课程文献中心 更多>>

关键词： 多糖   降解   抗氧化   降糖活性  

摘要： 本研究采用超声波辅助水提醇沉法制备沙棘果皮渣多糖(Seabuckthorn residue polysaccharide,SBRP),通过过氧化氢-抗坏血酸(H2O2-Vc)体系介导的自由基降解反应对其进行分子修饰得到沙棘果皮渣降解多糖(VC-SBRP),同时对降解前后多糖的初级结构、体外抗氧化及降糖活性进行研究。结果表明,降解后沙棘果皮渣多糖总糖含量升高,蛋白质含量显著降低,主要单糖组成及官能团未发生明显改变,扫描电镜(Scanning Electron Microscope,SEM)显示降解后多糖形态发生改变;多糖降解后体外抗氧化及降糖活性效果得到明显提升,对DPPH自由基半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC50)值由0.37 mg/mL降低至0.13 mg/mL,ABTS+自由基IC50值由0.31 mg/mL降低至0.10 mg/mL,对α-淀粉酶IC50值由12.61 mg/mL降低至8.77 mg/mL,对α-葡萄糖苷酶IC50值由0.87 mg/mL显著下降至9.73 μg/mL。本研究旨为沙棘果皮渣多糖的综合利用及在功能性食品开发应用方面提供理论支撑。

关键词： 毛囊   毛囊干细胞   信号通路   分子调控  

摘要： 毛囊是哺乳动物皮肤的附属器官,结构复杂、细胞组成多样,具有周期性生长的特性,分为生长期、退行期和休止期三个阶段,每一阶段受到多种细胞内与细胞间信号分子的精密调控。毛囊干细胞位于毛囊隆突部,在毛囊周期性再生过程中发挥核心作用,具有慢周期性、自我更新能力和多向分化潜能,不仅能分化为毛囊各类细胞,还能调控毛囊周期、参与表皮修复与皮脂腺再生。毛囊干细胞的增殖分化受多条信号通路调控,如Wnt、BMP及SHH等信号通路,目前对毛囊干细胞在静止期-生长期转换、干细胞微环境维持及信号通路协同作用等方面的认知仍存在诸多空白。因此,了解毛囊结构、生长规律、毛囊干细胞特性以及已知的关键信号通路对毛囊干细胞的调控作用是解决以上问题关键所在。本综述就毛囊形态结构及其周期性生长、毛囊干细胞功能与鉴定进行简要介绍,对Wnt、BMP信号通路及SHH等信号通路对毛囊干细胞的调控作用进行整理,为进一步研究与毛囊干细胞相关信号通路分子调控机制提供思路。

关键词： 多囊卵巢综合征   中药   多糖类化合物   作用机制  

摘要： 多囊卵巢综合征(PCOS)是一种育龄期女性常见的内分泌代谢性疾病,以高雄激素血症、排卵障碍和卵巢多囊样改变为特征。多糖类成分广泛存在于黄芪、茯苓、枸杞等多种中药中,具有抗氧化、降血糖、抗炎、抗菌、抗病毒、调节血脂等多种药理作用,对糖尿病、非酒精性脂肪性肝病、癌症等多种疾病具有显著的治疗作用。近几年研究发现,中药多糖可通过调节等多种途径缓解PCOS。本文系统综述近年来中药多糖在改善PCOS中的药理作用及其相关机制,旨在为中药多糖的临床应用和基础研究提供理论依据。

关键词： 兜兰   FAD2   低温胁迫   基因克隆   表达特征  

摘要： 低温是制约兜兰属(Paphiopedilum)植物生存繁衍的重要环境因子,而脂肪酸去饱和酶2(Fatty acid desaturase 2,FAD2)通过动态调节细胞膜脂不饱和度在植物响应零上低温胁迫中发挥重要作用。本研究中选取具有典型生态适应差异的紫纹兜兰(P. purpuratum)、长瓣兜兰(P. dianthum)和杏黄兜兰(P. armeniacum)为研究对象,结合基因克隆、生物信息分析及qRT-PCR技术,揭示了三种兜兰FAD2基因的序列特征及其在低温下的表达调控规律。研究显示,3种兜兰FAD2蛋白的理化参数、空间构象及跨膜特性高度保守,但其亚细胞定位呈现明显物种特异性,杏黄兜兰PaFAD2主要定位于质体,紫纹兜兰PpFAD2和长瓣兜兰PdFAD2分别富集于质膜/内质网和多种内膜系统。在4℃低温胁迫下,PaFAD2基因在胁迫初期(24 h)快速被激活并维持高水平表达,而PpFAD2和PdFAD2基因分别表现出应答滞后和弱响应特征。结合物种地理分布特征推测,杏黄兜兰PaFAD2基因表达的快速响应机制可能与其对高海拔生境长期适应密切相关,而紫纹兜兰和长瓣兜兰则可能通过FAD2基因的差异表达策略平衡抗寒与能量消耗。

关键词： 葡萄   VvDREB4   Na   CO   多糖   木质素  

摘要： 【目的】DREB(Dehydration-ResponsiveElementBinding)转录因子在植物非生物胁迫响应中起关键作用。本研究旨在探究葡萄 VvDREB4基因在盐碱胁迫下的生物学功能,并解析相关生理与分子机制。【方法】通过生物信息学分析VvDREB4 蛋白特性;利用遗传转化体系获得VvDREB4过表达葡萄愈伤组织;分析其在Na2CO3胁迫下的表型、生理指标(生长量、抗氧化酶活性、渗透物质、细胞壁组分)及相关基因表达变化。【结果】VvDREB4蛋白属于不稳定亲水蛋白,与柑橘同源性较高。在Na2CO3胁迫下,过表达 VvDREB4能显著缓解胁迫对愈伤组织生长的抑制,并显著提升超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶活性,降低丙二醛积累,增强抗氧化能力。同时,过表达系中总糖、纤维素、半纤维素及木质素含量显著增加,尤其是木质素在胁迫后含量达到对照的3.16倍。荧光定量结果显示,过表达 VvDREB4促进纤维素合成酶与过氧化物酶基因转录,并调控果胶代谢相关基因的表达模式。【结论】VvDREB4通过增强抗氧化防御系统及促进细胞壁多糖(尤其是木质素)的积累,从而提高葡萄的盐碱胁迫耐受性。本研究为阐明葡萄DREB 类转录因子的抗逆机制提供了理论依据。

关键词： 冷冻分割牛肉   抗氧化涂膜   氧化稳定性   蛋白质特性   凝胶特性  

摘要： 为探究抗氧化涂膜对冷冻分割牛肉贮藏品质的保护作用,本研究以聚乙烯(PE)膜处理组为对照,研究2%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)组、2%CMC-Na+0.01%茶多酚(TP)组、2%CMC-Na+0.01%TP+0.02%维生素C(Vc)组3种涂膜处理对冷冻牛肉180d冻藏期间氧化稳定性、蛋白质功能特性及凝胶品质的影响。结果表明:3种涂膜处理均能显著抑制牛肉硫代巴比妥酸反应物(TBARS)值和羰基含量上升,减缓总巯基含量下降;冻藏180d后,PE组TBARS值和羰基值分别增加48.50%、77.83%,总巯基值降低61.70%,而3种涂膜处理组的TBARS值依次增加39.42%、39.08%、39.49%,羰基值依次增加71.43%、65.49%、64.79%,总巯基值依次降低47.92%、44.81%、42.99%。相较于PE组、2%CMC-Na组,添加TP和Vc的复合涂膜组能更有效降低冻藏过程中牛肉的脂质氧化程度,减少蛋白质羰基化损伤,减缓总巯基流失。在蛋白质结构方面,涂膜处理可稳定牛肉蛋白质α-螺旋、β-折叠含量,减少离子键、氢键流失,抑制疏水键和二硫键异常变化,延缓蛋白质溶解度下降和表面疏水性升高,且Vc复合涂膜组在维持蛋白质二级结构稳定性上表现突出;凝胶品质方面,涂膜处理能有效抑制牛肉凝胶强度、硬度和咀嚼性下降,其中Vc复合涂膜组在冻藏后期对凝胶强度和质构特性的维持效果更优。综上,由2%CMC-Na与0.01%TP、0.02%Vc复配制成的抗氧化涂膜,可从氧化稳定性、蛋白质功能特性和凝胶品质多维度综合提升冷冻分割牛肉的贮藏品质,为工业化生产中冷冻肉类的长效保鲜提供理论依据和技术支撑。

关键词： 缺血性脑卒中   间充质干细胞   细胞治疗   旁分泌效应   基因修饰   细胞外囊泡  

摘要： 缺血性脑卒中是因血管堵塞导致大脑血液与氧气供应不足引发的脑部损伤性疾病。尽管临床已开展诸多探索,但目前缺血性脑卒中患者的治疗效果与预后仍不尽如人意。间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)凭借来源广泛、易体外培养、低免疫原性及多向分化潜能等优势,在缺血性脑卒中等多种疾病的治疗研究中展现出显著潜力,成为近年来的研究热点。本文围绕MSCs的给药方式、治疗缺血性脑卒中的疗效与核心机制、增强MSCs疗效的关键策略及临床应用的安全性与局限性等方面进行综述,明确MSCs治疗缺血性脑卒中的优势与现存问题,为该领域的细胞治疗研究提供参考。

关键词： 荷斯坦奶牛   热应激环境   蛋白质需要量   生产性能  

摘要： 【目的】本试验通过在日粮中添加不同水平粗蛋白(CP),研究日粮CP水平对热应激条件下奶牛生产性能、血清生化指标和乳成分的影响,综合各项指标确定热应激条件下泌乳后期奶牛最适宜的蛋白质需要量。【方法】试验选用240头产奶量相似(41.03±0.5)kg·d–1、泌乳时间相近(193±15)d、胎次相同(1胎)、体质量相当(600±30)kg的健康荷斯坦奶牛,随机分为3组,每组80头,分别饲喂3种粗蛋白水平的日粮,即16.67%(LCP组)、17.74%(MCP组)和18.66%(HCP组),预饲期为1周,正式期为6周。每天记录采食量和产奶量。【结果】牛舍内每日温湿指数(THI)均在68以上,因此试验牛在整个试验期间均处于热应激状态。日粮CP水平的改变对热应激条件下奶牛的呼吸频率和直肠温度无显著影响(P>0.05)。日粮CP水平的升高极显著增加了奶牛的干物质采食量(DMI)、产奶量、乳蛋白率、乳糖率和乳糖量(P<0.01)。随着日粮CP水平增加,乳中尿素氮含量极显著升高(P<0.01)。LCP组尿氮量显著低于其余两组(P<0.01)。日粮CP水平的改变对脂肪校正乳(FCM)、乳脂率、总固形物含量以及体细胞数无显著影响(P>0.05)。HCP组的DMI和CP表观消化率极显著低于其余两组(P<0.01),而日粮蛋白水平的改变对粗脂肪(EE)、酸性洗涤纤维(ADF)和中性洗涤纤维(NDF)表观消化率无显著影响(P>0.05)。此外,HCP组还显著提高了血清总蛋白(TP)和谷丙转氨酶(ALT)水平(P<0.01),并极显著提高了血尿素氮(BUN)和血糖(GLU)水平(P<0.01)。LCP组则极显著提高了血清中总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、并极显著降低了丙二醛(MDA)浓度(P<0.01)。综合考虑热应激条件下奶牛氮代谢等多方面的指标,确定热应激条件下泌乳后期荷斯坦奶牛最适宜的蛋白质需要量为16.67%。【结论】在热应激条件下饲喂16.67%CP能优化奶牛氮利用率,减少氮排放,提高资源利用效率,实现经济高效的目标。

关键词： 草地贪夜蛾   糖类物质   味觉受体   双电极电压钳记录   分子对接  

摘要： [目的]克隆草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda幼虫头部表达的味觉受体基因SfruGR8和SfruGR9,并解析其配体结合特性,为揭示草地贪夜蛾幼虫对糖类物质感知的分子机制奠定理论基础。[方法]基于草地贪夜蛾幼虫转录组测序数据与味觉受体基因鉴定结果,通过PCR克隆具有完整开放阅读框(open reading frame,ORF)的SfruGR8和SfruGR9 cDNA序列;利用系统发育进化和多序列比对分析SfruGR8和SfruGR9序列结构特征;采用非洲爪蟾Xenopus laevis卵母细胞体外表达系统,并结合双电极电压钳技术,测定重组表达蛋白SfruGR8和SfruGR9对11种候选配体化合物(肌醇和10种糖类物质)的电生理反应;通过三维结构建模和分子对接模拟预测SfruGR8和SfruGR9分别与葡萄糖和果糖的结合位点。[结果]克隆得到草地贪夜蛾SfruGR8(GenBank登录号:LOC118262948)和SfruGR9(GenBank登录号:LOC118274941)的cDNA全长序列。SfruGR8和SfruGR9分别具有8个和7个跨膜结构域,具有N端长位于细胞膜内、C端短位于细胞膜外的特征,且在C末端均含有保守基序-hh(G/A/S)(A/S) hhTYhhhhhQF,属于糖类受体家族。重组SfruGR8对葡萄糖表现出最强的响应,而重组SfruGR9仅对果糖表现出特异性反应;SfruGR8和SfruGR9分别结合葡萄糖和果糖时均呈剂量依赖性。重组SfruGR8与葡萄糖通过氢键和范德华力结合,结合能为-6.037 kJ/mol;重组SfruGR9与果糖通过相同作用力结合,其结合能为-6.374kJ/mol。[结论]味觉受体SfruGR8和SfruGR9均为糖类受体。SfruGR8对葡萄糖具有较强的响应,SfruGR9则特异结合果糖。推测SfruGR8和SfruGR9在草地贪夜蛾幼虫取食或消化糖类化合物过程中发挥重要作用。

关键词： 多克隆抗体   裂谷热病毒(RVFV)   核衣壳蛋白(NP)  

摘要： 目的原核表达及纯化裂谷热病毒(RVFV)核衣壳蛋白(NP),为检测血清中的NP抗体奠定基础,并制备针对NP的多克隆抗体。方法将构建的pET28a-ZH501-NP原核表达质粒转化至BL21(DE3)感受态细胞中,并采用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白NP的表达。将重组蛋白NP用HisTrapTMHP纯化后与弗氏完全佐剂、弗氏不完全佐剂混合免疫新西兰大白兔,制备NP多克隆抗体,通过间接免疫荧光(IFA)和Westernblot法鉴定多克隆抗体的特异性。结果成功构建原核表达质粒,在BL21(DE3)感受态细胞中成功诱导表达,且重组蛋白NP以包涵体形式表达。Westernblot法和IFA鉴定表明多克隆抗体能特异性识别RVFVNP。结论成功表达纯化RVFV NP蛋白,探索了其作为包被抗原的间接ELISA实验条件,同时制备了针对RVFV NP的特异性多克隆抗体,为建立可靠的RVF快速诊断技术、研发和评价RVFV新型疫苗提供了提供技术支撑。