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关键词： 外来入侵植物   克隆植物   克隆整合   生态型   空心莲子草   资源分配  

摘要： 为揭示不同生态型空心莲子草(Alternanthera philoxeroides)在不同生境中的适应策略，本研究以水生与陆生两种生态型的空心莲子草为材料，通过同质园实验比较二者在有、无克隆整合情况下叶片数、株高、地径、分枝数、根系数量及生物量等指标的差异。结果表明，克隆整合使得陆生型植株先端分株的叶片数、地径、株高分别提高50%、24%和31%,基端分株的叶片数、地径分别提高56%和25%,基端分株的株高无显著变化；同时，克隆整合显著提高水生型植株基端分株的细根数、地下生物量与总生物量，增幅分别达102%、336%和152%。在整株水平上，克隆整合使得陆生型植株的叶片数与地径分别显著增加53%与24%,而水生型植株的叶片数与地径均无显著提升。两种生态型空心莲子草采用了不同的克隆整合策略，以适应各自不同的生境：陆生型通过克隆整合将更多资源分配给地上部分，而水生型则倾向于将资源分配给地下部分。

关键词： 疏花蛇菰   多糖   水提醇沉   响应面法   抗氧化活性  

摘要： 研究旨在优化疏花蛇菰多糖的提取工艺并评价其抗氧化活性。试验采用水提醇沉法，考察液料比、提取时间、提取温度对疏花蛇菰多糖提取率的影响。在单因素试验的基础上，采用响应面法优化疏花蛇菰多糖提取工艺。通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基、2,2-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸阳离子（ABTS+）自由基、超氧阴离子自由基、羟基自由基的清除能力及还原力评价疏花蛇菰多糖的抗氧化活性。结果表明，疏花蛇菰多糖最佳提取工艺为液料比33∶1 mL/g，提取时间2.5 h，提取温度90℃，此条件下多糖的提取率为（7.56±0.07）%。疏花蛇菰多糖对DPPH自由基、ABTS+自由基、超氧阴离子自由基及羟基自由基清除率的半数抑制浓度(IC50值)分别为23.31、7.21、132.18、618.88μg/mL，疏花蛇菰多糖质量浓度为1 000μg/mL时，还原力为0.94，接近VC的还原力（0.97），说明其具有较好的抗氧化活性。综上所述，水提醇沉法提取疏花蛇菰多糖工艺合理可行，且多糖表现出较好的抗氧化能力。

关键词： 裂解性多糖单加氧酶   AA9家族   功能调控机制   氧化区域选择性   协同催化   活性测定   工业应用  

摘要： 裂解性多糖单加氧酶（lytic polysaccharide monooxygenase, LPMO）能通过氧化裂解的方式断裂纤维素等多糖链的糖苷键，与糖苷水解酶协同降解木质纤维素时，可以显著提升产糖效率，在木质纤维素生物质转化中具有重要作用。其中，真菌来源的AA9家族LPMO凭借其优异的氧化活性和广泛的底物谱，在食品、能源及材料等领域展现出广阔的应用前景。本文系统综述了AA9家族LPMO的来源及功能的多样性，指出不同来源的LPMO对糖苷水解酶的协同促进效果、底物降解类型存在显著差异；对其结构进行深入分析发现，催化结构域表面的Loop区对底物的识别、结合以及氧化区域的选择起着核心调控作用；除此之外，在双结构域的LPMO中，CBM结构域也会对LPMO结合底物的过程产生重要影响。同时，本文还对MALDI-TOF-MS、HPAEC-PAD及基于显色反应等多种酶活测定方法的原理与适用范围进行分析比较，发现色谱-质谱联用策略是目前定量分析LPMO氧化产物的最主要的方法之一。最后，本文详细总结了LPMO在食品加工、生物能源及纳米纤维素制备等领域展现出的应用潜力。因此，通过LPMO酶资源的挖掘或酶分子改良获得更多适合工业生产应用的新型酶制剂是目前研究工作的重要方向。深入剖析了当前AA9家族LPMO研究在酶资源功能表征、底物特异性分子机制解析以及实际应用效率提升等方面存在的关键技术问题，并针对性地提出了结合宏基因组学挖掘新酶、融合结构预测与机器学习解析底物选择性、针对不同预处理工艺开展酶分子定向改造等未来研究方向与策略建议。

关键词： 木糖葡萄球菌   L-LDH   多克隆抗体   中药单体   筛选  

摘要： 随着兽用抗菌药物使用减量化行动的不断落实，临床上已出现使用中药或者中药单体来代替抗菌药物治疗奶牛乳房炎的趋势。木糖葡萄球菌是一种在人和动物皮肤表面普遍存在的凝固酶阴性葡萄球菌，而这种凝固酶阴性葡萄球菌可以引起奶牛乳房炎。为了筛选得到治疗奶牛乳房炎的中药单体，以p ET-30a为表达载体，将L-乳酸脱氢酶（L-LDH）在大肠杆菌中进行了蛋白表达，并制备了其鼠源多克隆抗体；通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和蛋白质免疫印迹（WB）对重组蛋白进行鉴定；利用AlphaFold2对L-LDH蛋白进行蛋白结构预测，并以该蛋白为靶点，筛选中药单体。结果表明，诱导后的重组蛋白主要以包涵体形式表达，可与抗His标签多克隆抗体特异性结合，也与制备的鼠源多克隆抗体存在良好的反应原性。而构建的L-LDH蛋白分子模型，也成功筛选到管花苷A、知母皂苷BII、2'-乙酰基洋丁香酚苷、丹参酸B镁、淫羊霍定A等靶向该蛋白的天然化合物。试验以期为临床治疗木糖葡萄球菌引起的奶牛乳房炎提供理论基础。

关键词： 膝骨关节炎   温针灸   骨髓间充质干细胞   联合治疗  

摘要： 目的 探讨温针灸联合骨髓间充质干细胞（BMSCs）对兔膝骨关节炎（KOA）软骨中白介素-1β(IL-1β)、精氨酸酶-1(Arg-1)和白介素-10(IL-10)表达的影响。方法 50只新西兰大白兔按照随机数表法分为空白组、模型组、温针灸组、BMSCs组及联合组，每组10只。除空白组外，其余各组均用石膏固定法建立KOA模型并干预。观察膝关节大体形态改变，通过改良版Lequesne MG评分评估行为学，HE染色评估软骨形态；采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测兔关节液中IL-1β及Arg-1的表达；运用逆转录-聚合酶链反应及蛋白质印迹法检测兔软骨组织IL-1β、Arg-1和IL-10的信使RNA与蛋白表达水平。结果 与空白组相比，模型组兔软骨关节损伤及改良版Lequesne MG评分升高，关节液与软骨中IL-1β升高、Arg-1降低，软骨中IL-10降低（P均<0.01）。与模型组相比，各治疗组兔软骨关节损伤及Lequesne MG评分均改善（P均<0.01），且关节液与软骨中IL-1β降低、Arg-1升高，软骨中IL-10升高（P均<0.05），联合组效果最优。结论 温针灸与BMSCs均可改善兔KOA软骨损伤与功能，联合应用效果更优，其机制与下调IL-1β、上调Arg-1及IL-10的表达有关。

关键词： 藏天麻   浸泡酒   多糖   天麻素   色泽  

摘要： 为探究不同浸泡时间对藏天麻酒中营养功能成分、色泽及感官品质的影响，以藏天麻和38%（v/v）白酒为原料，分析不同浸泡时间下多糖、总酚、天麻素、色度参数及感官评分等指标的变化规律。结果表明，随着浸泡时间的延长，藏天麻酒中的多糖、总酚和天麻素等指标含量均呈上升趋势，至浸泡2年时达到峰值，分别为0.76 mg/mL、1.15 mg/mL和17.88 μg/mL，这说明长期浸泡有助于活性成分的持续溶出与转化。在色泽方面，白度L*值从96.81降至70.71，b*值从8.90升至37.02，说明酒中美拉德反应促进酒体由清澈、淡黄色变得浑浊、琥珀色。浸泡2年的藏天麻酒感官得分为85.63分，其口感醇厚，协调性好，接受程度高。本研究系统探究了藏天麻酒不同浸泡时间品质的变化规律，弥补了目前药食同源保健酒浸泡工艺研究中缺乏长期系统跟踪的空白，为藏天麻的开发利用、药食同源食材保健酒的工艺优化提供理论指导。

关键词： 蛇鳗科   线粒体蛋白质编码基因   密码子偏好性   最优密码子  

摘要： 本研究选取浙江近海分布的3种蛇鳗科鱼类：食蟹豆齿鳗、大吻沙蛇鳗和鳄形短体鳗为研究对象，利用生物信息学软件对去除终止密码子后的线粒体蛋白质编码基因密码子的使用情况进行分析，以探究影响密码子使用偏性形成的主要因素。研究表明：3种蛇鳗科鱼类线粒体蛋白质编码基因密码子偏性相似，GC碱基含量表现为GC1>GC2>GC3，密码子第3位点GC碱基平均含量为36.20%～38.57%；有效密码子数均大于35，表现出密码子较弱的使用偏好性；在同义密码子相对使用度大于1的密码子中有14个密码子偏好以A/U结尾；中性绘图、ENC-plot以及PR2-plot分析结果表明：自然选择对密码子的使用偏性形成影响较大；利用ΔRSCU法共筛选出48个最优密码子，其中GCC、GAC和CGA为3种鱼类共有的最优密码子。研究结果为深入了解蛇鳗科鱼类线粒体蛋白质编码基因密码子使用规律提供参考，也为该类群鱼类遗传资源的开发利用奠定理论依据。

关键词： 低共熔溶剂   浒苔多糖   结构   抗氧化   降血糖  

摘要： 以浒苔为原料，以多糖得率为指标，采用超声辅助低共熔溶剂（DES）提取多糖，通过优化工艺参数，确定最佳提取条件。通过单因素实验和响应面试验，考察料液比、低共熔溶剂含水量及提取温度对浒苔多糖得率的影响。结果表明，最佳提取工艺条件为：料液比1∶49，含水量51%，提取温度78 ℃。在此条件下，多糖得率为（20.08±0.19）%。与传统提取方法相比，DES-5（氯化胆碱和1，2-丙二醇的物质的量比为1∶2）提取效果最佳。该法制备并分离纯化得到浒苔多糖（EPP-1）的总糖含量为（75.40±1.80）%，分子质量为77.13 ku，主要由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、木糖组成，且具有糖醛酸和硫酸基团。在此基础上，测定所得EPP-1的生物活性。EPP-1对DPPH自由基、羟自由基及ABTS+自由基的清除率为（64.12%±1.57）%，（51.09%±1.74）%，（58.15%±2.20）%；对α-淀粉酶及α-葡萄糖苷酶的抑制率为（48.66%±1.12）%，（50.72%±1.20）%。本研究结果为推动绿色溶剂技术在海藻资源高值化利用中的应用奠定基础，为开发天然抗氧化剂/降血糖活性物质提供理论与技术支撑。

关键词： 缺血性卒中   适度高钾   骨髓间充质干细胞   抗炎   脑缺血再灌注损伤  

摘要： 目的：探究适度高钾联合骨髓间充质干细胞（Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,BMSCs）对大鼠MCAO/R模型的抗炎保护作用及潜在分子机制，并结合生物信息学分析验证核心炎症因子IL-6、TNF-α在缺血性卒中（Ischemic Stroke,IS）的调控作用与免疫微环境的关联性。方法：采用生物信息学方法分析IS数据集GSE61616，验证IL-6、TNF-α在IS的差异表达及与免疫细胞的相关性；取21只SD大鼠随机分为7组（n=3），除对照组外均采用Longa改良线栓法构建大脑中动脉栓塞再灌注（MCAO/R）模型，术后2 h尾静脉注射相应干预试剂，再灌注24 h后行神经功能评分，采用ELISA法检测各组大鼠缺血侧大脑皮质IL-6、TNF-α水平。结果：生物信息学分析显示，IS疾病组IL-6、TNF-α表达较对照组均上调（均为P<0.01），且均与免疫细胞浸润存在显著相关性；动物实验显示，与手术组相比，各干预组神经功能缺损评分降低，IL-6、TNF-α水平均降低，其中以HP+BMSCs组降低最显著（P<0.001）。结论：本研究通过生物信息学分析证实IL-6、TNF-α是IS的核心促炎因子，且参与调控脑组织免疫微环境。动物实验证实，适度高钾（40 mg/kg）联合BMSCs通过抗炎对大鼠MCAO/R模型起协同保护作用，其机制可能与抑制NLRP3炎症小体活性和调节免疫细胞表型发挥抗炎作用有关。

关键词： 麦冬多糖   代谢相关脂肪性肝病   磷酸肌醇3-激酶类   原癌基因蛋白质c-akt   核因子-E2相关因子2   炎症  

摘要： 目的 探讨麦冬多糖（OJP）对代谢相关脂肪性肝病的干预作用及其可能机制，重点评估磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B(AKT)与核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的参与。方法 4周龄C57BL/6J雄性小鼠（n=60）适应性饲养1周后，随机取10只，设为对照组，予常规饲料喂养，其余以高脂饮食联合30%果糖饮水喂养8周造模，造模成功后随机分为模型组10只、阳性药组（多烯磷脂酰胆碱150 mg/kg）10只及OJP低/中/高剂量组（100/200/400 mg/kg）各10只，各用药组给予相应药液灌胃治疗5周。采用苏木精-伊红（HE）染色与油红O染色观察肝组织形态与脂滴沉积；检测血清空腹血糖（FBG）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）等实验室检查指标；酶联免疫吸附试验（ELISA）测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）；蛋白质免疫印迹法检测PI3K、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶（p-PI3K）、AKT、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、Nrf2、血红素加氧酶-1(HO-1)的蛋白表达。结果 与对照组比较，模型组出现肝细胞空泡样变与脂滴沉积增加，FBG、TC、TG、ALT、AST升高，TNF-α与IL-6升高，SOD与GSH下降，MDA升高（均P<0.01）;PI3K/AKT、Nrf2/HO-1通路相关蛋白表达及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT比值下降。与模型组比较，阳性药物对照组及OJP中/高剂量组肝组织病理学改善，脂滴沉积减少；FBG、TC、TG、ALT、AST下调（P均<0.01）;TNF-α、IL-6降低，SOD、GSH升高、MDA下降（P均<0.05）；通路层面PI3K、AKT、Nrf2、HO-1及其磷酸化/活化水平上调，其中高剂量组效果最为显著，整体呈剂量依赖趋势。低剂量组改善较为有限。结论 麦冬多糖可通过激活PI3K/AKT和Nrf2信号通路，综合改善胰岛素抵抗、抑制炎症与氧化应激、减轻肝内脂质沉积，从而对MAFLD发挥保护作用，为其进一步转化与临床应用提供实验依据。