果】GWAS鉴定到4个与丙氨酸含量显著相关的SNP位点,注释获得PRSS48和FUT11两个候选基因,提示蛋白质代谢与糖基化修饰可能影响丙氨酸积累。GWAS与eGWAS共定位发现chr17:23364804 位点(PP.H4=1.000),可能通过顺式调控影响下游基因表达。TWAS 筛选到25个相关基因,功能涉及信号转导、代谢调控等。WGCNA识别出3个显著相关模块(Magenta、Red、Green),富集通路及蛋白质互作网络分析表明,三者分别主导组织水平代谢协调、底物驱动合成代谢及系统层面免疫清除与稳态维持。【结论】本研究从多组学角度揭示了文蛤丙氨酸含量受多基因微效调控和多通路交叉协同,且由合成、支撑与分解模块构成的动态调控网络协同调控,研究结果为文蛤风味性状的分子标记辅助选择与多基因聚合育种提供了重要候选基因资源和理论支持。

摘要： 对映异构体的精准分离是保障手性药物安全有效的前提.然而,传统分离膜普遍面临选择性与渗透性之间的权衡问题,其低通量特性严重制约了单一对映体药物的大规模生产.本文提出一种创新的级联反应策略:通过Sonogashira-Hagihara偶联构建刚性手性微孔骨架,同步引入手性识别位点,再经过Friedel-Crafts烷基化反应引入柔性亚甲基间隔基,成功制备出具有多孔结构的共轭微孔聚合物复合膜(CCMPMP1–4/SiO2).与仅采用Sonogashira-Hagihara偶联反应相比,级联反应策略制备的CCMP比表面积提升400倍.孔径梯度调控揭示出关键的“尺寸匹配效应”:当分子尺寸与膜孔径匹配时,可实现高通量传质且对映选择性高达97%ee;失配时则对映选择性骤降至9%ee.这一现象在四种手性分子的分离性能矩阵中得以直观呈现.通过对手性单体绝对构型的精确调控,可实现分离方向的定制化控制;静态吸附实验与密度泛函理论计算共同验证了其“优先吸附-界面富集-促进扩散”的分离机制.该策略实现了手性分离膜性能的突破:萘普生通量远高于文献报道值,达到37 mmol m-2 h-1;首次实现了山莨菪碱的膜法拆分,三级串联膜组件分离后, 6S, 2′S和6R, 2′R-异构体选择性达到89%.本研究为高效手性分离膜的设计提供了新范式,有望推动单一对映体药物的绿色、规模化制备.

关键词： 枸杞多糖   抗肿瘤   联合应用   作用机制  

摘要： 枸杞子是我国传统药食两用中药,具有“滋补肝肾”和“益精明目”之功效。随着现代科学技术的发展,大量研究表明枸杞多糖是枸杞子主要活性成分,可以通过诱导肿瘤细胞凋亡、抑制细胞增殖、调节免疫功能以及抑制肿瘤新血管生成等多维度发挥抗肿瘤作用。枸杞多糖与放、化疗等联合应用可增效减毒,逆转耐药性,加强机体免疫功能,发挥显著的协同潜力。近年来,国内外学者围绕枸杞多糖抗肿瘤机制开展大量研究,但尚未有关的系统性综述文献。基于此,该文整合了近年来枸杞多糖的抗肿瘤作用机制及其联合应用方面的最新研究进展,为后续机制深化、药物研发及临床转化提供系统的理论依据与研究框架。

关键词： 平菇多糖   黄曲霉毒素B   氧化损伤   线粒体功能障碍  

摘要： 本研究旨在探讨平菇多糖(POP)对黄曲霉毒素B1(AFB1)诱导的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2细胞)氧化损伤的缓解作用。首先,采用CCK-8试剂盒确定POP和AFB1的作用浓度以及POP的预处理时间;随后,将IPEC-J2细胞分为4组(每组3个重复):1)Control组,不作任何处理;2)AFB1组,16μmol/L AFB1处理24 h;3)POP+AFB1组,0.25 mg/mL POP先预处理24 h后,再与16μmol/L AFB1共处理24 h;4)POP组,0.25 mg/mL POP处理24 h。处理结束后,收集细胞,检测活性氧(ROS)相对含量、线粒体膜电位、ATP相对水平、抗氧化酶活性以及凋亡相关蛋白和线粒体动力学相关蛋白的相对表达量。结果显示:1)以16μmol/L AFB1处理IPEC-J2细胞24 h可成功建立氧化损伤模型;0.25 mg/mL POP预处理24 h可极显著升高细胞活力(P<0.01)。2)与Control组相比,AFB1组ROS相对含量极显著升高(P<0.01),线粒体膜电位和ATP相对水平极显著下降(P<0.01),线粒体融合蛋白1(MFN1)的相对表达量极显著减少(P<0.01),线粒体融合蛋白2(MFN2)的相对表达量显著减少(P<0.05),抗凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的相对表达量极显著降低(P<0.01),Bcl-2/Bcl-2相关X蛋白(Bax)比值显著降低(P<0.05),抗氧化酶谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性极显著下降(P<0.01),而0.25 mg/mL POP预处理24 h则可逆转以上变化。上述结果提示,POP可通过恢复线粒体功能、维持线粒体动力学平衡,有效缓解AFB1所致的猪小肠上皮细胞氧化损伤。

关键词： 骨髓间充质干细胞   细胞衰老   细胞外囊泡   凋亡囊泡   骨质疏松   骨再生   成骨诱导   无细胞治疗  

摘要： 目的 探讨亲代人骨髓间充质干细胞 (bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的衰老状态对其衍生凋亡囊泡(apoptotic vesicles,apoVs)骨诱导特性的影响,为基于apoVs的牙槽骨缺损及骨质疏松治疗提供实验依据及质量控制参考。方法 本研究通过连续传代构建衰老BMSCs(aging BMSCs,A-BMSCs)模型,以年轻BMSCs (young BMSCs,Y-BMSCs)作为对照。在星形孢菌素诱导细胞凋亡后,分别从Y-BMSCs和A-BMSCs中提取apoVs(Y-BMSCs来源apoVs,Y-apoVs;A-BMSCs来源apoVs,A-apoVs)。首先对两种囊泡的表征(形态、粒径、电位、产量及蛋白标志物等)进行系统鉴定。随后,将Y-BMSCs分为增殖培养(proliferation medium,PM)组、成骨诱导(osteogenic induction medium,OM)组、OM + Y-apoVs组和OM + A-apoVs组,通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色、茜素红染色及实时定量PCR检测成骨相关基因Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)、ALP、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)及成骨特异性转录因子(osterix,OSX)的表达,评估其体外骨诱导效能。获得实验动物伦理委员会批准,利用18月龄的C57BL/6老年小鼠模型验证两种使用红色荧光染料PKH26标记apoVs的体内分布及骨诱导效能,将小鼠随机分为Control组(注射PBS)、Y-apoVs组(注射Y-apoVs)和A-apoVs组(注射A-apoVs),连续8周尾静脉注射apoVs,通过微计算机断层扫描和组织学分析评估其骨再生效果。结果 电镜及粒径分析显示,Y-apoVs和A-apoVs均呈典型的双凹圆盘状结构,粒径主要分布在100~500 nm;western blot证实两者均高表达囊泡通用标志物(CD9、CD63、CD81)及凋亡标志物Fas。Y-apoVs和A-apoVs在形态、粒径、电位、产量及蛋白标志物表达上均无显著差异。体外实验显示,与PM组相比,OM组、OM + A-apoVs组、OM + Y-apoVs组均能显著增强靶细胞Y-BMSCs的ALP活性及钙结节沉积,并显著上调RUNX2、ALP、OPN、OSX的表达;且与OM组及OM + A-apoVs组相比,OM + Y-apoVs组的上述促进作用更为显著。体内实验证实,尾静脉注射的apoVs可有效归巢至骨组织,且Y-apoVs组能更有效地改善老龄小鼠的骨微结构,显著提高骨矿物质密度及骨体积分数,其疗效优于Control组和A-apoVs组。结论 亲代细胞的衰老状态显著削弱了BMSCs来源apoVs的生物学活性及其骨诱导能力。源自年轻BMSCs的apoVs是治疗年龄相关性骨丢失的有效生物制剂。

关键词： 水龙骨   壳聚糖   硫辛酸   水凝胶   抗氧化   伤口愈合  

摘要： 探究中药水龙骨粗多糖(Rhizoma polypodiodis nipponicae polysaccharide,RPNP)的抗氧化能力及其与硫辛酸(Lipoic acid,LA)-壳聚糖(Chitosan,CS)复合水凝胶对小鼠背部全皮层损伤修复的促进效果。通过水提醇沉、Sevage法去除蛋白质杂质制得RPNP,其对DPPH自由基、ABTS+自由基、羟基自由基有良好的清除效果,半数抑制浓度(IC50)分别为(1.97±0.22)、(1.86±0.27)、(5.48±0.48)mg/mL;以CS为水凝胶骨架,通过酰胺反应接枝LA,加入RPNP在UV光(365 nm)下通过LA的二硫键自聚集制得RPNP-LA-CS复合水凝胶;溶血实验证实该复合水凝胶具有良好的生物相容性,复合水凝胶还表现出对金黄色葡萄球菌(S. aureus)和铜绿假单胞菌(P. Aeruginosa)优异的抑菌效果,抑菌率均超过98%;在小鼠背部皮肤全皮层损伤实验中,复合水凝胶展示了对小鼠伤口愈合有良好的促进修复效果,苏木精&伊红(H&E)染色可观察到RPNP-LA-CS组小鼠皮肤组织恢复良好,结构完整,为水龙骨粗多糖抗氧化研究及在伤口修复方面应用提供新思路。