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关键词： 恰玛古多糖   低共熔溶剂   提取工艺   抗氧化活性   降糖能力  

摘要： 采用超声波协同低共熔溶剂法(DES)提取恰玛古多糖（BRPs）。以BRPs的提取率为指标，结合响应面法优化提取工艺，通过单糖组成、分子质量、红外光谱分析等方法对其进行结构表征和活性研究。结果表明：最优提取工艺为DES中氯化胆碱?丙三醇摩尔比1∶3、超声功率150 W、含水量50%、料液比1∶18(g∶mL)、提取温度60℃、提取时间53 min，在此条件BRPs提取率达9.4%。BRPs结构是半乳糖醛酸为主链，鼠李半乳糖醛酸聚糖?Ⅰ为连接区，阿拉伯聚糖为侧链的典型果胶类多糖。其重均分子质量为100.392 kDa，由半乳糖醛酸、阿拉伯糖、半乳糖、鼠李糖、葡萄糖和葡糖胺6种单糖组成。抗氧化和降糖试验结果表明，BRPs对ABTS自由基与DPPH自由基具有一定的清除作用。BRPs对α?葡萄糖苷酶抑制率达96.99%，具有很强的降糖能力。综上，建立高效、环保的BRPs提取工艺，揭示“果胶型”结构特征与多糖组成，证实其良好的生物活性潜力。

关键词： 多糖   面团   流变   油炸方便面   低脂  

摘要： 为解决传统油炸方便面高油脂、营养单一的问题，将阿拉伯木聚糖（AX）、多聚果糖（PF）、菊粉（IN）三种多糖按5、10、15 wt.%梯度用于油炸方便面加工中，通过Mixolab、流变仪、低场核磁共振等仪器，系统探究其对面团加工特性及成品品质的影响。结果表明，三种多糖均随添加量增加降低面粉吸水率，且对面团、面片及成品品质的影响具有显著调控作用：AX因破坏面筋网络，显著增强面片延展性与成品硬度；PF低添加量下优化面筋稳定性，维持体系粘弹性均衡，蒸煮损失增幅最小；IN显著延长面筋稳定时间，并缩短成品复水时间；三种多糖均随添加量升高显著降低油脂含量，其中PF15降幅最大，达16.18 wt.%,IN15、AX15依次为14.95 wt.%、13.51 wt.%；感官评价显示，PF组色泽稳定、适口性佳，IN组表观规整，AX高剂量组因基质多孔致表面粗糙，综合而言PF10成品为最佳。综上所述，三种多糖可从不同维度定向改良方便面的加工适应性与食用品质，为开发低脂功能性油炸方便面提供重要理论依据。

关键词： 肝损伤   外泌体   线粒体   脂肪酸代谢   代谢组学  

摘要： 目的 探究脐带间充质干细胞外泌体修复CCl4诱导急性肝损伤的代谢机制，分析关键代谢物在调控修复中的作用。方法 实验分为CCl4组、CCl4+外泌体低剂量组和CCl4+外泌体高剂量组，检测各组HL-7702的细胞活力，AST，ALT和MDA的水平，靶向代谢组学分析CCl4组和CCl4+外泌体组的差异代谢物，激光共聚焦显微镜观察HL7702细胞核和线粒体与外泌体的共定位关系，透射电镜观察各组细胞的线粒体结构变化。结果 外泌体在CCl4浓度为25mmol/l时显著逆转了细胞活性下降趋势，外泌体显著降低细胞AST、ALT和MDA水平，CCl4组和CCl4+外泌体组共存在73种显著差异代谢物，其中包括甘氨脱氧胆酸与十四烷二酸。荧光染色后观察到外泌体与细胞核及线粒体的共定位现象。讨论 外泌体作为治疗肝损伤的潜在性研究已被广泛报道。通过代谢组学检测发现，CCl4造模后，甘氨脱氧胆酸通过脂质过氧化作用增加丙二醛（MDA）水平，改变肝细胞膜流动性，从而导致不同程度的细胞损伤。十四烷二酸的过度蓄积可能阻碍β-氧化过程，导致能量代谢异常和脂肪储存。结论 外泌体显著逆转了CCl4诱导的HL-7702细胞AST、ALT和MDA水平异常，并保护线粒体结构和氧化应激损伤。代谢组学结果表明外泌体可能通过介导线粒体与脂肪酸代谢修复肝细胞损伤。

关键词： 急性冠脉综合征   代谢组学   磷脂   氨基酸   肉碱  

摘要： 急性冠脉综合征（ACS）是心血管疾病中发病急、病情重、病死率高的临床急症，其发病机制尚未完全明确，早期诊断与危险分层仍具挑战。代谢组学通过系统分析体内小分子代谢物的变化，为揭示ACS病理机制、发现新型生物标志物及治疗靶点提供了新视角。现对代谢组学在ACS流行病学、病理机制、临床应用及治疗策略等方面的研究进展做一综述，展现其在ACS精准防治中的价值与前景。

关键词： 锦绣杜鹃   RpHSP90-1   基因克隆   高温胁迫   表达模式分析  

摘要： 热激蛋白(HSPs)在植物响应逆境胁迫的过程中发挥重要作用。为探究HSP90在锦绣杜鹃(Rhododendron × pulchrum Sweet)高温胁迫中的表达模式，从锦绣杜鹃叶片中克隆获得一个HSP90基因的完整ORF框，利用生物信息学技术对其结构和功能进行分析，并检测其在锦绣杜鹃叶片中响应高温胁迫的表达水平。结果表明，该基因CDS全长1 668 bp，编码555个氨基酸，其氨基酸序列含有HATPase-Hsp90-like与HSP90 superfamily保守结构域，经同源序列比对和系统进化分析发现，与杜鹃花科杜鹃花属的映山红(KAF7138333.1) HSP90同源性最高，同源率达到92%，将其命名为RpHSP90-1。RpHSP90-1编码不稳定亲水蛋白HSP90，亚细胞定位于细胞质，且不存在信号肽与跨膜结构，蛋白分子质量为63 986.94，理论等电点5.42。蛋白二级结构预测显示，α-螺旋和无规则卷曲构成RpHSP90-1二级结构主体。qRT-PCR结果显示该基因在高温胁迫诱导下表达量明显上调。该研究为进一步阐明RpHSP90-1基因在锦绣杜鹃响应高温胁迫中的作用机制提供参考。

关键词： 大豆   密植   百粒重   蛋白质   油分  

摘要： 密植栽培是实现大豆高产的重要途径。为探究密植栽培条件下大豆籽粒品质变化规律,文章以生产上主栽大豆品种吉育608为父本,以合农91、克山1号和绥农76为母本分别进行杂交获得HJ群体(母本合农91)、KJ群体(母本克山1号)、SJ群体(母本绥农76),并以该群体及经过亲缘关系分析的东北地区53份大豆骨干品种(自然群体)为试验材料,在密植条件下测定其百粒重、蛋白质含量和油分含量,分析不同大豆群体在密植条件下的籽粒品质差异及不同群体大豆品质性状间的相关性。结果表明,密植条件下部分群体的百粒重、蛋白质含量、油分含量均呈显著性差异。不同群体大豆品质性状相关性分析结果表明,HJ群体、SJ群体及自然群体百粒重与油分含量均呈显著正相关。4个群体的百粒重与蛋白质含量均未呈显著相关;百粒重与蛋白油分总含量均呈显著正相关;蛋白质含量与油分含量均呈极显著负相关;蛋白质含量与蛋白油分总含量均呈显著正相关。本研究为生产上选育耐密植高品质大豆提供理论依据。

关键词： 副溶血性弧菌   5’-核苷酸酶   外膜蛋白   原核表达   免疫原性  

摘要： 目的 研究副溶血性弧菌新型外膜蛋白5’-核苷酸酶(5’-nucleotidase, 5’-NT)的免疫原性。方法 采用生物信息学方法分析5’-NT的序列保守性、结构及抗原表位;通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)克隆该基因,构建pET-28a(+)与5’-NT基因nutA的重组质粒并在大肠杆菌中诱导表达,经镍-次氮基三乙酸琼脂糖亲和层析介质纯化及梯度透析复性获得可溶性重组蛋白;利用小鼠免疫实验、酶联免疫吸附试验、免疫印迹、补体介导的血清杀菌试验及免疫荧光共聚焦显微镜,系统评价蛋白的表面暴露性、免疫效价、交叉反应性及免疫保护性。结果 5’-NT在弧菌属具有较高的序列保守性。成功构建了5’-NT重组质粒,通过诱导表达、纯化获得高纯度重组5’-核苷酸酶蛋白。重组5’-NT与副溶血性弧菌全菌免疫血清效价为1:81 k,具有表面暴露性。重组5’-NT免疫血清对5’-NT蛋白效价在1:81 k,对副溶血性弧菌效价在1:3 k,与其他弧菌属大多存在微弱的交叉反应,且免疫血清仅有较弱的补体依赖杀菌活性(1:4)。免疫印迹表明, 5’-NT免疫血清能对副溶血性弧菌及其他弧菌全菌蛋白产生特异性条带。免疫荧光共聚焦显微镜分析也表明了重组5’-NT免疫血清能够与副溶血性弧菌发生特异性结合,也说明该蛋白具有表面暴露性。结论 副溶血性弧菌5’-NT虽具有弧菌保守性和表面暴露性特征,但较低的免疫血清效价说明其暴露性、免疫原性或表达丰度有限,限制了其单独作为疫苗或检测抗原的应用,后续可通过多抗原联合等策略挖掘其在副溶血性弧菌防控中的价值。本研究揭示了副溶血性弧菌外膜蛋白5’-NT的表面暴露性、免疫原性和血清保护性,为副溶血性弧菌诊断抗原和亚单位疫苗开发提供了参考。

关键词： 扁桃晚丰   PdAOC基因   基因克隆   原核表达   低温胁迫  

摘要： 明确PdAOC基因在扁桃（Prunus dulcis L.）晚丰响应-5～-30℃梯度低温胁迫中的表达特征，探究该基因与扁桃低温胁迫响应的关联性，为扁桃抗寒基因挖掘及分子育种提供试验依据。以扁桃晚丰叶片及1年生枝条为材料，通过PCR技术克隆PdAOC基因，构建原核表达载体实现目标蛋白的诱导表达与纯化，利用qRTPCR技术测定梯度低温胁迫下该基因在1年生枝条中的相对表达量，分析其低温响应表达模式；结合亚细胞定位明确PdAOC蛋白的细胞定位特征。原核表达中，异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导可表达分子量约28.87 kD的重组蛋白，经亲和层析可获得高纯度目标蛋白，验证了该蛋白的体外可表达性。随着温度的降低，扁桃晚丰1年生枝条相对基因表达量呈先升高后下降趋势，在-15℃时达到表达峰值，且试验低温范围内表达量均高于基础水平。PdAOC基因在扁桃晚丰中具有典型的AOC家族基因序列特征，可在原核系统中高效表达，其编码蛋白定位于细胞膜，该基因的表达受低温胁迫诱导且与胁迫程度密切相关，正向参与扁桃晚丰的低温胁迫响应过程，是扁桃抗寒相关研究中具有重要研究价值的基因。综上，PdAOC基因是扁桃晚丰响应低温胁迫的关键功能基因，可作为扁桃抗寒分子育种与抗寒机制研究的重要候选基因。

关键词： 阿达木单克隆抗体   病毒清除   低pH孵育   除病毒过滤  

摘要： 目的 对阿达木单克隆抗体低pH孵育病毒灭活工艺（pH 3.80±0.05，18～26 ℃，120～140 min）和除病毒过滤工艺(过滤压力≤0.3 MPa，载量≤392 g/m2)进行病毒清除验证。方法 以伪狂犬病毒（pseudorabies virus， PRV）、异嗜性小鼠白血病病毒（xenotropic murine leukemia virus， X-MuLV）、鼠细小病毒（minute virus of mice， MVM）和呼肠孤病毒3型（reovirus type 3， ReoV-3）作为指示病毒，考察低pH孵育对2种包膜病毒的灭活能力和除病毒过滤对4种指示病毒的去除效果，同时考察低pH孵育步骤对中间产品质量的影响。结果 在工艺设定的最差参数条件下，低pH孵育后2种包膜病毒的病毒量均降低4.00 lg以上，且不同孵育时间（120～160 min）对中间产品质量的影响没有差异，所有除病毒过滤滤液中均未检出指示病毒，4种指示病毒病毒量均下降超过4.00 lg。结论 低pH孵育病毒灭活工艺和除病毒过滤工艺能有效地灭活/去除病毒，有效保证了阿达木单克隆抗体制品的质量及安全性。

关键词： 天然多糖   食品新鲜度   生物胺   比色传感器  

摘要： 食品腐败变质引发的安全风险与浪费推动了实时、无损的食品新鲜度监测技术发展。天然多糖因来源广泛、生物相容性好、可自然降解，成为构建绿色食品新鲜度指示与传感材料的重要基质。本文围绕多糖基食品新鲜度监测材料的研究与应用，首先对天然多糖的来源及改性方法进行了概述，系统归纳了多糖基食品新鲜度监测材料的传感机理，重点评述了多糖基薄膜、水凝胶、气凝胶、微针及摩擦纳米发电机等新鲜度监测材料在水产品、畜产品、果蔬等食品新鲜度监测中的代表性进展，同时对其响应性能、阻隔性能和机械性能的调控策略进行了梳理。最后，从提升比色传感器的多目标响应能力和环境稳定性等方面提出了未来研究中面临的机遇与挑战，为多糖基新鲜度监测材料的实际应用提供参考。