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关键词： 黑木耳多糖   醇沉浓度   结构表征   流变学特性   降血糖活性  

摘要： 本研究通过60%、70%和80% 3种不同醇沉浓度制备了黑木耳Auricularia heimuer的3种多糖AHP-60、AHP-70、AHP-80，并对其多糖、蛋白质、糖醛酸含量、单糖组成、流变特性等基本理化性质、结构特征及降血糖活性进行了研究。结果表明，3种AHP均含有少量的蛋白质和糖醛酸，其含量在1.2%–4%之间，随醇沉浓度的增加，AHP的多糖含量、粒径和Zeta电位绝对值均显著增加。3种AHP均具有三螺旋结构，为杂多糖，主要由甘露糖、核糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成，其中甘露糖和葡萄糖均有较高的占比，且AHP-70的葡萄糖和半乳糖的摩尔比显著高于AHP-60和AHP-80。3种AHP均具有假塑性流体的特征，随醇沉浓度及质量浓度增大，AHP溶液的表观黏度也随之增大，AHP-80在4 mg/mL浓度下有最高的黏度。3种多糖对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶均有较好的抑制作用，其对两种酶抑制能力强弱顺序分别为AHP-70＞AHP-60＞AHP-80和AHP-70＞AHP-80＞AHP-60。综上所述，提高醇沉浓度能制备多糖含量更高，黏度更大的黑木耳多糖，70%的醇沉浓度能制备降血糖活性更好的黑木耳多糖。本研究能为黑木耳多糖的综合开发利用和深入研究提供理论依据。

关键词： 中药多糖   提取方法   生物活性   生产性能   免疫增强   疾病治疗  

摘要： 多糖作为中药主要活性成分，具有独特生物活性和药理作用，包括免疫调节、抗氧化、抗菌和抗病毒等，在预防动物疾病、提高动物免疫力、增强动物生产性能方面具有显著效果。文章综述了中药多糖的提取方法、生物活性及近年来在提高畜禽生产性能、疫苗免疫增强和抗病毒等方面的研究进展。研究深入讨论未来发展方向，聚焦于中药多糖在畜禽生产中高效提取的工艺优化、分子作用机制及替代抗生素产品研发。结合新型技术，开发绿色安全的功能性饲料添加剂及防治动物疾病的天然药物制剂，推动中药多糖在畜禽绿色健康养殖中的准确应用与产业化示范标准，助力畜牧业的绿色转型与可持续发展。

关键词： 大豆   蛋白质   油脂   调控机制  

摘要： 大豆（Glycine max L.）是全球最重要的植物蛋白和食用油来源作物之一，其籽粒的蛋白质与油脂含量是决定大豆品质与经济价值的核心性状。蛋白质与油脂的积累存在复杂的代谢竞争与协同调控关系，解析其代谢及互作的分子调控机制对推进优质大豆生物育种具有重要意义。本文系统综述了近年来鉴定的大豆蛋白质与油脂代谢调控新基因及分子机制的研究进展。在蛋白质积累方面，重点探讨了储藏蛋白主要组分控制基因的功能特性、底物分配的分子机制、代谢关键酶以及转录因子介导的分子调控机制。在油脂调控方面，总结了脂肪酸组成与功能特征，讨论了脂肪酸及三酰甘油合成相关的关键代谢酶及功能，特别总结了近期发现的油脂合成的关键核心转录因子及分子模块的调控机制，加深了对油脂和蛋白质积累的分子调控机制的理解。最后，本文从新基因挖掘与机制解析、多基因协同调控网络构建、技术革新与功能高效评价以及表型精准鉴定对于推动油脂和蛋白质研究的重要性等方面探讨了未来的研究方向。

关键词： 布鲁菌   疫苗   变异株   蛋白质组学   全基因组测序  

摘要： 目的 探究牛种布鲁菌104M及其粗糙型变异株（104Ma）在小鼠体内的细胞免疫原性和毒力差异，并通过全基因组测序和蛋白质组学分析差异产生的分子机制。方法 将BALB/c小鼠随机分为3组：布鲁菌104M组、104Ma组和阴性对照组（生理盐水），前2组细菌免疫数量相同。免疫4周后，分离小鼠脾淋巴细胞，检测IFN-γ、IL-2分泌细胞数量并测定脾活菌数。对两菌株进行灭活处理，开展蛋白质组学检测和全基因测序，分析差异蛋白的功能、代谢通路影响和基因组变异情况，分析两菌株特征差异的原因。结果 与104M株比较，104Ma引起细胞免疫能力和毒力水平均降低，差异均有统计学意义（P均＜0.001）；菌体上调表达的蛋白有175个，下调表达的蛋白有224个；GDP-甘露糖4，6-脱水酶的表达量降低，差异有统计学意义（P＜0.001）。基因组学结果显示，位于104Ma染色体1的编码GDP-甘露糖4，6-脱水酶的gmd基因，其核苷酸序列发生了1个非同义突变，导致编码蛋白的第9个氨基酸由甘氨酸突变为天冬氨酸，最终影响了O抗原的合成，脂多糖由光滑型突变为粗糙型。结论 gmd基因发生单核苷酸突变导致104Ma突变为粗糙型菌株，细胞免疫原性和毒力均减弱。

关键词： 硫氧还蛋白过氧化物酶   东方巴贝斯虫   半胱氨酸结构域   免疫原性  

摘要： 硫氧还蛋白过氧化物酶广泛存在于原核及真核生物中，是生物抗氧化系统的重要成员。该类酶通过半胱氨酸依赖的催化机制，在抵御氧化应激过程中发挥关键作用。在东方巴贝斯虫（Babesia orientalis）的cDNA及gDNA中克隆到硫氧还蛋白过氧化物酶2(BoTPx-2)基因。该基因开放阅读框（ORF）长度为771 bp，无内含子，编码257个氨基酸，预测蛋白分子量约为27.7 ku，等电点为8.86。其编码的氨基酸序列包含两个保守的半胱氨酸结构域Phe-Val-Cys-Pro和Glu-Val-Cys-Pro，分别位于第107位和第227位。生物信息学分析表明，该蛋白具有高度保守的催化结构域，属于PTZ00137超家族。通过将BoTPx-2与其他巴贝斯虫、泰勒虫及疟原虫的TPx-2序列进行比对及系统进化树分析，发现其与牛巴贝斯虫TPx-2(XM＿001609049)的亲缘关系最近，序列相似度达79.44%。利用同源重组方法构建重组表达质粒BoTPx-2-pE-sumo，该质粒包含1个His标签，编码364个氨基酸，分子量约为40 ku。经IPTG诱导后，重组蛋白以可溶性形式大量表达于上清。进一步的蛋白质免疫印迹（Western blot）结果显示，感染东方巴贝斯虫水牛阳性血清可特异性识别大小约40 ku的条带，与重组蛋白大小一致，表明BoTPx-2具有良好的免疫原性，可引起感染水牛产生相应的免疫反应。此外，利用BoTPx-2-pE-sumo重组蛋白制备的多克隆抗体，在东方巴贝斯虫全虫抗原中检测到一条约27 ku的特异性条带，与BoTPx-2的预期分子量相符，即为BoTPx-2的天然大小。研究结果成功鉴定并初步分析了东方巴贝斯虫TPx-2基因及其表达产物，为后续深入研究该虫的抗氧化机制提供理论基础。

关键词： 中西医结合   核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎症小体   核转录因子–κB信号通路   肝纤维化  

摘要： 肝纤维化是慢性肝病进展至肝硬化、肝细胞癌的核心病理环节，其本质是肝脏对慢性损伤的异常修复反应，特征为细胞外基质过度沉积与肝脏结构破坏，而持续性炎症是驱动这一病理进程的关键始动因素，严重威胁人类肝脏健康。近年来研究证实，核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-containing-like receptor protein 3,NLRP3)炎症小体与核转录因子–κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路存在紧密的交叉对话，二者通过形成正反馈环路协同放大炎症信号，共同加速肝纤维化进展。文章旨在系统综述二者在肝纤维化中的协同调控机制，重点涵盖NF-κB作为上游转录调控因子，通过识别损伤相关分子模式激活后入核，启动NLRP3及前炎症因子的基因转录；活化的NLRP3炎症小体则通过剪切生成成熟炎症因子，反向激活NF-κB通路，形成级联放大效应，同时二者共同调控肝星状细胞（hepatic stellate cell,HSC）活化，转化为肌成纤维细胞，促进胶原蛋白等细胞外基质异常沉积的分子过程。文章创新性地从中医学“瘀热互结”理论视角对上述生物学机制进行重新审视。作者认为，NLRP3/NF-κB通路构成的正反馈环路堪称中医“瘀热互结”病机的现代微观阐释，其中“热”对应通路介导的炎症级联反应及炎症因子风暴，“瘀”对应HSC活化所致的纤维化沉积与肝窦毛细血管化，而二者的相互促进、恶性循环正是“瘀热互结”病机的生动体现。文章不仅丰富了肝纤维化病理机制的理论体系，更为建立中西医结合诊疗思路、开发靶向NLRP3/NF-κB通路的中药干预策略提供了重要的理论依据与实验方向。

关键词： 氨基酸   CPAs   冷冻保存   冷冻效率  

摘要： 传统冷冻保护剂(如DMSO、甘油)虽在生物样本保存中广泛应用，但其细胞毒性、渗透压冲击及潜在遗传风险等问题限制了临床与生物技术的安全应用。本文系统揭示了氨基酸作为新型冷冻保护剂的仿生学优势：其双重作用机制(物理化学防护与生物化学调控)不仅能通过抑制冰晶生长、稳定细胞膜结构抵御低温物理损伤，还可通过抗氧化、供能及信号通路调节等途径提升配子复苏后的功能完整性。研究显示，脯氨酸、谷氨酰胺等氨基酸在精卵冷冻中展现出显著的物种特异性保护效果——既可单独优化(如精氨酸改善精子活力、谷氨酰胺增强卵母细胞能量代谢)，亦能与传统保护剂协同构建减毒增效体系(如降低DMSO毒性并维持纺锤体稳定性)。未来研究需聚焦复合配方精准设计、冷冻参数优化及长期安全性验证，以推动氨基酸从实验室突破走向临床转化，为辅助生殖、种质资源保存及再生医学提供更安全、高效的低温保存解决方案。

关键词： 山药叶多糖   化学修饰   结构表征   抗氧化活性   降糖活性  

摘要： 目的：探究化学修饰对多糖结构、体外抗氧化与降糖能力的影响。方法：本文以山药叶多糖（Dioscorea opposita Thunb. leaf polysaccharides，DOLP）为供试材料，采用乙酸酐法、碱-氯乙酸法、氯磺酸-吡啶法、硝酸-亚硒酸钠法分别制备乙酰化、羧甲基化、硫酸化、硒化多糖衍生物，并测定其取代度与硒含量。通过光谱与色谱技术对DOLP及其衍生物进行结构表征，并评估其体外抗氧化和降糖活性。结果：乙酰化山药叶多糖（DOLP-Ac）、羧甲基化山药叶多糖（DOLP-C）、硫酸化山药叶多糖（DOLP-S）、硒化山药叶多糖（DOLP-Se）的取代度与硒含量分别为0.4±0.01、0.13±0.02、0.26±0.01、7.29%±0.44%。DOLP及其衍生物主要由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成，且具有三螺旋结构。红外光谱证实了DOLP化学修饰成功，并且衍生物表面形貌与热稳定性均发生改变，其中DOLP-Se的结晶度增加，DOLP-C和DOLP-S热稳定性提高。体外活性结果显示，DOLP-S对ABTS自由基清除能力较强，IC50为1.815 mg/mL；DOLP-Se对DPPH、OH自由基清除能力显著，IC50分别为1.717、1.868 mg/mL，并具备一定还原力。DOLP-Se对α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶的抑制能力优异，IC50分别为4.233、1.76 mg/mL。结论：本研究为山药叶多糖的深入探索提供了理论依据，表明化学修饰能够有效调控多糖的理化性质与活性，有助于推动功能性多糖的开发与利用。

关键词： 间充质干细胞   骨髓   机械应力   染色质   成骨细胞  

摘要： 骨髓间充质干细胞（Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）因其高度分化潜能和易获得性，被广泛应用于骨组织工程与再生医学，但控制其分化方向仍是临床难题。研究表明，机械应力作为关键物理信号，可通过改变染色质可及性影响BMSCs的成骨或成脂分化命运，但其具体分子机制尚未完全明确。本文综述了机械应力调控BMSCs染色质可及性的最新研究进展，重点阐述了“直接物理通路”和“间接生化通路”2条协同调控机制，并探讨了应力调控的双向性与剂量依赖性特征：适度应力促进染色质开放与成骨分化，而过度应力或机械缺失则诱导异染色质形成、抑制基因表达。未来研究需建立定量力学参数模型，开发实时监测技术，并基于“力学-表观遗传”偶联机制设计新型生物材料，以实现BMSCs分化方向的精准调控，推动骨组织工程个性化治疗的发展。

关键词： 栀子果壳   果胶   超声-芬顿氧化降解   结构表征   抗氧化活性  

摘要： 多糖是栀子果壳的核心活性成分，具备抗氧化、调节肠道微生态等多重生理功效，但分子结构复杂制约了其生物活性的精准调控与产业化应用。本研究以栀子果壳多糖（Gardenia Husk Polysaccharides， GHP）为原料，采用超声-芬顿联用技术对其进行降解，成功制备了6个不同降解程度的栀子果壳多糖组分（GHP-D1～GHP-D6），系统分析了GHP及降解产物的初级结构，并评价了它们的体外抗氧化与促进益生菌增殖活性。结果显示，除GHP-D1外，其余降解组分总糖含量均显著提升，GHP-D6总糖含量最高（43.7%±1.0%）；GHP-D1糖醛酸含量为66.9%，显著高于其他组分（42%～58%），各组分蛋白含量无明显变化。高效凝胶渗透色谱分析表明，GHP分子量由309 kDa降至8.1～11.2 kDa，分子分布更均一；红外光谱检测发现GHP的核心特征官能团均被保留，甲酯化度由31.9%升至38.3%～49.6%。体外活性测试显示，GHP-D1～GHP-D6的DPPH和ABTS自由基清除能力均显著优于GHP，且呈浓度依赖性，GHP-D5抗氧化活性最优，2.00 mg/mL浓度下清除率接近95%；降解产物可显著促进清酒乳杆菌增殖，培养24h时增殖活性达到峰值，GHP-D2、GHP-D5、GHP-D6促增殖效果分别为无糖对照组的1.64、1.36和1.39倍。综上，超声-芬顿联用技术可有效调控栀子果壳多糖初级结构，显著提升其体外抗氧化与益生活性，为栀子果壳高值化利用提供了技术支撑与理论依据。